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温经通络汤对膝骨关节炎模型小鼠VEGF/VEGFR2/ERK1/2信号通路的影响

中国实验方剂学杂志 2021年第13期27卷 28-34页

作者：许奇钱佳佳许炜民黄桂成马勇郭杨韩龙王礼宁南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学附属医院南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院南京210023

目的:探讨温经通络汤改善膝骨关节炎关节(KOA)软骨缺损,延缓关节退变的可能作用机制。方法:采用前交叉韧带切除术(ACLT法)建立KOA模型,实验分为假手术组、模型组、温经通络汤组(高、低剂量)和阳性药组。造模4周后中药组分别予以高、低剂... 详细信息

目的:探讨温经通络汤改善膝骨关节炎关节(KOA)软骨缺损,延缓关节退变的可能作用机制。方法:采用前交叉韧带切除术(ACLT法)建立KOA模型,实验分为假手术组、模型组、温经通络汤组(高、低剂量)和阳性药组。造模4周后中药组分别予以高、低剂量(80,20 g·kg^(-1))的温经通络汤灌胃;阳性药组予以硫酸氨基葡萄糖胶囊(0.29 g·kg^(-1));假手术组与模型组均予等体积生理盐水灌胃。连续干预4周后苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织形态学变化并进行Mankin’s评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测血管内皮生长因子A(VEGFA),血管内皮生长因子受体2(VEGFR2),细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)蛋白和mRNA的表达。结果:HE染色结果显示与假手术组比较,模型组小鼠Mankin’s评分显著升高(P<0.01);与模型组比较,药物组均能明显改善造模引起的关节软骨面缺损,Mankin’s评分均有显著降低(P<0.01),但各给药组间差异无有统计学意义。与假手术组比较,模型组VEGFA,VEGFR2,ERK1/2和ADAMTS4蛋白和mRNA的表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组可以显著抑制VEGFA和ERK1/2的蛋白表达(P<0.01),硫酸氨基葡萄糖胶囊组效果要优于温经通络汤低剂量组(P<0.05),但弱于温经通络汤高剂量组(P<0.01);硫酸氨基葡萄糖胶囊组可以抑制VEGFR2和ADAMTS4的蛋白表达,作用与温经通络汤低剂量组相当,作用均弱于温经通络汤高剂量组(P<0.05)。结论:温经通络汤可以改善KOA小鼠关节软骨损伤,其作用机制可能与VEGF/VEGFR2/ERK1/2信号通路有关。

关键词：温经通络汤膝骨关节炎血管生成血管内皮生长因子(VEGF) 细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)

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温经通络汤含药血清通过PI3K/AKT信号通路对IL-1β诱导软骨细胞凋亡的影响

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时珍国医国药 2022年第11期33卷 2583-2587页

作者：许奇许炜民赵佩茹王钰蔡任钱佳佳黄桂成南京中医药大学中医骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学康复治疗学教研室江苏南京210023 南京中医药大学体育部江苏南京210023

目的探索温经通络汤含药血清对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响及潜在分子机制。方法取传代培养的第2代小鼠软骨细胞,随机分为空白对照组(C组)、10ng/L IL-1β诱导模型组(M组)、10ng/L IL-1β+不同浓度含药血清组(10%、15%、20%),分... 详细信息

目的探索温经通络汤含药血清对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响及潜在分子机制。方法取传代培养的第2代小鼠软骨细胞,随机分为空白对照组(C组)、10ng/L IL-1β诱导模型组(M组)、10ng/L IL-1β+不同浓度含药血清组(10%、15%、20%),分别处理细胞24h后采用流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白印迹分析BAX、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9、p-PI3K、PI3K、p-AKT及AKT蛋白的表达水平。结果与对照组相比,10ng/L IL-1β可诱导软骨细胞的凋亡(P<0.05);与模型组比,10%、15%及20%温经通络汤含药血清组软骨细胞的凋亡率显著下降,其中20%温经通络汤含药血清组效果最为显著(P<0.05);与对照组相比,模型组BAX、Caspase-3、Caspase-9的表达明显增高(P<0.05),Bcl-2、p-PI3K、PI3K、p-AKT及AKT表达明显下降(P<0.05);不同浓度的温经通络汤含药血清可降低BAX、Caspase-3、Caspase-9表达,增加Bcl-2、p-PI3K、PI3K、p-AKT及AKT表达(P<0.05)。结论温经通络汤可以通过激活PI3K/AKT信号通路而抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,从而起到预防骨性关节炎发生发展的作用。

关键词：温经通络汤骨关节炎软骨细胞细胞凋亡 PI3K/AKT

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心理干预改善慢性筋骨病疼痛研究进展

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第5期 188-191页

作者：孙文渊马勇南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023

慢性筋骨病最常见的临床症状为疼痛,而消极的情绪反应、认知的偏差以及消极的应付方式等心理因素是造成疼痛主诉的主要原因。心理因素会放大疼痛体验,反之疼痛又会诱发或加重焦虑等心理障碍程度。故而心理干预是改善慢性疼痛的重要方法... 详细信息

慢性筋骨病最常见的临床症状为疼痛,而消极的情绪反应、认知的偏差以及消极的应付方式等心理因素是造成疼痛主诉的主要原因。心理因素会放大疼痛体验,反之疼痛又会诱发或加重焦虑等心理障碍程度。故而心理干预是改善慢性疼痛的重要方法,因此对慢性筋骨病疼痛的中西医相关概念、心理干预对慢性疼痛性疾病的治疗进行综述,以期提高骨科医务人员对疼痛与心理因素相关性的重视从而采取预见性诊疗措施,帮助患者消除感觉、情感、认知和社会维度的痛苦体验减轻疼痛疾病康复,改善患者的心理需求和社会功能需求,提高生活质量。

关键词：慢性筋骨病慢性疼痛肌肉骨骼心理干预情志

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浅析磁石与引经药之关联

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中华中医药杂志 2021年第1期36卷 378-381页

作者：吴承杰马勇郭杨南京中医药大学骨伤修复与重建新技术重点实验室南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029

引经药可引导其他药物趋向某经或直达病所,从而提高临床疗效。磁石,归肝、心、肾经,且具备天然的吸引力,与引经药的特征有诸多类似,其中可能存在一些关联。分析古籍中磁石一般作为内引经药服用,少有作为外引经药使用。然而,磁石可隔物作... 详细信息

引经药可引导其他药物趋向某经或直达病所,从而提高临床疗效。磁石,归肝、心、肾经,且具备天然的吸引力,与引经药的特征有诸多类似,其中可能存在一些关联。分析古籍中磁石一般作为内引经药服用,少有作为外引经药使用。然而,磁石可隔物作用,且与骨有亲附作用,所以更适合作为外引经药应用于骨伤科。因此,磁石是引经药,而且既可为内引经药,又可为外引经药。由此可拓展磁石的临床应用,并提高临床疗效,尤其是骨伤科。

关键词：磁石引经药骨伤临床应用

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脊髓康对脊髓损伤模型大鼠血清外泌体中miRNA表达的影响

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中医杂志 2021年第7期62卷 615-621页

作者：吴承杰马勇郭杨周雨昕涂鹏程杨光露孙杰潘娅岚南京中医药大学附属医院江苏省南京市210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京中医药大学慢性病中医护理干预实验室

目的探讨脊髓康治疗脊髓损伤的可能作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、强的松组和脊髓康组,每组20只。除假手术组外其余各组大鼠采用改进Allen′s方法建立脊髓损伤模型,假手术组大鼠脊髓暴露但未受伤。造模后假手术... 详细信息

目的探讨脊髓康治疗脊髓损伤的可能作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、强的松组和脊髓康组,每组20只。除假手术组外其余各组大鼠采用改进Allen′s方法建立脊髓损伤模型,假手术组大鼠脊髓暴露但未受伤。造模后假手术组和模型组大鼠给予生理盐水20ml/(kg·d)灌胃,强的松组大鼠给予强的松溶液60mg/(kg·d)灌胃,脊髓康组大鼠给予脊髓康溶液25g/(kg·d)灌胃。各组大鼠分别于术后7、14、21和28天进行指标观察,每个时间点5只。大鼠的运动功能采用双后肢运动功能评分(BBB评分)和斜板试验评价,采集血清后提取外泌体并用外泌体标志蛋白(Tsg101、CD63、CD9)进行鉴定,检测损伤区RhoA、ROCK蛋白及mRNA表达,并检测外泌体中miR-21、miR-126、miR-133b表达。结果与假手术组同时间比较,模型组大鼠斜板试验角度和BBB评分均降低,模型组在术后7、28天时RhoA蛋白及mRNA表达升高,术后28天时ROCK蛋白及mRNA表达升高,术后7、28天时外泌体中miR-21、miR-126、miR-133b表达降低(P<0.05);与模型组同时间比较,脊髓康组和强的松组大鼠在术后21、28天时斜板试验角度和BBB评分增加,术后28天时RhoA、ROCK蛋白及mRNA表达均降低,外泌体中miR-21、miR-126、miR-133b表达均升高(P<0.05或P<0.01)。结论脊髓康可能通过促进急性脊髓损伤模型大鼠血清外泌体中miR-21、miR-126、miR-133b表达,进而抑制RhoA/ROCK通路,从而修复脊髓损伤,改善大鼠的运动功能,在28天时作用最明显。

关键词：脊髓损伤脊髓康运动功能外泌体微小RNA

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基于网络药理学及体内实验探讨温肾通络止痛方对原发性骨质疏松症小鼠MAPK信号通路的调节作用

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中医药信息 2022年第11期39卷 1-9页

作者：韩秋革员浬刘孟敏郭杨马勇孙杰王礼宁潘娅岚南京中医药大学江苏南京210023 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023

目的:采用网络药理学和体内实验验证的方法探讨温肾通络止痛方治疗原发性骨质疏松症的潜在作用机制。方法:选择TCMSP、TCMID、BATMAN-TCM与OMIM、GeneCards数据库筛选温肾通络止痛方治疗原发性骨质疏松症的有效活性成分及靶标基因;利用C... 详细信息

目的:采用网络药理学和体内实验验证的方法探讨温肾通络止痛方治疗原发性骨质疏松症的潜在作用机制。方法:选择TCMSP、TCMID、BATMAN-TCM与OMIM、GeneCards数据库筛选温肾通络止痛方治疗原发性骨质疏松症的有效活性成分及靶标基因;利用Cytoscape 3.7.2建立其网络关系图;通过STRING在线分析平台构建PPI网络并运用NetworkAnalyzer拓扑学分析进一步筛选核心靶点;借助DAVID进行GO和KEGG富集分析,筛选具有统计学差异的GO过程与KEGG通路(P<0.05)。以去卵巢的方式建立原发性骨质疏松症模型,21只SPF级C57BL/6J雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、温肾通络止痛方组,假手术组切除卵巢周围相等质量的脂肪组织,模型组和温肾通络止痛方组切除双侧卵巢;灌胃相应药物8周后,苏木素-伊红(HE)染色观察股骨组织形态学变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠血清IL-6、TNF-α的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-timePCR)检测IL-6、TNF-α、Runx2 mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测p-ERK、ERK、p-JNK、JNK的蛋白表达。结果:网络药理学方法筛选出温肾通络止痛方防治原发性骨质疏松症的有效活性成分包括山柰酚、槲皮素、木犀草素等203个,靶标基因包括IL-6、TNF-α、MAPK8等154个。KEGG富集分析预测温肾通络止痛方主要通过PI3K/Akt、TNF、MAPK等信号通路发挥抗骨质疏松作用。HE染色结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠骨小梁稀疏,骨髓腔间隙较大,温肾通络止痛方可改善模型小鼠骨小梁密度,减小骨髓腔间隙。与模型组比较,温肾通络止痛方能够降低模型小鼠血清中IL-6、TNF-α的表达水平(P<0.01),降低IL-6、TNF-αmRNA表达(P<0.01),升高Runx2的mRNA的表达(P<0.01),并同时降低p-ERK/ERK、p-JNK/JNK的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:温肾通络止痛方治疗原发性骨质疏松症具有多成分、多靶点、多途径的特点,可能通过IL-6、TNF-α靶点调控MAPK信号通路影响炎症反应等来发挥防治原发性骨质疏松症的作用。

关键词：网络药理学温肾通络止痛方原发性骨质疏松症 MAPK信号通路

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基于藏象学说探析脊髓损伤的病机与治法

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现代中西医结合杂志 2024年第24期33卷 3411-3416页

作者：胡永康吴承杰张通海马勇吴毛王建伟郭杨南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 江苏省中医退行性骨关节病临床医学创新中心江苏无锡214071

中医学对脊髓损伤的病机与治法长期集中在督脉和瘀血的角度,藏象学说作为中医学发展中最重要的体系之一,对脊髓损伤的诊疗有着重要的指导意义。本文基于藏象学说,分别从肾、肝、脾三脏角度分期辨证探析脊髓损伤的病机与治法,结合现代医... 详细信息

中医学对脊髓损伤的病机与治法长期集中在督脉和瘀血的角度,藏象学说作为中医学发展中最重要的体系之一,对脊髓损伤的诊疗有着重要的指导意义。本文基于藏象学说,分别从肾、肝、脾三脏角度分期辨证探析脊髓损伤的病机与治法,结合现代医学研究,阐释脊髓损伤与现代医学肾功能、肝功能及消化系统的内在联系,并探讨脊髓损伤治法的研究概况,旨在为脊髓损伤的中医药治疗研究提供新的思路。

关键词：藏象学说脊髓损伤病机治法

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中医药治疗腰椎间盘突出症微创术后残留症状的研究进展

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中华中医药杂志 2021年第5期36卷 2830-2834页

作者：戎毅马勇郭杨司誉豪於浩王凌南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤研究所南京210023 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023

腰椎间盘突出症微创术后患者常残留腰腿疼痛麻木等症状,日常生活受到影响,中医药治疗此症状具有独特疗效。文章通过阐述其病因病机、总结中医药治疗方式(包括口服中药煎剂、针灸、针刀、中药熏洗外敷、推拿等),希望引起广大医学工作者... 详细信息

腰椎间盘突出症微创术后患者常残留腰腿疼痛麻木等症状,日常生活受到影响,中医药治疗此症状具有独特疗效。文章通过阐述其病因病机、总结中医药治疗方式(包括口服中药煎剂、针灸、针刀、中药熏洗外敷、推拿等),希望引起广大医学工作者的关注,进行大样本、多参数、高质量的随机对照临床试验以及数据挖掘,建立以经方为基础的相对统一的辨证论治体系,为临床上诊治腰椎间盘突出症微创术后残留症状提供参考。

关键词：腰椎间盘突出症微创术后残留症状中医药经方

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基于经筋理论的三步理筋手法治疗早中期膝骨关节炎的临床研究

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现代中西医结合杂志 2023年第14期32卷 1945-1950页

作者：龚震马勇钱超黄利佳孙文渊郭杨南京中医药大学附属医院江苏南京210004 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院江苏南京210023

目的观察三步理筋手法治疗早中期膝骨关节炎的短期临床疗效。方法选取2022年1—8月就诊于南京中医药大学附属医院骨伤科门诊的早中期膝骨关节炎患者45例为研究对象,随机分为治疗组、对照组、空白组3组,每组15例。所有患者均予美洛昔康... 详细信息

目的观察三步理筋手法治疗早中期膝骨关节炎的短期临床疗效。方法选取2022年1—8月就诊于南京中医药大学附属医院骨伤科门诊的早中期膝骨关节炎患者45例为研究对象,随机分为治疗组、对照组、空白组3组,每组15例。所有患者均予美洛昔康联合盐酸氨基葡萄糖口服,空白组不予手法治疗,治疗组予三步理筋手法治疗,对照组予常规局部手法治疗,手法治疗每周2次,每次约15 min。3组治疗时间均为4周。治疗前、治疗1周及治疗4周后采用西大略湖和迈克马斯特骨性关节炎评分量表(WOMAC)评估3组患者膝关节功能,治疗前及治疗4周后采用健康简明调查简表(SF-36)评价3组患者生活质量,治疗结束后2个月随访。结果治疗4周后,治疗组WOMAC综合评分及僵硬评分均明显低于其余2组(P均<0.05),日常活动评分明显低于空白组(P<0.05)。治疗结束后2个月,治疗组WOMAC综合评分、僵硬评分均明显低于其余2组(P均<0.05),治疗组、对照组日常活动评分均明显低于空白组(P均<0.05)。治疗4周后,治疗组生理功能、躯体疼痛评分均明显高于对照组及空白组(P均<0.05),3组生理职能、总体健康、活力、情感职能、社会功能、精神健康评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。治疗结束后2个月,治疗组生理功能、躯体疼痛评分均明显高于对照组及空白组(P均<0.05)。结论在药物治疗的基础上,加用三步理筋手法可有效缓解早中期膝骨关节炎患者局部疼痛,改善关节功能,提高患者生活质量,且疗效优于常规局部手法治疗。

关键词：经筋理论手法治疗三步理筋手法早中期膝骨关节炎

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温肾通督方对脊髓损伤后微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片的影响

温肾通督方对脊髓损伤后微血管内皮细胞吞噬髓鞘碎片的影响

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第十四届全国中医药博士生学术论坛

作者：吴承杰郭杨石磊陈思娴潘娅岚刘孟敏王礼宁马勇南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京 210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京 210023 南京中医药大学慢性病中医护理干预实验室南京 210023 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京 210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京 210023

目的：探究温肾通督方对脊髓损伤后微血管内皮细胞(MECs)吞噬髓鞘碎片的影响及其作用机制.方法：采用改良Allen's法制备脊髓损伤小鼠模型,1、3、7 d后通过HE染色和尼氏染色观察损伤脊髓的病理改变.利用ELISA法检测损伤脊髓和血清中M... 详细信息

目的：探究温肾通督方对脊髓损伤后微血管内皮细胞(MECs)吞噬髓鞘碎片的影响及其作用机制.方法：采用改良Allen's法制备脊髓损伤小鼠模型,1、3、7 d后通过HE染色和尼氏染色观察损伤脊髓的病理改变.利用ELISA法检测损伤脊髓和血清中MCP-1、IL-6、IL-1 β、TNF-α的表达水平,通过3D激光共聚焦观察损伤脊髓中MECs吞噬髓鞘碎片情况,采用多重免疫荧光染色检测脊髓损伤后MECs中HDAC6、LC3B、NLRP3表达.结果：与模型组比较,温肾通督方明显减少脊髓损伤后炎症细胞的浸润和神经元的固缩坏死;显著降低脊髓和血清中MCP-1、IL-6、IL-1β、TNF-α的水平(P＜0.01,P＜0.05);促进MECs吞噬髓鞘碎片,并能下调HDAC6、NLRP3表达,上调LC3B表达(P＜0.01).结论：温肾通督方可能通过抑制HDAC6促进MECs吞噬髓鞘碎片,并能同时阻断NLRP3通路的信号转导,共同改善炎性微环境,促进脊髓损伤修复.

关键词：温肾通督方脊髓损伤微血管内皮细胞髓鞘碎片炎症反应

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