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南京中医药大学学报 2017年第5期33卷 515-518页

作者：谭佳妮石文静沈卫星徐长亮孙东东程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的探讨消癌解毒方对结肠癌的抗肿瘤作用及作用机制。方法皮下注射结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠右腋下,建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14d后,处死小鼠,分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测消癌解毒方对Treg细胞分布的影响,免疫组化检测... 详细信息

目的探讨消癌解毒方对结肠癌的抗肿瘤作用及作用机制。方法皮下注射结肠癌细胞CT26于BALB/c小鼠右腋下,建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14d后,处死小鼠,分离外周血单核细胞,流式细胞仪检测消癌解毒方对Treg细胞分布的影响,免疫组化检测消癌解毒方对肿瘤组织内Foxp3蛋白表达的影响。结果消癌解毒方可以显著抑制结肠癌荷瘤的增长,降低CD4+Foxp3+Treg细胞在外周血及脾脏的分布,减少Foxp3蛋白在肿瘤组织内的表达。结论消癌解毒方具有显著抑制结肠癌增殖的作用,其机制可能与减少外周血内Treg细胞的分布及肿瘤组织中Foxp3的表达进而影响其下游信号通路传导相关。

关键词：消癌解毒方结肠癌调节性T细胞

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消癌解毒方含药血清对人结肠癌细胞增殖及糖酵解过程的影响

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中国实验方剂学杂志 2017年第20期23卷 120-125页

作者：石文静谭佳妮沈卫星徐长亮孙东东程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学第一临床医学院南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的:探讨不同浓度消癌解毒方含药血清对人结肠癌细胞增殖及糖酵解过程的影响及其作用机制。方法:8只新西兰兔随机分为含药血清组(消癌解毒方40 g·kg·^(-1)d^(-1))和空白血清组(等体积生理盐水),每组兔子连续灌胃3 d,制备消... 详细信息

目的:探讨不同浓度消癌解毒方含药血清对人结肠癌细胞增殖及糖酵解过程的影响及其作用机制。方法:8只新西兰兔随机分为含药血清组(消癌解毒方40 g·kg·^(-1)d^(-1))和空白血清组(等体积生理盐水),每组兔子连续灌胃3 d,制备消癌解毒方含药血清和空白血清。5%,10%,15%消癌解毒方含药血清处理人结肠癌HT-29与HCT-116细胞后,采用噻唑蓝比色法测定其对HT-29与HCT-116细胞生长的抑制作用,乳酸试剂盒检测HT-29与HCT-116细胞的乳酸生成量,葡萄糖试剂盒检测HT-29与HCT-116细胞的葡萄糖生成量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测己糖激酶(HK2),丙酮酸脱氢酶激酶(PDK1),乳酸脱氢酶(LDHA)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达。结果:消癌解毒方含药血清能够抑制HT-29与HCT-116细胞增殖能力,15%消癌解毒方含药血清对人结肠癌HT-29与HCT-116细胞的抑制率分别为42.7%,50.2%。Western blot结果显示,与空白组比较,消癌解毒方含药血清可降低HK2,PDK1,LDHA,HIF-1α蛋白相对表达量(P<0.05),且随浓度的增加表达降低。乳酸及葡萄糖试剂盒检测结果显示,与空白组比较,消癌解毒方含药血清可降低HT-29与HCT-116细胞的乳酸及葡萄糖水平(P<0.05),且随浓度的增加乳酸及葡萄糖水平降低。结论:消癌解毒方含药血清可以通过抑制人结肠癌HT-29与HCT-116细胞糖酵解的过程从而抑制肿瘤细胞的增殖,其抑制糖酵解过程的机制可能与降低HIF-1α表达,进而减少糖酵解相关酶HK2,PDK1,LDHA表达有关。

关键词：消癌解毒方结肠癌增殖糖酵解

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尤建良治疗胃癌常用药对举隅

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辽宁中医杂志 2017年第8期44卷 1596-1597页

作者：刘拥军沈卫星尤建良程海波南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学附属无锡市中医医院江苏无锡214001

尤建良教授从医30余载,学验俱丰,擅长运用中医药治疗恶性肿瘤。尤教授临证常喜用药对,临证可起到事半功倍的效果。文章介绍尤建良教授治疗胃癌常用药对,以总结其临证经验。

关键词：尤建良中医药药对胃癌

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清热解毒与以毒攻毒治法在肿瘤治疗中的比较研究

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时珍国医国药 2017年第9期28卷 2184-2186页

作者：石文静谭佳妮沈卫星徐长亮程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

中医治疗肿瘤已有数千年历史,清热解毒与以毒攻毒作为肿瘤的常用治法在肿瘤临床中占有重要地位。两种治法在治疗肿瘤时的理论依据、机理、方药以及中药抗肿瘤机制均有所不同。针对以上四方面进行总结归纳,以期对肿瘤治法的相关比较有更... 详细信息

中医治疗肿瘤已有数千年历史,清热解毒与以毒攻毒作为肿瘤的常用治法在肿瘤临床中占有重要地位。两种治法在治疗肿瘤时的理论依据、机理、方药以及中药抗肿瘤机制均有所不同。针对以上四方面进行总结归纳,以期对肿瘤治法的相关比较有更加深入的探讨。

关键词：清热解毒以毒攻毒肿瘤

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转化医学视角下的中药复方物质基础研究思路与建议

转化医学视角下的中药复方物质基础研究思路与建议

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第三届仁心雕龙学术论坛

作者：孙东东沈卫星苗筠杰闫秋莹程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学药学院南京210023

物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节.论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药... 详细信息

物质基础研究是中药复方研究的重要内容,是实现中医药基础研究与临床应用之间双向转化的关键环节.论文简述了当前中药复方物质基础研究的基本情况和存在的问题,提出以转化医学视角,开展中药复方物质基础研究的思路与方法,要注重中医药理论创新及药物创制;要统筹好给药前以及给药后两个环节;还要充分借助现代仪器分析技术和生命科学手段.

关键词：中药复方物质基础药物创制转化医学

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尤建良教授治疗中晚期胃癌

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吉林中医药 2017年第1期37卷 18-21页

作者：刘拥军沈卫星尤建良程海波南京中医药大学第一临床医学院南京210023 国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室/江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学附属无锡市中医医院肿瘤科江苏无锡214001

尤建良教授诊治中晚期胃癌认为中焦失调是内环境失衡的关键,调理中焦脾胃功能是治疗中晚期胃癌的首要任务,也是微调平衡的核心思想;提倡中医辨证与西医辨病相结合,以提高诊断的准确性和治疗的靶向性;遣药多选用药对及平性温和之品,药性... 详细信息

尤建良教授诊治中晚期胃癌认为中焦失调是内环境失衡的关键,调理中焦脾胃功能是治疗中晚期胃癌的首要任务,也是微调平衡的核心思想;提倡中医辨证与西医辨病相结合,以提高诊断的准确性和治疗的靶向性;遣药多选用药对及平性温和之品,药性轻灵,而少用大寒大热之品,提倡量少力宏。此外,尤教授论治肿瘤时注重精神情志和饮食因素对疾病的影响,时时不忘对患者进行心理疏导和饮食调理。尤教授临证诸法合用,从而稳定病灶,缓解症状,提高生活质量,延长患者生存期。

关键词：尤建良胃癌中焦失调微调平衡情志调节

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液质联用分析芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B在小鼠灌胃给药后体内的组织分布

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药物分析杂志 2016年第10期36卷 1760-1766页

作者：闫秋莹程海波沈卫星徐长亮窦志华孙东东南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的:建立UPLC-MS同时测定小鼠组织中芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B的分析方法,并对该3种成分在小鼠体内的组织分布进行研究。方法:以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷^(-1),9(11)-二烯-28-酸甲酯(CDDO-Me)为内标,通过甲醇沉淀组织样品蛋白,使用... 详细信息

目的:建立UPLC-MS同时测定小鼠组织中芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B的分析方法,并对该3种成分在小鼠体内的组织分布进行研究。方法:以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷^(-1),9(11)-二烯-28-酸甲酯(CDDO-Me)为内标,通过甲醇沉淀组织样品蛋白,使用LC-MS技术进行定量分析,采用ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,正、负离子检测模式,检测离子质荷比(m/z)为芦丁609.2、野黄芩苷463.3、半枝莲碱B 558.4和CDDO-Me 506.7。结果:在小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织中,芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B分别在0.005 0~0.160 0、0.004 0~0.133 0、0.0033~0.106 7μg·m L^(-1)的线性范围内线性关系良好(r≥0.9913);方法的精密度和稳定性RSD均小于15%;回收率为90.0%~98.4%,RSD小于15%,符合化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则。芦丁等3个成分在小鼠体内分布比较广泛,其中在肝脏和肾脏中分布较多,在肺脏中分布含量最低。结论:本方法经方法学验证,可对小鼠组织中的芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B含量进行测定;在用于小鼠体内化学成分的组织分布研究中,芦丁在肾脏中含量多、脾脏中最少,野黄芩苷在心脏中含量最多、肺脏中最少,半枝莲碱B在肝脏中含量最多、肾脏中最少。

关键词：半枝莲芦丁野黄芩苷半枝莲碱B 药物分布药物代谢动力学液相色谱-质谱联用

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HPLC-ESI-Q-TOF-MS分析天葵子乙醇提取物中化学成分

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中国实验方剂学杂志 2016年第15期22卷 42-46页

作者：闫秋莹程海波孙东东谭佳妮窦志华南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学药学院南京210023

目的：采用高效液相色谱与电喷雾四极杆飞行时间质谱仪串联技术（HPLC-ESI-Q-TOF-MS）对天葵子95%乙醇提取部位中的化学成分进行定性分析。方法：采用液质联用色谱方法（LC-MS-MS）,C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,以乙腈-0.1%... 详细信息

目的：采用高效液相色谱与电喷雾四极杆飞行时间质谱仪串联技术（HPLC-ESI-Q-TOF-MS）对天葵子95%乙醇提取部位中的化学成分进行定性分析。方法：采用液质联用色谱方法（LC-MS-MS）,C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,质谱使用ESI离子源,正离子模式采集数据。质量扫描范围为m/z 50～1 500。结果：通过质谱数据分析,并与相关文献对照,从天葵子95%乙醇提取部位共鉴定出11种化合物,分别为4-（甲氧羰基）-2-氨基丁酸、紫草氰苷、耧斗菜内酯、蝙蝠葛内酯、蝙蝠葛氰苷、菲律宾厚壳树苷、天葵氰苷、橙黄胡椒酰胺、对苯二甲酸二丁酯、胡萝卜苷及邻苯二甲酸-二-2-乙基-己酯。结论：基于HPLC-ESI-Q-TOF技术,通过高效液相色谱分离,质谱测定相对分子质量、裂解数据,文献分析检索,能够快速准确地对天葵子95%乙醇提取部位的化学成分进行分离鉴定,为进一步研究天葵子的药效物质基础提供有力证据。

关键词：天葵子乙醇提取部分化学成分高效液相色谱串联电喷雾四极杆飞行时间质谱仪

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消癌解毒方中有效成分在小鼠体内的组织分布研究

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中药药理与临床 2016年第2期32卷 181-185页

作者：闫秋莹程海波沈卫星谭佳妮孙东东南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的：使用液质联用方法对消癌解毒方水提液中芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B等在小鼠组织中的分布进行研究。方法：以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9（11）-二烯-2-酸甲酯（CDDO-Me）作为内标,以甲醇对组织中蛋白进行沉淀,通过液质联用技... 详细信息

目的：使用液质联用方法对消癌解毒方水提液中芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B等在小鼠组织中的分布进行研究。方法：以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9（11）-二烯-2-酸甲酯（CDDO-Me）作为内标,以甲醇对组织中蛋白进行沉淀,通过液质联用技术对芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B含量进行测定,使用Waters ACQUITY UPLC BEH-C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）,0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱,正、负离子模式检测,检测离子质荷比（m/z）芦丁609.2、野黄芩苷463.3、半枝莲碱B558.4和CDDO-Me 506.7。结果：在小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织中,芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B在测定的线性范围内线性关系良好（r≥0.9913）;方法的精密度和稳定性RSD小于均15%;回收率为89.89%~113.35%,RSD值小于15%,符合化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则。芦丁等3种成分在不同组织中分布情况各不相同,芦丁主要分布在肝脏和肾脏,其次为心脏和脾脏,肺脏中分布最少;野黄芩苷只在肺脏中检出;半枝莲碱B的分布趋势为肝脏、肾脏和心脏中,肺脏和脾脏中分布较少。结论：本方法能够方便、灵敏、准确地对小鼠组织中的芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B的含量进行测定。

关键词：消癌解毒方芦丁野黄芩苷半枝莲碱B 液质联用组织分布

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基于HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术分析白花蛇舌草二氯甲烷部位化学成分

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中华中医药杂志 2016年第2期31卷 388-391页

作者：孙东东闫秋莹沈卫星徐长亮程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023 南京中医药大学药学院南京210023

目的:通过HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位中的化学成分进行定性分析。方法:采用LC-MS/MS,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。通过质谱信... 详细信息

目的:通过HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位中的化学成分进行定性分析。方法:采用LC-MS/MS,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。通过质谱信息及元素组成,与相关文献数据对照分析,对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位进行成分鉴定。结果:共鉴定出12个化合物,分别为阿魏酸、对羟基香豆酸、葡萄糖乙苷、对甲氧基桂皮酸、quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-feruloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-glucopyranoside、kaempferol-3-O-[2-O-(6-O-Eferuloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-galactopyranoside、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、2-甲基-3-羟基蒽醌、aurantianmide acetate、β-谷甾醇、豆甾醇、豆甾醇-5,22-二烯-3β,7β-二醇。结论:采用LC-MS/MS方法同时鉴定白花蛇舌草中多种化学成分,方法简单,快速,结果准确,为进一步阐明白花蛇舌草的药效物质基础提供证据。

关键词：白花蛇舌草化学成分 HPLC-ESI-Q-TOF-MS

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