检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2025年第5期50卷 1331-1339页

作者：赵梓彤涂鹏程孙孝先潘娅岚郭杨王礼宁马勇南京中医药大学中西医结合学院江苏南京210023 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京中医药大学无锡附属医院江苏无锡214071 南京中医药大学中西医结合护理研究所江苏南京210029

明确灵仙新苷保护骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)免受缺氧诱导的细胞凋亡的作用及机制。采用骨片法提取骨髓间充质干细胞,流式细胞技术鉴定BMSCs;在正常培养状态(37℃,5%CO_(2))和缺氧状态(37℃,90%N_(2),... 详细信息

明确灵仙新苷保护骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)免受缺氧诱导的细胞凋亡的作用及机制。采用骨片法提取骨髓间充质干细胞,流式细胞技术鉴定BMSCs;在正常培养状态(37℃,5%CO_(2))和缺氧状态(37℃,90%N_(2),5%CO_(2))培养BMSCs,同时使用灵仙新苷进行干预,将BMSCs分为空白组(正常状态培养)、灵仙新苷组(正常状态培养+灵仙新苷)、缺氧24 h组(缺氧状态培养24 h)、灵仙新苷缺氧24 h组(缺氧状态培养24 h+灵仙新苷)、缺氧48 h组(缺氧状态培养48 h)、灵仙新苷缺氧48 h组(缺氧状态培养48 h+灵仙新苷)、缺氧72 h组(缺氧状态培养72 h)、灵仙新苷缺氧72 h组(缺氧状态培养72 h+灵仙新苷)8组,cell counting kit-8(CCK-8)检测各组细胞的增殖活性,TUNEL法检测细胞凋亡率,MitoTracker■Red CM-H2XRo线粒体染色检测线粒体总量,DCFH-DA荧光探针染色检测细胞内活性氧水平,JC-1染色检测细胞线粒体膜电位,Western blot检测细胞内B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,BAX)、半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3)和视神经萎缩蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)蛋白的表达变化。结果显示,灵仙新苷可以显著提高细胞的增殖活性;与空白组相比,缺氧组的BMSCs凋亡率显著增加,线粒体数量显著减少,ROS水平显著升高,线粒体膜电位显著下降,BAX和caspase-3蛋白表达显著升高,OPA1蛋白表达显著下降;与相同缺氧时间下的缺氧组相比,灵仙新苷干预后细胞凋亡率显著下降,线粒体数量显著增多,ROS水平显著下降,线粒体膜电位显著升高,BAX和caspase-3蛋白表达显著下降,OPA1蛋白表达显著升高。由此得出,灵仙新苷可能通过调控OPA1来维持BMSCs线粒体稳态,从而发挥对缺氧环境下的BMSCs的抗凋亡作用。

关键词：灵仙新苷骨髓间充质干细胞细胞凋亡线粒体稳态 OPA1

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齐墩果酸液晶纳米温敏凝胶大鼠鼻腔给药药动学及脑靶向性研究

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中国医院药学杂志 2025年

作者：施之琪李卿贾凡王卿南京中医药大学附属无锡医院中医药研究所梁溪区中医医院药剂科无锡市中医药研究所中药研究室

目的：制备齐墩果酸液晶纳米温敏凝胶，并考察其体内药动学及脑靶向性。方法：以泊洛沙姆F127和F68为凝胶基质，制备齐墩果酸立方液晶纳米温敏凝胶（简称OANG），并对F127和F68的配比进行研究。大鼠分别鼻腔给药OANG和静脉注射齐墩果酸... 详细信息

目的：制备齐墩果酸液晶纳米温敏凝胶，并考察其体内药动学及脑靶向性。方法：以泊洛沙姆F127和F68为凝胶基质，制备齐墩果酸立方液晶纳米温敏凝胶（简称OANG），并对F127和F68的配比进行研究。大鼠分别鼻腔给药OANG和静脉注射齐墩果酸混悬液后采血，LC-MS测定血浆和脑组织中齐墩果酸的浓度，计算主要药动学参数。结果：凝胶的相变温度为34℃，体外渗透试验表明，齐墩果酸从OANG中释放具有明显的缓释特征，符合Higuchi动力学方程；透射电镜测试结果表明，齐墩果酸液晶纳米粒在OANG中分散均匀；大鼠体内药动学试验结果表明，与静脉注射给药相比，OANG鼻腔给药大鼠脑组织AUC0～t升高1.21倍，MRT0～t延长1.07倍，脑靶向效率（BTE）、鼻脑直接转移率（DTF）和绝对生物利用度（F）分别为129.21%、9.44%、9.68%。结论：齐墩果酸液晶纳米温敏凝胶鼻腔给药具有一定脑靶向性，可增加药物在脑组织中的分布。

关键词：齐墩果酸温敏凝胶药动学液晶纳米鼻腔给药

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基于OPA1调控线粒体稳态研究姜黄素对HUVECs增殖、迁移的双向调节作用

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中华中医药杂志 2023年第10期38卷 4913-4918页

作者：李彬涂鹏程郭杨潘娅岚孙杰杨光露王礼宁梁众擎马勇南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210029

目的:基于O P A1介导的线粒体稳态明确不同浓度姜黄素双向调节人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的药理作用及机制。方法:高糖DMEM完全培养基培养HUVECs,CD31荧光染色鉴定;不同浓度姜黄素干预HUVECs,CCK8检测增殖活性,结晶紫染色... 详细信息

目的:基于O P A1介导的线粒体稳态明确不同浓度姜黄素双向调节人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的药理作用及机制。方法:高糖DMEM完全培养基培养HUVECs,CD31荧光染色鉴定;不同浓度姜黄素干预HUVECs,CCK8检测增殖活性,结晶紫染色检测克隆增殖状态;细胞划痕实验及Transwell实验检测其迁移能力;RT-qPCR检测HUVECs的VEGFα、HIF-1αmRNA水平;ROS、JC-1试剂盒检测HUVECs ROS水平及线粒体膜电位;Western Blotting检测HUVECs OPA1及其下游蛋白表达。结果:20、30、50μmol/L姜黄素显示显著的HUVECs增殖抑制效果(P<0.01),1μmol/L姜黄素能够促进HUVECs的克隆增殖;与Ctrl组比较,1、10μmol/L姜黄素能够显著促进HUVECs迁移(P<0.01),20、30μmol/L姜黄素能够显著抑制HUVECs细胞迁移(P<0.01);20、30μmol/L姜黄素能够显著抑制HIF-1αmRNA水平(P<0.05);与Ctrl组比较,20μmol/L姜黄素显著上调HUVECsROS水平(P<0.05),20、30μmol/L姜黄素能够显著降低HUVECs线粒体活性(P<0.05);与Ctrl组比较,1、10μmol/L姜黄素均能够显著上调OPA1蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:以10μmol/L为区分,不同浓度的姜黄素对HUVECs的增殖、迁移发挥双向调节作用,并且这一作用与OPA1介导的线粒体稳态密切相关。

关键词：姜黄素线粒体稳态血管内皮细胞 OPA1

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基于16S rDNA分析脊髓康对脊髓损伤小鼠肠道菌群的影响

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中华中医药杂志 2023年第3期38卷 1009-1014页

作者：杨光露马勇郭杨潘娅岚刘孟敏吴承杰涂鹏程南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210023

目的:探讨脊髓康对脊髓损伤(SCI)小鼠肠道菌群的影响。方法:将64只C57BL/6小鼠随机分为假手术+生理盐水组、假手术+脊髓康组、SCI+生理盐水组、SCI+脊髓康组;采用改良Allen’s法建立小鼠SCI模型;用后肢运动功能(BMS)评分及斜板试验评估... 详细信息

目的:探讨脊髓康对脊髓损伤(SCI)小鼠肠道菌群的影响。方法:将64只C57BL/6小鼠随机分为假手术+生理盐水组、假手术+脊髓康组、SCI+生理盐水组、SCI+脊髓康组;采用改良Allen’s法建立小鼠SCI模型;用后肢运动功能(BMS)评分及斜板试验评估小鼠后肢运动功能,HE染色观察脊髓组织形态;采集粪便进行16S rDNA测序分析。结果:BMS评分和斜板试验显示,脊髓康可促进小鼠运动功能恢复;HE染色显示脊髓康可改善受损脊髓组织形态。16S rDNA测序分析显示,SCI小鼠Verrucomicrobia、Elusimicrobia、Akkermansia、Barnesiella等占比显著下降(P<0.05),Alistipes等占比显著增加(P<0.05),脊髓康可逆转以上大部分菌群的占比趋势。结论:脊髓康可调节SCI小鼠肠道菌群结构,促进SCI修复,改善小鼠运动功能。

关键词：脊髓损伤脊髓康肠道菌群 16S rDNA测序

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枳壳甘草汤对椎间盘退变大鼠生物钟基因表达的影响

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中华中医药杂志 2025年第2期40卷 516-523页

作者：黄泽灵徐波陆斌杰蔡学峰裴帅刘昱江祝学思沈晓峰李宇卫南京中医药大学附属苏州市中医医院苏州215009 苏州市吴门医派研究院骨伤研究所苏州215009

目的:研究枳壳甘草汤对大鼠椎间盘退变(IDD)及髓核组织生物钟相关基因表达的影响。方法:60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、塞来昔布组及枳壳甘草汤低、中、高剂量组,每组10只。大鼠尾椎间盘针刺构建IDD模型。各组予相应药物干预后取... 详细信息

目的:研究枳壳甘草汤对大鼠椎间盘退变(IDD)及髓核组织生物钟相关基因表达的影响。方法:60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、塞来昔布组及枳壳甘草汤低、中、高剂量组,每组10只。大鼠尾椎间盘针刺构建IDD模型。各组予相应药物干预后取材,X线扫描及病理染色检测大鼠尾椎间盘病理改变,酶联免疫吸附法检测尾椎间盘组织炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR检测椎间盘髓核组织生物钟相关mRNA表达水平,Western Blot检测椎间盘髓核组织细胞外基质及生物钟相关蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组尾椎间盘高度指数显著降低(P<0.01),病理改变明显,椎间盘IL-1β、IL-6、TNF-α及ADAMTS4、MMP3蛋白表达显著升高(P<0.01),IL-4,Aggrecan、CollagenⅡ蛋白及Bmal1、Clock、Rev-erbα、Rorα、Per1、Cry1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,塞来昔布组及枳壳甘草汤中、高剂量组大鼠尾椎间盘高度指数显著升高(P<0.01),病理改变减轻,椎间盘IL-1β、IL-6、TNF-α及ADAMTS4、MMP3蛋白表达显著降低(P<0.01),IL-4及Aggrecan、CollagenⅡ蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05),塞来昔布组Clock、Rev-erbα、Rorα、Per1、Cry1 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05),枳壳甘草汤高剂量组Bmal1、Clock、Rev-erbα、Rorα、Per1、Cry1 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:枳壳甘草汤可以抑制退变椎间盘髓核组织炎症及细胞外基质降解,延缓IDD,内在机制可能与其对生物钟基因的调控有关。

关键词：腰痛椎间盘退变生物钟炎症因子细胞外基质枳壳甘草汤

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负载威灵仙总皂苷丝素蛋白微载体复合软骨细胞促进兔膝关节软骨缺损修复的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2022年第3期36卷 343-351页

作者：涂鹏程马勇潘娅岚汪志芳孙杰陈凯杨光露王礼宁刘孟敏郭杨南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210023 南京中医药大学张家港附属医院中医骨伤科江苏苏州215699

目的制备负载威灵仙总皂苷(clematis total saponins,CTS)丝素蛋白微载体,探讨其复合软骨细胞后促进兔膝关节软骨缺损修复的效果。方法取5%丝素蛋白溶液与10 mg/mL CTS溶液、甘油混匀后,利用高压静电场结合冷冻干燥方法制备负载CTS丝素... 详细信息

目的制备负载威灵仙总皂苷(clematis total saponins,CTS)丝素蛋白微载体,探讨其复合软骨细胞后促进兔膝关节软骨缺损修复的效果。方法取5%丝素蛋白溶液与10 mg/mL CTS溶液、甘油混匀后,利用高压静电场结合冷冻干燥方法制备负载CTS丝素蛋白微载体,扫描电镜对样本表征并检测CTS累积释放量;同时制备丝素蛋白微载体。取6只4周龄新西兰大白兔膝关节软骨,分离培养软骨细胞并传代。取第3代细胞分别与两种微载体在微重力条件下共培养7d,期间倒置相差显微镜及扫描电镜观察软骨细胞在微载体上黏附情况,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖活性,并与正常培养细胞比较。取30只3月龄新西兰大白兔制备双侧膝关节软骨缺损模型后随机分为3组(n=20),A组膝关节软骨缺损不作任何处理,B、C组分别采用丝素蛋白微载体-软骨细胞复合物、负载CTS丝素蛋白微载体-软骨细胞复合物填充关节软骨缺损。术后12周取材,ELISA检测关节液基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、MMP-13、MMP组织抑制因子1(tissue inhibitor of MMP 1,TIMP-1)水平;大体观察及组织学观察(HE、甲苯胺蓝染色)评估软骨缺损修复情况;Western blot检测Ⅱ型胶原及蛋白聚糖表达;组织学及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)免疫组织化学染色观察关节滑膜炎症程度。结果负载CTS丝素蛋白微载体呈类球形,直径主要在300~500μm之间,表面呈多孔结构,孔隙率达35.63%±3.51%;药物缓释检测示微载体中CTS可长期缓慢释放。微重力条件下随培养时间延长,两种微载体表面黏附的软骨细胞逐渐增多,培养24 h时软骨细胞增殖活性均较正常培养细胞提高(P<0.05),两种微载体间差异无统计学意义(P>0.05)。动物体内实验观察,与A、B组相比,C组关节液中MMP-9、MMP-13含量均降低(P<0.05),TIMP-1含量上调(P<0.05)。与A组相比,B、C组软骨缺损均有组织填充,且C组修复表面更完整,与周围软骨结合较好;组织学观察及Western blot检测显示B、C组国际软骨修复评分准则(ICRS)评分以及Ⅱ型胶原、蛋白聚糖相对表达量均优于A组,C组优于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。关节滑膜组织学观察显示,与A、B组相比,C组滑膜炎症细胞浸润及小血管增生减少,免疫组织化学染色示C组iNOS表达水平降低(P<0.05)。结论负载CTS丝素蛋白微载体具有良好的CTS缓释效果及生物相容性,在微重力条件下能促进共培养的软骨细胞增殖,植入体内后能促进兔膝关节软骨缺损修复。

关键词：软骨组织工程软骨修复丝素蛋白威灵仙总皂苷微重力细胞培养兔

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狄氏副拟杆菌作用与中药调控研究进展

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中国中药杂志 2024年第22期49卷 5988-5997页

作者：龙丹秦梦陈培鹏黄鑫曹雅婷殷爱玲陈月月王海丹郭云柯王璇孙海建单进军周伟多靶标天然药物全国重点实验室中国药科大学中药学院江苏南京210009 南京中医药大学附属南京中医院江苏南京210001 南京中医药大学附属医院江苏南京210029 同济大学附属同济医院风湿免疫科上海200065 江南大学无锡医学院江苏无锡214028 南京中医药大学医学代谢组学中心江苏省儿童呼吸道疾病重点实验室南京中医药大学中医儿科学研究所江苏南京210000

狄氏副拟杆菌Parabacteroides distasonis是1933年首次从临床样本中分离出来的一种革兰阴性菌,于2006年被归类至副拟杆菌属。***可调节肠道屏障功能,在机体免疫应答和代谢调节中发挥重要作用。此外,中药与肠道菌群有紧密联系,中药中的... 详细信息

狄氏副拟杆菌Parabacteroides distasonis是1933年首次从临床样本中分离出来的一种革兰阴性菌,于2006年被归类至副拟杆菌属。***可调节肠道屏障功能,在机体免疫应答和代谢调节中发挥重要作用。此外,中药与肠道菌群有紧密联系,中药中的多糖、皂苷等成分可通过与***相互作用治疗疾病,但背后作用机制尚未明确还需深入研究。该文综述了肠道共生菌***在炎症免疫性疾病、代谢性疾病、心血管疾病、神经精神疾病和癌症等疾病中的作用和相关机制,并总结了中药调控***防治疾病的相关研究成果,为***的进一步探索及中药与肠道菌群的相互作用研究提供参考依据。

关键词：狄氏副拟杆菌中药肠道菌群药理作用

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枳壳甘草汤对椎间盘退变模型大鼠尾椎间盘髓核组织细胞凋亡及Hippo-YAP/TAZ信号通路的影响

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中医杂志 2025年第5期66卷 509-517页

作者：朱在师黄泽灵陈俊名徐波陆斌杰陈华段星星李宇卫沈晓峰南京中医药大学附属苏州市中医医院江苏省苏州市215009 苏州市吴门医派研究院骨伤研究所

目的基于河马(Hippo)-Yes相关蛋白(YAP)/带有PDZ结合基序的转录共激活因子(TAZ)信号通路探讨吴门枳壳甘草汤延缓椎间盘退变的可能作用机制。方法50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、枳壳甘草汤低剂量组、枳壳甘草汤高剂量组、枳壳甘... 详细信息

目的基于河马(Hippo)-Yes相关蛋白(YAP)/带有PDZ结合基序的转录共激活因子(TAZ)信号通路探讨吴门枳壳甘草汤延缓椎间盘退变的可能作用机制。方法50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、枳壳甘草汤低剂量组、枳壳甘草汤高剂量组、枳壳甘草汤高剂量+抑制剂组,每组10只。假手术组大鼠采用21G针头在尾部Co6/7/8节段穿刺皮肤和肌肉(深度约为2 mm),不损伤椎间盘,其余各组大鼠在尾部Co6/7/8节段用21G针头穿刺尾椎间盘5 mm建立椎间盘退变大鼠模型。造模1周后,枳壳甘草汤低、高剂量组分别予6.24、12.24 g/(kg·d)枳壳甘草汤灌胃,枳壳甘草汤高剂量+抑制剂组大鼠给予12.24 g/(kg·d)枳壳甘草汤灌胃后,按10 mg/kg腹腔注射YAP/TAZ抑制剂Verteporfin,假手术组与模型组大鼠予5 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。灌胃每日1次,腹腔注射隔日1次。各组均连续干预4周后,采用HE染色、番红O-固绿染色及甲苯胺蓝染色观察大鼠尾椎间盘病理改变;免疫组化法检测椎间盘髓核组织聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶3(MMP3)表达;Tunel荧光染色检测髓核组织细胞凋亡,计算凋亡率;Western blot法检测髓核组织中Hippo-YAP/TAZ信号通路[包括YAP、磷酸化Yes相关蛋白(p-YAP)、磷酸化20样激酶1/2(p-MST1/2)、带有PDZ结合基序的磷酸化转录共激活因子(p-TAZ)]及凋亡相关蛋白[包括剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase 3)、肿瘤基因P53(P53)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠椎间盘发生明显退行性改变,椎间盘髓核组织Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平降低,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率均上升(P<0.01)。与模型组比较,各药物干预组椎间盘退变均得到一定恢复,Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平均升高,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率均降低(P<0.05或P<0.01)。与枳壳甘草汤低剂量组比较,枳壳甘草汤高剂量组大鼠椎间盘退变恢复更显著,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率降低,Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平升高(P<0.05或P<0.01)。与枳壳甘草汤高剂量组比较,枳壳甘草汤高剂量+抑制剂组大鼠椎间盘退变恢复程度降低,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率升高,Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论枳壳甘草汤可能通过抑制椎间盘髓核组织YAP磷酸化,维持Hippo-YAP/TAZ信号通路功能,降低髓核细胞凋亡,从而延缓椎间盘退变。

关键词：椎间盘退变细胞凋亡 Yes相关蛋白带有PDZ结合基序的转录共激活因子枳壳甘草汤

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吴门枳壳甘草汤调控HIF-1α/VEGF/Ang信号轴抑制退变椎间盘病理性血管新生的机制研究

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中国药房 2025年第7期36卷 807-814页

作者：黄泽灵朱在师李宇卫徐波陈俊名张宝飞陆斌杰蔡学峰陈华南京中医药大学附属苏州市中医医院骨伤科江苏苏州215009 苏州市吴门医派研究院骨伤研究所江苏苏州215009 曲阜市中医院骨伤科山东曲阜273100

目的探讨枳壳甘草汤对退变椎间盘病理性血管新生的影响及机制。方法动物实验设置假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂(YC-1)组[2 mg/(kg·d),尾静脉注射]和枳壳甘草汤低、中、高剂量组[3.06、6.1... 详细信息

目的探讨枳壳甘草汤对退变椎间盘病理性血管新生的影响及机制。方法动物实验设置假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂(YC-1)组[2 mg/(kg·d),尾静脉注射]和枳壳甘草汤低、中、高剂量组[3.06、6.12、12.24 g/(kg·d),灌胃],每组8只。除假手术组外,其余各组均构建椎间盘退变大鼠模型。造模成功后,每天给药1次,连续3周。末次给药后,观察大鼠椎间盘组织病理改变及血管新生情况,检测大鼠椎间盘组织中炎症因子[白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平以及血管生成相关蛋白[HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体2(VEGFR2)、血管紧张素1(Ang 1)、Ang 2]表达水平。细胞实验中,提取并培养大鼠原代髓核细胞,以50 ng/mL TNF-α诱导细胞退变。设置空白对照组(10%空白对照血清)、TNF-α组(10%空白对照血清)、YC-1组(10%空白对照血清+0.2 mmol/L YC-1)和5%、10%、15%含药血清组(5%、10%、15%含药血清),干预24 h后,将髓核细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养。检测髓核细胞中Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)表达,检测HUVEC增殖、迁移、成管能力,检测HUVEC中HIF-1α/VEGF/Ang信号轴及血管生成相关蛋白(在动物实验基础上新增MMP-2、MMP-9)表达水平。结果动物实验结果显示,与模型组比较,各药物组大鼠椎间盘组织中CD31阳性表达减少(P<0.05),炎症因子及血管生成相关蛋白表达均显著下调(P<0.05),椎间盘病理改变减轻。细胞实验结果显示,与TNF-α组比较,各药物组髓核细胞中CollagenⅡ表达均显著上调、MMP-3表达均显著下调(P<0.05),HUVEC增殖、迁移及成管能力显著减弱(P<0.05),HUVEC中HIF-1α、VEGF、Ang 2 mRNA及蛋白和血管生成相关蛋白(除5%含药血清组的Ang 2 mRNA及HIF-1α、VEGFR2、Ang 2蛋白)表达均显著下调(P<0.05)。结论枳壳甘草汤可能通过抑制HIF-1α/VEGF/Ang信号轴,减弱血管内皮细胞的血管生成能力,改善椎间盘病理性血管新生,延缓椎间盘退变。

关键词：枳壳甘草汤椎间盘退变病理性血管新生 HIF-1α/VEGF/Ang信号轴髓核细胞退变炎症因子

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模拟微重力环境下威灵仙维持兔膝关节软骨细胞表型的效应与机制

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中国现代应用药学 2022年第1期39卷 12-19页

作者：涂鹏程马勇郭杨潘娅岚吴承杰杨光露孙杰王礼宁南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学第一临床医学院南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210023

目的研究模拟微重力培养环境下威灵仙提取物对兔软骨细胞表型维持的作用及机制。方法利用液动力聚焦细胞培养系统体外模拟微重力培养环境,同时使用威灵仙提取物进行干预,将兔膝关节软骨细胞分为空白组(平面培养)、威灵仙组(平面培养+威... 详细信息

目的研究模拟微重力培养环境下威灵仙提取物对兔软骨细胞表型维持的作用及机制。方法利用液动力聚焦细胞培养系统体外模拟微重力培养环境,同时使用威灵仙提取物进行干预,将兔膝关节软骨细胞分为空白组(平面培养)、威灵仙组(平面培养+威灵仙提取物)、微重力组(微重力培养)、微重力-威灵仙组(微重力培养+威灵仙提取物)4组,培养7 d;观察各组软骨细胞形态学变化,CCK-8检测各组细胞增殖活性,流式细胞技术检测各组软骨细胞凋亡率;RT-qPCR检测成软骨相关mRNAⅡ型胶原蛋白、蛋白多糖、TGF-β、SOX9,以及与软骨去分化相关mRNA MMP13、Ⅰ型胶原蛋白;Western blotting检测Ⅱ型胶原蛋白、蛋白聚糖、TGF-β及MMP13蛋白表达;同时对细胞内葡萄糖、ATP、乳酸含量进行检测,评估各组软骨细胞能量代谢状态。结果形态学观察显示微重力组、微重力-威灵仙组软骨细胞保持良好形态,空白组、威灵仙组梭形细胞增多。与空白组相比,模拟微重力培养条件与威灵仙提取物均能提高软骨细胞48,72 h的增殖活性,降低细胞凋亡率,上调蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白、TGF-β的蛋白及mRNA表达,降低MMP13的蛋白及mRNA表达,上调SOX9 mRNA表达,降低Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达,上调软骨细胞内葡萄糖、ATP、乳酸含量,两者结合效果最为显著(P<0.01)。结论模拟微重力培养环境与威灵仙提取物均能够促进软骨细胞能量代谢,保持增殖活性以及软骨细胞表型维持,而二者联合应用可以发挥协同作用。

关键词：威灵仙模拟微重力软骨细胞表型维持能量代谢

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