检索结果-内蒙古大学图书馆

高等学校化学学报 2006年第11期27卷 2106-2109页

作者：谷宇杜志游郎秋蕾陈集双何农跃南京中医药大学基础医学院生物学与生物化学系南京210029 浙江大学微生物分子生物学实验室杭州310029 东南大学生物电子学国家重点实验室南京210096

报道了一种检测植物类病毒RNA的新方法———RNA杂交芯片技术,即将cDNA芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合,将马铃薯样品的总RNA直接固定在玻片上,用荧光标记制备检测马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)的特异探针,探针与芯片杂交后分析杂交信... 详细信息

报道了一种检测植物类病毒RNA的新方法———RNA杂交芯片技术,即将cDNA芯片技术与RNA斑点杂交技术相结合,将马铃薯样品的总RNA直接固定在玻片上,用荧光标记制备检测马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)的特异探针,探针与芯片杂交后分析杂交信号以确定相应的样品有无PSTVd侵染.参照膜杂交的方法,确定了RNA芯片的制备条件,并用以检测了马铃薯样品的PSTVd侵染情况,检测结果与RT-PCR结果相符,阳性产物经克隆测序证实为PSTVd.

关键词： RNA芯片杂交斑点杂交 cDNA芯片马铃薯纺锤块基类病毒(PSTVd)

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关于中药毒性现代研究的几点设想

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中医杂志 2009年第7期50卷 649-650页

作者：孙敬昌山东中医药大学基础医学院细胞生物学实验室山东省济南市250355

中药毒性理论是中药药性理论的重要组成部分,进行中药毒性理论研究,是实现中医药现代化的重要课题之一。为科学揭示中药毒性理论的实质,中药毒性现代研究应在中医理论指导下,在科学界定中药个药毒性属性基础上,对"无毒"中药... 详细信息

中药毒性理论是中药药性理论的重要组成部分,进行中药毒性理论研究,是实现中医药现代化的重要课题之一。为科学揭示中药毒性理论的实质,中药毒性现代研究应在中医理论指导下,在科学界定中药个药毒性属性基础上,对"无毒"中药重点进行"辨证(病)使用基础上的毒性研究"及长期毒性观察,对"有毒"中药着重进行毒性机理和安全使用条件的研究,同时要重视临床资料的研究和总结。

关键词：中药毒性安全性现代研究

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越鞠丸石油醚部位潜在的快速抗抑郁作用与BDNF、TrkB蛋白表达的上调相关

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中国药理学通报 2015年第12期31卷 1754-1759页

作者：任荔陶伟伟薛文达吴颢昕陈刚南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心江苏南京210023 南京中医药大学中医脑病重点实验室江苏南京210023

目的研究越鞠丸石油醚部位是否具有快速抗抑郁潜力,并对其有效剂量及潜在的生物学机制进行了探讨。方法将44只昆明种♂小鼠随机分成空白组(生理盐水组)、越鞠丸石油醚部位(YJ-PE)高、中、低剂量组及氯胺酮组。单次给药后30 min对昆明小... 详细信息

目的研究越鞠丸石油醚部位是否具有快速抗抑郁潜力,并对其有效剂量及潜在的生物学机制进行了探讨。方法将44只昆明种♂小鼠随机分成空白组(生理盐水组)、越鞠丸石油醚部位(YJ-PE)高、中、低剂量组及氯胺酮组。单次给药后30 min对昆明小鼠进行小鼠悬尾行为绝望测试。再将24只昆明种♂小鼠分成空白组、筛选出有效的越鞠丸石油醚部位低剂量组和氯胺酮组,单次给药24 h后进行小鼠悬尾行为绝望测试。利用Western blot实验分别检测给药后30 min及24 h小鼠海马区BDNF和TrkB蛋白的表达变化。结果单次给药越鞠丸石油醚部位从30 min到24 h均能对其小鼠悬尾的行为绝望行为产生抗抑郁作用。给予越鞠丸石油醚部位30 min后小鼠海马中的BDNF及其受体TrkB的表达明显上调,且这种抗抑郁的作用机制可持续到24 h。结论越鞠丸石油醚部位(低剂量)具有快速抗抑郁的药物潜力,且这种潜在的快速抗抑郁作用与BDNF及其受体TrkB的激活相关。

关键词：越鞠丸石油醚部位快速抗抑郁 BDNF TrkB 氯胺酮

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栀子石油醚有效部位的快速抗抑郁潜力与BDNF、p-eEF2的表达上调相关

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中国药理学通报 2016年第9期32卷 1224-1230页

作者：任荔陶伟伟柴毅李守雪王省张煜萱陈丽夏宝妹吴颢昕陈刚南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心江苏南京210023 南京中医药大学中医脑病重点实验室江苏南京210023

目的筛选出栀子石油醚有效部位具有快速抗抑郁潜力并对其初始起效时间点及生物学机制进行了探讨。方法采用给药后24 h进行小鼠悬尾实验、强迫游泳实验和新奇抑制摄食实验来初步筛选具有快速抗抑郁潜力的栀子石油醚有效部位。给药30 min... 详细信息

目的筛选出栀子石油醚有效部位具有快速抗抑郁潜力并对其初始起效时间点及生物学机制进行了探讨。方法采用给药后24 h进行小鼠悬尾实验、强迫游泳实验和新奇抑制摄食实验来初步筛选具有快速抗抑郁潜力的栀子石油醚有效部位。给药30 min后进行悬尾行为实验及给药2h后进行强迫游泳实验以测试栀子石油醚有效部位起效时间。Western blot实验检测2 h及24 h小鼠海马区BDNF及p-e EF2蛋白的表达。结果单次给药GJ-PE1后2 h到24 h均能降低小鼠强迫游泳行为的不动时间,同时降低小鼠陌生环境下摄食的潜伏时间。GJ-PE3单次给药24 h后能降低小鼠陌生环境下摄食的潜伏时间。GJ-PE4给药24 h后能增加小鼠陌生环境下的摄食量。给药2 h后,GJ-PE1小鼠海马中的BDNF表达明显上调而p-e EF2表达明显下调,24 h后小鼠海马中BDNF表达明显下调而p-e EF2表达明显上调。结论栀子石油醚的4个下分部位中,GJ-PE1最具有快速抗抑郁潜力,起效时间为给药后2 h,其机制与BDNF的上调及p-e EF2的下调相关。GJ-PE3、GJ-PE4具有部分潜在快速起效抗抑郁药物的特征。GJ-PE2不具有快速抗抑郁潜力。

关键词：栀子石油醚有效部位快速抗抑郁 BDNF p-eEF2 氯胺酮

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PLGF通过激活Rho/ROCK信号通路介导人脑微血管内皮细胞间紧密连接开放

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基础医学与临床 2013年第8期33卷 960-965页

作者：王淳李波方文刚陈誉华辽宁中医药大学基础医学院卫生生物教研室辽宁沈阳110032 中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制。方法利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HB... 详细信息

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制。方法利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HBMEC间紧密连接相关蛋白质occludin和ZO-1的表达及分布,用蛋白激酶抑制剂干预和Western blot法检测Rho蛋白活性。结果 25 ng/mL PLGF 30 min显著降低体外血脑屏障模型TEER,使其通透性增高(P<0.05);增加S-occludin表达的同时降低了IS-occludin的表达,使ZO-1蛋白在细胞周边分布减少;此外,ROCK蛋白激酶抑制剂Y27632抑制了PLGF引起的体外血脑屏障透过性增高(P<0.05),并激活细胞内Rho激酶活性。结论 PLGF通过激活HBMEC内Rho/ROCK信号通路,影响HBMEC间紧密连接完整性,进而改变血脑屏障的通透性。

关键词：胎盘生长因子血脑屏障紧密连接 Rho ROCK

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利用腺病毒载体介导的RNA干扰技术在悬浮细胞中获得基因沉默效应

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基础医学与临床 2012年第2期32卷 226-232页

作者：王淳方文刚李波辽宁中医药大学基础医学院卫生生物教研室辽宁沈阳110032 中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的利用重组腺病毒载体携带短发夹RNA(shRNA),使难于转染的悬浮细胞达到较高的目的基因沉默效率。方法分别将含有人胎盘生长因子(PLGF)的干扰序列及阴性对照序列(scramble)连入pRNAT-H1.1/Adeno载体,获得重组穿梭质粒;将线性化的重组... 详细信息

目的利用重组腺病毒载体携带短发夹RNA(shRNA),使难于转染的悬浮细胞达到较高的目的基因沉默效率。方法分别将含有人胎盘生长因子(PLGF)的干扰序列及阴性对照序列(scramble)连入pRNAT-H1.1/Adeno载体,获得重组穿梭质粒;将线性化的重组穿梭质粒与腺病毒骨架重组;将重组子转染HEK 293细胞,经过3轮病毒包装,收获病毒颗粒并测定滴度。病毒颗粒感染悬浮细胞——人小细胞肺癌细胞(NCI-H 250和NCI-H 209),通过实时定量PCR方法鉴定靶基因沉默效应,并利用肿瘤细胞重建基质膜侵袭实验进行功能鉴定。结果成功构建带有靶基因干扰序列及scramble、空载体的3种腺病毒重组子(AD-shuttle-shPLGF、AD-shuttle-scramble和AD-shuttle)。经过HEK 293细胞包装,最终获得3株病毒颗粒,病毒滴度分别为1.5×1011、1.6×1011和1.6×1011。NCI-H 250和NCI-H 209细胞感染腺病毒颗粒48 h后,大部分细胞表达GFP,感染率接近100%;且两株细胞感染AD-shuttle-shPLGF病毒48 h后,PLGF mRNA表达水平降低(P<0.01),肿瘤细胞侵袭能力明显下降(P<0.01)。结论携带shRNA的腺病毒表达载体可以代替电转、脂质体介导等方法,使难于转染细胞的目的基因达到有效沉默。

关键词： RNA干扰 shRNA 腺病毒载体悬浮细胞

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高血压病患者大网膜小动脉重塑的观测及相关蛋白表达探讨

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中国病理生理杂志 2011年第10期27卷 1863-1867页

作者：孙敬昌齐冬梅李运伦山东中医药大学基础医学院细胞生物学实验室山东济南250355 山东中医药大学科技处山东济南250355 山东中医药大学附属医院心内科山东济南250011

目的:研究高血压病患者大网膜小动脉病理损害、重塑及相关蛋白的表达。方法:检测12例非高血压病对照者和12例高血压病患者血液流变学及大网膜小动脉形态学的变化,采用免疫组织化学方法检测大网膜小动脉Bcl-2、Bax、c-Myc、c-Fos、MMP-9... 详细信息

目的:研究高血压病患者大网膜小动脉病理损害、重塑及相关蛋白的表达。方法:检测12例非高血压病对照者和12例高血压病患者血液流变学及大网膜小动脉形态学的变化,采用免疫组织化学方法检测大网膜小动脉Bcl-2、Bax、c-Myc、c-Fos、MMP-9和TIMP-2蛋白表达,用Masson染色法观察大网膜小动脉壁胶原含量变化。结果:高血压病患者血液流变学异常,大网膜小动脉胶原沉积增多,中膜厚度/管腔直径比值增大,动脉壁Bcl-2、Bax、c-Myc、c-Fos、MMP-9和TIMP-2蛋白表达增强。结论:高血压病患者大网膜小动脉存在病理损害和重塑,其机制与血液动力学(高血压)和血液流变学异常,动脉壁Bcl-2和Bax、MMP-9和TIMP-2表达失衡及c-Myc和c-Fos过度表达有关。

关键词：高血压病大网膜小动脉血管重塑细胞凋亡基因蛋白表达

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全基因组关联分析在中医证候研究中的应用展望

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中国中医基础医学杂志 2017年第1期23卷 141-143页

作者：陈刚周欣薛文达吴颢昕南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心中医脑病学重点实验室南京210023

中医证候的科学本质是中医基础研究中的核心内容,也是揭开中医辨证论治个性化治疗奥秘的关键,但目前对其的认识仍然有限。通过介绍复杂性状遗传学的基本概念,提出将证候作为生命活动表现的复杂性状,运用复杂性状遗传学研究手段,特别是... 详细信息

中医证候的科学本质是中医基础研究中的核心内容,也是揭开中医辨证论治个性化治疗奥秘的关键,但目前对其的认识仍然有限。通过介绍复杂性状遗传学的基本概念,提出将证候作为生命活动表现的复杂性状,运用复杂性状遗传学研究手段,特别是当前迅速发展的全基因组关联分析(Genome-wide association study,GWAS)方法,以解析证候个体化差异的分子遗传基础。除了进行人群的证候GWAS研究,还可利用遗传参照种群小鼠资源进行证候的分子及系统网络GWAS研究。故展望了在中医基础研究中利用模式动物建构合适的中医病-证模型进行GWAS研究的广阔前景,该方法的推广应用将在新的方向上推动中医基础研究的发展。

关键词：证候复杂性状遗传学全基因组关联分析遗传参照种群小鼠模型

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江苏汉族人群p53第7内含子多态性与慢性萎缩性胃炎无相关性

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世界华人消化杂志 2007年第2期15卷 171-175页

作者：王剑蓉赖仁胜张心海谢玲南京中医药大学基础医学院江苏省南京市210029 南京中医药大学附属医院病理科国家中管局三级分子生物学实验室江苏省南京市210029 南京中医药大学江苏省南京市210029

目的：探讨江苏汉族人群p53第7内含子多态性与慢性萎缩性胃炎（CAG）之间的相关性．方法：提取80例CAG患者、76例健康体检人群基因组DNA，PCR特异性扩增p53基因第7，8外显子及其间的第7内含子，产物纯化后测序，将样品序列与标准序列进... 详细信息

目的：探讨江苏汉族人群p53第7内含子多态性与慢性萎缩性胃炎（CAG）之间的相关性．方法：提取80例CAG患者、76例健康体检人群基因组DNA，PCR特异性扩增p53基因第7，8外显子及其间的第7内含子，产物纯化后测序，将样品序列与标准序列进行比对，观察第7内含子多态性．组间的基因型及等位基因频率比较采用x^2检验．结果：CAG组P53基因第7内含子的第72位碱基和第92位碱基等位基因分别为T．G（32．5％）和C-T（67．5％），基因型表现为T-G／T-G（11．3％），C-T/T-G（42．5％1和C-T／C-T（46．3％）3种：在体检组中相应的等位基因T-G和C-T的频率是29．6％和70．4％，3种基因型频率分布分别为9．2％（T-G／T-G），40．8％（C-T／T-G）和50．0％（c．T／C．T）．等位基因频率和基因型分布在CAG组和体检组差异无统计学意义（P〉0．05）。T-G等位基因携带者和C-T等位基因携带者患CAG的危险性差异无统计学意义（OR=1．14）．结论：江苏汉族人群p53第7内含子多态性与CAG表遗传外显率无直接致病关系．

关键词：慢性萎缩性胃炎 p53基因多态性内含子测序

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大承气汤对脑出血模型大鼠小胶质细胞的作用及机制探讨

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华中科技大学学报（医学版） 2021年第6期50卷 728-733,749页

作者：杨树升林丽武汉市红十字会医院中医科武汉430015 湖北中医药大学基础医学院医学分子细胞生物学实验室武汉430065

目的探讨大承气汤对脑出血模型大鼠小胶质细胞及IL-1β、IL-10等炎症因子的影响及分子机制。方法应用胶原酶Ⅶ对成年SD雄性大鼠左侧尾壳核进行脑立体定位注射,建立脑出血大鼠模型。用大承气汤干预1周[立体定位术后6 h开始灌胃,根据前期... 详细信息

目的探讨大承气汤对脑出血模型大鼠小胶质细胞及IL-1β、IL-10等炎症因子的影响及分子机制。方法应用胶原酶Ⅶ对成年SD雄性大鼠左侧尾壳核进行脑立体定位注射,建立脑出血大鼠模型。用大承气汤干预1周[立体定位术后6 h开始灌胃,根据前期实验结果使用剂量为1 g/(100 g体重·次),2次/d],采用平衡木实验和悬尾实验评价大鼠脑出血后1、3、7、14和28 d时神经功能缺损情况;采用免疫荧光双重标记观察大承气汤对出血灶周围小胶质细胞和星形胶质细胞形态和数目的影响;ELISA法检测脑出血后14 d出血区IL-1β和IL-10的水平;Western blot法检测脑出血后14 d出血区p38和P-p38水平。结果大承气汤能有效逆转脑出血模型大鼠脑出血后神经功能受损,减少小胶质细胞增生,可逆转IL-1β水平的上升并增加IL-10的表达水平,同时可逆转P-p38蛋白水平的上升。结论大承气汤可通过调节小胶质细胞的数量、形态和功能,改善脑出血后大鼠神经功能缺损情况,其机制可能涉及调控p38 MAPK信号通路而发挥神经保护作用。

关键词：大承气汤脑出血小胶质细胞白细胞介素 p38 MAPK信号通路

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