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中国中药杂志 2023年第4期48卷 951-957页

作者：陶兴宝吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

为探究法半夏炮制过程中炮制辅料石灰水浸泡对其毒性成分凝集素蛋白的影响,阐释法半夏炮制过程中石灰水解毒的科学内涵。以Western blot法考察不同pH石灰水(pH 10、11、12.4)、饱和氢氧化钠及碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量的影响;采... 详细信息

为探究法半夏炮制过程中炮制辅料石灰水浸泡对其毒性成分凝集素蛋白的影响,阐释法半夏炮制过程中石灰水解毒的科学内涵。以Western blot法考察不同pH石灰水(pH 10、11、12.4)、饱和氢氧化钠及碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量的影响;采用SDS-PAGE法结合银染技术测定不同pH石灰水浸泡凝集素蛋白后上清与沉淀中蛋白组成;以MALDI-TOF-MS/MS技术检测不同pH石灰水浸泡凝集素蛋白后上清及沉淀中肽段相对分子质量分布,圆二色谱检测浸泡过程中凝集素蛋白二级结构比例变化。结果显示,pH>12的石灰水及饱和氢氧化钠溶液浸泡均可使凝集素蛋白含量显著下降,而pH<12的石灰水及饱和碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量无显著影响。pH>12的石灰水浸泡凝集素蛋白后其上清和沉淀均在12 kDa位置未检测到对应的凝集素蛋白条带和分子离子峰。这是由于pH>12的石灰水浸泡可使凝集素蛋白的二级结构比例发生明显改变,出现了不可逆变性过程,而pH<12的石灰水浸泡未使凝集素蛋白的二级结构比例发生明显改变,未出现变性过程。pH>12是法半夏炮制过程中石灰水解毒的关键条件。石灰水(pH>12)浸泡可使凝集素蛋白发生不可逆变性,致使半夏致炎毒性显著下降,起到炮制解毒的关键作用。

关键词：半夏石灰水凝集素蛋白炮制解毒机制

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半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性研究

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中国中药杂志 2012年第7期37卷 1007-1011页

作者：朱法根郁红礼吴皓史闰均陶文婷邱韵萦南京中医药大学药学院江苏南京210029 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029

目的:研究半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性,揭示半夏产生毒性的机制。方法:采用大鼠腹腔炎症模型,以腹腔渗出液中PGE2含量为指标,研究半夏凝集素致炎作用的量-毒、时-毒曲线;采用家兔眼结膜刺激模型,以眼结膜的病理切片观察半... 详细信息

目的:研究半夏凝集素蛋白与半夏毒针晶毒性的相关性,揭示半夏产生毒性的机制。方法:采用大鼠腹腔炎症模型,以腹腔渗出液中PGE2含量为指标,研究半夏凝集素致炎作用的量-毒、时-毒曲线;采用家兔眼结膜刺激模型,以眼结膜的病理切片观察半夏凝集素与半夏毒针晶刺激性的相关性。结果:半夏凝集素可引起大鼠腹腔渗出液中PGE2、蛋白含量显著提高,呈剂量依赖性;半夏凝集素可显著加重半夏毒针晶对家兔眼结膜的刺激性,且随着半夏凝集浓度的升高,刺激性显著增强,但单给药半夏凝集素对家兔眼结膜无刺激性。结论:半夏凝集素蛋白具强烈的致炎作用。半夏产生强烈炎症刺激的机制是半夏刺入机体,凝集素蛋白随针晶进入机体组织,诱导炎症反应发生而产生刺激性。

关键词：半夏半夏毒针晶半夏凝集素蛋白致炎作用毒性机制

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硫熏和直接热风加热的粉葛中葛根素含量及药效的比较研究

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中国中药杂志 2016年第14期41卷 2571-2575页

作者：郁红礼张倩金羊平王奎龙陆兔林李林南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

为考察硫熏及直接热风加热的粉葛中葛根素含量及药效的差异,将鲜粉葛削皮、切小块分别制备成晒干、直接热风干燥及硫熏后热风干燥样品,分别测定样品水分含量。采用HPLC,比较晒干、直接热风干燥及硫熏后热风干燥样品中粉葛中主要药效成... 详细信息

为考察硫熏及直接热风加热的粉葛中葛根素含量及药效的差异,将鲜粉葛削皮、切小块分别制备成晒干、直接热风干燥及硫熏后热风干燥样品,分别测定样品水分含量。采用HPLC,比较晒干、直接热风干燥及硫熏后热风干燥样品中粉葛中主要药效成分葛根素的含量;建立醉酒模型,以SOD含量为指标,灌胃给药硫熏和非硫熏粉葛样品的水煎煮提取物,比较硫熏对粉葛提高醉酒模型小鼠肝脏、血清中SOD含量的影响;同时考察不同包装及贮存条件下,硫熏及非硫熏样品的霉变及虫蛀情况。结果显示硫熏后的粉葛样品,其葛根素含量发生明显变化,随着硫熏次数及硫磺用量的提高,其葛根素含量逐渐下降。且硫熏可显著降低粉葛提高的醉酒模型小鼠肝脏、血清中SOD含量,与晒干及直接热风干燥组均呈显著性差异。水分符合药典标准的硫熏样品和直接热风干燥样品均未发生虫蛀和霉变。研究显示硫熏可显著降低粉葛中主要药效成分的含量,降低粉葛的药效,表明硫熏后粉葛质量显著下降。而未硫熏直接热风干燥的样品其主要药效成分的含量、药效以及贮藏结果均与晒干相似,是一种较好的产地干燥工艺,可推广。

关键词：粉葛硫熏质量下降热风干燥含量测定葛根素药效

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商陆正丁醇部位醋制前后肠道毒性变化研究

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中国中药杂志 2016年第2期41卷 216-219页

作者：张程超郁红礼吴皓潘耀宗陈叶青王奎龙金羊平王卫南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210046 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210046

为探索商陆毒性部位炮制前后对肠道毒性变化的影响,提取分离获得了商陆正丁醇毒性部位,在整体动物模型水平,灌胃给药后观察小鼠肠道肿胀程度,测定小鼠肠道不同部位的含水量及粪便的含水量,考察商陆正丁醇部位炮制前后对腹泻及肠道肿胀... 详细信息

为探索商陆毒性部位炮制前后对肠道毒性变化的影响,提取分离获得了商陆正丁醇毒性部位,在整体动物模型水平,灌胃给药后观察小鼠肠道肿胀程度,测定小鼠肠道不同部位的含水量及粪便的含水量,考察商陆正丁醇部位炮制前后对腹泻及肠道肿胀的影响;在细胞水平,采用MTT法,测定肠细胞HT-29,IEC-6的IC50,比较醋制前后商陆正丁醇部位的毒性变化。结果显示商陆正丁醇部位能够导致肠道肿胀,表现为引起十二指肠、空肠的水肿,且可导致粪便含水量增加引起腹泻,可抑制肠细胞HT-29,IEC-6增殖,表明其具有肠细胞毒性,对HT-29细胞的IC5014.59 mg·L-1,IEC-6 IC5043.77 mg·L-1;经醋制,小鼠肠道肿胀程度显著减弱,肠道和粪便的含水量明显降低,对HT-29和IEC-6的抑制作用减轻,对HT-29细胞的IC5058.51 mg·L-1,IEC-6 IC5084.37 mg·L-1。由此可知,醋制法具有降低商陆正丁醇部位的毒性作用。

关键词：商陆正丁醇部位肠道水肿腹泻肠细胞增殖抑制醋制减毒

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多指标正交优选大腹皮饮片切制工艺

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中药材 2014年第12期37卷 2178-2181页

作者：郁红礼汤丽娟吴皓毛春芹陆兔林毛善虎南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室/国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

目的:优选大腹皮饮片切制工艺。方法:采用正交试验法,以4种生物碱(槟榔碱、槟榔次碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱)含量及水溶性煎出物得率为指标,采用相关系数综合评分法,选择切制宽度、烘干温度和烘干时间为考察因素,优化大腹皮饮片的... 详细信息

目的:优选大腹皮饮片切制工艺。方法:采用正交试验法,以4种生物碱(槟榔碱、槟榔次碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱)含量及水溶性煎出物得率为指标,采用相关系数综合评分法,选择切制宽度、烘干温度和烘干时间为考察因素,优化大腹皮饮片的炮制工艺。结果:优选出的炮制工艺为:大腹皮药材抢水洗后,润透,纵切1 cm段,50℃烘2.5 h。结论:优选出的大腹皮炮制工艺稳定可行,重现性好。

关键词：大腹皮炮制工艺正交设计生物碱水溶性煎出物得率

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中药炮制辅料米醋的指纹图谱研究

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南京中医药大学学报 2017年第5期33卷 463-469页

作者：陆金兰朱星宇刘玲张希琼徐柳陈志鹏李伟东南京中医药大学药学院江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

目的通过对不同产地和品牌的米醋进行指纹图谱研究,为建立中药炮制辅料米醋的药用质量标准提供基础。方法收集33批米醋,采用HPLC方法,通过对流动相种类、色谱柱、洗脱程序、流动相pH的考察,优化米醋HPLC指纹图谱的分析方法,并对其中20... 详细信息

目的通过对不同产地和品牌的米醋进行指纹图谱研究,为建立中药炮制辅料米醋的药用质量标准提供基础。方法收集33批米醋,采用HPLC方法,通过对流动相种类、色谱柱、洗脱程序、流动相pH的考察,优化米醋HPLC指纹图谱的分析方法,并对其中20批黑醋指纹图谱进行相似度、聚类分析和主成分分析。结果米醋浓度以1∶3稀释进样,色谱条件为色谱柱:Thermo Hypersil GOLD(5μm,250mm×4.6mm),流动相:0.07%磷酸水(pH=2.28~2.38)-甲醇梯度洗脱,流速:1mL/min,柱温:30℃,进样量:10μL。此时特征峰分离效果最佳。米醋分白醋和黑醋,其指纹图谱差异较大,白醋几乎只有一个醋酸峰,单从HPLC方面无法判断配制白醋和酿造白醋的区别;20批黑醋指纹图谱相似度差异较大,聚类分析和主成分将其聚为几类。将同一品牌恒顺不同类型的米醋进行相似度比较,发现相似度较高,可见同一品牌内的米醋由于酿造工序、原料相似,品质比较均一稳定。结论市场上的米醋种类繁多,质量也参差不齐,实验选择20批常用黑醋进行指纹图谱分析,比较不同种类米醋的差异,为中药炮制辅料米醋的药用质量标准提供参考。

关键词：米醋指纹图谱 HPLC 药用质量标准

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补骨脂炮制前后水煎液致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤作用比较

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中草药 2022年第5期53卷 1434-1441页

作者：符映均吴育梅春梅华政颖李伟东南京中医药大学南通附属医院药剂科江苏南通226000 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

目的探讨补骨脂炮制前后致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤的差异。方法采用高效液相色谱仪检测补骨脂炮制前后化学成分含量变化。雌性ICR小鼠连续30 d ig生、盐补骨脂水煎液,末次给药24 h后,取血清,采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标丙... 详细信息

目的探讨补骨脂炮制前后致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤的差异。方法采用高效液相色谱仪检测补骨脂炮制前后化学成分含量变化。雌性ICR小鼠连续30 d ig生、盐补骨脂水煎液,末次给药24 h后,取血清,采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平;取肝脏、脾脏和肾脏,称定质量并计算脏器指数,采用苏木素-伊红(HE)染色法进行肝脏病理组织学检查;采用ELISA法检测血清中雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肝脏中法尼醇受体(farnesoid X receptor,FXR)、雌激素硫酸转移酶1E1(sulfotransferase 1E1,SULT1E1)和E2含量。结果补骨脂经盐炙后补骨脂苷、异补骨脂苷、新补骨脂异黄酮含量下降,其余8种成分含量均升高,其中补骨脂素、异补骨脂素、corylifol A升高较为明显。雌性小鼠ig生、盐补骨脂水煎液30 d后出现生殖器损伤,小鼠阴道口红肿,有水样浸润。与对照组比较,生、盐补骨脂组小鼠血清ALT、AST、ALP活性及DBIL、TBIL、TBA水平均显著升高(P<0.05、0.01、0.001),盐炙后补骨脂致肝损伤较生品更严重;肝脏FXR、SULT1E1含量显著降低(P<0.01、0.001),血清E2、FSH、IL-6和肝脏E2含量均显著升高(P<0.05、0.01、0.001)。盐补骨脂与生补骨脂比较,IL-6升高更明显,FXR、SULT1E1下降更明显。结论补骨脂素、异补骨脂素和Corylifol A可能是补骨脂药效成分同时也可能是其主要毒性成分,盐补骨脂较生补骨脂更易造成肝损伤。

关键词：补骨脂盐炙胆汁瘀积性肝损伤雌激素样作用补骨脂素异补骨脂素 corylifol A 补骨脂苷异补骨脂苷新补骨脂异黄酮

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醋制对商陆及商陆正丁醇部位中皂苷类成分含量的影响

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中国中药杂志 2017年第1期42卷 125-129页

作者：郁红礼张程超吴皓王奎龙王卫单雪莲南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

为研究醋制对商陆及商陆正丁醇部位皂苷类成分的影响,比较商陆中主要毒性成分商陆皂苷B(EsB)和商陆皂苷C(EsC)醋制前后含量的变化,依据商陆《中国药典》醋炙工艺,将商陆正丁醇部位进行模拟醋制;采用液质联用法对商陆正丁醇部位醋制前后... 详细信息

为研究醋制对商陆及商陆正丁醇部位皂苷类成分的影响,比较商陆中主要毒性成分商陆皂苷B(EsB)和商陆皂苷C(EsC)醋制前后含量的变化,依据商陆《中国药典》醋炙工艺,将商陆正丁醇部位进行模拟醋制;采用液质联用法对商陆正丁醇部位醋制前后皂苷类成分进行研究;采用HPLC-ELSD方法检测毒性成分EsC和EsB在商陆生品、醋制品中的含量,考察商陆醋制前后的含量变化。结果显示,商陆正丁醇部位中除商陆皂苷甲(EsA)以外,各商陆皂苷类成分含量均不同程度下降,皂苷类化合物组成显著变化,但醋制后未见新化合物生成;含量测定发现生商陆中EsC和EsB的质量分数分别为0.12%,0.20%,醋制后下降为0.48%,0.094%。表明醋制能够显著改变商陆及商陆正丁醇部位中皂苷类成分的组成,显著降低毒性皂苷EsC和EsB的含量,表明商陆采用醋制法炮制的科学性。

关键词：商陆商陆皂苷液质联用 HPLC EsC EsB 含量测定

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发酵对胆南星中胆汁酸类成分的影响及胆南星中3种游离胆汁酸含量测定研究

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中国中药杂志 2018年第22期43卷 4457-4461页

作者：陈云郁红礼吴皓王卫李瑶程梓烨单雪莲南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

考察以猪胆汁为原料的胆南星发酵炮制品及混合蒸制炮制品中主要胆汁酸类成分的组成,建立发酵制胆南星中胆汁酸类成分的含量测定方法。以猪胆汁及天南星、制天南星为原料分别制备发酵法胆南星及混合蒸制法胆南星,采用HPLC-ELSD检测比较2... 详细信息

考察以猪胆汁为原料的胆南星发酵炮制品及混合蒸制炮制品中主要胆汁酸类成分的组成,建立发酵制胆南星中胆汁酸类成分的含量测定方法。以猪胆汁及天南星、制天南星为原料分别制备发酵法胆南星及混合蒸制法胆南星,采用HPLC-ELSD检测比较2种胆南星中胆汁酸类成分的差异;以3种游离胆汁酸类成分为指标,采用HPLC-ELSD检测发酵制胆南星炮制品中的胆汁酸类成分的含量。采用Agilent Eclipse XDB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%冰醋酸水(55∶45)为流动相,流速为1 mL·min^-1,柱温为30℃,ELSD:漂移管温度为90℃,氮气流量为2.2 mL·min^-1。结果显示混合蒸制法胆南星中主要含有结合型胆汁酸类成分,发酵制胆南星中未见有结合型胆汁酸类成分,主要含游离型胆汁酸类成分。发酵制品中的3种游离型胆汁酸类成分猪胆酸(HCA)、猪去氧胆酸(HDCA)和鹅去氧胆酸(CDCA)均在定量范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率在95.99%104.3%,加样回收符合要求。研究结果表明,胆南星发酵过程可使得胆汁中的结合型胆汁酸类成分转化为游离型胆汁酸。所建方法可以有效控制发酵制胆南星中胆汁酸类成分的含量。

关键词：胆南星游离型胆汁酸类成分 HPLC-EISD 含量测定

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商陆提取物醋制前后毒性作用的比较研究

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中国中药杂志 2013年第10期38卷 1610-1613页

作者：宫乐吴皓郁红礼赵腾斐徐秋香南京中医药大学药学院江苏南京210029 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029

目的:提取分离获得商陆的毒性成分,并比较其醋制前后毒性的变化。方法:采用黏膜刺激性反应、小鼠腹腔炎症模型及离体巨噬细胞释放NO模型,比较商陆毒性成分醋制前后的致炎毒性变化。结果:商陆毒性成分具有显著的致炎毒性,可导致家兔眼结... 详细信息

目的:提取分离获得商陆的毒性成分,并比较其醋制前后毒性的变化。方法:采用黏膜刺激性反应、小鼠腹腔炎症模型及离体巨噬细胞释放NO模型,比较商陆毒性成分醋制前后的致炎毒性变化。结果:商陆毒性成分具有显著的致炎毒性,可导致家兔眼结膜水肿、小鼠腹腔渗出液中PGE2含量升高以及巨噬细胞释放NO含量升高;经醋制后,对家兔眼结膜刺激性减弱,使小鼠腹腔渗出液中PGE2含量降低、巨噬细胞释放NO含量降低。结论:醋制法能够降低商陆毒性成分的毒性作用。

关键词：商陆毒性成分黏膜刺激性炎症

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