检索结果-内蒙古大学图书馆

生理学报 2021年第6期73卷 926-930页

作者：马华根刘海琴刘昭德唐元瑜北京中医药大学中医学院伤寒教研室北京102488 福建中医药大学中西医结合学院福州350122 南京医科大学基础医学院南京211116 福建中医药大学中医学院福州350122

本研究旨在建立一种简便高效的原代大鼠肾小球微血管内皮细胞体外培养方法。摘取出生7~10天Sprague-Dawley大鼠的双侧肾脏,分离出肾皮质;经剪碎,连续过200目、300目筛网获得肾小球;Ⅳ型胶原酶消化15~20 min后,收集肾微血管球进行接种培... 详细信息

本研究旨在建立一种简便高效的原代大鼠肾小球微血管内皮细胞体外培养方法。摘取出生7~10天Sprague-Dawley大鼠的双侧肾脏,分离出肾皮质;经剪碎,连续过200目、300目筛网获得肾小球;Ⅳ型胶原酶消化15~20 min后,收集肾微血管球进行接种培养。通过细胞形态学观察、第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色鉴定所培养的细胞。结果显示:肾微血管球呈不规则球形,无包囊,毛细血管袢结构清晰;静置培养3天后,有短梭形细胞从其周围爬出,并逐渐形成细胞集落,呈"岛屿状"分布;4~5天后细胞集落相互融合,6天后铺满皿底,呈典型的单层、铺路石样、镶嵌式排列。第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色检测结果显示,胞质淡染成棕红色,第Ⅷ因子相关抗原表达为阳性,阳性率接近100%。以上结果提示,本研究将连续过筛法和胶原酶消化法结合,成功建立了简便高效的原代大鼠肾小球微血管内皮细胞体外培养方法,从而为开展糖尿病肾病的发生和发展机理研究提供了重要的工具细胞。

关键词：肾小球微血管内皮细胞连续过筛法胶原酶消化法第Ⅷ因子相关抗原大鼠

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莪术醇对小鼠肝窦内皮细胞结构的影响及其对肝内血管新生的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2021年第5期47卷 1124-1130页

作者：郑洋王佳慧彭岳原鲜玲汪磊赵铁建广西中医药大学赛恩斯新医药学院医学系广西南宁530222 广西中医药大学基础医学院生理教研室广西南宁530222

目的:探讨莪术醇对小鼠肝窦内皮细胞(LSEC)结构的影响,阐明其对LSEC介导的肝内血管新生的作用。方法:30只SPF级KM小鼠使用灌注及消化法分离原代LSEC,将其分为空白对照组、模型组、莪术醇组和丹参酚酸B组,空白对照组仅用普通培养基处理;... 详细信息

目的:探讨莪术醇对小鼠肝窦内皮细胞(LSEC)结构的影响,阐明其对LSEC介导的肝内血管新生的作用。方法:30只SPF级KM小鼠使用灌注及消化法分离原代LSEC,将其分为空白对照组、模型组、莪术醇组和丹参酚酸B组,空白对照组仅用普通培养基处理;模型组用100μg·L^(-1)廋素进行活化,培养细胞48 h;莪术醇组先用45 mg·L^(-1)莪术醇处理30 min再用廋素培养细胞48 h;丹参酚酸B组先用1×10^(-6) mmol·L^(-1)丹参酚酸B处理30 min再用廋素培养细胞48 h。采用MTT法检测各组细胞增殖率,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测各组细胞中分化抗原簇31(CD31)和血管性血友病因子(vWF)mRNA表达水平,免疫印迹法检测CD31和vWF蛋白表达水平,扫描电镜观察LSEC窗孔的结构,血管形成实验观察肝内血管新生情况。结果:MTT法检测,模型组细胞增殖率较空白对照组明显降低(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组细胞增殖率较模型组明显下降(P<0.05),丹参酚酸B组与莪术醇组细胞增殖率比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR法检测,模型组细胞中CD31和vWFmRNA表达水平较空白对照组明显升高(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组细胞中CD31和vWFmRNA表达水平较模型组明显降低(P<0.05),丹参酚酸B组与莪术醇组细胞中CD31和vWFmRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫印迹法检测,模型组细胞中CD31和vWF蛋白表达水平较空白对照组明显升高(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组细胞中CD31和vWF蛋白表达水平较模型组明显降低(P<0.05),莪术醇组与丹参酚酸B组细胞中CD31和vWF蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜观察,空白对照组LSEC窗孔数量较多,与空白对照组比较,模型组窗孔数量减少;与模型组比较,莪术醇组和丹参酚酸B组LSEC窗孔数量有所增加。血管形成实验检测,模型组血管形成数量较空白对照组明显增加(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组血管形成数量较模型组明显减少(P<0.05),莪术醇组与丹参酚酸B组血管形成数量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:莪术醇通过调控小鼠LSEC的窗孔结构,从而抑制肝内血管新生。

关键词：肝纤维化莪术醇肝窦内皮细胞血管新生

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线粒体逆行信号在肿瘤进展中的研究现状

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中国癌症防治杂志 2023年第6期15卷 672-676页

作者：许小君廖达文王星琛魏元元黄启超杜钰璐陕西中医药大学第二临床医学院咸阳712046 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室西安710032

线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所,被誉为细胞的动力工厂。除了供能,线粒体还可作为信号转导中心在调控细胞生理功能及疾病发生等过程发挥重要作用。例如,在线粒体受损情况下,其会将损伤信号传递到细胞核,从而激活适应性的转录以调... 详细信息

线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所,被誉为细胞的动力工厂。除了供能,线粒体还可作为信号转导中心在调控细胞生理功能及疾病发生等过程发挥重要作用。例如,在线粒体受损情况下,其会将损伤信号传递到细胞核,从而激活适应性的转录以调节细胞的代谢状态。这些由线粒体向细胞核传递的信号被称为“线粒体⁃细胞核逆行信号”。最近的研究揭示,通过改变线粒体代谢物的水平或应激信号,线粒体向细胞核的逆行信号可引起各种表观遗传变化,并与肿瘤的发生、恶性进展和治疗等过程密切相关。鉴于此,本文总结了近期关于线粒体⁃细胞核逆行信号如何调控表观基因组及调控肿瘤的研究进展,以期为建立肿瘤预防和治疗新策略提供新视角。

关键词：肿瘤线粒体⁃细胞核逆行信号线粒体代谢物活性氧

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Fluspirilene下调Akt抗肝癌的分子机制研究

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中国药理学通报 2021年第3期37卷 356-361页

作者：石西南张荣平解宇环孟卓然吴施国陈嵘万伟萍张珊陈伟王健云南中医药大学基础医学院病理学教研室昆明650500 黔西南民族职业技术学院医药系兴义562400 云南中医药大学中药学院南药研究院云南省高校芳香中药研究重点实验室云南省中医治未病理论应用研究创新团队云南中医药大学基础医学院方剂学教研室云南中医药大学基础医学院生理学教研室昆明650500 昆明市中医医院肛肠科昆明650032 云南中医药大学第一附属医院神经内科昆明650000

目的探索小分子化合物Fluspirilene下调Akt抗肝癌的分子机制。方法细胞实验:经不同浓度Fluspirilene处理肝癌细胞HepG2和Huh7后,通过mRNA转录组筛查检测差异表达;Western blot实验检测蛋白表达水平。动物实验:经不同浓度Fluspirilene处... 详细信息

目的探索小分子化合物Fluspirilene下调Akt抗肝癌的分子机制。方法细胞实验:经不同浓度Fluspirilene处理肝癌细胞HepG2和Huh7后,通过mRNA转录组筛查检测差异表达;Western blot实验检测蛋白表达水平。动物实验:经不同浓度Fluspirilene处理肝癌移植瘤模型小鼠21 d后取肿瘤组织,通过免疫组化检测蛋白水平的表达。结果与对照之间相比,Fluspirilene处理组mRNA转录组筛查显示Akt呈现3.07倍低表达(P<0.01)。免疫组化蛋白检测Fluspirilene治疗肝癌移植瘤小鼠组,其组织p-Akt蛋白水平呈现浓度依赖性低表达(P<0.05)。Western blot蛋白水平检测结果:p-Akt、p-CDK2及p-Rb蛋白水平呈现浓度依赖性低表达(P<0.05)。结论通过体内外生物分子实验推测Fluspirilene通过调控Akt激酶,降低细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2、Rb的活性发挥抗肝癌作用。

关键词： Fluspirilene Akt 肝癌转录组筛查细胞周期 CDK2

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三种逆行示踪工具标记小鼠前扣带回皮质传入核团的比较

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神经解剖学杂志 2023年第4期39卷 393-400页

作者：肖昊翔解进祎刘明月刘珺琛袁滋铎武胜昔郭保霖空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 延安大学医学院生理学教研室延安716099 陕西中医药大学基础医学院西安712046 延安大学生命科学学院神经生物学教研室延安716099

目的:通过对小鼠前扣带回皮层(ACC)立体定位注射重组腺相关病毒(rAAV2⁃retro)、荧光乳胶微球(retrobeads)及狂犬病毒(RV)的方法,比较三种逆行示踪工具对ACC上游传入核团的标记效果。方法:将rAAV2⁃retro⁃hSyn⁃EGFP⁃P2A⁃Cre⁃WPRE⁃hGH⁃PA、... 详细信息

目的:通过对小鼠前扣带回皮层(ACC)立体定位注射重组腺相关病毒(rAAV2⁃retro)、荧光乳胶微球(retrobeads)及狂犬病毒(RV)的方法,比较三种逆行示踪工具对ACC上游传入核团的标记效果。方法:将rAAV2⁃retro⁃hSyn⁃EGFP⁃P2A⁃Cre⁃WPRE⁃hGH⁃PA、retrobeads(Red)等量混合后注射到小鼠ACC脑区,待病毒表达3周后灌注取脑、切片观察。另外将rAAV2/9⁃EF1α⁃DIO⁃oRVG(19G)、rAAV2/9⁃EF1α⁃DIO⁃NLS⁃mCherry⁃P2A⁃TVA⁃T2A⁃RVG、rAAV2/9⁃CaMKIIα⁃Cre混合后注射到小鼠ACC脑区,待病毒表达2周后将RV⁃EnvA⁃ΔG⁃EGFP注射到相同部位,1周后灌注取脑、切片观察,比较三种策略标记到ACC上游传入核团的神经元数量及形态。结果:retrobeads标记到的核团最多,但无法标记神经元形态及树突结构;RV标记到的核团数量次之,胞体及树突结构标记完整,而且可以观察到清晰的树突棘;rAAV2⁃retro标记到的核团最少,能标记到树突,但无法标记树突棘。三者在内侧眶皮层、腹侧眶皮层、视皮层等区域均能够高效标记。其中,RV在丘脑腹前核和腹外侧核标记效率高于其他两种工具。结论:ACC接受脑内的广泛投射,而三种逆行示踪剂在标记效率和标记神经元结构完整性上各有优劣。

关键词：前扣带回皮层重组腺相关病毒荧光乳胶微球狂犬病毒神经示踪小鼠

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microRNA-125b在多种慢性肝病发生发展中的作用

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临床肝胆病杂志 2021年第3期37卷 725-728页

作者：卢能源王佳慧钟芳菲汪磊彭岳赵铁建郑洋广西中医药大学赛恩斯新医药学院南宁530021 广西中医药大学基础医学院生理教研室南宁530021

微小RNA(miRNA)是一类非编码的小分子RNA,是基因表达的转录后调控因子。简述了多种慢性肝病,包括代谢功能障碍相关性脂肪性肝病、慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、慢性药物性肝损伤、肝硬化以及肝细胞癌的相关病因,归纳了近年来关于miR-125... 详细信息

微小RNA(miRNA)是一类非编码的小分子RNA,是基因表达的转录后调控因子。简述了多种慢性肝病,包括代谢功能障碍相关性脂肪性肝病、慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、慢性药物性肝损伤、肝硬化以及肝细胞癌的相关病因,归纳了近年来关于miR-125b通过靶向不同的靶基因,进入不同的信号转导途径而在同一肝病或病理进程中发挥着相同或相悖的调控作用的相关报道,以期为多种慢性肝病的发病机制研究和非创伤性鉴别手段的建立提供相关见解。

关键词：微RNAs 肝疾病基因表达调控

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铁死亡调控慢性肝病的研究进展

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生理科学进展 2022年第6期53卷 440-446页

作者：徐灿丽何文星郑洋汪磊王佳慧彭岳赵铁建广西中医药大学赛恩斯新医药学院医学系南宁530222 广西中医药大学基础医学院生理教研室南宁530200

铁死亡(iron death)是一种铁依赖的非凋亡性的新程序性死亡方式,其是因铁代谢异常导致细胞内大量活性氧与脂质过氧化物堆积造成的。铁死亡对慢性肝病的发生发展起着重要的调控作用,是治疗慢性肝病的潜在靶点。本文对近年来铁死亡在非酒... 详细信息

铁死亡(iron death)是一种铁依赖的非凋亡性的新程序性死亡方式,其是因铁代谢异常导致细胞内大量活性氧与脂质过氧化物堆积造成的。铁死亡对慢性肝病的发生发展起着重要的调控作用,是治疗慢性肝病的潜在靶点。本文对近年来铁死亡在非酒精性脂肪性肝病、酒精性肝病、药物性肝损伤、肝纤维化和肝细胞癌发病中作用的最新研究进展进行总结,希冀为慢性肝病的预防和治疗提供新思路。

关键词：铁死亡慢性肝病脂质过氧化物

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白细胞介素-12对干燥综合征小鼠肝脏的损伤作用及其机制

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中华解剖与临床杂志 2023年第3期28卷 183-190页

作者：查洁郭俊巧江婷婷姚根宏南京医科大学鼓楼临床医学院风湿免疫科南京210008 安庆医药高等专科学校基础医学院病原生物与免疫学教研室安庆246052 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院南京210008

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)对干燥综合征(SS)小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法选取12周龄C57BL/6小鼠、非肥胖型糖尿病(NOD)SS模型小鼠、IL-12基因敲除NOD小鼠各5只, 分别纳入正常对照组、SS模型组和IL-12 KO NOD组。各组小鼠取外... 详细信息

目的探讨白细胞介素-12(IL-12)对干燥综合征(SS)小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法选取12周龄C57BL/6小鼠、非肥胖型糖尿病(NOD)SS模型小鼠、IL-12基因敲除NOD小鼠各5只, 分别纳入正常对照组、SS模型组和IL-12 KO NOD组。各组小鼠取外周静脉血分离提取外周血单个核细胞(PBMC)和血清, 处死小鼠解剖获取颌下腺组织和肝脏组织。(1)取正常对照组和SS模型组小鼠肝脏组织制备石蜡切片, HE染色观察肝脏肝小叶结构, MASSON染色观察肝脏纤维化情况。(2)取正常对照组和SS模型组小鼠肝脏组织、颌下腺组织的石蜡切片免疫组织化学染色观察比较IL-12阳性细胞光密度(OD)值的改变。(3)采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测正常对照组、SS模型组小鼠PBMC和肝脏组织IL-12 mRNA的相对表达量, 以及正常对照组、SS模型组、IL-12 KO NOD模型组小鼠肝脏组织纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原(Col1)mRNA的相对表达量。(4)取正常对照组、SS模型组、IL-12 KO NOD模型组小鼠外周血血清和肝脏组织, 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、转铁蛋白(TRF)、转铁蛋白受体(TFR)蛋白的表达情况。结果 (1)HE染色可见正常对照组小鼠肝小叶结构基本正常, 而SS模型组小鼠肝脏的肝小叶、肝索结构紊乱, 肝细胞胞浆内有空泡出现。MASSON染色可见SS模型组小鼠肝脏组织中见弥漫不规则的染为蓝色的胶原纤维, 正常对照组小鼠肝组织中染为蓝色的胶原纤维则少见。(2)正常对照组小鼠颌下腺和肝脏IL-12阳性细胞OD值分别为0.08±0.01、0.03±0.01, 高于SS模型组的8.74±0.78、2.58±0.07, 差异均有统计学意义(t=24.82、80.64, P值均<0.001)。(3)正常对照组小鼠肝脏组织及PBMC中IL-12 mRNA表达分别为1.07±0.15、1.03±0.14, 均低于SS模型组的3.00±0.50、3.01±0.57, 差异均有统计学意义(t=8.27、7.54, P值均<0.001)。与正常对照组比, SS模型组FN、TGF-β mRNA的相对表达量均增高, 差异均有统计学意义(P值均<0.001);与SS模型组比较, IL-12 KO NOD组FN、TGF-β mRNA的相对表达量均降低, 差异均有统计学意义(P值均<0.05);3组间Col1 mRNA的相对表达量差异无统计学意义(P=0.243)。(4)与正常对照组比较, SS模型组血清和肝脏组织中SLC7A11、GPX4、TRF蛋白相对表达量均明显降低, TFR蛋白相对表达量均增高, 差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与SS模型组比较, IL-12 KO NOD组血清和肝脏组织中SLC7A11、GPX4、TRF的相对表达量均增加, 血清TFR蛋白的相对表达量降低, 差异均有统计学意义(P值均<0.05);而肝脏组织中TFR蛋白的相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-12表达增高对SS小鼠肝脏组织的损伤起到了促进作用, 其机制可能与增高的IL-12诱导肝脏细胞铁死亡有关。

关键词：干燥综合征肝脏损伤颌下腺白细胞介素-12 铁死亡

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加味补阳还五汤对防治动脉粥样硬化的Toll样受体7及其下游信号转导通路的影响

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中华中医药杂志 2020年第4期35卷 1767-1773页

作者：尚卫兵朱博冉张海楼许梦贤翟意吴颢昕南京中医药大学南京210046 南京中医药大学基础医学院内经教研室南京210046

目的:探究加味补阳还五汤对于载脂蛋白E基因敲除小鼠的Toll样受体7(TLR7)及其下游信号转导通路的影响,从而探讨加味补阳还五汤对动脉粥样硬化的防治机制。方法:将40只雄性载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组、补阳还五... 详细信息

目的:探究加味补阳还五汤对于载脂蛋白E基因敲除小鼠的Toll样受体7(TLR7)及其下游信号转导通路的影响,从而探讨加味补阳还五汤对动脉粥样硬化的防治机制。方法:将40只雄性载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组,每组10只,10只C57BL/6J小鼠作为空白组。空白组正常饮食饮水,其余组给予高脂饲料喂养8周。空白组和模型组每日用0.9%氯化钠溶液灌胃,阿托伐他汀组、补阳还五汤组及加味补阳还五汤组每日以相应药物灌胃。第9周后采用生化检测方法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)。采用苏木素-伊红(HE)染色方法观察,并测量斑块所占管腔面积之比。以实时定量荧光PCR检测TLR7及MyD88、TRAF-6、NF-κB、IRF7 mRNA表达;蛋白质印迹法测定其蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组TC、TG、LDL-C水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组TC、TG、LDL-C水平显著降低,同时HDL-C水平升高(P<0.01);病理学观察,与空白组比较,模型组主动脉内膜增厚、隆起、内皮细胞部分脱落,有大量斑块形成,中膜平滑肌细胞增生;与模型组比较,阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组均能有效地改善主动脉细胞的炎性浸润程度和斑块管腔占比(P<0.01)。与空白组比较,模型组TLR7、MyD88、TRAF-6、NF-κB mRNA与蛋白的表达显著增高(P<0.01);与模型组比较,阿托伐他汀组、补阳还五汤组、加味补阳还五汤组TLR7、MyD88、TRAF-6、NF-κB mRNA与蛋白的表达显著降低(P<0.05,P<0.01),但3组之间的m R NA与蛋白表达差异无统计学意义。结论:加味补阳还五汤对于动脉粥样硬化的发生发展有防治作用,其机制可能与抑制TLR7及其下游信号转导通路有一定相关性。

关键词：加味补阳还五汤动脉粥样硬化 Toll样受体7 信号通路

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王灿晖运用黄芪扶正汤辨治慢性肾脏病验案

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中华中医药杂志 2020年第8期35卷 3991-3993页

作者：黎妗妗刘涛南京中医药大学基础医学院南京210023 南京中医药大学基础医学院温病学教研室南京210023

王灿晖教授在治疗慢性肾脏病方面拥有丰富的经验,并创制了黄芪扶正汤。该方具有益气补虚,活血化瘀,通导泄浊的作用。将该方化裁应用于多种肾脏病的治疗,具有良效。文章中选取王教授运用该方治疗尿酸性肾病、高血压肾病验案进行分析,以... 详细信息

王灿晖教授在治疗慢性肾脏病方面拥有丰富的经验,并创制了黄芪扶正汤。该方具有益气补虚,活血化瘀,通导泄浊的作用。将该方化裁应用于多种肾脏病的治疗,具有良效。文章中选取王教授运用该方治疗尿酸性肾病、高血压肾病验案进行分析,以飨同道。

关键词：慢性肾脏病黄芪扶正汤王灿晖验方验案

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