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2010中药炮制技术、学术交流暨产业发展高峰论坛

作者：蔡皓王丹丹刘晓陈军蔡宝昌南京中医药大学药学院南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室南京海昌中药饮片有限公司

目的:研究马钱子碱,马钱子砂烫炮制品总生物碱与马钱子粉在大鼠体内的不同药动学规律,探寻单成分与整体之间的相互影响。方法:给各组大鼠分别灌胃给予马钱子碱溶液,马钱子砂烫炮制品总碱溶液及马钱子粉混悬液,采用高效液相色谱（HPLC）... 详细信息

目的:研究马钱子碱,马钱子砂烫炮制品总生物碱与马钱子粉在大鼠体内的不同药动学规律,探寻单成分与整体之间的相互影响。方法:给各组大鼠分别灌胃给予马钱子碱溶液,马钱子砂烫炮制品总碱溶液及马钱子粉混悬液,采用高效液相色谱（HPLC）测定大鼠体内马钱子碱的血浆浓度,血药浓度—时间曲线经3P97软件包进行房室模型拟合并计算和比较各组药物动力学参数。结果:马钱子碱在大鼠体内的代谢过程符合二室模型,权重W=1/C,方差分析结果表明,相同剂量的马钱子碱在3组不同的存在形式中,马钱子碱溶液组与马钱子砂烫炮制品总生物碱组在Cmax,MRT有显著性差异（P<0.05）;马钱子碱溶液组与马钱子粉混悬液组在Cmax,AUC0AUC。有显著性差异（P<0.05）,其中马钱子粉混悬液组Cmax,AUC0AUC最小。结论:马钱子砂烫炮制品总生物碱组可相对延长马钱子中有效成分马钱子碱的血浆滞留时间,马钱子粉混悬液组的生物利用度较低。

关键词：马钱子碱马钱子总生物碱马钱子粉药动学

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中药炮制辅料米醋的指纹图谱研究

中药炮制辅料米醋的指纹图谱研究

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世界中医药大会第五届夏季峰会

作者：陆金兰朱星宇刘玲张希琼徐柳陈志鹏李伟东南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210046 南京中医药大学药学院江苏南京210046

目的通过对不同产地和品牌的米醋进行指纹图谱研究,为建立中药炮制辅料醋的药用质量标准提供基础.方法收集33 批米醋,采用HPLC 方法,通过对流动相种类、色谱柱、洗脱程序、流动相pH 的考察,优化米醋HPLC 指纹图谱的分析方法,并对其中... 详细信息

目的通过对不同产地和品牌的米醋进行指纹图谱研究,为建立中药炮制辅料醋的药用质量标准提供基础.方法收集33 批米醋,采用HPLC 方法,通过对流动相种类、色谱柱、洗脱程序、流动相pH 的考察,优化米醋HPLC 指纹图谱的分析方法,并对其中20 批米醋指纹图谱进行相似度、聚类分析和主成分分析.结果米醋浓度以1∶3 稀释进样,色谱条件为色谱柱：Thermo Hypersil GOLD(5 μm,250mm×4.6 mm),流动相：0.07％磷酸水(pH=2.28～2.38)-甲醇梯度洗脱,流速：1 mL/min,柱温：30℃,进样量：10 μL.此时特征峰分离效果最佳.米醋分白醋和黑醋,其指纹图谱差异较大,白醋几乎只有一个醋酸峰,单从HPLC 方面无法判断配制白醋和酿造白醋的区别;20 批黑醋指纹图谱相似度差异较大,聚类分析和主成分将其聚为几类.将同一品牌恒顺不同类型的米醋进行相似度比较,发现相似度较高,可见同一品牌内的米醋由于酿造工序、原料相似,品质比较均一稳定.结论市场上的米醋种类繁多,质量也参差不齐,实验选择20 批常用黑米醋进行指纹图谱分析,比较不同种类米醋的差异,为中药炮制辅料醋的药用质量标准提供参考.

关键词：米醋指纹图谱 HPLC 药用质量标准

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不同炮制品的杜仲含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女成骨细胞增殖、分化的影响

不同炮制品的杜仲含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女成骨细...

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2014年全国中药炮制学术年会暨中药饮片创新发展论坛及协同创新联盟会议

作者：翁泽斌颜翠萍高倩倩赵根华陈志鹏蔡宝昌李伟东南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京中医药大学药学院江苏省泰州市药检所

[目的]研究杜仲盐炙前后含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女的成骨细胞增殖和分化的影响。探讨杜仲对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品入药的必要性。[方法]以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,给予大鼠生品... 详细信息

[目的]研究杜仲盐炙前后含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女的成骨细胞增殖和分化的影响。探讨杜仲对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品入药的必要性。[方法]以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,给予大鼠生品及盐炙品杜仲水提液灌胃(10 mL·kg),给药持续7 d,第7天采集大鼠血液制备含药血清。实验分为空白对照组、空白血清组、杜仲含药血清组、盐杜仲含药血清组。以雌二醇作为对照阳性药物。采用MTT法检测各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞增殖的影响;同时测量成骨细胞碱性磷酸酶活性来评价各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞分化的作用。[结果]杜仲生品和盐炙品含药血清均能促进入成骨细胞的增殖,提高碱性磷酸酶的活性,且血清浓度为20%时,杜仲盐炙品含药血清对成骨细胞增殖、分化的促进作用显著优于生品（P<0.01）;同时杜仲中4种环烯醚萜类成分对人成骨细胞的增殖和分化均有促进作用。[结论]杜仲生品和盐炙品含药血清均具有良好的促进人成骨细胞增殖和分化的作用,其中盐炙品的作用显著优于生品。杜仲中环烯醚萜类成分可能是其补肾健骨作用的有效成分。

关键词：杜仲环烯醚萜盐炙成骨细胞骨质疏松症

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藏药镰形棘豆总生物碱提取纯化的研究

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西北药学杂志 2013年第6期28卷 551-555页

作者：詹珺雁燕珂杨光明王栋蔡宝昌连云港市第一人民医院连云港222002 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210023

目的研究藏药镰形棘豆总生物碱的提取纯化的最佳工艺。方法选择物料比、乙醇体积分数、醋酸体积分数和提取温度作为实验的考察因素,以酸性染料比色法测定吸光度为指标,采用正交实验优选镰形棘豆总生物碱的提取纯化最佳工艺。结果最优工... 详细信息

目的研究藏药镰形棘豆总生物碱的提取纯化的最佳工艺。方法选择物料比、乙醇体积分数、醋酸体积分数和提取温度作为实验的考察因素,以酸性染料比色法测定吸光度为指标,采用正交实验优选镰形棘豆总生物碱的提取纯化最佳工艺。结果最优工艺条件为以5mL·L-1醋酸的体积分数40%乙醇溶液为溶剂,物料比为1∶20,60℃超声提取2次,经732型阳离子交换树脂进行吸附,再以10mL·L-1 NH3·H2O的体积分数60%乙醇溶液超声提取树脂中的生物碱。结论优选的工艺稳定可行,能较好地提取镰形棘豆中的总生物碱,为今后从镰形棘豆中获得总生物碱提供了科学依据。

关键词：镰形棘豆总生物碱提取纯化

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山茱萸炮制过程中的红外光谱分析

山茱萸炮制过程中的红外光谱分析

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2014年全国中药炮制学术年会暨中药饮片创新发展论坛及协同创新联盟会议

作者：杨光明张玉玲李伟东潘扬蔡宝昌南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京中医药大学药用菌与中药生物技术研究所

目的:利用红外光谱技术,分析炮制过程中山茱萸红外光谱的宏观和指纹特征。方法:以酒蒸法炮制山茱萸药材,对炮制过程中不同时间点的酒萸肉饮片进行红外光谱信息采集并进行分析。结果:根据红外光谱信息,可以推断山茱萸中存在醇类、有机酸... 详细信息

目的:利用红外光谱技术,分析炮制过程中山茱萸红外光谱的宏观和指纹特征。方法:以酒蒸法炮制山茱萸药材,对炮制过程中不同时间点的酒萸肉饮片进行红外光谱信息采集并进行分析。结果:根据红外光谱信息,可以推断山茱萸中存在醇类、有机酸类、酯类等化合物,炮制过程中各类成分有规律地变化并趋于稳定,在3309 cm,1713cm,1020 cm有特征吸收。此外,在8～12 h炮制样品中羧酸含量最高,结合文献判断为最佳炮制时间。结论:该方法快速、方便,特征性强,可以识别山茱萸炮制品中的主体成分,为炮制工艺的优化提供科学的依据。

关键词：山茱萸红外光谱炮制

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槐花中黄酮类成分模拟炒炭后指标性产物Huaicarbon A/B的生成规律及其促进胶原诱导血小板聚集的机制研究

槐花中黄酮类成分模拟炒炭后指标性产物Huaicarbon A/B的生成规律...

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2016年全国中药炮制学术年会

作者：郁红礼陈叶青吴皓王奎龙刘丽萍王卫南京中医药大学药学院江苏南京 210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京 210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京 210023 南京中医药大学药学院江苏南京 210023

前期研究发现槐花中的黄酮类成分模拟炒炭加热产物Huaicarbon A/B具有显著的止血作用,为进一步研究其转化生成途径,揭示槐花中黄酮类成分在加热过程中的转化机制,将槲皮素(异鼠李素)与鼠李糖(葡萄糖)以不同摩尔比置于马弗炉中进行加热反...

前期研究发现槐花中的黄酮类成分模拟炒炭加热产物Huaicarbon A/B具有显著的止血作用,为进一步研究其转化生成途径,揭示槐花中黄酮类成分在加热过程中的转化机制,将槲皮素(异鼠李素)与鼠李糖(葡萄糖)以不同摩尔比置于马弗炉中进行加热反应,采用HPLC-MS/MS对加热反应产物进行分析验证.结果表明,槲皮素与鼠李糖在250℃/200℃反应即能转化生成huaicarbon A/B.增加鼠李糖的摩尔数可提高huaicarbon A/B的生成率,槲皮素与鼠李糖加热反应的最佳摩尔比为1∶3,此时,huaicarbon A/B的生成率分别为25％和16％.槲皮素与葡萄糖、异鼠李素与鼠李糖/葡萄糖加热反应未能生成huaicarbon A/B.表明槲皮素和鼠李糖是huaicarbon A/B的前体物质.为了进一步研究huaicarbon A/B促进胶原诱导的聚集的作用机制,本文采用体外血小板聚集实验,观察加入GPVI受体抑制剂(GPVI抗体)前后huaicarbon A/B对人血小板聚集及胞内Ca2+水平的影响.结果表明,huaicarbon A/B通过与血小板GPVI受体结合,增加胞内Ca2+的累积,从而促进胶原诱导的血小板聚集,而这种作用能被GPVI抗体阻断.本文研究表明Huaicarbon A/B通过激活血小板GPVI受体介导的信号通路促进胶原诱导的血小板聚集.此研究结果为槐花炭指标性成分的研究奠定基础.

关键词：

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补骨脂炮制前后水煎液致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤作用比较

补骨脂炮制前后水煎液致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤作用比较

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2022年(第二届)传统药物研究国际高峰论坛

作者：符映均吴育梅春梅华政颖李伟东南京中医药大学南通附属医院药剂科江苏南通 226000 南京中医药大学南通附属医院药剂科江苏南通 226000 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京 210023 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京 210023

目的探讨补骨脂炮制前后致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤的差异.方法采用高效液相色谱仪检测补骨脂炮制前后化学成分含量变化.雌性ICR小鼠连续30dig生、盐补骨脂水煎液,末次给药24h后,取血清,采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标丙氨... 详细信息

目的探讨补骨脂炮制前后致雌性ICR小鼠胆汁瘀积性肝损伤的差异.方法采用高效液相色谱仪检测补骨脂炮制前后化学成分含量变化.雌性ICR小鼠连续30dig生、盐补骨脂水煎液,末次给药24h后,取血清,采用全自动生化仪检测肝损伤相关指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平;取肝脏、脾脏和肾脏,称定质量并计算脏器指数,采用苏木素-伊红(HE)染色法进行肝脏病理组织学检查;采用ELISA法检测血清中雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肝脏中法尼醇受体(farnesoid X receptor,FXR)、雌激素硫酸转移酶1E1(sulfotransferase 1E1,SULT1E1)和E2含量.结果补骨脂经盐炙后补骨脂苷、异补骨脂苷、新补骨脂异黄酮含量下降,其余8种成分含量均升高,其中补骨脂素、异补骨脂素、corylifolA升高较为明显.雌性小鼠ig生、盐补骨脂水煎液30 d后出现生殖器损伤,小鼠阴道口红肿,有水样浸润.与对照组比较,生、盐补骨脂组小鼠血清ALT、AST、ALP活性及DBIL、TBIL、TBA水平均显著升高(P＜0.05、0.01、0.001),盐炙后补骨脂致肝损伤较生品更严重;肝脏FXR、SULT1E1含量显著降低(P＜0.01、0.001),血清E2、FSH、IL-6和肝脏E2含量均显著升高(P＜0.05、0.01、0.001).盐补骨脂与生补骨脂比较,IL-6升高更明显,FXR、SULT1E1下降更明显.结论补骨脂素、异补骨脂素和Corylifol A可能是补骨脂药效成分同时也可能是其主要毒性成分,盐补骨脂较生补骨脂更易造成肝损伤.

关键词：补骨脂盐炙胆汁瘀积性肝损伤雌激素样作用补骨脂素异补骨脂素 corylifol A 补骨脂苷异补骨脂苷新补骨脂异黄酮

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半夏、掌叶半夏凝集素蛋白与毒针晶毒性的相关性研究

半夏、掌叶半夏凝集素蛋白与毒针晶毒性的相关性研究

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2012年全国有毒中药的研究及其合理应用交流研讨会

作者：郁红礼吴皓朱法根陶文婷邱韵萦南京中医药大学药学院南京中国210029 江苏省中药炮制重点实验室南京中国210046 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京中国210029 南京中医药大学药学院南京中国210029

毒针晶是天南星科有毒中药半夏及掌叶半夏中共性的毒性成分.毒针晶的毒性并不单纯由于针晶机械刺激,还与针晶表面带有的凝集素蛋白相关.本文通过研究半夏、掌叶半夏凝集素蛋白与半夏、掌叶半夏毒针晶毒性的相关性,揭示半夏、掌叶半夏产... 详细信息

毒针晶是天南星科有毒中药半夏及掌叶半夏中共性的毒性成分.毒针晶的毒性并不单纯由于针晶机械刺激,还与针晶表面带有的凝集素蛋白相关.本文通过研究半夏、掌叶半夏凝集素蛋白与半夏、掌叶半夏毒针晶毒性的相关性,揭示半夏、掌叶半夏产生毒性的机制,结果显示半夏、掌叶半夏凝集素可引起大鼠腹腔渗出液中PGE2及蛋白含量显著提高,并呈剂量依赖性;半夏、掌叶半夏凝集素可显著加重半夏、掌叶半夏毒针晶对家兔眼结膜的刺激性,且随着凝集浓度的升高,刺激性显著增强,表明半夏凝集素及掌叶半夏凝集素可协同针晶产生显著的促炎作用.但单给药凝集素对家兔眼结膜无刺激性,表明凝集素蛋白产生致炎需以针晶刺入为前提.故半夏、掌叶半夏产生强烈炎症刺激的机制是半夏、掌叶半夏刺入机体,凝集素蛋白随针晶刺入进入机体组织,进一步加重炎症反应发生.毒针晶的炎症刺激是针晶及蛋白的双重作用.

关键词：半夏掌叶半夏凝集素蛋白毒针晶毒性相关性分析

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天南星科有毒中药炮制减毒共性机理

天南星科有毒中药炮制减毒共性机理

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全国民族医药发展学术研讨会

作者：吴皓郁红礼葛秀允潘耀宗金羊平张倩南京中医药大学药学院江苏南京 210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京 210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京 210023

天南星科的半夏(Pinellia ternata (Thunb.) Breit.)、掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott.)、天南星(Arisaema amurense Maxim)、白附子(Typhonium giganteum Engl.)是常用有毒中药.因其有毒,故在临床应用前需要把它们浸泡在白矾溶液中采炮制减毒.毒针晶和凝集素被认为天南星科有毒中药中共性的毒性物质,两者均具有显著的致炎作用.本文研究了白矾溶液降低毒性成分毒性的炮制机理.采用整体动物腹腔致炎模型和家兔眼结膜刺激模型研究白矾炮制对针晶、凝集素蛋白的刺激性及致炎毒性的影响;采用电镜扫描观察针晶在炮制过程中的晶型变化;采用HPLC法研究针晶的溶解、锈蚀是与白矾溶液中何种离子相关;以27Al-NMR技术研究草酸铝络合物的形成与针晶溶解、锈蚀之间的关系;采用蛋白Shotgun质谱分析技术研究白矾溶液浸泡前后凝集素蛋白肽序列变化.结果显示毒针晶及凝集素蛋白腹腔注射导致的小鼠腹腔渗出液中PGE2及蛋白含量升高,白矾溶液炮制炮制后其致炎作用显著降低.电镜扫描显示毒针晶在炮制过程中针晶溶解、锈蚀,晶型结构被破坏;HPLC法测定显示以白矾溶液浸泡毒针晶可使毒针晶中草酸含量明显下降,这与白矾中的Al3+相关;27Al-NMR分析显示白矾中的Al3+可与针晶中的C2O42-形成稳定的络合物,促使毒针晶的草酸钙溶解;SDS凝胶电泳和LC-MS/MS蛋白肽序列分析结果表明,毒针晶经白矾溶液浸泡后,毒针晶带有的凝集素蛋白溶解并降解,凝集素蛋白序列变化,蛋白结构破坏.结论:天南星科有毒中药采用白矾炮制解毒的共性机制:白矾溶液中的Al3+与毒针晶中草酸钙的草酸根形成络合物,促使草酸钙溶解,毒针晶特殊晶型的刚性结构被破坏,机械刺激破坏;同时白矾溶液浸泡使毒针晶上带有的凝集素蛋白溶解并降解,破坏了毒蛋白的结构,使致炎效应显著降低.双重作用导致天南星科有毒中药的毒性显著下降.

关键词：天南星科中药炮制毒针晶凝集素蛋白解毒机制

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基于ROS/NF-κB信号通路的天南星凝集素致炎机制及炮制对蛋白的影响

基于ROS/NF-κB信号通路的天南星凝集素致炎机制及炮制对蛋白的影...

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第九届全国中医药博士生学术论坛

作者：王卫毛善虎单雪莲程梓烨陈云郁红礼吴皓南京中医药大学药学院南京210023 南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中药炮制重点实验室南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210023 国家中医药管理局中药炮制传承基地南京210023

目的：研究天南星科有毒中药天南星凝集素蛋白(AEL)的致炎机制及炮制对蛋白的影响. 方法：通过体外培养RAW264.7巨噬细胞,经不同浓度AEL刺激1h后,ELISA法检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的释放,Western ... 详细信息

目的：研究天南星科有毒中药天南星凝集素蛋白(AEL)的致炎机制及炮制对蛋白的影响. 方法：通过体外培养RAW264.7巨噬细胞,经不同浓度AEL刺激1h后,ELISA法检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的释放,Western blot法检测p-IκB、IκB、p-p65、p65蛋白的表达,倒置荧光显微镜及荧光酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位及胞内游离钙离子水平;加入ROS的阻断剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,采用ELISA和Western blot法检测TNF-α、IL-1β及p-IκB、IκB、p-p65、p65蛋白表达的变化.采用8％白矾溶液炮制AEL,ELISA法检测炮制前后炎性因子TNF-α、IL-1β释放的变化. 结果：AEL刺激巨噬细胞可导致炎性因子TNF-α、IL-1β大量释放,促进p-IκB、p-p65水平升高,导致巨噬细胞中ROS水平升高,线粒体膜电位降低以及胞内游离钙离子水平升高.当加入ROS的阻断剂NAC后,可明显降低ROS的生成,同时抑制了IκB、p65的磷酸化以及炎性因子TNF-α、IL-1β的大量释放.AEL经8％白矾溶液炮制后,能显著降低巨噬细胞炎性因子TNF-α、IL-1β的大量释放. 结论：AEL刺激巨噬细胞后可诱导氧化应激,生成过量ROS,进而激活NF-κB炎性信号通路并导致炎性因子大量释放.AEL经白矾炮制后毒性降低,推测凝集素蛋白在白矾溶液中发生变性或降解,这可能是矾制天南星减毒的机制之一.

关键词：天南星凝集素蛋白致炎机制活性氧核因子-κB 白矾炮制毒性作用

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