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药学学报 2024年第4期59卷 965-971页

作者：马芳周培岚苏瑞斌南京中医药大学江苏南京210046 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

本文旨在用急性阿片及非阿片类物质建立小鼠瘙痒模型,探究阿片受体部分激动剂噻吩诺啡对致痒物质所致急性瘙痒行为的影响,揭示噻吩诺啡改善急性瘙痒的作用机制。本文用无侵害性小鼠抓挠行为分析系统测试瘙痒行为。C57 BL/6J小鼠分别给... 详细信息

本文旨在用急性阿片及非阿片类物质建立小鼠瘙痒模型,探究阿片受体部分激动剂噻吩诺啡对致痒物质所致急性瘙痒行为的影响,揭示噻吩诺啡改善急性瘙痒的作用机制。本文用无侵害性小鼠抓挠行为分析系统测试瘙痒行为。C57 BL/6J小鼠分别给予吗啡、蛙皮素(鞘内注射,i.t)或五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、氯喹(皮内注射,i.d),建立瘙痒模型,探究噻吩诺啡(0.75、1.5、3 mg·kg^(-1))对致痒物质所致急性瘙痒行为的作用和机制。采用Western blot检测噻吩诺啡对致痒物质诱导的小鼠脊髓段蛋白激酶Cδ(protein kinase Cδ,PKCδ)蛋白表达的影响。实验中所有操作均获得军事医学研究院实验动物伦理委员会批准(批准号:IACUC-2021-017W)。结果显示,吗啡(1 nmol)、蛙皮素(0.3 nmol)、5-HT(5 nmol)、氯喹(20 nmol)分别给药后皆能显著增加小鼠的抓挠行为。噻吩诺啡(1.5 mg·kg^(-1))能够显著抑制阿片类药物吗啡和非阿片类物质蛙皮素、5-HT、氯喹诱导的抓挠行为,并且噻吩诺啡能够明显逆转阿片类药物吗啡和非阿片类致痒物质5-HT诱导的PKCδ蛋白表达的变化。本研究表明,阿片受体部分激动剂噻吩诺啡具有广谱抗瘙痒作用,能够通过不同途径逆转PKCδ而抑制阿片类和非阿片物质诱导的瘙痒行为,为探究和治疗瘙痒提供了新的思路。

关键词：噻吩诺啡瘙痒阿片类非阿片类蛋白激酶C δ 瘙痒治疗

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一种基于高内涵成像分析技术的快速检测RhoA蛋白激活的方法

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中国药理学与毒理学杂志 2024年第11期38卷 839-845页

作者：周亚男曲颖王劭文孙毅苏瑞斌南京中医药大学江苏南京210023 军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室北京100850

目的利用高内涵成像分析系统(HCIS)建立快速检测Ras同源基因家族成员A(RhoA)蛋白激活的方法。方法将人胚胎肾细胞293(Hek293)或仓鼠卵巢细胞(CHO)接种在96孔板中,待细胞贴壁后进行饥饿处理。Hek293细胞分别使用浓度为0(溶剂对照组),10... 详细信息

目的利用高内涵成像分析系统(HCIS)建立快速检测Ras同源基因家族成员A(RhoA)蛋白激活的方法。方法将人胚胎肾细胞293(Hek293)或仓鼠卵巢细胞(CHO)接种在96孔板中,待细胞贴壁后进行饥饿处理。Hek293细胞分别使用浓度为0(溶剂对照组),10^(-11),10^(-10),10^(-9),10^(-8),10^(-7),10^(-6),10^(-5)和10^(-4)mol·L^(-1)RhoA激动剂诺考达唑孵育3,10和30 min;CHO细胞分别使用相同浓度诺考达唑、溶血磷脂酸(LPA)和钙肽素孵育3,10和30 min。孵育结束用3.7%甲醛溶液进行固定后,使用烟酸己可碱(hoechst)和罗丹明标记鬼笔环肽,室温避光染色,利用HCIS拍照并对图像进行分析和统计,以平均荧光强度(MFI)的变化评估药物对RhoA蛋白的激活。结果与溶剂对照组相比,处理Hek293细胞3 min后诺考达唑10^(-10)~10^(-6)mol·L^(-1)组MFI显著升高(P<0.01),处理30 min后10^(-10)~10^(-4)mol·L^(-1)组MFI升高(P<0.01),表明RhoA蛋白被激活。在CHO细胞上,与溶剂对照组相比,诺考达唑10^(-10)~10^(-6)mol·L^(-1)处理10和30 min MFI均升高(P<0.05,P<0.01);LPA 10^(-11)~10^(-4)mol·L^(-1)处理3 min和10^(-11),10^(-8)~10^(-4)mol·L^(-1)处理10 min及10^(-11)~10^(-9),10^(-7),10^(-6),10^(-4)mol·L^(-1)处理30 min MFI均升高(P<0.05,P<0.01);钙肽素10^(-11)~10^(-6),10^(-4)mol·L^(-1)处理10 min及10^(-11)和10^(-4)mol·L^(-1)处理30 min MFI均升高(P<0.05,P<0.01),均表明RhoA蛋白被有效激活。结论成功建立了快速检测RhoA蛋白激活的方法,可实现高通量、快速、高效、便捷地对RhoA蛋白的激活进行检测。

关键词： Ras同源基因家族成员A 蛋白检测高内涵成像分析荧光染色高通量

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蛋白质磷酸化修饰参与经典致幻剂诱导的大鼠甩头反应

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中国药理学通报 2023年第10期39卷 1899-1904页

作者：王劭文周亚男孙毅苏瑞斌南京中医药大学江苏南京210000 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的探究经典致幻剂通过蛋白质翻译后修饰(protein post-translational modifications,PTMs)调控急性甩头反应机制。方法大鼠单次腹腔注射经典致幻剂LSD、DOM和Psilocin进行甩头反应实验,选取甩头次数最高的剂量建立甩头反应动物模型;We... 详细信息

目的探究经典致幻剂通过蛋白质翻译后修饰(protein post-translational modifications,PTMs)调控急性甩头反应机制。方法大鼠单次腹腔注射经典致幻剂LSD、DOM和Psilocin进行甩头反应实验,选取甩头次数最高的剂量建立甩头反应动物模型;Western blot检测经典致幻剂给药10和30 min后大鼠前额叶皮层中蛋白质的磷酸化、乙酰化、泛素化修饰变化情况。结果LSD(0.025 mg·kg^(-1),i.p.)、DOM(3 mg·kg^(-1),i.p.)、Psilocin(8 mg·kg^(-1),i.p.)为大鼠甩头反应动物模型最佳剂量;经典致幻剂给药10 min和30 min后大鼠前额叶皮层中蛋白质磷酸化变化明显。结论蛋白质磷酸化修饰参与经典致幻剂诱导的大鼠甩头反应。

关键词：经典致幻剂动物模型甩头反应前额叶皮层蛋白质翻译后修饰磷酸化乙酰化泛素化

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次级视觉皮质N-甲基-D-天冬氨酸受体对甲基苯丙胺诱发情境关联学习记忆的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2025年第3期39卷 161-168页

作者：孙楚曹丹旎宋睿李锦南京中医药大学江苏南京210023 军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室北京100850

目的研究次级视觉皮质(V2)脑区N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体对甲基苯丙胺情境关联学习记忆的影响。方法以雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,采用小鼠条件性位置偏爱(CPP)实验,分别观察形成期伴随V2脑区微注射、表达期测试前单次V2脑区微注... 详细信息

目的研究次级视觉皮质(V2)脑区N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体对甲基苯丙胺情境关联学习记忆的影响。方法以雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,采用小鼠条件性位置偏爱(CPP)实验,分别观察形成期伴随V2脑区微注射、表达期测试前单次V2脑区微注射、小剂量甲基苯丙胺(0.5 mg·kg^(-1),ip)或环境线索点燃期测试前单次V2脑区微注射NMDA受体选择性拮抗剂D-AP5(双侧各0.5μg)后小鼠CPP得分,评价NMDA受体对甲基苯丙胺诱发CPP效应形成、表达和唤起的影响。结果与溶剂对照组相比,小鼠CPP形成期伴随甲基苯丙胺训练V2脑区微注射D-AP5(双侧各0.5μg)对CPP得分无显著抑制作用,表达期测试前单次V2脑区微注射D-AP5(双侧各0.5μg)对CPP得分无明显抑制作用,小剂量甲基苯丙胺(0.5 mg·kg^(-1),ip)点燃期测试前单次V2脑区微注射D-AP5(双侧各0.5μg)对CPP得分无明显抑制作用,环境线索点燃期测试前单次V2脑区微注射D-AP5(双侧各0.5μg)对CPP得分无明显抑制作用。结论V2脑区NMDA受体不参与甲基苯丙胺情境关联学习记忆的形成、表达和唤起。

关键词：次级视觉皮质条件性位置偏爱甲基苯丙胺 N-甲基-D-天冬氨酸受体

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多巴胺3型受体敲除对电击诱发恐惧记忆形成和唤起的抑制作用

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中国药理学与毒理学杂志 2025年第2期39卷 81-88页

作者：丁晓燕王志媛吴宁李锦宋睿南京中医药大学江苏南京210000 军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室北京100850

目的研究多巴胺3型受体(D_(3)R)对强烈电击诱发恐惧记忆的影响及其可能的神经生物学机制。方法(1)以野生型(WT)和D_(3)R敲除(D_(3)R^(-/-))小鼠为研究对象,用足底热辐射法以缩足反应潜伏期(PWL)为观察指标评价WT和D_(3)R^(-/-)小鼠足底... 详细信息

目的研究多巴胺3型受体(D_(3)R)对强烈电击诱发恐惧记忆的影响及其可能的神经生物学机制。方法(1)以野生型(WT)和D_(3)R敲除(D_(3)R^(-/-))小鼠为研究对象,用足底热辐射法以缩足反应潜伏期(PWL)为观察指标评价WT和D_(3)R^(-/-)小鼠足底基础痛阈值,以排除痛阈值差别对强烈电击效果的影响。(2)将WT和D_(3)R^(-/-)小鼠分别分为对照组和模型组,第1天模型组施予不可逃避性足底电击(1.5 mA,持续10 s,间隔10 s,共15次),对照组不施予电击。于第2,7,10,14和16天进行情景恐惧测试,通过计算僵住时间(FT)百分率反映环境线索诱发的恐惧记忆形成;于环境线索诱发的恐惧反应消退后(第17天)再次给予模型组低强度电流(0.5 mA,持续10 s,间隔10 s,共15次)刺激进行恐惧记忆唤起,对照组不施予电击,第18天进行情景恐惧测试,通过观察FT百分率反映环境线索诱发的恐惧记忆唤起。(3)另一批WT和D_(3)R^(-/-)小鼠,分组和处理同(2),运用光纤记录技术检测电击时WT和D_(3)R^(-/-)小鼠中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺(DA)能神经元钙荧光信号实时动力学变化,以曲线下面积(AUC)为指标量化DA能神经元兴奋性。结果(1)与WT小鼠相比,D_(3)R^(-/-)小鼠PWL无显著变化。(2)与WT对照组相比,WT模型组在电击后第2,7,10和14天FT百分率均显著增加(P<0.05);与D_(3)R^(-/-)对照组相比,D_(3)R^(-/-)模型组仅在电击后第2和7天FT百分率显著增加(P<0.01)。与WT模型组小鼠相比,D_(3)R^(-/-)模型组小鼠在电击后第2,7,10和14天FT百分率均显著减少(P<0.05,P<0.01)。在唤起阶段(第18天),与各自对照组相比,WT模型组和D_(3)R^(-/-)模型组(P<0.05)小鼠FT百分率均显著增加(P<0.05,P<0.01),而D_(3)R^(-/-)模型组FT百分率显著低于WT模型组小鼠(P<0.01)。(3)在电击过程中,WT模型组和D_(3)R^(-/-)模型组小鼠VTA中DA能神经元钙信号在电击前2 s内均迅速升高,在电击2~10 s时间段内钙信号均缓慢下降,而D_(3)R^(-/-)模型组小鼠在2~10 s时间段内的AUC显著低于WT模型组(P<0.05)。结论D_(3)R敲除抑制小鼠长期恐惧记忆的形成和唤起,其神经生物学机制可能与电击时DA能神经元兴奋性降低相关。

关键词：多巴胺3型受体恐惧记忆中脑腹侧被盖区多巴胺

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影响麦司卡林诱导小鼠甩头反应的神经元类型筛选鉴定

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中国药理学与毒理学杂志 2024年第5期38卷 353-359页

作者：王媛媛周培岚闫海涛苏瑞斌南京中医药大学江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院国家安全特需药品全国重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室北京100850

目的探究影响5-羟色胺(5-HT)能致幻剂麦司卡林诱导小鼠甩头反应(HTR)的神经元类型。方法 (1)成年雄性C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组和麦司卡林(1.56,3.125,6.25,12.5,25和50 mg·kg^(-1))组,每组15只,ip给予相应药物后观察30 mi... 详细信息

目的探究影响5-羟色胺(5-HT)能致幻剂麦司卡林诱导小鼠甩头反应(HTR)的神经元类型。方法 (1)成年雄性C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组和麦司卡林(1.56,3.125,6.25,12.5,25和50 mg·kg^(-1))组,每组15只,ip给予相应药物后观察30 min内小鼠HTR次数。(2)将5-HT 2A受体(5-HT_(2A)R)基因双侧LoxP纯合子(5-HT_(2A)^(flox/flox))小鼠分别与钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα环化重组酶阳性(CaMKⅡα^(cre/+))、小清蛋白(PV)^(cre/+)、生长抑素(SOM)^(cre/+)或血管活性肠肽(VIP)^(cre/+)小鼠杂交得到不同类型神经元的5-HT_(2A)受体条件性敲除(cKO)小鼠(5-HT_(2A)^(ΔCaMKⅡα),5-HT_(2A)^(ΔPV),5-HT_(2A)^(ΔSOM)和5-HT_(2A)^(ΔVIP)),将每类cKO小鼠随机分为正常对照组和麦司卡林12.5 mg·kg^(-1)组,每组15只,ip给予相应药物后记录30 min内小鼠HTR次数。(3)将每类5-HT_(2A)R cKO小鼠随机分为正常对照组和麦司卡林12.5 mg·kg^(-1)组,每组12只,ip给予相应药物后记录30 min内小鼠自发活动。结果 (1)与正常对照组相比,麦司卡林3.125,6.25,12.5和25 mg·kg^(-1)组小鼠HTR显著增加(P<0.05,P<0.01)。(2)不同类型神经元的5-HT_(2A)R cKO小鼠中,只有5-HT_(2A)^(ΔCaMKⅡα)小鼠正常对照组与麦司卡林12.5 mg·kg^(-1)组间HTR次数无差异,而在5-HT_(2A)^(ΔPV),5-HT_(2A)^(ΔSOM)和5-HT_(2A)^(ΔVIP)小鼠中,与正常对照组相比,麦司卡林12.5 mg·kg^(-1)组小鼠HTR均显著增加(P<0.01)。(3)所有cKO小鼠正常对照组与麦司卡林12.5 mg·kg^(-1)组间自发活动均无显著差异。结论锥体神经元参与介导了麦司卡林对小鼠HTR的诱导作用。

关键词：麦司卡林甩头反应锥体神经元 5-HT_(2A)受体

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基于HPLC指纹图谱和多成分含量测定结合化学计量学的盐杜仲质量评价研究

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 141-150页

作者：王婷格罗陆遥薛瑞李劲草李硕张杨张有志南京中医药大学江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 华北理工大学药学院河北唐山063210

建立盐杜仲的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法,结合指纹图谱相似度评价、聚类分析(cluster analysis, CA)、主成分分析(principal component analysis, PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least square discriminate analysis, OPLS-DA)进行不同来源盐杜仲的质量评价。采用Cosmosil 5C18-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长238 nm,柱温30℃,进样量10μL。20批不同来源盐杜仲的指纹图谱相似度评价结果表明,除S3批次样品指纹图谱相似度为0.893外,其余19批次样品的相似度均≥0.919,表明相似度较好;共标定14个共有峰,并指认了京尼平苷酸等7个共有峰,京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、京尼平、松脂醇二葡萄糖苷、鹅掌楸苷和松脂醇单葡萄糖苷7个成分的质量分数依次为0.062 0%~0.426 9%、0.024 9%~0.116 5%、0.009 5%~0.052 9%、0.005 5%~0.034 8%、0.115 9%~0.317 8%、0.016 4%~0.108 8%、0.026 4%~0.039 8%;通过CA、PCA和OPLS-DA均可将20批盐杜仲划分为3类,且通过OPLS-DA项下的变量重要性投影(variable importance in projection, VIP)值分析筛选出京尼平苷酸和绿原酸2个差异质量标志物。该研究建立的HPLC指纹图谱和多成分含量测定方法稳定、可靠,可为盐杜仲的质量控制提供参考。

关键词：盐杜仲指纹图谱含量测定化学计量学质量评价

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基于转录组数据分析的六味地黄方活性组分LWD-b抗补体作用的发现与验证

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第3期37卷 168-177页

作者：林颖韩露高圣乔罗丹肖智勇周文霞南京中医药大学江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的基于转录组数据分析发现与验证六味地黄方活性组分的抗补体作用,并研究其可能的作用途径。方法人恶性黑素瘤细胞A375用DMEM/F12高糖培养基培养,分为细胞对照、六味地黄苷糖LW-AFC、寡糖组分CA-30、多糖组分LWB-B和糖苷组分LWD-b组... 详细信息

目的基于转录组数据分析发现与验证六味地黄方活性组分的抗补体作用,并研究其可能的作用途径。方法人恶性黑素瘤细胞A375用DMEM/F12高糖培养基培养,分为细胞对照、六味地黄苷糖LW-AFC、寡糖组分CA-30、多糖组分LWB-B和糖苷组分LWD-b组(终浓度均为100 mg·L^(-1)),培养6 h后用L1000技术采集细胞转录组数据,采用Cosine相似度算法和特征方向法对各组转录组数据进行相似性比对和差异表达分析,采用基因富集分析算法进行KEGG通路富集分析。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定补体通路基因C3和C5 m RNA表达。采用基于补体经典途径的溶血活性实验测定相对溶血率,观察LWAFC,CA-30,LWB-B和LWD-b(终浓度均为1,10和100 mg·L^(-1))及LWD-b中各主要成分莫诺苷、芍药苷、獐牙菜苷、马钱苷、马钱苷酸和丹皮酚原苷(终浓度均为1和100μmol·L^(-1))的抗补体活性。采用补体成分(C1q,C2,C3,C4,C5和C9)缺失血清法测定LWD-b的补体作用靶点。结果转录组数据分析结果显示,LWD-b下调的基因显著富集于补体级联激活通路(P<0.01),而LW-AFC,CA-30和LWB-B此作用不明显。RT-qPCR结果表明,与细胞对照组相比,LWD-b 100 mg·L^(-1)组补体C3和C5 mRNA表达明显降低(P<0.01)。抗补体活性测定结果表明,与补体组相比,LWD-b各浓度组及LW-AFC 10和100 mg·L^(-1)组相对溶血率均明显降低(P<0.01),但仅LWD-b组相对溶血抑制率>20%,提示LWD-b具有抗补体活性,LW-AFC,CA-30和LWB-B此作用不明显。LWD-b中主要成分的抗补体活性筛选结果表明,与补体组相比,莫诺苷1和100μmol·L^(-1)组及芍药苷100μmol·L^(-1)组相对溶血率均明显降低(P<0.01),且相对溶血抑制率均>20%;獐牙菜苷、马钱苷、马钱苷酸和丹皮酚原苷组相对溶血率虽也明显降低(P<0.01),但其相对溶血抑制率均<20%;提示莫诺苷和芍药苷具有显著抗补体活性,而其余成分抗补体活性较弱。补体成分缺失血清法测定结果表明,分别与补体C1q,C2,C3,C5和C9缺失血清组相比,LWD-b 100 mg·L^(-1)处理后相对溶血率变化均<5%,提示LWD-b降低溶血能力与其作用于上述补体成分相关。结论基于转录组数据分析发现并验证了六味地黄方活性组分LWD-b具有抗补体激活作用,莫诺苷和芍药苷可能是其发挥该作用的主要活性成分。LWD-b可能通过作用于补体成分C1q,C2,C3,C5和C9发挥作用。

关键词：六味地黄方活性组分 LWD-b 补体系统溶血实验转录组数据分析

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2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺对卡巴胆碱诱导的小鼠离体海马CA3区γ振荡的作用

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第2期37卷 91-97页

作者：高明伟张树卓苏瑞斌南京中医药大学江苏南京210000 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的探究5-羟色胺2A受体(5-HT_(2A)R)激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺(DOI)对卡巴胆碱(CCh)诱发的小鼠离体海马CA3区γ振荡的作用。方法制备C57BL/6J小鼠离体海马脑片,用人工脑脊液(ACSF)灌流,用离体脑片电生理法记录海马CA3区局部场电位... 详细信息

目的探究5-羟色胺2A受体(5-HT_(2A)R)激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺(DOI)对卡巴胆碱(CCh)诱发的小鼠离体海马CA3区γ振荡的作用。方法制备C57BL/6J小鼠离体海马脑片,用人工脑脊液(ACSF)灌流,用离体脑片电生理法记录海马CA3区局部场电位(LFP),用NeuroExplorer软件分析LFP功率,用Matlab软件分析θ振荡和γ振荡的相位振幅耦合。离体海马脑片给予CCh 5μmol·L^(-1),记录给药前后海马CA3区LFP的变化,并给予荷包牡丹碱(Bic)5μmol·L^(-1)验证γ振荡的诱发。在CCh诱导产生γ振荡后给予DOI 10μmol·L^(-1),分析DOI对γ振荡功率的影响,计算θ振荡和γ振荡的相位振幅耦合调制指数(MI)。结果离体海马脑片给予CCh 5μmol·L^(-1)后,海马CA3区LFP功率较给药前显著升高(P<0.01);在此基础上给予Bic 5μmol·L^(-1)后,LFP功率较给Bic前显著降低(P<0.01),表明γ振荡诱发成功。给予DOI 10μmol·L^(-1)后,CCh诱发的γ振荡功率较给DOI前显著增加(P<0.05),θ振荡功率及θ振荡与γ振荡相位振幅耦合MI较给DOI前无显著差异。结论DOI可能是通过增加海马CA3区γ振荡功率,而非通过影响θ振荡或θ振荡与γ振荡相位振幅耦合发挥影响认知的药理学作用。

关键词： 5-羟色胺2A受体 2,5-二甲氧基-4-碘苯丙胺 γ振荡海马电生理

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基于综合情绪Z值的小鼠观察性恐惧习得性别差异研究

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第10期37卷 733-743页

作者：付圆石天尧周文霞南京中医药大学江苏南京210023 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的用Z-score归一化法整合观察性恐惧习得(OFL)模型小鼠的多项行为指标,探讨小鼠OFL的性别差异。方法①将雌性和雄性C57BL/6J小鼠分别分为对照组和模型组。在OFL训练阶段,令小鼠目睹同类小鼠遭受足底电击(模型组)或不遭受足底电击(对照... 详细信息

目的用Z-score归一化法整合观察性恐惧习得(OFL)模型小鼠的多项行为指标,探讨小鼠OFL的性别差异。方法①将雌性和雄性C57BL/6J小鼠分别分为对照组和模型组。在OFL训练阶段,令小鼠目睹同类小鼠遭受足底电击(模型组)或不遭受足底电击(对照组)以建立OFL模型,24 h后进行观察性恐惧回忆测试。分别记录训练阶段和24 h后恐惧回忆阶段雌、雄小鼠的僵住行为、旷场回避行为和社会交互行为,比较各行为的性别差异。应用Z-score归一化整合3种行为参数,以综合情绪Z值比较小鼠OFL反应的性别差异。②雌性小鼠行双侧卵巢切除术制备去势小鼠,检测OFL实验中3种恐惧行为,以综合情绪Z值比较去势模型组、假手术模型组与各自对照组以及假手术模型组与去势模型组之间的差异。结果①在训练阶段,雌、雄模型组小鼠的僵住时间和旷场回避时间均较同性别对照组显著增加(P<0.05),雌性模型组的社会交互次数较同性别对照组显著降低(P<0.01),但雌、雄模型组之间的僵住行为、旷场回避行为和社会交互行为均无显著差异。24 h后恐惧回忆阶段,雄性模型组的僵住时间较同性别对照组仍显著升高(P<0.01),雌性模型组与同性别对照组之间已无明显差异,雌、雄模型组的旷场回避和社会交互行为与同性别对照组相比均无显著差异,但与雌性模型组相比,雄性模型组的僵住时间显著增加(P<0.01)、旷场回避无差异、社会交互次数显著降低(P<0.01);根据整合后的综合情绪Z值,雌、雄模型组在训练阶段的恐惧情绪反应较同性别对照组强烈(P<0.01),雌雄之间无明显差异;在24 h后恐惧回忆阶段,雄性模型组的恐惧情绪反应仍较同性别对照组强烈(P<0.05),且明显强于雌性模型组(P<0.01)。②去势雌性模型组小鼠在训练阶段较去势对照组恐惧情绪反应明显增强(P<0.05),但与假手术模型组之间无差异;在24 h后恐惧回忆阶段,去势模型组恐惧情绪反应仍强于去势对照组,较假手术模型组也显著增强(P<0.01)。结论在OFL中,雌雄小鼠均能通过目睹同类遭受痛苦而获得恐惧,基于多种行为指标整合后的综合情绪Z值证明,雄鼠习得性恐惧比雌鼠更强。通过双侧卵巢切除消除雌激素的影响后,去势雌鼠的OFL反应与雄鼠相似。

关键词：观察性恐惧习得性别差异 Z-score 去势

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