检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2016年第8期32卷 1091-1097页

作者：张伟伟朱继峰王任高雅楠张军峰佟书娟南京中医药大学病原与免疫学教研室江苏南京210023 江苏省现代病原生物学重点实验室江苏南京211166

目的探讨白藜芦醇对日本血吸虫病纤维化的作用,并分析其对Th1和Th2应答的影响。方法 45只C57BL/6小鼠感染日本血吸虫3周后,随机分为A、B、C 3组,A组为感染组,B组为灌胃白藜芦醇治疗组,C组为灌胃吡喹酮治疗组,另取15只正常C57BL/6小鼠为... 详细信息

目的探讨白藜芦醇对日本血吸虫病纤维化的作用,并分析其对Th1和Th2应答的影响。方法 45只C57BL/6小鼠感染日本血吸虫3周后,随机分为A、B、C 3组,A组为感染组,B组为灌胃白藜芦醇治疗组,C组为灌胃吡喹酮治疗组,另取15只正常C57BL/6小鼠为健康对照D组。在感染第13周,取小鼠的肝脏,应用天狼猩红染色观察肝脏纤维化程度,并检测肝脏中IL-13、IFN-γ和TGF-β mRNA的表达情况。另取脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测Th1和Th2细胞占总T淋巴细胞的比例。结果感染第13周,与A组相比,B组和C组小鼠肝脏纤维化程度明显减轻(P<0.01),B组小鼠的Th1细胞比例明显增高(P<0.05),Th2细胞比例明显降低(P<0.01),B组小鼠外周血清中的抗可溶性成虫抗原(SWA)的IgG2a明显增多(P<0.05),而抗可溶性虫卵抗原(SEA)的IgG1明显减少(P<0.01),B组小鼠肝脏中IFN-γ mRNA的表达量明显增高(P<0.05),而IL-13、TGF-β mRNA的表达水平明显降低(P<0.01)。结论白藜芦醇通过增强日本血吸虫感染小鼠的Th1应答,降低Th2应答,明显抑制日本血吸虫感染小鼠肝脏纤维化程度。

关键词：日本血吸虫白藜芦醇吡喹酮纤维化 Th1 Th2

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稳定表达叶酸受体α的C26细胞株的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第5期31卷 644-647页

作者：邱郑邢黎军刘欣欣张梅张芳王旻中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室江苏南京210009 南京中医药大学中药学一级学科江苏南京210046

目的建立稳定表达叶酸受体α(FRα)的C26细胞,用于FRα基因疫苗的后续研究。方法采用脂质体转染法,将前期构建的重组真核表达质粒pc DNA3.1-FRα基因导入C26细胞,用G418加压进行筛选,并通过单克隆操作,建立稳定转染叶酸受体α基因的单... 详细信息

目的建立稳定表达叶酸受体α(FRα)的C26细胞,用于FRα基因疫苗的后续研究。方法采用脂质体转染法,将前期构建的重组真核表达质粒pc DNA3.1-FRα基因导入C26细胞,用G418加压进行筛选,并通过单克隆操作,建立稳定转染叶酸受体α基因的单克隆细胞株。利用反转录PCR及免疫荧光细胞化学染色检测稳定转染细胞中叶酸受体α基因的表达情况,并利用反转录PCR检测传代细胞中FRα基因表达的稳定性。结果经转染、G418筛选以及单克隆化操作,得到单克隆FRα基因稳定转染细胞株,所得单克隆稳定转染细胞株可表达FRαmRNA及蛋白,并能够在多次传代后保持表达的稳定性。结论成功构建了FRα稳定转染细胞株。

关键词：叶酸受体α 稳定转染细胞株表达鉴定

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快速老化小鼠P8海马神经元突触可塑性相关的AMPA受体表达异常

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解剖学报 2014年第1期45卷 15-19页

作者：封敏张英俊鲁娟熊殷艺吴巧凤于美玲卢圣锋余曙光怀化医学高等专科学校针灸推拿教研室湖南怀化418000 成都中医药大学时间生物学实验室成都610075 怀化医学高等专科学校医学影像学教研室湖南怀化418000 南京中医药大学康复治疗学教研室南京210023 南京中医药大学针药结合省部共建教育部重点实验室南京210023

目的比较快速老化小鼠P8(SAMP8)与抗快速老化小鼠R1(SAMR1)海马神经元突触可塑性相关的谷氨酸α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸(AMPA)受体表达差异,为阿尔兹海默病(AD)的发病机制提供实验依据。方法取雄性10月龄SAMP8 10只和SAMR1 9只... 详细信息

目的比较快速老化小鼠P8(SAMP8)与抗快速老化小鼠R1(SAMR1)海马神经元突触可塑性相关的谷氨酸α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸(AMPA)受体表达差异,为阿尔兹海默病(AD)的发病机制提供实验依据。方法取雄性10月龄SAMP8 10只和SAMR1 9只,应用Morris水迷宫实验评价动物学习记忆能力,透射电子显微镜观察海马CA1区神经元突触界面超微结构,蛋白质免疫印迹法检测海马AMPA受体亚基GluR1、GluR2的表达。结果与SAMR1比较,SAMP8逃避潜伏期延长,目标象限时间百分比下降,穿台次数减少;海马CA1区神经元突触后致密带变薄,突触间隙增宽,突触界面曲率下降;海马GluR2含量下降,GluR1含量有下降趋势,但差异无统计学意义。结论海马AMPA受体异常可能是导致突触可塑性受损,引发SAMP8认知障碍的原因之一,AMPA受体在AD的发病中可能占有重要地位。

关键词：快速老化小鼠P8 阿尔兹海默病谷氨酸α-氨基-3-羟基-5-甲基4-异唑丙酸受体突触可塑性学习记忆 Morris水迷宫免疫印迹法小鼠

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RNA干扰抑制Fas基因的表达对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3的影响

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临床检验杂志 2013年第6期31卷 438-441页

作者：张春兵高峰张明顺滕凤猛南京中医药大学附属江苏省中医院检验科南京210029 南京医科大学微生物学和免疫学教研室南京210029

目的用RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠Fas基因表达,观察其对脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及FADD-FLIP-TRAF-NF-κB信号传导途径的影响,为后续FasL低剂量兴奋效应研究提供实验基础。方法设计合成靶向小鼠Fas基因的小干扰RNA(siRNA)片段,用脂... 详细信息

目的用RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠Fas基因表达,观察其对脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及FADD-FLIP-TRAF-NF-κB信号传导途径的影响,为后续FasL低剂量兴奋效应研究提供实验基础。方法设计合成靶向小鼠Fas基因的小干扰RNA(siRNA)片段,用脂质体包埋转染bEnd.3细胞;CCK-8法检测细胞增殖;RT-PCR检测bEnd.3细胞Fas mRNA的表达情况;western blot检测Fas、FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平。结果 CCK-8法检测显示,Fas-siRNA组细胞增殖水平与空白对照组比较,无统计学差异(t=1.805,P>0.05);RT-PCR结果表明,与空白组的Fas mRNA表达水平比较,Fas-228-、Fas-310-、Fas-427-、Fas-891-siRNA组mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(F=123.127,P<0.05);western blot显示,Fas-siRNA组与空白对照组Fas蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(t=12.101,P<0.01);Fas-siRNA组FADD、FLIP、TRAF蛋白相对表达水平与空白对照组比较,表达均下调(t=28.315、17.563、8.903,P<0.05)。结论 Fas-siRNA能有效封闭Fas基因的表达,抑制Fas下游信号FADD、FLIP、TRAF蛋白表达。

关键词： Fas基因 RNA干扰细胞增殖

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叶酸受体α真核表达载体的构建及在HEK293细胞中表达的鉴定

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药物生物技术 2013年第2期20卷 106-109页

作者：刘欣欣邱郑王筱萌邢黎军张娟张芳王旻中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室江苏南京210009 南京中医药大学中药学一级学科江苏南京210046

从高表达叶酸受体α的卵巢癌细胞株SKOV3中提取总RNA,RT-PCR扩增FRα基因片段,使用HindⅢ和EcoRⅠ双酶切后克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,对其进行酶切及测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染入人胚肾细胞HEK293中,并利用RT-PCR、... 详细信息

从高表达叶酸受体α的卵巢癌细胞株SKOV3中提取总RNA,RT-PCR扩增FRα基因片段,使用HindⅢ和EcoRⅠ双酶切后克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,对其进行酶切及测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染入人胚肾细胞HEK293中,并利用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色检测细胞内FRα基因的表达情况。通过RT-PCR扩增得到750 bp左右的FRα基因片段,并构建了真核表达重组质粒,经酶切、测序鉴定正确。转染HEK293细胞后,RT-PCR检测到细胞中FRαmRNA的存在,Western blot、细胞免疫荧光证明FRα蛋白在细胞中的表达。成功构建了FRα基因的真核表达重组质粒,该质粒可在真核细胞中表达FRα蛋白,这些实验结果为卵巢癌基因疫苗的研究奠定了基础。

关键词：卵巢癌叶酸受体α 真核载体 DNA疫苗

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上感颗粒对病毒性上呼吸道感染小鼠肺组织TLR3及PKR mRNA表达的影响

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南京医科大学学报（自然科学版） 2011年第3期31卷 410-413页

作者：郑艳耿连艺盛夏高峰奚肇庆南京中医药大学第一临床医学院内科学教研室江苏南京210046 东南大学医学院分子生物学实验室江苏南京210009 江苏省中医院急诊科江苏南京210029

目的:通过观察上感颗粒对病毒性上呼吸道感染小鼠肺组织TLR3及PKR mRNA表达的影响,来探讨其治疗病毒性上呼吸道感染可能的免疫调节机制。方法:ICR小鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、抗病毒口服液组、利巴韦林组、上感颗粒大、中、低... 详细信息

目的:通过观察上感颗粒对病毒性上呼吸道感染小鼠肺组织TLR3及PKR mRNA表达的影响,来探讨其治疗病毒性上呼吸道感染可能的免疫调节机制。方法:ICR小鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、抗病毒口服液组、利巴韦林组、上感颗粒大、中、低剂量组。病毒滴鼻后给药,观察其肺组织TLR3及PKR mRNA的表达。结果:抗病毒口服液、利巴韦林、上感颗粒可降低小鼠肺组织TLR3及PKR mRNA的表达,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论:上感颗粒可抑制病毒性上呼吸道感染小鼠肺组织中TLR3及PKR mRNA的表达,可能为其免疫调节作用的机制之一。

关键词：上感颗粒病毒性上呼吸道感染 TLR3 PKR mRNA

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黄芪甲苷联合树突状细胞瘤苗抗胃癌免疫的体外实验研究

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国际中医中药杂志 2011年第4期33卷 301-304页

作者：杨璐沈洪王立新林琳周晓波吴静刘增巍徐艺赵崧葛超骆殊刘亚军南京中医药大学第一临床医学院2008级硕士研究生 210046 南京中医药大学2008级博士研究生 210046 南京中医药大学基础医学院中医基础教研室 210046 江苏省中医院消化内科南京210029 东南大学医学院病原生物学与免疫学系

目的通过体外实验观察中药单体黄芪甲苷（astragaloside IV，AIV）联合树突状细胞（DC）瘤苗对机体免疫功能的调节作用。方法外周血单个核细胞体外诱导、培养，负载胃癌SGC7901冻融抗原，制备DC瘤苗，分别观察AⅣ联合DC瘤苗、DC瘤苗、AI... 详细信息

目的通过体外实验观察中药单体黄芪甲苷（astragaloside IV，AIV）联合树突状细胞（DC）瘤苗对机体免疫功能的调节作用。方法外周血单个核细胞体外诱导、培养，负载胃癌SGC7901冻融抗原，制备DC瘤苗，分别观察AⅣ联合DC瘤苗、DC瘤苗、AIV淋巴细胞增殖情况及其激活的效应细胞在体外杀伤胃癌细胞的活性。结果①AⅣ联合DC瘤苗（联合）组、DC瘤苗组T淋巴细胞增殖率显著高于AIV组、T细胞组（阴性对照组）（P=0．000），其中联合组促淋巴细胞增殖能力优于DC瘤苗组（S／R为1：5、1：10、1：50、1：100时，P分别为0．013、0．014、0．017、0．019）；AIV组T淋巴细胞增殖与T细胞组比较，差异无统计学意义（P=0．185）。②联合组及DC瘤苗组所活化的T细胞对胃癌SGC7901细胞的杀伤率高于AⅣ组、未活化T细胞组（P=0．000），联合组杀伤能力优于DC瘤苗组（E／T为5：1、10：1、20：1、50：1时，P分别为0．023、0．012、0．016、0．011）；而AⅣ组与未活化T细胞组几乎无杀伤作用（P=0．267）。结论AⅣ可通过DC瘤苗促进T淋巴细胞的增殖及杀伤肿瘤的活性，从而更有效地诱导抗胃癌特异性免疫应答。

关键词：树突状细胞黄芪甲苷胃癌抗肿瘤免疫

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当归补血汤对感音神经性聋大鼠耳蜗干细胞移植后细胞凋亡的影响

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听力学及言语疾病杂志 2010年第3期18卷 271-274页

作者：郑鸿燕邰浩清曾水林南京中医药大学解剖教研室南京210029 东南大学医学院神经生物学研究所

目的探讨感音神经性聋大鼠耳蜗干细胞移植后干细胞凋亡的时程特点及当归补血汤的抗凋亡作用。方法分离胚胎大鼠Corti器的耳蜗干细胞进行细胞培养,在相差显微镜下观察细胞形态及生长状况,用Nestin免疫荧光法进行耳蜗干细胞鉴定。建立感... 详细信息

目的探讨感音神经性聋大鼠耳蜗干细胞移植后干细胞凋亡的时程特点及当归补血汤的抗凋亡作用。方法分离胚胎大鼠Corti器的耳蜗干细胞进行细胞培养,在相差显微镜下观察细胞形态及生长状况,用Nestin免疫荧光法进行耳蜗干细胞鉴定。建立感音神经性聋大鼠模型,将其分为耳蜗干细胞移植组(45只)、当归补血汤干预组(45只)及对照组(35只),分别将耳蜗干细胞悬液、含有当归补血汤的耳蜗干细胞悬液和生理盐水移植入三组大鼠耳蜗鼓阶,于移植后1、3、5、10、15天采用原位末端标记法结合流式细胞仪及免疫荧光方法对三组动物干细胞凋亡情况进行定量分析。结果移植后1、3、5、10、15天耳蜗干细胞移植组的耳蜗干细胞凋亡率分别为27.84%、49.37%、44.78%、39.37%、34.82%,当归补血汤干预组分别为18.35%、26.92%、23.18%、21.38%、18.19%,细胞凋亡在移植后3～5天达到高峰;当归补血汤干预组各时间点凋亡率均明显低于耳蜗干细胞移植组(P<0.05)。结论感音神经性聋大鼠耳蜗干细胞移植后3～5天是干细胞凋亡的高峰期;当归补血汤具有抗移植耳蜗干细胞凋亡的作用。

关键词：感音神经性聋耳蜗干细胞凋亡当归补血汤

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凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

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中西医结合学报 2010年第4期8卷 347-351页

作者：何春燕黄建华王文健金妙文叶放吴海涛陈伟华吴勉华南京中医药大学中医学博士后流动站江苏南京210029 复旦大学中西医结合研究所上海200040 南京中医药大学第一临床医学院中医内科教研室江苏南京210029 南京中医药大学基础医学院细胞生物学实验室江苏南京210029

目的:探讨中药凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿的作用及其机制。方法:采用自体血纹状体注射方法制备大鼠脑出血模型。实验大鼠分为假手术组、模型组和凉血通瘀方组。凉血通瘀方组给予凉血通瘀煎剂灌胃,余两组给予生理盐水灌胃,每日1次。... 详细信息

目的:探讨中药凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿的作用及其机制。方法:采用自体血纹状体注射方法制备大鼠脑出血模型。实验大鼠分为假手术组、模型组和凉血通瘀方组。凉血通瘀方组给予凉血通瘀煎剂灌胃,余两组给予生理盐水灌胃,每日1次。脑出血后24、48、72和120 h观察大鼠脑水肿情况,明胶酶谱法检测脑血肿周围组织内基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)活性,荧光定量实时聚合酶链式反应法检测MMP-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissueinhibitor ofmetalloproteinase-1,TIMP-1)的表达水平。结果:凉血通瘀方组大鼠脑水肿程度在各时间点均显著低于模型组(P<0.01),仅在72 h其脑组织含水量高于假手术组(P<0.01)。与模型组相比,凉血通瘀方组的MMP-9酶原水平及活性均显著降低,其mRNA水平亦在脑出血后48、72、120 h低于模型组(P<0.01),而TIMP-1 mRNA水平在各时间点均显著升高(P<0.01)。结论:凉血通瘀方可能通过上调TIMP-1表达来抑制MMP-9水平,从而减轻脑出血大鼠脑水肿。

关键词：脑出血基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶组织抑制剂1 复方大鼠

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当归补血汤对耳蜗干细胞鼓阶内移植治疗药物性感音神经性耳聋大鼠增效作用研究

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东南大学学报（医学版） 2010年第2期29卷 176-182页

作者：郑鸿燕邰浩清曾水林南京中医药大学解剖学教研室江苏南京210029 东南大学医学院神经生物学研究所江苏南京210009

目的:观察当归补血汤对耳蜗干细胞移植治疗感音神经性耳聋大鼠增效作用。方法:感音神经性耳聋大鼠分为耳蜗干细胞移植组、当归补血汤组和空白对照组3组。体外培养耳蜗干细胞进行内耳移植,耳蜗干细胞移植组将耳蜗干细胞悬液移植入内耳耳... 详细信息

目的:观察当归补血汤对耳蜗干细胞移植治疗感音神经性耳聋大鼠增效作用。方法:感音神经性耳聋大鼠分为耳蜗干细胞移植组、当归补血汤组和空白对照组3组。体外培养耳蜗干细胞进行内耳移植,耳蜗干细胞移植组将耳蜗干细胞悬液移植入内耳耳蜗结构,当归补血汤组将含有当归补血汤的耳蜗干细胞悬液移植入内耳耳蜗结构,空白对照组移植生理盐水。分别于术后1、3、6和12个月采用听觉脑干诱发电位方法检测模型大鼠的听力恢复情况,处死大鼠,通过免疫荧光染色方法观察移植的耳蜗干细胞在内耳存活、分化和迁移情况。结果:从E14大鼠耳蜗分离的组织,经原代和传代培养后,可获得大量未分化悬浮生长的Nestin阳性细胞团,Brdu表达阳性,说明是具有自我更新和增殖潜能的干细胞。免疫荧光检测发现在耳蜗干细胞移植组、当归补血汤组在移植针道两侧可见移植的干细胞,有些还迁移到基底膜区。存活的细胞部分呈My-osinⅦA阳性染色。与耳蜗干细胞移植组比较,当归补血汤组MyosinⅦA阳性染色细胞数量较多,差异有统计学意义(P<0.05)。听觉脑干诱发电位结果显示当归补血汤组的感音神经性耳聋模型大鼠听力恢复情况较耳蜗干细胞移植组和对照组好,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经体外培养的耳蜗干细胞移植入内耳鼓阶后能够存活和迁移,并分化为内耳毛细胞;当归补血汤可以提高耳蜗干细胞分化为内耳毛细胞的比例,并促进感音神经性耳聋模型大鼠听力恢复。

关键词：耳蜗干细胞移植当归补血汤大鼠

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