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原花青素B2对H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞铁死亡的影响及机制研究

中药药理与临床 2025年第1期41卷 77-84页

作者：苑舒文司建超陈雪齐珂杨胜昌河北中医药大学生理学教研室石家庄050091 河北省中医药结合氢医学技术创新中心石家庄050091 广州中医药大学基础医学院中西医结合基础研究中心广州510000

目的:探讨原花青素B2对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞铁死亡的影响及机制。方法:以HT22细胞为研究对象,分为空白对照组、模型对照组、原花青素B2100μg/mL组、铁死亡诱导剂组和铁死亡诱导剂+原花青素B2100μg/mL组;... 详细信息

目的:探讨原花青素B2对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞铁死亡的影响及机制。方法:以HT22细胞为研究对象,分为空白对照组、模型对照组、原花青素B2100μg/mL组、铁死亡诱导剂组和铁死亡诱导剂+原花青素B2100μg/mL组;CCK-8和LDH法筛选H_(2)O_(2)和原花青素B2的最佳作用浓度;试剂盒检测细胞内Fe^(2+)和总铁水平;ELISA法检测细胞内过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力或含量;透射电子显微镜观察细胞线粒体形态变化;免疫荧光法检测细胞内活性氧(ROS)积累水平;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化;RT-qPCR和Western Blot检测细胞铁死亡标志物及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路的mRNA和蛋白表达变化情况;确证H_(2)O_(2)能够诱导铁死亡的同时验证原花青素B2的保护作用,随后进一步探究原花青素B2改善HT22细胞铁死亡的分子机制。结果:与正常对照组相比,模型对照组细胞Fe^(2+)、总铁含量以及核受体辅活化子4(NCOA4)、环氧化酶-2(COX-2)、Nrf2、HO-1的蛋白及mRNA表达明显上调,膜铁转运蛋白l(FPN1)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白及mRNA表达明显下调,CAT、SOD、GSH-Px的含量明显降低,MDA含量和ROS的水平升高(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,原花青素B2100μg/mL能够显著改善细胞内铁累积,增加CAT、SOD、GSH-Px的含量,降低MDA含量和ROS的水平,上调FPN1、FTH1、GPX4蛋白及mRNA的表达,下调NCOA4、COX-2蛋白及mRNA的表达,并进一步激活Nrf2、HO-1蛋白及mRNA的表达(P<0.05或P<0.01);经Fin56干预后,细胞铁死亡程度较H_(2)O_(2)组显著增强(P<0.05或P<0.01),原花青素B2处理后上述指标变化可见一定程度的改善(P<0.05或P<0.01)。结论:原花青素B2通过平衡细胞内的铁稳态和氧化应激水平,抑制脂质过氧化损伤,改善H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞铁死亡,其作用机制可能与其激活Nrf2/HO-1通路有关。

关键词：原花青素B2 过氧化氢小鼠海马神经元细胞铁死亡氧化应激核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1通路

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人参皂苷治疗心肌缺血/再灌注损伤研究进展

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心脏杂志 2025年第1期37卷 79-85页

作者：李阳王一石马恒陕西中医药大学基础医学院陕西咸阳712046 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

缺血性心脏病(ischemic heart disease,IHD)的最佳治疗策略是尽早恢复心肌血流灌注,但是再灌注会导致缺血心肌的损伤,即心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia-reperfusion,MI/R)损伤。MI/R损伤会扩大心肌梗死面积,影响血运重建,严重影... 详细信息

缺血性心脏病(ischemic heart disease,IHD)的最佳治疗策略是尽早恢复心肌血流灌注,但是再灌注会导致缺血心肌的损伤,即心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia-reperfusion,MI/R)损伤。MI/R损伤会扩大心肌梗死面积,影响血运重建,严重影响患者预后。因此,采用药物干预以防治MI/R损伤是IHD临床救治的重大需求和目标。传统中药的有效成分为防治MI/R损伤提供了新的用药策略和途径,其中含有人参的制剂被广泛应用于心血管疾病的治疗。人参皂苷是人参的有效成分,研究表明其对MI/R损伤有一定的防治作用。本文对人参皂苷防治MI/R损伤的作用和相关机制进行综述,以期为人参皂苷的临床应用提供理论依据和转化的可能。

关键词：心肌缺血/再灌注损伤人参皂苷缺血性心脏病心脏保护

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NEXN基因突变引起的扩张性心肌病动物模型构建和表型分析

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心脏杂志 2025年 387-391页

作者：任静李军张天骄刘佩娟辛智倩杨海蛟解王格张海陕西中医药大学基础医学院空军军医大学国家分子医学转化中心空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室

目的构建扩张性心肌病基因工程小鼠动物模型。方法以CRISPR/Cas9技术在C57BL/6J小鼠中敲除NEXN基因，敲除小鼠经PCR和Sanger测序鉴定后通过大体解剖观察心脏形态，HE和Masson染色分析组织病理改变，超声心动图检测敲除小鼠心脏功能。... 详细信息

目的构建扩张性心肌病基因工程小鼠动物模型。方法以CRISPR/Cas9技术在C57BL/6J小鼠中敲除NEXN基因，敲除小鼠经PCR和Sanger测序鉴定后通过大体解剖观察心脏形态，HE和Masson染色分析组织病理改变，超声心动图检测敲除小鼠心脏功能。结果在sgRNA介导下，敲除NEXN基因9号外显子长度11bp序列，导致移码框改变，其翻译提前终止，产生截断型nexilin蛋白后表达水平严重降低（P<0.05）。NEXN基因突变小鼠心脏体积增大，心脏质量/体重质量上升（P<0.05），组织病理改变明显，左心室腔明显扩大，心脏功能显著下降。结论通过突变NEXN基因成功构建扩张性心肌病基因工程小鼠动物模型，模型小鼠表型符合扩张性心肌病特征。

关键词：扩张性心肌病动物模型 CRISPR/Cas9 NEXN基因表型分析

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基于星形胶质细胞靶点的抑郁症发病机制研究进展

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中国药理学通报 2010年第9期26卷 1132-1135页

作者：戴建国陈琳赵玉男王中立黄玉芳南京中医药大学基础医学院病理学教研室江苏南京210046 南京中医药大学基础医学院生理学教研室江苏南京210046

抑郁症是具有自杀倾向的情感性精神障碍,其机制尚未完全阐明。随着对其研究的不断深入,一些非单胺类神经递质假说机制被陆续发现,特别是星形胶质细胞功能障碍在其中起重要作用。该文就星形胶质细胞靶点的抑郁症发病机制进行综述。

关键词：抑郁症星形胶质细胞发病机制非单胺类神经递质,GFAP EAATS

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As_2S_3纳米粒的制备及其对肝癌SMMC-7721细胞的治疗作用

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东南大学学报（自然科学版） 2006年第2期36卷 298-302页

作者：林梅王子妤张东生东南大学基础医学院病理学与病理生理学系南京210009 南京中医药大学基础医学院病理教研组南京210029

研究了雌黄纳米粒的制备方法及其抗肿瘤作用.采用化学方法制备A s2S3纳米粒,通过透射电镜、X射线能谱(EDS)对A s2S3纳米粒进行分析表征,以形态学、MTT法和流式细胞术体外研究不同浓度的A s2S3纳米粒对肝癌SMMC-7721细胞生长的影响,并同... 详细信息

研究了雌黄纳米粒的制备方法及其抗肿瘤作用.采用化学方法制备A s2S3纳米粒,通过透射电镜、X射线能谱(EDS)对A s2S3纳米粒进行分析表征,以形态学、MTT法和流式细胞术体外研究不同浓度的A s2S3纳米粒对肝癌SMMC-7721细胞生长的影响,并同时与传统剂型的A s2S3进行比较.分析结果显示:实验制备的A s2S3纳米粒平均直径约为80nm,电镜下呈圆形,大小较一致,分散性较好,EDS证实其为A s2S3,无其他成分;A s2S3纳米粒对SMMC-7721细胞有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,且呈浓度和时间依耐性,其细胞生长抑制率和凋亡诱导率明显高于相同浓度传统剂型的A s2S3处理组(p<0.001).表明化学法可以制备A s2S3纳米粒;与传统剂型的A s2S3相比,A s2S3纳米粒有更强的抗肿瘤作用.

关键词： As2S3 纳米粒 SMMC-7721细胞

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加味四逆散抗应激性抑郁效应及其海马NMDA受体通道机制的初步研究

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中国药理学通报 2007年第11期23卷 1425-1431页

作者：吴丽丽严灿丁胜元徐志伟曾纯兰金鑫广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室广东广州510006 广州中医药大学基础医学院生理学教研室广东广州510006

目的研究加味四逆散(JWSNS)抗应激性抑郁效应及其海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体通道的机制。方法采用慢性轻度不可预计应激(chronicmild unpredictable stress,CMUS)制作大鼠抑郁症模型。在造模前后测量基础糖... 详细信息

目的研究加味四逆散(JWSNS)抗应激性抑郁效应及其海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体通道的机制。方法采用慢性轻度不可预计应激(chronicmild unpredictable stress,CMUS)制作大鼠抑郁症模型。在造模前后测量基础糖水消耗量和体重的变化;离体海马脑片TTC染色检测各组大鼠海马损伤情况以及JWSNS含药血清的保护作用;运用细胞贴附式膜片钳记录模式检测大鼠海马NMDA受体通道开放概率和平均开放时间的变化,Tillvision图像处理系统检测海马神经元细胞内游离Ca2+浓度。结果CMUS可引起大鼠糖水偏爱度下降(P<0.01),JWSNS和MK801可提高应激性抑郁症大鼠糖水偏爱度(P<0.01,P<0.05),但对大鼠的体重无影响。JWSNS、20%JWSNS含药血清和MK801均能明显升高应激性抑郁症大鼠海马光密度值,降低海马脑片损伤百分率(P<0.05,P<0.01)。模型组大鼠海马NMDA受体通道开放概率明显增高(P<0.05),而JWSNS、MK801能明显降低海马NMDA受体通道开放概率(P<0.05,P<0.01);对NMDA受体通道平均开放时间无明显影响。JWSNS、MK801能明显降低应激性抑郁症大鼠海马神经元内升高的游离Ca2+浓度(P<0.01)。结论JWSNS具有抗抑郁作用,NMDA受体可能是其药理学作用靶点之一,调控海马神经元NMDA受体的功能状态可能是JWSNS发挥抗抑郁效应的直接作用机制之一。

关键词：应激抑郁症海马 N-甲基-D-天冬氨酸受体加味四逆散

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六种助阳类药物抗抑郁作用动物实验研究

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山东大学学报（医学版） 2014年第S02期52卷 3-4页

作者：戴建国王中立陈琳黄玉芳赵玉男南京中医药大学基础医学院病理学教研室南京210023 南京中医药大学基础医学院生理学教研室南京210023

目的探讨附子、淫羊藿、锁阳、葫芦巴、韭菜子、阳起石等6种助阳类药物的抗抑郁作用.方法采用旷场试验评价药物对小鼠自发活动的影响,强迫游泳和强迫悬尾实验评价药物对小鼠不动时间的影响.结果与正常对照组比,附子能够降低小鼠体质量(P... 详细信息

目的探讨附子、淫羊藿、锁阳、葫芦巴、韭菜子、阳起石等6种助阳类药物的抗抑郁作用.方法采用旷场试验评价药物对小鼠自发活动的影响,强迫游泳和强迫悬尾实验评价药物对小鼠不动时间的影响.结果与正常对照组比,附子能够降低小鼠体质量(P<0.05);旷场试验中,各组小鼠运动总距离差异无统计学意义(P>0.05),但附子组和淫羊藿组动物可以增加小鼠中心区域活动时间(P<0.05);在强迫游泳实验和悬尾实验中,附子组和淫羊藿组不动时间缩短(P<0.05).结论附子和淫羊藿具有抗抑郁作用.

关键词：助阳药抗抑郁附子淫羊藿

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白花丹醌对肝癌细胞SMMC-7721凋亡和自噬的影响

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中国药理学通报 2018年第10期34卷 1419-1424页

作者：林宇宁王声善吕贝贝马静陈永欣钟静刘雪梅韦燕飞广西中医药大学基础医学院生理学教研室广西南宁530200

目的研究白花丹醌对肝癌细胞SMMC-7721凋亡和自噬的影响。方法 MTT法检测白花丹醌对SMMC-7721细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞凋亡与自噬的形态变化;免疫荧光检测自噬蛋白LC3的变化;qPCR法检测自噬基因Beclin1、Atg7、Atg5 mRNA的变化;... 详细信息

目的研究白花丹醌对肝癌细胞SMMC-7721凋亡和自噬的影响。方法 MTT法检测白花丹醌对SMMC-7721细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞凋亡与自噬的形态变化;免疫荧光检测自噬蛋白LC3的变化;qPCR法检测自噬基因Beclin1、Atg7、Atg5 mRNA的变化;Western blot检测自噬蛋白LC3、Beclin1、Atg7、Atg5的表达水平。结果白花丹醌对SMMC-7721细胞增殖有抑制作用,且呈剂量-时间依赖关系;透射电镜下,白花丹醌组细胞凋亡形态明显,并出现自噬体;免疫荧光显示,白花丹醌处理后细胞LC3蛋白的表达上升;qPCR结果表明白花丹醌组自噬基因Beclin1、Atg7、Atg5 mRNA的表达增加;Western blot提示白花丹醌分别与凋亡抑制剂Z-VAD-FMK和自噬抑制剂3-MA联合使用时,能够影响自噬蛋白Atg5、Atg7、LC3-Ⅱ、Beclin1的表达水平。结论白花丹醌促进SMMC-7721肝癌细胞的凋亡与自噬,其机制可能与上调SMMC-7721细胞自噬有关基因及蛋白的表达水平有关。

关键词：白花丹醌肝癌细胞凋亡自噬 LC3 Beclin-1 Atg7

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吗啡促进大鼠星形胶质细胞外ATP的酶解和腺苷的生成(英文)

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生理学报 2011年第1期63卷 20-24页

作者：刘微杨战利周乐全李小英闫福曼关莉刘海梅冯鉴强广州中医药大学基础医学院生理学教研室广州510006 中山大学中山医学院生理学教研室广州510080

近年来的研究表明星形胶质细胞在ATP的降解和腺苷的生成方面发挥了重要的作用,而ATP和腺苷与痛觉的形成有着密切关系。本文旨在探讨镇痛药物吗啡是否能够影响星形胶质细胞酶解ATP以及生成腺苷。通过检测大鼠脑星形胶质细胞内钙的水平选... 详细信息

近年来的研究表明星形胶质细胞在ATP的降解和腺苷的生成方面发挥了重要的作用,而ATP和腺苷与痛觉的形成有着密切关系。本文旨在探讨镇痛药物吗啡是否能够影响星形胶质细胞酶解ATP以及生成腺苷。通过检测大鼠脑星形胶质细胞内钙的水平选择合适的吗啡孵育时间,应用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)检测ATP和腺苷的水平。结果显示:(1)同其他处理时间点相比,1.5和48h的吗啡处理对ATP酶解的促进作用更为显著,而二者相比没有统计学差别。(2)对于镇痛物质腺苷,同对照组相比,1.5h的吗啡处理能够上调腺苷生成速度,而48h的吗啡处理后腺苷生成速度同对照组没有差异。以上结果提示,体外应用吗啡能够动态地改变星形胶质细胞外ATP和腺苷的水平,星形胶质细胞可以被认为是吗啡改变中枢神经系统ATP和腺苷水平的靶细胞之一。

关键词：吗啡 ATP 腺苷星形胶质细胞

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脊髓星型胶质细胞的JNK介导吗啡耐受

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中国药理学通报 2010年第11期26卷 1435-1439页

作者：刘微郭瑞鲜崔宇赵春梅傅璐胡芬冯鉴强陈培熹广州中医药大学基础医学院生理学教研室广东广州510006 中山大学中山医学院生理学教研室广东广州510080

目的观察脊髓JNK在大鼠吗啡镇痛耐受过程中的作用。方法对SD大鼠连续7d鞘内注射吗啡(15μg)建立吗啡耐受的动物模型。采用50℃热水甩尾法观察吗啡的镇痛效果;应用免疫组织化学方法检测吗啡耐受过程中脊髓背角磷酸化JNK(pJNK)的表达情况... 详细信息

目的观察脊髓JNK在大鼠吗啡镇痛耐受过程中的作用。方法对SD大鼠连续7d鞘内注射吗啡(15μg)建立吗啡耐受的动物模型。采用50℃热水甩尾法观察吗啡的镇痛效果;应用免疫组织化学方法检测吗啡耐受过程中脊髓背角磷酸化JNK(pJNK)的表达情况。结果在慢性鞘内注射吗啡的过程中,大鼠脊髓背角pJNK的表达随着吗啡耐受程度的增加而逐步增加,且pJNK主要存在于脊髓星型胶质细胞。吗啡注射前15min鞘内给予JNK特异性抑制剂SP600125(25μg),不仅可以明显抑制吗啡镇痛耐受还可以部分抑制已形成的吗啡耐受。结论脊髓星型胶质细胞JNK的激活可能是吗啡耐受形成和维持的重要机制之一。

关键词：吗啡耐受 JNK 星型胶质细胞脊髓镇痛

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