检索结果-内蒙古大学图书馆

PLGF通过激活Rho/ROCK信号通路介导人脑微血管内皮细胞间紧密连接开放

基础医学与临床 2013年第8期33卷 960-965页

作者：王淳李波方文刚陈誉华辽宁中医药大学基础医学院卫生生物教研室辽宁沈阳110032 中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制。方法利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HB... 详细信息

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制。方法利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HBMEC间紧密连接相关蛋白质occludin和ZO-1的表达及分布,用蛋白激酶抑制剂干预和Western blot法检测Rho蛋白活性。结果 25 ng/mL PLGF 30 min显著降低体外血脑屏障模型TEER,使其通透性增高(P<0.05);增加S-occludin表达的同时降低了IS-occludin的表达,使ZO-1蛋白在细胞周边分布减少;此外,ROCK蛋白激酶抑制剂Y27632抑制了PLGF引起的体外血脑屏障透过性增高(P<0.05),并激活细胞内Rho激酶活性。结论 PLGF通过激活HBMEC内Rho/ROCK信号通路,影响HBMEC间紧密连接完整性,进而改变血脑屏障的通透性。

关键词：胎盘生长因子血脑屏障紧密连接 Rho ROCK

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利用腺病毒载体介导的RNA干扰技术在悬浮细胞中获得基因沉默效应

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基础医学与临床 2012年第2期32卷 226-232页

作者：王淳方文刚李波辽宁中医药大学基础医学院卫生生物教研室辽宁沈阳110032 中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的利用重组腺病毒载体携带短发夹RNA(shRNA),使难于转染的悬浮细胞达到较高的目的基因沉默效率。方法分别将含有人胎盘生长因子(PLGF)的干扰序列及阴性对照序列(scramble)连入pRNAT-H1.1/Adeno载体,获得重组穿梭质粒;将线性化的重组... 详细信息

目的利用重组腺病毒载体携带短发夹RNA(shRNA),使难于转染的悬浮细胞达到较高的目的基因沉默效率。方法分别将含有人胎盘生长因子(PLGF)的干扰序列及阴性对照序列(scramble)连入pRNAT-H1.1/Adeno载体,获得重组穿梭质粒;将线性化的重组穿梭质粒与腺病毒骨架重组;将重组子转染HEK 293细胞,经过3轮病毒包装,收获病毒颗粒并测定滴度。病毒颗粒感染悬浮细胞——人小细胞肺癌细胞(NCI-H 250和NCI-H 209),通过实时定量PCR方法鉴定靶基因沉默效应,并利用肿瘤细胞重建基质膜侵袭实验进行功能鉴定。结果成功构建带有靶基因干扰序列及scramble、空载体的3种腺病毒重组子(AD-shuttle-shPLGF、AD-shuttle-scramble和AD-shuttle)。经过HEK 293细胞包装,最终获得3株病毒颗粒,病毒滴度分别为1.5×1011、1.6×1011和1.6×1011。NCI-H 250和NCI-H 209细胞感染腺病毒颗粒48 h后,大部分细胞表达GFP,感染率接近100%;且两株细胞感染AD-shuttle-shPLGF病毒48 h后,PLGF mRNA表达水平降低(P<0.01),肿瘤细胞侵袭能力明显下降(P<0.01)。结论携带shRNA的腺病毒表达载体可以代替电转、脂质体介导等方法,使难于转染细胞的目的基因达到有效沉默。

关键词： RNA干扰 shRNA 腺病毒载体悬浮细胞

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黄芪甲苷联合树突状细胞瘤苗抗胃癌免疫的体外实验研究

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国际中医中药杂志 2011年第4期33卷 301-304页

作者：杨璐沈洪王立新林琳周晓波吴静刘增巍徐艺赵崧葛超骆殊刘亚军南京中医药大学第一临床医学院2008级硕士研究生 210046 南京中医药大学2008级博士研究生 210046 南京中医药大学基础医学院中医基础教研室 210046 江苏省中医院消化内科南京210029 东南大学医学院病原生物学与免疫学系

目的通过体外实验观察中药单体黄芪甲苷（astragaloside IV，AIV）联合树突状细胞（DC）瘤苗对机体免疫功能的调节作用。方法外周血单个核细胞体外诱导、培养，负载胃癌SGC7901冻融抗原，制备DC瘤苗，分别观察AⅣ联合DC瘤苗、DC瘤苗、AI... 详细信息

目的通过体外实验观察中药单体黄芪甲苷（astragaloside IV，AIV）联合树突状细胞（DC）瘤苗对机体免疫功能的调节作用。方法外周血单个核细胞体外诱导、培养，负载胃癌SGC7901冻融抗原，制备DC瘤苗，分别观察AⅣ联合DC瘤苗、DC瘤苗、AIV淋巴细胞增殖情况及其激活的效应细胞在体外杀伤胃癌细胞的活性。结果①AⅣ联合DC瘤苗（联合）组、DC瘤苗组T淋巴细胞增殖率显著高于AIV组、T细胞组（阴性对照组）（P=0．000），其中联合组促淋巴细胞增殖能力优于DC瘤苗组（S／R为1：5、1：10、1：50、1：100时，P分别为0．013、0．014、0．017、0．019）；AIV组T淋巴细胞增殖与T细胞组比较，差异无统计学意义（P=0．185）。②联合组及DC瘤苗组所活化的T细胞对胃癌SGC7901细胞的杀伤率高于AⅣ组、未活化T细胞组（P=0．000），联合组杀伤能力优于DC瘤苗组（E／T为5：1、10：1、20：1、50：1时，P分别为0．023、0．012、0．016、0．011）；而AⅣ组与未活化T细胞组几乎无杀伤作用（P=0．267）。结论AⅣ可通过DC瘤苗促进T淋巴细胞的增殖及杀伤肿瘤的活性，从而更有效地诱导抗胃癌特异性免疫应答。

关键词：树突状细胞黄芪甲苷胃癌抗肿瘤免疫

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凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿及基质金属蛋白酶9和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

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中西医结合学报 2010年第4期8卷 347-351页

作者：何春燕黄建华王文健金妙文叶放吴海涛陈伟华吴勉华南京中医药大学中医学博士后流动站江苏南京210029 复旦大学中西医结合研究所上海200040 南京中医药大学第一临床医学院中医内科教研室江苏南京210029 南京中医药大学基础医学院细胞生物学实验室江苏南京210029

目的:探讨中药凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿的作用及其机制。方法:采用自体血纹状体注射方法制备大鼠脑出血模型。实验大鼠分为假手术组、模型组和凉血通瘀方组。凉血通瘀方组给予凉血通瘀煎剂灌胃,余两组给予生理盐水灌胃,每日1次。... 详细信息

目的:探讨中药凉血通瘀方对脑出血大鼠脑水肿的作用及其机制。方法:采用自体血纹状体注射方法制备大鼠脑出血模型。实验大鼠分为假手术组、模型组和凉血通瘀方组。凉血通瘀方组给予凉血通瘀煎剂灌胃,余两组给予生理盐水灌胃,每日1次。脑出血后24、48、72和120 h观察大鼠脑水肿情况,明胶酶谱法检测脑血肿周围组织内基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)活性,荧光定量实时聚合酶链式反应法检测MMP-9和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissueinhibitor ofmetalloproteinase-1,TIMP-1)的表达水平。结果:凉血通瘀方组大鼠脑水肿程度在各时间点均显著低于模型组(P<0.01),仅在72 h其脑组织含水量高于假手术组(P<0.01)。与模型组相比,凉血通瘀方组的MMP-9酶原水平及活性均显著降低,其mRNA水平亦在脑出血后48、72、120 h低于模型组(P<0.01),而TIMP-1 mRNA水平在各时间点均显著升高(P<0.01)。结论:凉血通瘀方可能通过上调TIMP-1表达来抑制MMP-9水平,从而减轻脑出血大鼠脑水肿。

关键词：脑出血基质金属蛋白酶9 基质金属蛋白酶组织抑制剂1 复方大鼠

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胚鼠腹侧中脑和胚肾联合移植治疗Parkinson病的实验研究

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神经解剖学杂志 2005年第2期21卷 143-146页

作者：曾水林郑鸿燕李涛朱建宝东南大学神经生物学研究所南京210009 南京中医药大学基础医学院解剖学教研室南京210029

为了提高移植多巴胺(DA)能神经元的存活率和促进神经元生长,将胚鼠腹侧中脑和胚肾联合移植入Parkinson病(PD)模型大鼠脑内,检测胚肾对移植DA能神经元的影响。先用神经毒剂6 OHDA损毁大鼠左侧中脑被盖腹侧区和黑质致密部建立PD动物模型,... 详细信息

为了提高移植多巴胺(DA)能神经元的存活率和促进神经元生长,将胚鼠腹侧中脑和胚肾联合移植入Parkinson病(PD)模型大鼠脑内,检测胚肾对移植DA能神经元的影响。先用神经毒剂6 OHDA损毁大鼠左侧中脑被盖腹侧区和黑质致密部建立PD动物模型,再将胚脑的腹侧中脑(A组)、胚脑的腹侧中脑和胚肾(B组)分别移植入左侧纹状体尾壳核,C组为空白对照。于移植后3d、1月、3月将动物处死,采用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化法观察3组动物移植部位DA能神经元的存活和生长状况。在移植部位可见B组较A组的TH阳性神经元和纤维的数量明显增多,C组的移植部位未见TH阳性神经元和纤维;A、B两组的移植针道及其周围也有TH阳性神经元和纤维;B组的TH阳性神经元数量、体积和神经纤维的密度均大于A组。移植1个月和3个月后,A、B两组大鼠的旋转行为均较C组减少(P<0. 05)。以上结果提示胚肾具有良好的神经营养作用,能促进移植DA能神经元的存活和生长。

关键词：胚鼠腹侧中脑胚肾联合移植治疗 Parkinson病多巴胺能神经元

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口腔癌前病变细胞凋亡的原位观察与分析

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口腔医学 2005年第1期25卷 52-54页

作者：范媛詹瑧彭涛宋晓陵冯振卿南京中医药大学基础医学院微生物学教研室南京210029 南京医科大学基础医学院病理学教研室南京210029 南京医科大学口腔医学院病理科南京210029

目的　探讨口腔白斑、扁平苔藓的癌变机制。方法　通过原位末端转移酶标记法 ,观察分析 10例正常口腔黏膜上皮 ,18例扁平苔藓 ,2 3例白斑 ,2 2例鳞癌上皮组织凋亡状况。结果　除单纯上皮增生 ,非糜烂型扁平苔藓外 ,上皮 (轻、中、重 )... 详细信息

目的　探讨口腔白斑、扁平苔藓的癌变机制。方法　通过原位末端转移酶标记法 ,观察分析 10例正常口腔黏膜上皮 ,18例扁平苔藓 ,2 3例白斑 ,2 2例鳞癌上皮组织凋亡状况。结果　除单纯上皮增生 ,非糜烂型扁平苔藓外 ,上皮 (轻、中、重 )异常增生 ,鳞癌及糜烂型扁平苔藓的凋亡指数均高于正常 ,差异有显著性。从上皮异常增生到鳞癌凋亡指数逐渐增高 ,糜烂型扁平苔藓的凋亡指数低于鳞癌 ,差异有显著性。结论　细胞凋亡参与白斑癌变的过程 ,在病变不同阶段作用不同。

关键词：口腔白斑扁平苔藓凋亡原位

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大鼠胚肾组织促帕金森病移植神经元存活的实验研究

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东南大学学报（医学版） 2004年第2期23卷 104-108页

作者：郑鸿燕曾水林李涛朱建宝花菊兰南京中医药大学基础医学院解剖学教研室江苏南京210029 东南大学基础医学院神经生物学研究所江苏南京210009

目的 :探讨大鼠胚肾组织对帕金森病移植神经元的促存活作用。方法 :用神经毒剂 6 OHDA单侧损毁SD大鼠左侧中脑被盖腹侧区 (VTA)和黑质致密部 (SNC)建立动物模型。实验分 3组 :A组将胚鼠腹侧中脑组织 (VM )预置于胚肾组织培养液中 ;B组... 详细信息

目的 :探讨大鼠胚肾组织对帕金森病移植神经元的促存活作用。方法 :用神经毒剂 6 OHDA单侧损毁SD大鼠左侧中脑被盖腹侧区 (VTA)和黑质致密部 (SNC)建立动物模型。实验分 3组 :A组将胚鼠腹侧中脑组织 (VM )预置于胚肾组织培养液中 ;B组将VM组织预置于胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)营养液中 ;C组将VM组织预置于DMEM营养液中。 6h后移植 ,于移植后 1、4、7d将动物处死 ,采用原位末端标记法 (TUNEL)结合流式细胞术及免疫组织化学方法对 3组移植神经元凋亡和存活情况进行定量分析。结果 :根据TUNEL、酪氨酸羟化酶 (TH)染色和流式细胞仪检测结果 ,A、B移植组较C移植组移植神经元凋亡率降低 ,凋亡细胞数减少 ,纹状体移植针道和针道周围都可见大量TH阳性细胞 ,而且TH阳性神经元数量明显增多。另外 ,A移植组和B移植组TH阳性神经元和凋亡细胞数比较也存在统计学差异。结论 :胚肾组织分泌物对帕金森病移植神经元具有促存活作用 ;胚肾组织培养液较单一生长因子作用好。

关键词：帕金森病神经移植胚肾组织细胞凋亡神经营养因子

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微生态制剂益康口服液对微循环和血栓形成的影响

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中国微生态学杂志 2003年第5期15卷 258-258,260页

作者：许明孙立雯王明艳中国人民武装警察部队药品检验所北京102613 大连科达药业有限公司辽宁大连116024 南京中医药大学基础医学院细胞生物学教研室江苏南京210029

目的 :观察益康口服液 (双歧杆菌、乳酸链球菌、人参、茯苓、黄芪等 )对微动脉 (A)、微静脉 (V)及微静脉血流速度 (v)的作用和大鼠血栓形成的影响。方法 :体微循环实验观察微生态制剂益康口服液对正常小鼠耳廓微循环的影响 ;利用大鼠体... 详细信息

目的 :观察益康口服液 (双歧杆菌、乳酸链球菌、人参、茯苓、黄芪等 )对微动脉 (A)、微静脉 (V)及微静脉血流速度 (v)的作用和大鼠血栓形成的影响。方法 :体微循环实验观察微生态制剂益康口服液对正常小鼠耳廓微循环的影响 ;利用大鼠体外颈总动脉 -颈外静脉血流旁路法形成血小板血栓 ,观察益康口服液对大鼠血栓形成的影响。结果 :益康口服液能明显扩张微动脉、微静脉 ,明显加快微静脉血流速度 ;提示其具有较好的改善微循环作用。结论 :益康口服液能够抑制大鼠血栓的形成 ,提示其具有抗血小板粘附聚集作用。

关键词：微生态制剂益康口服液微循环血栓形成

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微生态制剂益康口服液对老年大鼠血液流变学的影响

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中国微生态学杂志 2003年第4期15卷 220-220页

作者：许明孙立雯王明艳中国人民武装警察部队药品检验所北京102613 大连科达药业公司辽宁大连11602 南京中医药大学基础医学院细胞生物学教研室江苏南京210029

目的 :研究微生态制剂益康口服液 (由双歧杆菌、乳酸链球菌与中药人参、茯苓、黄芪等药物组成 )对老年大鼠血液流变学的影响。方法 :大鼠按鼠龄、体重随机分为 7组 ,每组 10只 (除青年组外其余各组均采用鼠龄 2 4个月大鼠 ) :(1)青年组... 详细信息

目的 :研究微生态制剂益康口服液 (由双歧杆菌、乳酸链球菌与中药人参、茯苓、黄芪等药物组成 )对老年大鼠血液流变学的影响。方法 :大鼠按鼠龄、体重随机分为 7组 ,每组 10只 (除青年组外其余各组均采用鼠龄 2 4个月大鼠 ) :(1)青年组、(2 )老年组、(3)抗老延年丸组、(4 )复方丹参片组、(5 )益康口服液Ⅰ组、(6 )益康口服液Ⅱ组、(7)益康口服液Ⅲ组。连续ig 14d ,每日 1次 ,在第 14天ig 30min后 ,取颈动脉血进行血液流变学测试。资料结果采用student t检验。结果 :益康口服液能够降低老年大鼠全血与血浆粘度 ,增强红细胞的变形性 ,降低红细胞的聚集性。结论 :益康口服液可以改善老年大鼠的血液流变性 ,通过活血化瘀改善循环延缓衰老。

关键词：微生态制剂益康口服液血液流变学抗衰老

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表皮生长因子影响肿瘤患者舌苔变化的分子机制研究

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第6期18卷 598-600页

作者：许冬青王明艳狄洌詹瑧南京中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室江苏南京210029 南京农业大学理学院

目的　研究表皮生长因子 (EGF)对食管癌细胞Eca 10 9细胞周期及表皮生长因子受体 (EGF R)表达的影响 ,探讨EGF促进肿瘤患者舌苔增厚的分子机制。方法　应用流式细胞术 ,检测EGF R的表达和细胞周期。结果　EGF能明显促进Eca 10 9细胞膜上... 详细信息

目的　研究表皮生长因子 (EGF)对食管癌细胞Eca 10 9细胞周期及表皮生长因子受体 (EGF R)表达的影响 ,探讨EGF促进肿瘤患者舌苔增厚的分子机制。方法　应用流式细胞术 ,检测EGF R的表达和细胞周期。结果　EGF能明显促进Eca 10 9细胞膜上EGF R的表达 ,使细胞增殖活性大大增强。结论　EGF有可能是通过促进EGF

关键词：分子机制表皮生长因子细胞周期流式细胞术舌苔食管癌

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