检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2021年第7期16卷 759-763,768页

作者：唐泽丽吴展帅余新炳黄艳中山大学中山医学院寄生虫学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西中医药大学基础医学院医学免疫学教研室广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室

目的探究重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CsCP)的枯草杆菌芽孢(B.s-CsCP)的保存方法,并评价其保存效果。方法制备B.s-CsCP芽孢并将其分为单蒸水重悬(液体芽孢)和冷冻干燥成粉末(冻干芽孢)两份,分别用EP管均等分装,储存在室温(RT)、4... 详细信息

目的探究重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CsCP)的枯草杆菌芽孢(B.s-CsCP)的保存方法,并评价其保存效果。方法制备B.s-CsCP芽孢并将其分为单蒸水重悬(液体芽孢)和冷冻干燥成粉末(冻干芽孢)两份,分别用EP管均等分装,储存在室温(RT)、4℃、-20℃及-80℃温度条件下,使用稀释平板计数法定期检测芽孢的存活率,免疫荧光法检测芽孢保存24个月后融合蛋白的表达情况。将4℃保存≥24个月的液体芽孢(B.s-CsCP-W-4)、RT保存≥24个月的冻干芽孢(B.s-CsCP-P-RT)及新鲜制备的重组芽孢分别经口免疫小鼠,ELISA及微板法测定小鼠肠黏液和胆汁中CsCP特异性sIgA水平以及肝功能指标。结果液体芽孢在4℃、-20℃及-80℃保存24个月的存活率分别为84.5%、93.5%和94.3%,冻干芽孢在RT、4℃、-20℃及-80℃保存24个月的存活率分别为84.6%、92.4%、93.8%和92.8%。除了RT,液体芽孢在其余3个温度下保存24个月均具有较高的CsCP融合蛋白表达率,冻干芽孢在4个温度条件下均高表达。B.s-CsCP-W-4和B.s-CsCP-P-RT均能显著提高小鼠肠黏液以及胆汁中特异性sIgA的水平(P<0.01),与新鲜制备的芽孢比较差异无统计学意义(P>0.05)。此外,B.s-CsCP-W-4和B.s-CsCP-P-RT对小鼠肝功能均无不良影响。结论 B.s-CsCP芽孢的低温液体和常温冻干粉剂型均能长期有效保存,其具有制作简便、安全有效及存储和运输方便等优势。

关键词：华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶枯草杆菌芽孢口服疫苗保存

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钩藤生物碱调节肠系膜动脉细胞增殖凋亡相关蛋白的研究

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山东中医药大学学报 2013年第3期37卷 244-247页

作者：焦华琛李运伦孙敬昌山东中医药大学附属医院山东济南250011 山东中医药大学基础医学院细胞生物学实验室山东济南250355

目的:研究钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱对自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜动脉平滑肌细胞凋亡和增殖的影响。方法:将SHR分组,分别给予钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱,并以Wistar大鼠作为正常对照。采用HE染色法观测肠系膜动脉的病理形... 详细信息

目的:研究钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱对自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜动脉平滑肌细胞凋亡和增殖的影响。方法:将SHR分组,分别给予钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱,并以Wistar大鼠作为正常对照。采用HE染色法观测肠系膜动脉的病理形态,采用Masson染色法观察肠系膜动脉胶原含量,采用免疫组化法检测肠系膜动脉Bcl-2、Bax、c-myc、c-fos、MMP-9和TIMP-2的蛋白表达。结果:钩藤碱、异钩藤碱和钩藤总生物碱能减轻SHR肠系膜动脉的病理损害,降低动脉壁的胶原沉积,下调肠系膜动脉平滑肌Bcl-2、c-fos和TIMP-2蛋白表达,钩藤碱上调肠系膜动脉MMP-9蛋白表达。结论:钩藤碱和异钩藤碱可能通过下调原癌基因Bcl-2蛋白表达,促进SHR肠系膜动脉细胞凋亡,通过下调c-fos蛋白表达途径抑制SHR肠系膜动脉细胞异常增殖,并通过调节MMP-9和TIMP-2蛋白表达抑制SHR肠系膜动脉的胶原沉积,从而改善肠系膜动脉壁重塑。

关键词：钩藤提取物高血压肠系膜动脉凋亡增殖大鼠实验研究

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越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导损伤的HT22细胞的神经保护作用

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时珍国医国药 2018年第10期29卷 2334-2337页

作者：葛渴敏薛文达王薇转化系统生物学和神经科学研究中心中医脑病重点实验室南京中医药大学基础医学院江苏南京210023 南京中医药大学医学与生命科学学院江苏南京210023 南京中医药大学心理学院江苏南京210023 南通大学神经再生协同创新中心江苏南通226001

目的探讨越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的神经保护作用。方法利用高浓度皮质酮(CORT)构建HT22细胞的损伤模型后,给予不同浓度的越鞠甘麦大枣汤含药血清,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HT22细胞的存活率,以及E... 详细信息

目的探讨越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的神经保护作用。方法利用高浓度皮质酮(CORT)构建HT22细胞的损伤模型后,给予不同浓度的越鞠甘麦大枣汤含药血清,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HT22细胞的存活率,以及ELISA法测定乳酸脱氢酶(LDH)浓度并分析LDH漏出量。结果高浓度的CORT使HT22细胞存活率明显下降、LDH漏出量显著增加。1%,5%,10%的越鞠甘麦大枣汤含药血清均能显著提高高浓度CORT条件下HT22细胞的存活率,并减少LDH的漏出量,从而减少细胞损伤。结论越鞠甘麦大枣汤对CORT诱导的HT22细胞损伤具有显著的保护作用。

关键词：越鞠甘麦大枣汤皮质酮小鼠海马神经元细胞神经保护

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中医药快速抗抑郁研究进展

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世界科学技术-中医药现代化 2017年第8期19卷 1283-1288页

作者：周欣薛文达唐娟娟陶伟伟吴颢昕陈刚南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心中医脑病学重点实验室南京210023

抑郁症是严重危害个体及社会的公共卫生问题,而现有主流抗抑郁西药有起效缓慢的缺点。近年来系列研究发现,在多种抑郁症模型及临床研究中,解郁名方越鞠丸显示出类似于快速抗抑郁原型药氯胺酮的优势特点,其快速持久增强神经可塑性机制,... 详细信息

抑郁症是严重危害个体及社会的公共卫生问题,而现有主流抗抑郁西药有起效缓慢的缺点。近年来系列研究发现,在多种抑郁症模型及临床研究中,解郁名方越鞠丸显示出类似于快速抗抑郁原型药氯胺酮的优势特点,其快速持久增强神经可塑性机制,个体化差异机制,以及栀子作为快速抗抑郁君方的实验证据与机制等也被揭示出来。广泛深入开展相关研究将为抑郁症的防治提供科学可靠的中医药方案做出贡献。

关键词：越鞠丸栀子快速抗抑郁动物模型神经与个体化反应机制

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越鞠丸快速治疗抑郁症初步临床随机双盲对照研究

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辽宁中医杂志 2016年第2期43卷 311-313页

作者：朱丹丹吴如燕周欣夏友春邰文婷陈刚南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心中医脑病重点实验室江苏南京210023 泰州第四人民医院精神科江苏泰州225300

目的：检验越鞠丸有效缓解抑郁症的快速性。方法：抑郁症病人随机分为3组进行双盲对照研究。治疗组采用越鞠丸两种不同剂量合用氟西汀,对照组采用中药安慰剂加氟西汀,服用7 d后,停服中药。于服药前及服药后的第1,3,5,7,10天采用汉密尔... 详细信息

目的：检验越鞠丸有效缓解抑郁症的快速性。方法：抑郁症病人随机分为3组进行双盲对照研究。治疗组采用越鞠丸两种不同剂量合用氟西汀,对照组采用中药安慰剂加氟西汀,服用7 d后,停服中药。于服药前及服药后的第1,3,5,7,10天采用汉密尔顿抑郁量表（HAMD-24）及抑郁自评量表（SDS）进行疗效评定。结果：符合纳入标准病人中,越鞠实验组13例,越鞠普通剂量组10例,对照组9例。HAMD-24评分,越鞠实验组在第3,5,7天与对照组比显著降低,且停服中药3 d后差异仍然显著,而与服药前比,服药第3~第10天都有差异（P〈0.05）。服药后的第3天开始,HAMD迟滞因子有平行的显著改善（P〈0.05）。越鞠普通剂量组与对照组比较,及其分别与服药前比较均无显著差异。SDS评分结果与HAMD-24类似。结论：越鞠丸具有快速治疗抑郁症作用,主要是通过快速改善迟滞因子实现的。

关键词：抑郁症快速起效越鞠丸随机双盲对照

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α-生育酚通过抑制mTOR激活小鼠海马神经元细胞自噬

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长春中医药大学学报 2021年第6期37卷 1278-1281页

作者：武霁舟王省南京中医药大学基础医学院/转化系统生物学与神经科学研究中心/中医脑病学重点实验室南京210023

目的探究α-生育酚对小鼠海马神经元细胞自噬的影响及分子机制。方法分别以自噬抑制剂Compound C、α-生育酚处理小鼠海马神经元细胞,采用AO染色法检测不同处理后神经元内自噬泡的数量;利用透射电镜观察自噬小体;通过免疫蛋白质印记法... 详细信息

目的探究α-生育酚对小鼠海马神经元细胞自噬的影响及分子机制。方法分别以自噬抑制剂Compound C、α-生育酚处理小鼠海马神经元细胞,采用AO染色法检测不同处理后神经元内自噬泡的数量;利用透射电镜观察自噬小体;通过免疫蛋白质印记法检测自噬相关蛋白LC3-II、P62以及上游调控蛋白mTOR、AMPK和ULK1表达水平。结果 Compound C显著抑制LC3-II水平并且上调P62的表达,减少自噬泡及自噬小体的数量;加用α-生育酚处理后LC3-II表达提高,P62和mTOR水平均被抑制,且自噬泡和自噬小体数量提高。结论α-生育酚能够诱导细胞发生自噬,这一作用可能与抑制mTOR信号通路相关。

关键词： α-生育酚自噬 mTOR Compound C

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黄蜀葵花中黄酮类化合物抗抑郁活性及其上调大鼠海马组织中BDNF的作用机制研究

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药学学报 2017年第2期52卷 222-228页

作者：蔡红蝶陶伟伟宿树兰郭盛朱悦郭建明钱大玮丛旭东唐仁茂段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 南京中医药大学平移系统生物学与神经科学中心/脑疾病综合生物医学实验室基础医学院江苏南京210023 江苏苏中药业集团制药有限公司江苏姜堰225500

黄蜀葵花为中国民间草药,是锦葵科秋葵属黄蜀葵[Abelmoschus manihot(L.)Medic.]的干燥花冠,已报道其具有抗抑郁活性。本文从黄蜀葵花中分离纯化得到主要黄酮类化合物,并探索其中5种化合物抗抑郁活性及其作用机制。采用D101大孔树脂柱... 详细信息

黄蜀葵花为中国民间草药,是锦葵科秋葵属黄蜀葵[Abelmoschus manihot(L.)Medic.]的干燥花冠,已报道其具有抗抑郁活性。本文从黄蜀葵花中分离纯化得到主要黄酮类化合物,并探索其中5种化合物抗抑郁活性及其作用机制。采用D101大孔树脂柱、聚酰胺柱和Sephadex LH-20柱对黄酮类成分进行分离与纯化,经UHPLC与NMR等技术鉴定,得到8个黄酮类化合物,为杨梅素-3-O-β-D-葡糖苷(1)、棉皮素-8-O-β-D-葡糖苷酸(2,G-8-G)、棉皮素-3'-O-β-D-葡糖苷(3)、槲皮素-3'-葡糖苷(4,Q-3-G)、异槲皮苷(5,IQT)、金丝桃苷(6,HY)、杨梅黄酮(7)和槲皮素(8,QT)。采用小鼠分别灌胃化合物2、4、5、6和8(15、30、60 mg·kg^(-1))24 h后,观察悬尾实验(tail suspension test,TST)和强迫游泳实验(forced swimming test,FST),并采用Western blot技术检测小鼠海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸受体激酶B(Trk B)和磷酸化的真核延伸因子2(p-e EF2)的表达。结果表明,化合物2和4能够显著缩短小鼠在FST和TST中的不动时间,显著增加BDNF和Trk B的表达,减少p-e EF2的表达。可见,化合物2和4可上调BDNF表达而发挥其抗抑郁活性。

关键词：锦葵科秋葵属抗抑郁黄酮类化合物脑源性神经营养因子酪氨酸受体激酶B

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栀子环烯醚帖部位的快速持久抗抑郁作用及其对PKA-CREB信号通路激活的依赖性

栀子环烯醚帖部位的快速持久抗抑郁作用及其对PKA-CREB信号通路激...

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长三角地区神经科学论坛2016暨第八次会员代表大会

作者：任荔张海楼陶伟伟陈茵邹之璐沈琴琴郭小燕陈刚南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心南京中医药大学中医脑病重点实验室

主流抗抑郁西药具有起效缓慢的缺点,目前研究较多的快速抗抑郁药物氯胺酮因成瘾性、肝毒性和神经毒性等副作用在临床应用中受到限制。近来本实验室的基础及临床研究发现,中药越鞠丸具有快速起效治疗抑郁症的特性,而栀子为其中的关键成... 详细信息

主流抗抑郁西药具有起效缓慢的缺点,目前研究较多的快速抗抑郁药物氯胺酮因成瘾性、肝毒性和神经毒性等副作用在临床应用中受到限制。近来本实验室的基础及临床研究发现,中药越鞠丸具有快速起效治疗抑郁症的特性,而栀子为其中的关键成分。本研究旨在研究栀子GJI部位的快速起效抗抑郁作用及其相关机制。本研究中的行为学实验分为有效剂量初筛实验(初始起效时间点实验和药效持续时间实验)及慢性模型验证实验。有效剂量初筛实验中,给予中剂量GJI(栀子快速抗抑郁等效剂量)30分

关键词：栀子 GJI部位快速持久抗抑郁慢性不可预知的温和刺激 PKA CREB

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栀子环烯醚帖部位的快速持久抗抑郁作用及其对PKA-CREB信号通路激活的依赖性

栀子环烯醚帖部位的快速持久抗抑郁作用及其对PKA-CREB信号通路激...

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中华中医药学会中药实验药理分会第十二次学术会议

作者：任荔张海楼陶伟伟陈茵邹之璐沈琴琴郭小燕陈刚南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心南京中医药大学中医脑病重点实验室南京210023

目的：主流抗抑郁西药具有起效缓慢的缺点，目前研究较多的快速抗抑郁药物氯胺酮因成瘾性、肝毒性和神经毒性等副作用在临床应用中受到限制.近来本实验室的基础及临床研究发现，中药越鞠丸具有快速起效治疗抑郁症的特性，而栀子为其中...

目的：主流抗抑郁西药具有起效缓慢的缺点，目前研究较多的快速抗抑郁药物氯胺酮因成瘾性、肝毒性和神经毒性等副作用在临床应用中受到限制.近来本实验室的基础及临床研究发现，中药越鞠丸具有快速起效治疗抑郁症的特性，而栀子为其中的关键成分.本研究旨在探索栀子环烯醚帖部位是否具备快速起效抗抑郁作用及其相关机制.方法：1.有效剂量初筛实验(初始起效时间点实验和药效持续时间实验)：采用给药后24 小时进行小鼠悬尾实验、强迫游泳实验和新奇抑制摄食实验，从高(200mg/kg)、中(100mg/kg)、低(50mg/kg)三个剂量来初步筛选具有快速抗抑郁潜力的栀子环烯醚帖部位.给药2 小时及给药30 分钟后进行悬尾实验以测试有效剂量栀子环烯醚萜部位的起效时间.给药3 天、5 天、7 天组的小鼠分别进行新奇抑制摄食实验、悬尾实验、强迫游泳实验，给药10 天及14 天的小鼠进行新奇抑制摄食实验.2.慢性模型验证实验：给予慢性温和刺激造模组小鼠有效剂量栀子环烯醚帖24 小时后依次进行开场实验、糖偏好测试、新奇抑制摄食实验、悬尾实验、强迫游泳实验，给药3 天、5 天、7 天组的小鼠分别进行新奇抑制摄食实验、悬尾实验、强迫游泳实验，给药10 天及14 天的小鼠进行新奇抑制摄食实验.3.分子实验：Western blot 实验检测30 分钟、2 小时及24 小时小鼠海马区BDNF 的表达.2 小时及24 小时小鼠海马区PKA、p-CREB 及CREB 的表达.4.阻断剂实验：测试组小鼠腹腔注射PKA 阻断剂H89 后给予有效剂量的栀子环烯醚帖，分别于给药后30 分钟、2 小时、24 小时进行小鼠悬尾实验.结果：1.有效剂量初筛实验中，给予中剂量环烯醚帖(栀子快速抗抑郁等效剂量)30分钟后显著降低了小鼠悬尾实验的不动时间.栀子环烯醚帖的抗抑郁作用能够在小鼠悬尾、强迫游泳模型上持续到第7 天，在新奇抑制摄食模型条件下能够至少持续到第14 天;2.与越鞠丸类似，在慢性不可预知的温和刺激模型中，环烯醚萜单次给药24 小时后，逆转了造模动物糖偏好的降低，悬尾及强迫游泳测试中不动时间的延长，以及新奇抑制摄食实验中单位摄食量的降低和摄食潜伏时间的延长等抑郁-焦虑样行为.其在慢性模型上单次给药的抗抑郁作用同样能够持续至少14 天;3.分子研究结果提示栀子环烯醚萜单次给药24 小时后海马PKA-CREB 信号通路的激活，而该时间点的抗抑郁作用不依赖于BDNF 的激活;4.对PKA-CREB 信号通路的阻断逆转了其24 小时的抗抑郁效应.结论：栀子环烯醚萜部位可能为栀子和越鞠丸快速持久抗抑郁效应中的关键药物部位.与越鞠丸类似，该部位的快速持久抗抑郁作用依赖于PKA-CREB 信号通路的激活.与越鞠丸不同的是，该部位早期抗抑郁作用不依赖于BDNF 快速表达的升高.

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越鞠丸抗抑郁作用新特点与新机制研究

越鞠丸抗抑郁作用新特点与新机制研究

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中华中医药学会中药实验药理分会第十二次学术会议

作者：陈刚薛文达陶伟伟周欣唐娟娟张海楼任荔夏宝妹吴如燕南京中医药大学基础医学院转化系统生物学与神经科学研究中心南京中医药大学中医脑病重点实验室南京210023

目的：抑郁症的一线治疗西药具有起效慢的缺点,且部分患者对各种抗抑郁药物都不反应。近年来氯胺酮的快速持久起效抗抑郁作用及机制引起广泛关注,但是其成瘾和毒副作用限制其广泛的临床应用。本系列研究力图揭示可否利用中医药实现快速...

目的：抑郁症的一线治疗西药具有起效慢的缺点,且部分患者对各种抗抑郁药物都不反应。近年来氯胺酮的快速持久起效抗抑郁作用及机制引起广泛关注,但是其成瘾和毒副作用限制其广泛的临床应用。本系列研究力图揭示可否利用中医药实现快速持久抗抑郁作用,并揭示了其已知与独特的分子神经药理机制。方法：利用快速抗抑郁药物具备的持久抗抑郁性,以氯胺酮作为阳性对照,使用了不同的抑郁症相关模型,对中药越鞠丸的快速与持久抗抑郁作用进行了系统分析,对最新的的快速持久抗抑郁关于的BDNF 和mTOR 信号介导的快速增强神经可塑性进行了检验,通过品系差异性研究,分析了越鞠丸持久抗抑郁的特异性机制。结果：在ICR 品系中,越鞠丸单次给药可以在30 分钟产生降低悬尾不动时间的抗抑郁作用,并可持续24 小时,也缓解获得性无助与陌生环境摄食抑制行为,显示抗抑郁的快速性。在Kunming 品系小鼠中,越鞠丸同样在30 分钟有效,但可持续5 天。在两个品系的海马中,越鞠丸均可以在30 分钟导致BDNF 蛋白的转录后表达增强,提示其在越鞠丸早期抗抑郁中发挥作用。虽然ICR 小鼠上,3 小时产生BDNF 的基因表达增强,但是在24 小时恢复到基底,在Kunming 鼠中,越鞠丸3 小时后,有显著的CREB 与BDNF 基因和表达增强,且持续至少2 天,提示持久性与CREB-BDNF 相关。氯胺酮表现出相似的品系依赖性行为与分子信号差异。使用CREB 上游PKA 信号抑制剂可以逆转越鞠丸对BDNF 基因表达增强和抗抑郁作用,而对氯胺酮没有作用。使用mTOR 抑制剂雷帕霉素可以逆转氯胺酮,而对越鞠丸无效。验证了越鞠丸是通过激活海马细胞CREB-BDNF 来发挥抗抑郁作用的持久性与特异性。在昆明小鼠进行慢性不可预知轻度应激研究中发现,越鞠丸可以早在给药后2小时逆转糖偏好的降低,而氟西汀没有此作用,而且越鞠丸的逆转糖偏好和陌生环境摄食抑制行为可以持续到单次给药后第6 天,此时氯胺酮已没有抗抑郁作用。与氯胺酮一样,越鞠丸可以快速逆转前额叶mTOR 相关信号,如上游AKT,ERK 和下游S6k 与4EBP 的,及突触蛋白GluR1,synapin 1 等降低和NMDAR 亚单位NR1 的升高。而到给药6 天后,相对于氯胺酮,越鞠丸选择性地提高了AKT 信号,抑制NR1,信号说明他们特异性地参与了越鞠丸抗抑郁作用的持久性。此外,研究也发现栀子是越鞠丸快速持久抗抑郁的君方,在不同的化学部位中显示其快速持久抗抑郁潜力。临床初步研究结果支持越鞠丸抗抑郁的快速性。结论：不同的抑郁症动物模型研究结果显示,越鞠丸具有类似于氯胺酮的快速抗抑郁作用,且持久性比起更长,其快速抗抑郁作用可能是通过BDNF 的快速增强产生,而其持久抗抑郁作用依赖于CREB 引起的BDNF 基因表达增强,并与AKT 和NR1 的持久调节有一定的关系,导致快速持久的增强神经可塑性而介导抗抑郁作用。此系列研究首次揭示中医复方具有快速抗抑郁作用,具有广阔的临床应用与开发前景。

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