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南京中医药大学学报 2014年第6期30卷 593-595页

作者：程海波沈卫星姚志华沈政洁孙东东徐长亮谭佳妮南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

介绍了癌毒病机理论的相关内容,认为痰瘀郁毒是肿瘤的核心病机,并在癌毒病机理论的指导下,对消癌解毒方抗肿瘤的临床与实验研究进行了综述,消癌解毒方配合化疗具有较好的増效减毒、提高患者免疫功能的作用,其作用机制可能与其能够降低T... 详细信息

介绍了癌毒病机理论的相关内容,认为痰瘀郁毒是肿瘤的核心病机,并在癌毒病机理论的指导下,对消癌解毒方抗肿瘤的临床与实验研究进行了综述,消癌解毒方配合化疗具有较好的増效减毒、提高患者免疫功能的作用,其作用机制可能与其能够降低TGF-β1表达水平、抑制VEGF的生成、降低MMP-2活性、影响TLRs/NF?κB信号转导通路等有关。

关键词：癌毒病机理论消癌解毒方抗肿瘤述评

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消癌解毒方对结肠癌的抑制作用及对Treg细胞的影响

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南京中医药大学学报 2017年第5期33卷 515-518页

作者：谭佳妮石文静沈卫星徐长亮孙东东程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的探讨消癌解毒方对结肠癌的抗肿瘤作用及作用机制。方法皮下注射结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠右腋下,建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14d后,处死小鼠,分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测消癌解毒方对Treg细胞分布的影响,免疫组化检测... 详细信息

目的探讨消癌解毒方对结肠癌的抗肿瘤作用及作用机制。方法皮下注射结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠右腋下,建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14d后,处死小鼠,分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测消癌解毒方对Treg细胞分布的影响,免疫组化检测消癌解毒方对肿瘤组织内Foxp3蛋白表达的影响。结果消癌解毒方可以显著抑制结肠癌荷瘤的增长,降低CD4+Foxp3+Treg细胞在外周血及脾脏的分布,减少Foxp3蛋白在肿瘤组织内的表达。结论消癌解毒方具有显著抑制结肠癌增殖的作用,其机制可能与减少外周血内Treg细胞的分布及肿瘤组织中Foxp3的表达进而影响其下游信号通路传导相关。

关键词：消癌解毒方结肠癌调节性T细胞

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消癌解毒方君药组分干预肝癌大鼠肝脏组织蛋白差异性表达的蛋白质组学研究

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时珍国医国药 2021年第3期32卷 532-536页

作者：叶仲昊许宏钦赵胜男孙东东谭佳妮程海波沈卫星南京中医药大学第一临床医学院国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的以蛋白组学技术,观察白花蛇舌草和半枝莲对肝癌大鼠肝脏组织蛋白差异表达的影响。方法将30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、清热解毒药组。给予模型组与清热解毒药组大鼠0.01%DEN自由饮水14周诱导大鼠肝癌模型。清热解毒药组... 详细信息

目的以蛋白组学技术,观察白花蛇舌草和半枝莲对肝癌大鼠肝脏组织蛋白差异表达的影响。方法将30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、清热解毒药组。给予模型组与清热解毒药组大鼠0.01%DEN自由饮水14周诱导大鼠肝癌模型。清热解毒药组大鼠从第4周开始给予白花蛇舌草、半枝莲水提液灌胃,模型组同时给予0.9%生理盐水灌胃。第16周给药结束后全部处死,取肝脏组织样本。进行TMT肽段标记,质谱鉴定,应用KOBAS软件分析两组蛋白质的生物信息学的差异表达。结果清热解毒药组与模型组相比,差异表达明显的蛋白共597个,包括上调蛋白319个,下调蛋白278个。差异表达蛋白富集分析发现主要涉及了细胞代谢、炎症反应、免疫调控、自噬、热休克、细胞周期与凋亡、细胞生长与分化、基质降解、血管生成、肿瘤转移、癌相关、肝再生修复等分子机制。信号通路分析涉及化学致癌作用、PPAR代谢等代谢相关通路、细胞色素P450相关通路,瞬时受体电位(TRP)相关通路等通路。结论消癌解毒方的君药组分——清热解毒药白花蛇舌草和半枝莲对肝癌大鼠肝脏组织的免疫、炎性相关通路的影响尤为显著,提示清热解毒中药可能通过干预免疫、炎性过程发挥抗肿瘤效应,并对相关代谢通路具有调控作用。

关键词：中药中药复方消癌解毒方肝癌蛋白质组学

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消癌解毒方联合顺铂通过调控组蛋白去甲基化酶抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长

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中国实验方剂学杂志 2018年第13期24卷 78-84页

作者：孙浩沈卫星徐长亮孙东东谭佳妮许惠琴程海波南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的：观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法：BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂（2 mg·kg-1）、消癌解毒方（1×104mg·kg-1）及两者联合用药进行治疗,给药期... 详细信息

目的：观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法：BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂（2 mg·kg-1）、消癌解毒方（1×104mg·kg-1）及两者联合用药进行治疗,给药期间称量并记录小鼠体质量和瘤体积,15 d后脱颈处死,剥离并称量瘤块质量,计算抑瘤率,苏木素-伊红（HE）染色观察心、肝、脾、肾和瘤块的病理情况,原位末端转移酶标记技术（TUNEL）观察肿瘤细胞凋亡情况并统计凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,组蛋白去甲基化酶1（LSD1）,组蛋白H3（Histone H3）,组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化（Histone H3K4me2）,组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化（Histone H3K9me2）的表达水平。结果：与模型组相比,顺铂给药组小鼠体质量均有下降,其中消癌解毒方＋顺铂组较单用顺铂组体质量增加（P〈0.01）;消癌解毒方＋顺铂较单用顺铂更能缩小移植瘤体积,提高抑瘤率（P〈0.01）;更明显提高了肿瘤细胞凋亡率（P〈0.05,P〈0.01）;更明显下调肿瘤组织Bcl-2表达水平,上调Bax表达水平（P〈0.05,P〈0.01）;各给药组均能下调LSD1蛋白的表达,增加组蛋白H3K4,H3K9的二甲基化,消癌解毒方＋顺铂组作用最为明显（P〈0.05,P〈0.01）。结论：消癌解毒方＋顺铂用药对于4T1荷瘤小鼠抑瘤作用明显,其机制可能与下调组蛋白去甲基化酶水平有关。

关键词：消癌解毒方 4T1荷瘤小鼠顺铂组蛋白去甲基化酶

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消癌解毒方通过调控PI3K/AKT通路抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的作用与机制探讨

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南京中医药大学学报 2018年第2期34卷 173-177页

作者：孙浩沈卫星徐长亮孙东东谭佳妮许惠琴程海波南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的研究消癌解毒方抗乳腺癌细胞的活性及作用机制。方法显微镜观察MDA-MB-231细胞形态,MTT法考察细胞的增殖抑制率,流式细胞术观察细胞周期,Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白P53、P21、Cyclin B1、CDK1的表达。结果与对照组相... 详细信息

目的研究消癌解毒方抗乳腺癌细胞的活性及作用机制。方法显微镜观察MDA-MB-231细胞形态,MTT法考察细胞的增殖抑制率,流式细胞术观察细胞周期,Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白P53、P21、Cyclin B1、CDK1的表达。结果与对照组相比,消癌解毒方给药组细胞减少,排列疏松,体积变小,形态变圆;消癌解毒方可以提高MDA-MB-231细胞的增殖抑制率(P<0.05~0.01),使肿瘤细胞的细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.05~0.01),可以抑制与细胞周期相关的PI3K/AKT信号通路,上调P53、P21,下调Cyclin B1、CDK1蛋白的表达(P<0.05~0.01)。结论消癌解毒方能阻滞MDA-MB-231细胞周期,抑制乳腺癌细胞的增殖,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：消癌解毒方乳腺癌细胞细胞增殖 PI3K/AKT通路

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基于化学成分与肠道菌群探讨消癌解毒方中黄连-乌梅药对的配伍机制

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南京中医药大学学报 2019年第2期35卷 199-204页

作者：史悦华范汇森刘晓肖平沈卫星程海波孙东东东南大学附属中大医院江苏南京210009 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

目的探讨黄连-乌梅药对与消癌解毒方水煎液中部分生物碱类成分的含量差异,并比较药对与全方对小鼠肠道菌群的影响。方法采用Extend-C18(100mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温35℃,... 详细信息

目的探讨黄连-乌梅药对与消癌解毒方水煎液中部分生物碱类成分的含量差异,并比较药对与全方对小鼠肠道菌群的影响。方法采用Extend-C18(100mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温35℃,进样量2μL;离子化模式为电喷雾离子化(ESI),以正离子模式检测,开展方法学验证和含量测定研究。按照给药不同将小鼠分为正常组、全方高浓度组、全方低浓度组、药对高浓度组和药对低浓度组,连续灌胃给药7d,每组分别收集粪便样本,进行16S rRNA基因测序。结果建立的含量测定方法在一定浓度范围内线性关系良好,方法学验证结果均符合相关要求,木兰花碱与非洲防己碱在黄连、药对以及全方中的含量分别为:(4.433±0.133)(8.905±0.154)mg/g,(3.545±0.033)(9.170±0.051)mg/g,(5.287±0.038)(13.861±0.690)mg/g。全方组和药对组中拟杆菌门Bacteroides的丰度均高于正常组,而全方组和药对组中厚壁菌门Firmicutes的丰度均低于正常组。药对高浓度组中的疣微菌门Verrucomicrobia和变形菌门Proteobacteria的丰度高于其他组。结论液质联用方法和相关参数简便、可靠,可用于有关成分的含量检测。与单味药中含量相比,经过药对配伍后,非洲防己碱含量增加,而木兰花碱含量则略有降低;经过全方配伍后,2种成分的含量均增加。此外,肠道菌群实验表明无论是药对还是全方在给药后,会不同程度地影响肠道菌群内部占比改变,其可能对调节肠道系统平衡,具有一定帮助作用,从而为进一步阐释黄连-乌梅在消癌解毒方中配伍机制提供了参考和依据。

关键词：黄连-乌梅配伍肠道菌群 16S rRNA基因测序含量测定

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清热解毒与以毒攻毒治法在肿瘤治疗中的比较研究

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时珍国医国药 2017年第9期28卷 2184-2186页

作者：石文静谭佳妮沈卫星徐长亮程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

中医治疗肿瘤已有数千年历史,清热解毒与以毒攻毒作为肿瘤的常用治法在肿瘤临床中占有重要地位。两种治法在治疗肿瘤时的理论依据、机理、方药以及中药抗肿瘤机制均有所不同。针对以上四方面进行总结归纳,以期对肿瘤治法的相关比较有更... 详细信息

中医治疗肿瘤已有数千年历史,清热解毒与以毒攻毒作为肿瘤的常用治法在肿瘤临床中占有重要地位。两种治法在治疗肿瘤时的理论依据、机理、方药以及中药抗肿瘤机制均有所不同。针对以上四方面进行总结归纳,以期对肿瘤治法的相关比较有更加深入的探讨。

关键词：清热解毒以毒攻毒肿瘤

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应用蛋白质组学分析化痰祛瘀法干预肝癌大鼠血清蛋白的差异表达

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广州中医药大学学报 2018年第5期35卷 841-847页

作者：饶希午陈婷婷孙东东苗筠杰谭佳妮徐长亮李柳程海波沈卫星南京中医药大学第一临床医学院国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

【目的】观察化痰祛瘀法对肝癌大鼠血清蛋白差异表达的影响,探讨其药效学机制。【方法】将30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、化痰祛瘀组,每组10只。采用自由饮用二乙基亚硝胺(DEN)法复制大鼠肝癌模型。从造模第4周开始,化痰祛瘀... 详细信息

【目的】观察化痰祛瘀法对肝癌大鼠血清蛋白差异表达的影响,探讨其药效学机制。【方法】将30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、化痰祛瘀组,每组10只。采用自由饮用二乙基亚硝胺(DEN)法复制大鼠肝癌模型。从造模第4周开始,化痰祛瘀组大鼠给予山慈菇、莪术水提液(剂量为3.12 g·kg-1·d-1)灌胃,模型组给予9 g/L生理盐水灌胃(1 m L/d),每周6 d。于第16周末,将大鼠全部处死,取血清样本。将3组大鼠血清样本进行TMT肽段标记,质谱鉴定,应用KOBAS软件分析3组差异表达蛋白质的生物信息学。【结果】共鉴定到1 151个蛋白点。与正常组比较,模型组差异表达明显的蛋白共234个,包含正调控蛋白151个,负调控蛋白83个;与模型组比较,化痰祛瘀组差异表达明显的蛋白共138个,包括正调控蛋白60个,负调控蛋白78个。对差异表达蛋白对应的基因于PubMed数据库逐一进行检索,发现这些差异表达蛋白参与代谢、免疫调控、炎症反应、自噬、热休克、氧化应激、细胞周期与凋亡、基质降解、血管生成、肿瘤转移、癌相关等。信号通路分析涉及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)代谢、糖酵解、ATP合成等多条代谢相关通路,纤溶酶原激活物联转导通路,免疫调控相关Toll样受体(TLRs)通路,低氧诱导因子1(HIF-1)信号通路,经典肿瘤通路如P53、Wnt、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路、Ras通路等,亦涉及细胞因子介导的炎症反应、细胞黏附分子、细胞基质受体互动、自噬、细胞凋亡等通路。【结论】化痰祛瘀法可有效干预大鼠肝癌转移,具有多靶点、多中心的调控作用。

关键词：化痰祛瘀法山慈菇莪术肝癌蛋白质组学疾病模型,动物大鼠

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转化医学视角下的中药复方物质基础研究思路与建议

转化医学视角下的中药复方物质基础研究思路与建议

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第三届仁心雕龙学术论坛

作者：孙东东沈卫星苗筠杰闫秋莹程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学药学院南京210023

物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节.论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药... 详细信息

物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节.论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药理论创新及药物创制;要统筹好给药前以及给药后两个环节;还要充分借助现代仪器分析技术和生命科学手段.

关键词：中药复方物质基础药物创制转化医学

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消癌解毒方黄酮类成分及其给药后在大鼠体内分布

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中国现代中药 2020年第12期22卷 1977-1984页

作者：钱桂英闫秋莹蒋家璐范汇森谭佳妮程海波孙东东南京中医药大学常熟附属医院江苏苏州215500 国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室/江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室/江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心/南京中医药大学转化医学研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的:建立超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)检测消癌解毒方水提液中黄酮类成分的方法,同时研究大鼠灌胃给予消癌解毒方水提液后黄酮类成分在体内的分布情况。方法:采用Agilent C 18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)... 详细信息

目的:建立超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)检测消癌解毒方水提液中黄酮类成分的方法,同时研究大鼠灌胃给予消癌解毒方水提液后黄酮类成分在体内的分布情况。方法:采用Agilent C 18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)反相色谱柱对各待测物进行分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,应用电喷雾离子源(ESI),在正、负离子模式下采集数据。结果:从消癌解毒方水提液中共鉴定出23个黄酮类化学成分;大鼠经灌胃给予消癌解毒方水提液后,6-甲氧基柚皮素(13)、柚皮素(14)、4′-羟基汉黄芩素(15)、芹菜素(16)、汉黄芩素(19)在多个生物样品中被检测发现,其中在肠、脑、胃、粪便样品中分别检测出6、6、12、10个黄酮类成分。结论:建立的方法可快速分析鉴定出消癌解毒方水提液中及给药后大鼠有关部位中黄酮类成分,为进一步阐释复方中特征化学成分及其在体内的变化分布规律提供参考。

关键词：消癌解毒方超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法黄酮化学成分体内分布

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