检索结果-内蒙古大学图书馆

生理学报 2021年第6期73卷 926-930页

作者：马华根刘海琴刘昭德唐元瑜北京中医药大学中医学院伤寒教研室福建中医药大学中西医结合学院南京医科大学基础医学院福建中医药大学中医学院

本研究旨在建立一种简便高效的原代大鼠肾小球微血管内皮细胞体外培养方法。摘取出生7～10天Sprague-Dawley大鼠的双侧肾脏,分离出肾皮质;经剪碎,连续过200目、300目筛网获得肾小球;Ⅳ型胶原酶消化15～20 min后,收集肾微血管球进行接种... 详细信息

本研究旨在建立一种简便高效的原代大鼠肾小球微血管内皮细胞体外培养方法。摘取出生7～10天Sprague-Dawley大鼠的双侧肾脏,分离出肾皮质;经剪碎,连续过200目、300目筛网获得肾小球;Ⅳ型胶原酶消化15～20 min后,收集肾微血管球进行接种培养。通过细胞形态学观察、第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色鉴定所培养的细胞。结果显示:肾微血管球呈不规则球形,无包囊,毛细血管袢结构清晰;静置培养3天后,有短梭形细胞从其周围爬出,并逐渐形成细胞集落,呈"岛屿状"分布;4～5天后细胞集落相互融合,6天后铺满皿底,呈典型的单层、铺路石样、镶嵌式排列。第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色检测结果显示,胞质淡染成棕红色,第Ⅷ因子相关抗原表达为阳性,阳性率接近100%。以上结果提示,本研究将连续过筛法和胶原酶消化法结合,成功建立了简便高效的原代大鼠肾小球微血管内皮细胞体外培养方法,从而为开展糖尿病肾病的发生和发展机理研究提供了重要的工具细胞。

关键词：肾小球微血管内皮细胞连续过筛法胶原酶消化法第Ⅷ因子相关抗原大鼠

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黑骨藤追风活络胶囊调节mPGES-1改善胶原诱导性关节炎的作用研究

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医学信息 2024年第20期37卷 57-61页

作者：罗进芳何吉乐岚何康黄勇其姚血明黄聪贵州中医药大学基础医学院药理学教研室贵州省高等学校中药(民族药)药性与效应研究重点实验室贵州中医药大学药学院贵州中医药大学第二附属医院风湿免疫科

目的研究黑骨藤追风活络胶囊（HZC）调节mPGES-1干预类风湿关节炎的作用机制。方法随机选取24只SD大鼠并分为正常组、模型组、HZC组、甲氨蝶呤（methotrexate, MTX）组，造模成功后对大鼠进行灌胃给药，除正常组外，其余三组采用牛Ⅱ... 详细信息

目的研究黑骨藤追风活络胶囊（HZC）调节mPGES-1干预类风湿关节炎的作用机制。方法随机选取24只SD大鼠并分为正常组、模型组、HZC组、甲氨蝶呤（methotrexate, MTX）组，造模成功后对大鼠进行灌胃给药，除正常组外，其余三组采用牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂混合乳化剂构建胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis, CIA）模型，大鼠分别给予生理盐水、MTX和HZC灌胃，共给药21 d。比较各组足肿胀、脾指数、微粒体前列腺素E2合酶-1(microsomal prostaglandin E synthase 1,mPGES-1)的表达情况。结果与正常组大鼠比较，模型组大鼠足肿胀程度明显且伴随着关节变形肿大，HZC组和MTX组大鼠未见明显足肿胀和关节变形。模型组给药第14、21天足肿胀厚度高于正常组，差异有统计学意义（P<0.05），而HZC组和MTX组给药后第14、21天足肿胀厚度低于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）。模型组脾指数高于正常组、HZC组、MTX组，差异有统计学意义（P<0.05）；与正常组比较，模型组大鼠关节滑膜组织m PGES-1蛋白表达上升（P<0.05），而与模型组比较，HZC组和MTX组mPGES-1蛋白表达下调（P<0.05）。结论 HZC能通过干预m PGES-1的表达情况而改善CIA大鼠的炎症反应，起到治疗作用。

关键词：黑骨藤追风活络胶囊胶原诱导性关节炎 mPGES-1

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白细胞介素-12对干燥综合征小鼠肝脏的损伤作用及其机制

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中华解剖与临床杂志 2023年第3期28卷 183-190页

作者：查洁郭俊巧江婷婷姚根宏南京医科大学鼓楼临床医学院风湿免疫科南京210008 安庆医药高等专科学校基础医学院病原生物与免疫学教研室安庆246052 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院南京210008

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)对干燥综合征(SS)小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法选取12周龄C57BL/6小鼠、非肥胖型糖尿病(NOD)SS模型小鼠、IL-12基因敲除NOD小鼠各5只, 分别纳入正常对照组、SS模型组和IL-12 KO NOD组。各组小鼠取外... 详细信息

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)对干燥综合征(SS)小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法选取12周龄C57BL/6小鼠、非肥胖型糖尿病(NOD)SS模型小鼠、IL-12基因敲除NOD小鼠各5只, 分别纳入正常对照组、SS模型组和IL-12 KO NOD组。各组小鼠取外周静脉血分离提取外周血单个核细胞(PBMC)和血清, 处死小鼠解剖获取颌下腺组织和肝脏组织。(1)取正常对照组和SS模型组小鼠肝脏组织制备石蜡切片, HE染色观察肝脏肝小叶结构, MASSON染色观察肝脏纤维化情况。(2)取正常对照组和SS模型组小鼠肝脏组织、颌下腺组织的石蜡切片免疫组织化学染色观察比较IL-12阳性细胞光密度(OD)值的改变。(3)采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常对照组、SS模型组小鼠PBMC和肝脏组织IL-12 mRNA的相对表达量, 以及正常对照组、SS模型组、IL-12 KO NOD模型组小鼠肝脏组织纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原(Col1)mRNA的相对表达量。(4)取正常对照组、SS模型组、IL-12 KO NOD模型组小鼠外周血血清和肝脏组织, 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、转铁蛋白(TRF)、转铁蛋白受体(TFR)蛋白的表达情况。结果 (1)HE染色可见正常对照组小鼠肝小叶结构基本正常, 而SS模型组小鼠肝脏的肝小叶、肝索结构紊乱, 肝细胞胞浆内有空泡出现。MASSON染色可见SS模型组小鼠肝脏组织中见弥漫不规则的染为蓝色的胶原纤维, 正常对照组小鼠肝组织中染为蓝色的胶原纤维则少见。(2)正常对照组小鼠颌下腺和肝脏IL-12阳性细胞OD值分别为0.08±0.01、0.03±0.01, 高于SS模型组的8.74±0.78、2.58±0.07, 差异均有统计学意义(t=24.82、80.64, P值均<0.001)。(3)正常对照组小鼠肝脏组织及PBMC中IL-12 mRNA表达分别为1.07±0.15、1.03±0.14, 均低于SS模型组的3.00±0.50、3.01±0.57, 差异均有统计学意义(t=8.27、7.54, P值均<0.001)。与正常对照组比, SS模型组FN、TGF-β mRNA的相对表达量均增高, 差异均有统计学意义(P值均<0.001);与SS模型组比较, IL-12 KO NOD组FN、TGF-β mRNA的相对表达量均降低, 差异均有统计学意义(P值均<0.05);3组间Col1 mRNA的相对表达量差异无统计学意义(P=0.243)。(4)与正常对照组比较, SS模型组血清和肝脏组织中SLC7A11、GPX4、TRF蛋白相对表达量均明显降低, TFR蛋白相对表达量均增高, 差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与SS模型组比较, IL-12 KO NOD组血清和肝脏组织中SLC7A11、GPX4、TRF的相对表达量均增加, 血清TFR蛋白的相对表达量降低, 差异均有统计学意义(P值均<0.05);而肝脏组织中TFR蛋白的相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-12表达增高对SS小鼠肝脏组织的损伤起到了促进作用, 其机制可能与增高的IL-12诱导肝脏细胞铁死亡有关。

关键词：干燥综合征肝脏损伤颌下腺白细胞介素-12 铁死亡

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IGF2BP3对儿童白血病细胞增殖的影响及其机制

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山西医科大学学报 2025年第3期56卷 233-239页

作者：王阳申亮亮封琳樊巧玲铜川市人民医院南院儿科铜川727100 空军军医大学基础医学院西安医学院医学免疫学教研室北京中医药大学孙思邈医院儿科

目的分析调控儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)进展的关键基因,探讨m6A甲基化修饰阅读蛋白胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 3,IGF2BP3)调控白血病细胞增殖的分子机制。方法利用GEOexplo... 详细信息

目的分析调控儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)进展的关键基因,探讨m6A甲基化修饰阅读蛋白胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 3,IGF2BP3)调控白血病细胞增殖的分子机制。方法利用GEOexplorer在线工具分析ALL治疗前后的基因表达谱差异,并结合GO分析等,筛选发生显著改变的功能差异基因。利用IGF2BP3 shRNA慢病毒和对照病毒(NC)分别感染Jurkat细胞,命名为shIGF2BP3#1组、shIGF2BP3#2组和NC组,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、EdU掺入实验检测比较敲降IGF2BP3后白血病细胞体外增殖能力的改变。建立骨髓移植的小鼠自发白血病模型,在骨髓细胞中过表达IGF2BP3蛋白,检测IGF2BP3对小鼠生存期和白血病进展的影响,通过集落形成实验和细胞计数分析增殖能力和白细胞数量。用GO分析并绘制弦图,筛选在白血病治疗后表达改变的关键基因;用Western blot和realtime PCR实验检测敲降Jurkat细胞IGF2BP3对Midkine mRNA和蛋白表达的影响,并利用放线菌素D作用细胞不同时间检测Midkine mRNA稳定性。结果与治疗前相比,治疗后ALL中IGF2BP3表达增加(P<0.001)。与NC组相比,shIGF2BP3#1组和shIGF2BP3#2组Jurkat细胞体外增殖能力降低(P<0.001)。过表达IGF2BP3后,自发白血病小鼠生存期缩短(P<0.001),白细胞数和集落形成能力增加(P<0.001)。GO分析显示,Midkine表达与白血病细胞增殖能力相关。GEPIA分析显示,Midkine与IGF2BP3表达呈正相关(P<0.001)。与NC组相比,shIGF2BP3#1组和shIGF2BP3#2组Midkine表达降低,且Midkine mRNA稳定性下降(P<0.001)。结论IGF2BP3通过诱导Midkine表达促进儿童白血病细胞增殖。

关键词：急性淋巴细胞白血病 N6-甲基腺苷修饰 IGF2BP3 m6A修饰阅读蛋白 Midkine 肝素结合细胞因子

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槐耳活性成分及抗癌分子机制

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生命的化学 2023年第1期43卷 124-129页

作者：乔旭鹏罗程丁煦审叶科祺安朗托雷姜东伯杨琨陕西中医药大学医学技术学院咸阳712046 空军军医大学基础医学院免疫教研室西安710032 空军军医大学基础医学院学员旅西安710032

槐耳(Trametes robiniophila Murr.)是一味中草药,在临床上对各种肿瘤的治疗展现出了良好的效果。本文通过总结近年来槐耳抗癌的最新研究进展,介绍了槐耳的主要活性成分,包括槐耳粗体物、多糖类物质以及其他活性物质;阐述了槐耳在肺癌... 详细信息

槐耳(Trametes robiniophila Murr.)是一味中草药,在临床上对各种肿瘤的治疗展现出了良好的效果。本文通过总结近年来槐耳抗癌的最新研究进展,介绍了槐耳的主要活性成分,包括槐耳粗体物、多糖类物质以及其他活性物质;阐述了槐耳在肺癌、肝癌、乳腺癌、消化道癌等恶性肿瘤中的研究及其作用机制,包括抑制增殖和转移、阻滞细胞周期、诱导凋亡和自噬、抗肿瘤内血管生成、增强肿瘤免疫原性微环境等;介绍了槐耳在临床应用以及联合用药过程中亟待解决的问题;旨在为槐耳的推广应用于临床提供参考。

关键词：槐耳恶性肿瘤信号通路分子机制

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下调锌指棕榈酰基转移酶9表达抑制乳腺癌进展

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中华实验外科杂志 2023年第4期40卷 630-634页

作者：李孟轩代引海訾浩毅王邑迪张瑞王廷陕西中医药大学第二附属医院肿瘤乳腺外科咸阳712099 空军军医大学西京医院甲乳血管外科西安710032 空军军医大学基础医学院免疫学教研室西安710032

目的探讨锌指棕榈酰基转移酶9(ZDHHC9)的表达对乳腺癌增殖、迁移侵袭和凋亡的影响以及其作用机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析乳腺癌中ZDHHC9的表达情况及与预后的关系。用慢病毒感染方式在HCC1937细胞、MCF7细胞、SKBR3... 详细信息

目的探讨锌指棕榈酰基转移酶9(ZDHHC9)的表达对乳腺癌增殖、迁移侵袭和凋亡的影响以及其作用机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析乳腺癌中ZDHHC9的表达情况及与预后的关系。用慢病毒感染方式在HCC1937细胞、MCF7细胞、SKBR3细胞中敲低ZDHHC9,每种细胞分别设置一个对照组(shNC)和两个敲低实验组(sh1、sh2),通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测、细胞增殖检测(EdU)、平板克隆形成实验检测ZDHHC9对乳腺癌细胞增殖影响,通过划痕实验和小室细胞侵袭实验(Transwell)验证ZDHHC9对迁移和侵袭能力的影响,细胞流式分析检测ZDHHC9对细胞凋亡的影响。蛋白质免疫印迹法(Western blot)实验观察下调ZDHHC9对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路(PI3K/Akt)和细胞外调节蛋白激酶信号通路(ras/raf/MEK/Erk)的影响。采用t检验方法进行组间比较。结果TCGA数据库数据分析ZDHHC9在乳腺癌中高表达,且与不良预后相关。CCK-8实验表明下调ZDHHC9后乳腺癌细胞增殖被抑制(HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:2.577±0.012比1.887±0.077,t=15.319,P<0.01;MCF7-shNC比MCF7-sh1:0.905±0.016比0.398±0.053,t=16.034,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:2.322±0.090比1.786±0.022,t=10.067,P<0.01);平板克隆形成实验提示敲低ZDHHC9后集落形成数量减少[HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:(472.333±48.211)个比(362.667±43.108)个,t=7.637,P<0.01;MCF7-shNC比MCF7-sh1:(176.667±37.448)个比(79.667±27.227)个,t=3.639,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:(296.333±19.553)个比(210.667±11.676)个,t=6.515,P<0.01];划痕实验提示敲低ZDHHC9抑制乳腺癌细胞的迁移(HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:0.536±0.046比0.235±0.010,t=10.969,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:0.429±0.021比0.231±0.060,t=5.381,P<0.01);Transwell侵袭实验表明下调ZDHHC9后乳腺癌细胞侵袭能力下降[HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:(211.333±11.930)个比(73.667±5.508)个,t=18.146,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:(159.333±11.590)个比(45.333±7.024)个,t=14.570,P<0.01];流式细胞分析提示下调ZDHHC9导致细胞凋亡增加(HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:0.121±0.007比0.157±0.004,t=6.634,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:0.124±0.0050.142±0.005,t=6.218,P<0.01);免疫印迹实验结果显示,敲低ZDHHC9抑制PI3K/Akt通路和ras/raf/MEK/Erk通路的激活被抑制[磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)相对表达量:MCF7-shNC比MCF7-sh1:0.931±0.005比0.707±0.002,t=24.193,P<0.01;磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)相对表达量:MCF7-shNC比MCF7-sh1:1.418±0.010比1.206±0.053,t=6.748,P<0.01]。结论敲低ZDHHC9抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡。

关键词：乳腺癌锌指棕榈酰基转移酶9 增殖迁移凋亡

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应用髓源性抑制细胞来源外泌体治疗糖尿病肾病小鼠

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现代免疫学 2024年第6期44卷 474-481页

作者：梁丽张一珂邵烁鋆谢劲松朱栋炜南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)检验科南京210003 江苏大学医学院免疫学教研室江苏省临床检验诊断重点实验室镇江212013

已知糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)与免疫应答的过度激活有关,而髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)来源的外泌体(exosome,EX)展现出强大的免疫抑制能力,研究探讨MDSC-EX对DN模型小鼠病情的影响。经高脂饮食... 详细信息

已知糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)与免疫应答的过度激活有关,而髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)来源的外泌体(exosome,EX)展现出强大的免疫抑制能力,研究探讨MDSC-EX对DN模型小鼠病情的影响。经高脂饮食和链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射构建DN小鼠模型,磁珠分选DN小鼠脾脏中MDSC的两个亚群——多形核样MDSC(polymorphonuclear MDSC,PMN-MDSC)和单核细胞样MDSC(monocytic MDSC,MO-MDSC)。培养PMN-MDSCs和MO-MDSCs并收集上清液,制备EX,FACS检测EX对CD3+T细胞增殖的抑制作用。尾静脉注射PMN-MDSC-EX或MO-MDSC-EX至DN模型小鼠,观察处理对模型小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、体质量(body weight,BW)、24 h尿液总蛋白定量(total protein in urine within 24 hours,TPU)、血清尿素氮(urea nitrogen in serum,UNS)、血清肌酐(creatinine in serum,CS)以及肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)的影响。显微镜下观察各组肾脏H-E染色情况,Western blotting检测肾脏组织纤维连接蛋白(fibronectin)、Ⅳ型胶原(collagen typeⅣ,collagenⅣ)和α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况。实验成功构建DN模型并制得PMN-MDSC-EX和MO-MDSC-EX。相较MO-MDSC-EX,PMN-MDSC-EX可更显著地抑制CD3+T细胞增殖(P<0.05)。相较MO-MDSC-EX,PMN-MDSC-EX显著降低DN小鼠FBG、TPU、UNS和CS水平,增加模型鼠BW和GFR(均P<0.05)。PMN-MDSC-EX和MO-MDSC-EX干预后DN小鼠肾脏组织损伤明显减轻,相较MO-MDSC-EX,PMN-MDSC-EX抑制DN模型小鼠肾小球硬化的作用更为显著(均P<0.05)。由此,相较MO-MDSC-EX,PMN-MDSC-EX具有更强的缓解DN小鼠病情的作用,提示PMN-MDSC-EX或可成为治疗DN的新途径。

关键词：髓源性抑制细胞外泌体糖尿病肾病

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中介素对脂多糖诱导巨噬细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体活化及细胞焦亡的影响

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中华风湿病学杂志 2022年第12期26卷 813-819,I0002页

作者：景刚张军锋朱爱萍杨佳常思佳黄太平王艳红山西医科大学第二医院检验科太原030001 山西中医药大学基础医学院晋中030619 山西医科大学微生物学与免疫学教研室太原030001

目的利用脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,研究中介素对腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法细胞分组为:对照组,脂多糖组,中介素处理组,磷脂酰肌醇-3... 详细信息

目的利用脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,研究中介素对腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法细胞分组为:对照组,脂多糖组,中介素处理组,磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)阻滞剂LY294002组。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞NLRP3炎症小体的激活情况及炎症因子IL-1β和IL-18表达,碘化丙锭(PI)染色法检测细胞焦亡的改变。计量资料以±s表示,组间差异比较采用方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组[(0.83±0.09),(0.49±0.04)]比较,脂多糖组磷酸化(p)-PI3K/PI3K(0.44±0.05),p-Akt/Akt(0.27±0.06)比值均显著降低,与脂多糖组相比,脂多糖+中介素组细胞中p-PI3K/PI3K(1.22±0.18),pAkt/Akt(0.83±0.09)比值均显著升高(F=31.40,P<0.001;F=50.88,P<0.001)。与对照组比较,脂多糖组(脂多糖和ATP)可刺激RAW264.7细胞炎症因子IL-1β、IL-18和NLRP3炎症小体(NLRP3,caspase-1,ASC)的mRNA及蛋白表达上调;与脂多糖组相比,中介素处理可抑制炎症因子IL-1β、IL-18和NLRP3炎症小体表达,这种效应可被PI3K/Akt通路的阻滞剂LY294002所阻断。Real-time PCR结果显示,IL-1βmRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.11),脂多糖组为(8.32±0.61),脂多糖+中介素组为(8.32±0.55),脂多糖+中介素+LY组为(7.23±0.41)(F=15.42,P<0.001);IL-18 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.17),脂多糖组为(1.82±0.21),脂多糖+中介素组为(1.14±0.15),脂多糖+中介素+LY组为(1.53±0.11)(F=18.16,P<0.001);NLRP3 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.13),脂多糖组为(2.58±0.18),脂多糖+中介素组为(1.07±0.17),脂多糖+中介素+LY组为(1.33±0.32)(F=15.98,P<0.001);caspase-1 mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.09),脂多糖组为(6.20±0.19),脂多糖+中介素组为(3.43±0.06),脂多糖+中介素+LY组为(5.50±0.45)(F=18.39,P<0.001);ASC mRNA相对表达量:对照组为(1.00±0.21),脂多糖组为(4.58±0.48),脂多糖+中介素组为(2.07±0.51),脂多糖+中介素+LY组为(3.33±0.32)(F=15.19,P<0.001)。蛋白质免疫印迹结果显示,IL-1β蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(188±14)%],脂多糖+中介素组为[(112±11)%],脂多糖+中介素+LY组为[(171±27)%](F=21.25,P<0.001);IL-18蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(183±16)%],脂多糖+中介素组为[(115±19)%],脂多糖+中介素+LY组为[(179±23)%](F=19.62,P<0.001);NLRP3蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(149±15)%],脂多糖+中介素组为[(106±10)%],脂多糖+中介素+LY组为[(144±15)%](F=14.35,P<0.001);ASC蛋白相对表达量:对照组为(100%),脂多糖组为[(188±12)%)],脂多糖+中介素组为[(110±18)%],脂多糖+中介素+LY组为(192±8)%(F=15.79,P<0.001)。结论中介素通过调节PI3K/Akt活性,抑制NLRP3炎症小体的活化与细胞焦亡。

关键词：巨噬细胞脂多糖类细胞焦亡 NLRP3炎症小体中介素 PI3K/Akt信号通路

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氢离子通过mTOR通路抑制CD8^(+)T细胞功能

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临床检验杂志 2023年第7期41卷 512-516页

作者：马丽黄玲朱栋炜南京中医药大学附属南京医院&南京市第二医院检验科南京210003 江苏大学医学院免疫学教研室江苏镇江212013

目的探讨氢离子(H^(+))对CD8^(+)T细胞功能及哺乳动物雷帕霉素(Rapamycin)靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法通过磁珠分选的方法从人外周血单个核细胞(PBMC)中分选出CD8^(+)T细胞,流式细胞术检测CD8^(+)... 详细信息

目的探讨氢离子(H^(+))对CD8^(+)T细胞功能及哺乳动物雷帕霉素(Rapamycin)靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法通过磁珠分选的方法从人外周血单个核细胞(PBMC)中分选出CD8^(+)T细胞,流式细胞术检测CD8^(+)T细胞的百分比并验证其纯度。根据细胞培养基的不同pH值将培养基分为对照组(pH为7.2~7.4)、pH 6.7组和pH 6.5组。细胞计数法检测不同pH分组中CD8^(+)T细胞的增殖能力。流式细胞术检测经PMA/离子霉素刺激后不同pH分组CD8^(+)T细胞中细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达水平,并进一步分析在Rapamycin作用下,CD8^(+)T细胞中TNF-α、IFN-γ水平以及S6蛋白磷酸化水平。qRT-PCR检测不同pH分组中CD8^(+)T细胞TNF-α和IFN-γmRNA的表达水平。Western blot检测不同pH分组CD8^(+)T细胞中mTOR信号通路相关蛋白AKT和S6的磷酸化水平。结果pH 6.7组和pH 6.5组中CD8^(+)T细胞的增殖能力显著低于对照组(P<0.05);CD8^(+)T细胞内细胞因子TNF-α和IFN-γmRNA水平显著低于对照组(P<0.05),其蛋白质表达水平与对照组相比亦显著降低(P<0.05),mTOR信号通路相关蛋白AKT和S6的磷酸化水平显著低于对照组(P<0.05)。经Rapamycin作用后,pH 6.5^(+)Rapamycin组中CD8^(+)T细胞S6蛋白磷酸化水平以及细胞因子TNF-α、IFN-γ的表达水平均显著低于对照^(+)Rapamycin组(P<0.05)。结论H^(+)可抑制CD8^(+)T细胞的功能,且与mTOR信号通路相关。

关键词：氢离子 CD8^(+)T细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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血浆外泌体hsa_circ_0052513在非小细胞肺癌中的表达及意义

引用

肿瘤防治研究 2024年第9期51卷 744-749页

作者：张磊李晨曦彭辉勇朱栋炜谢劲松南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)检验科南京210037 江苏大学京江学院生命科学技术学院镇江212013 镇江市第一人民医院(江苏大学附属人民医院)检验科镇江212013 江苏大学医学院免疫学教研室江苏省临床检验诊断重点实验室镇江212013

目的筛选非小细胞肺癌(NSCLC)血浆外泌体中差异表达的circRNA,并验证其作为NSCLC的诊断价值。方法对6例NSCLC患者和6例健康者的血浆外泌体进行circRNA测序分析。qRT-PCR法验证60例NSCLC患者和60例健康对照样本外泌体中hsa_circ_0052513... 详细信息

目的筛选非小细胞肺癌(NSCLC)血浆外泌体中差异表达的circRNA,并验证其作为NSCLC的诊断价值。方法对6例NSCLC患者和6例健康者的血浆外泌体进行circRNA测序分析。qRT-PCR法验证60例NSCLC患者和60例健康对照样本外泌体中hsa_circ_0052513的表达水平。qRT-PCR检测NSCLC患者术前与术后血浆外泌体中hsa_circ_0052513的表达水平。统计分析NSCLC患者血浆外泌体hsa_circ_0052513的表达量与临床病例资料的相关性。结果测序结果显示hsa_circ_0052513在NSCLC患者血浆外泌体中的表达水平高于健康对照。qRT-PCR结果确认了测序结果,而在NSCLC患者手术切除肿瘤后表达降低(P<0.05)。NSCLC患者血浆外泌体hsa_circ_0052513的高表达与NSCLC的肿瘤大小、远端转移和TNM分期相关(均P<0.05)。血浆外泌体hsa_circ_0052513诊断NSCLC患者曲线下面积(AUC)为0.7904(P<0.0001)。结论Hsa_circ_0052513在NSCLC患者血浆外泌体中高表达,且和肿瘤大小、转移以及TNM分期相关,有望成为NSCLC新的诊断标志物。

关键词： hsa_circ_0052513 非小细胞肺癌血浆外泌体

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