检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2015年第14期46卷 2149-2154页

作者：李帅锋郑传柱张丽兰才武贺定翔姚卫峰尚尔鑫丁安伟南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 贵州昌吴中药发展有限公司贵州凯里556000

目的建立不同产地何首乌Polygonum multiflorum的HPLC指纹图谱。方法采用HPLC法建立不同产地16批何首乌药材的指纹图谱，色谱条件为ExtendC18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以乙腈．0．1％甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量1... 详细信息

目的建立不同产地何首乌Polygonum multiflorum的HPLC指纹图谱。方法采用HPLC法建立不同产地16批何首乌药材的指纹图谱，色谱条件为ExtendC18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以乙腈．0．1％甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量1．0mL／min，检测波长28011111，通过Matlab软件对共有峰面积进行主成分分析，同时对16批何首乌中的二苯乙烯苷进行测定。结果16批何首乌的相似度在0．936～0．998，说明不同产地何首乌样品质量稳定。同时确定了18个共有峰，并通过HPLC／Q-TOF／MS对何首乌共有峰进行定性分析。主成分分析结果与相似度分析结果一致，同时二苯乙烯苷量与主成分分析结果一致。结论该方法简便、可靠，可为何首乌药材的质量控制提供指导和依据。

关键词：何首乌 HPLC 指纹图谱 HPLC/Q-TOF-MS 二苯乙烯苷

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荆芥StHD1与StHD8基因克隆与调控腺毛的功能分析

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中国中药杂志 2022年第21期47卷 5838-5848页

作者：周佩娜党静洁邵永芳石遵睿张琳刘潺潺吴啟南南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

HD-Zip是植物界一类特有的转录因子,影响植物的生长发育及次生代谢。其中的HD-ZipⅣ被认为在毛状体的发育中具有重要的调控作用。为了探究荆芥HD-ZipⅣ亚家族的2个基因StHD1与StHD8在荆芥腺鳞中的调控作用,利用转录组测序技术、酵母双... 详细信息

HD-Zip是植物界一类特有的转录因子,影响植物的生长发育及次生代谢。其中的HD-ZipⅣ被认为在毛状体的发育中具有重要的调控作用。为了探究荆芥HD-ZipⅣ亚家族的2个基因StHD1与StHD8在荆芥腺鳞中的调控作用,利用转录组测序技术、酵母双杂技术等对2个基因的表达模式、蛋白之间的互作进行了分析,并对基因进行了亚细胞定位、在烟草体内和荆芥体内的功能验证。结果表明:荆芥的StHD1与StHD8与其他植物的HD-ZipⅣ亚家族蛋白序列相似性较高,具有HD-ZipⅣ亚家族特征保守结构域,亚细胞定位显示被定位于细胞核;以上2个基因主要在幼嫩组织和花穗中表达;酵母双杂结果表明StHD1与StHD8蛋白之间存在互作。StHD1与StHD8过表达的转基因烟草腺毛密度和长度明显增加。通过VIGS(virus-induced gene silencing)技术在荆芥体内抑制StHD1与StHD8表达会导致腺鳞密度、单萜合成关键基因表达量下降,单萜主要成分柠檬烯和胡薄荷酮相对含量降低。以上结果表明,荆芥的StHD1与StHD8通过形成复合体对荆芥的腺毛具有调控作用,同时影响单萜的生物合成。

关键词：荆芥 VIGS 蛋白互作转基因 qPCR

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荆芥萜类合成酶(TPS)基因家族鉴定与分析

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中国中药杂志 2023年第22期48卷 6039-6050页

作者：贾聪玲舒娟党静洁王雪吴啟南刘潺潺南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

萜类化合物兼具药理活性和经济价值,是植物重要的次生代谢产物,而萜类合成酶(TPSs)是其合成过程的关键酶。为了探究荆芥中TPS基因家族成员及其潜在的功能,该研究基于荆芥全基因组数据,采用生物信息学方法,对荆芥萜类合成酶基因家族进行... 详细信息

萜类化合物兼具药理活性和经济价值,是植物重要的次生代谢产物,而萜类合成酶(TPSs)是其合成过程的关键酶。为了探究荆芥中TPS基因家族成员及其潜在的功能,该研究基于荆芥全基因组数据,采用生物信息学方法,对荆芥萜类合成酶基因家族进行了系统分析。结果表明从荆芥基因组数据库中共鉴定获得57个StTPS成员,StTPS家族成员编码285~819个氨基酸,蛋白相对分子质量在32.75~94.11 kDa,均为亲水性蛋白。StTPS家族成员主要分布在细胞质和叶绿体,其物理定位呈现出随机不均匀的特点。系统进化分析结果显示StTPS基因家族分为6个亚组,主要为TPS-a、TPS-b亚家族成员。通过启动子分析预测,荆芥TPS基因家族成员能响应光、脱落酸及MeJA等多种胁迫。转录组数据分析结果表明,荆芥中的TPS基因大多数在根中表达,同时对叶中高表达而根中低表达的基因进行qRT-PCR分析。通过对于荆芥TPS基因家族的分析,该研究筛选出可能参与荆芥倍半萜合成的基因StTPS5、StTPS18、StTPS32、StTPS45,并对StTPS45进行了克隆及原核表达载体的构建,可为进一步探究荆芥TPS基因家族的功能及在倍半萜合成中的作用提供参考。

关键词：荆芥萜类合成酶基因家族生物信息学

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藿香腺鳞挥发油积累规律及其生物合成的机制研究

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 62-69页

作者：舒娟贾聪玲党静洁梁亚芳李秋娟吴啟南刘潺潺南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

挥发油作为藿香的药效成分,积累并储藏在腺鳞中。以胡薄荷酮型藿香的叶片为材料,对藿香不同生长时期的叶片进行形态学观察,并通过GC-MS检测分析腺鳞中的挥发油成分。同时采用qRT-PCR技术测定挥发油中单萜生物合成途径中关键酶基因的相... 详细信息

挥发油作为藿香的药效成分,积累并储藏在腺鳞中。以胡薄荷酮型藿香的叶片为材料,对藿香不同生长时期的叶片进行形态学观察,并通过GC-MS检测分析腺鳞中的挥发油成分。同时采用qRT-PCR技术测定挥发油中单萜生物合成途径中关键酶基因的相对表达量。结果表明,藿香腺鳞的密度呈现先下降后趋于平稳的趋势。随着藿香叶片的不断生长,腺鳞中胡薄荷酮的相对含量由79.26%降至3.94%(89.97%~41.44%),而异薄荷酮的相对含量则由2.43%上升至77.87%(0.74%~51.01%),其他成分的变化相对不明显。单萜类成分相对含量与其关键酶基因相对表达量的相关性分析表明,薄荷酮、异薄荷酮的相对含量与胡薄荷酮还原酶(PR)的相对表达量存在显著的相关性(r>0.6,P<0.01)。综上所述,该研究揭示了藿香腺鳞内含物的主要成分的积累规律及其生物合成关键酶基因的表达规律,为藿香药材合适采收时期的确定及质量控制提供了科学依据和数据支撑,并初步揭示藿香中以胡薄荷酮和异薄荷酮为主的单萜类成分的生物合成机制,为后续研究藿香中单萜类成分合成积累的分子机制的深入研究奠定基础。

关键词：藿香腺鳞挥发油生物合成

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荆芥穗药材腺鳞内含物定性及三种主要萜类的定量研究

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中药材 2016年第1期39卷 31-36页

作者：蒋征王红吴啟南乐巍吴达维樊修和南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

目的:建立了荆芥穗药材中腺鳞的分离、纯化、富集与计数方法,对荆芥穗腺鳞内含物进行化学定性并测定3种萜类成分含量。方法:运用冻刷法分离荆芥穗腺鳞,利用水选沉降与材料亲和技术对所分离的腺鳞进行纯化富集,并运用气相质谱技术对腺鳞... 详细信息

目的:建立了荆芥穗药材中腺鳞的分离、纯化、富集与计数方法,对荆芥穗腺鳞内含物进行化学定性并测定3种萜类成分含量。方法:运用冻刷法分离荆芥穗腺鳞,利用水选沉降与材料亲和技术对所分离的腺鳞进行纯化富集,并运用气相质谱技术对腺鳞内含物化学定性,结合显微计数对单个腺鳞及萼片中3种萜类成分含量进行测定和预测。结果:共从荆芥穗腺鳞内含物中鉴定了29个成分,占峰总面积97.45%,其与荆芥穗挥发油的共有峰35个,大于各自峰总面积的97%,其中d-柠檬烯、dl-薄荷酮、胡薄荷酮、反式香芹乙酯等化合物在二者中含量差异较大。通过显微计数,测得单个腺鳞中d-柠檬烯、dl-薄荷酮、胡薄荷酮含量分别为27.660、24.334、396.390 ng。结论:本实验为荆芥穗腺鳞研究提供了分离、纯化、富集及计数方法,水蒸气蒸馏提取挥发油与荆芥穗腺鳞内含物的化学组分有所差异,不能完全真实的反映药材中各挥发油类成分的含量与比例。基于腺鳞计数所建立的3种萜类成分含量预测模型预测能力较好。

关键词：荆芥穗腺鳞 d-柠檬烯 dl-薄荷酮胡薄荷酮气相质谱联用

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不同产地薄荷药材商品质量及差异研究

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中国中药杂志 2017年第17期42卷 3391-3397页

作者：许一鸣乐巍桑梦如吴达维刘潺潺赵玲玲吴啟南南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

该文利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析了薄荷药材挥发油的化学成分,并结合气相色谱法(GC)对7个挥发性成分进行含量测定,以比较传统道地产区-江苏、当今主产区-安徽及其他产区薄荷药材挥发性成分之间的差异。实验结果显示:收集的薄荷药... 详细信息

该文利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析了薄荷药材挥发油的化学成分,并结合气相色谱法(GC)对7个挥发性成分进行含量测定,以比较传统道地产区-江苏、当今主产区-安徽及其他产区薄荷药材挥发性成分之间的差异。实验结果显示:收集的薄荷药材挥发油分为4种化学型:(1)薄荷醇-薄荷酮型、(2)胡薄荷酮-薄荷酮型、(3)胡椒酮-薄荷醇型、(4)氧化胡椒酮型;薄荷醇为所有薄荷样品挥发性成分中含量最高的成分;安徽与其他产区薄荷挥发油成分之间的差异相对明显,江苏产区薄荷与另两个产区则存在交叉性。该文研究了不同产地薄荷药材挥发油的主要成分及产地间的差异,建立了薄荷药材多个挥发性成分的含量测定方法,为薄荷药材质量标准的提高提供了基础。

关键词：薄荷产地挥发性成分定性分析定量分析

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丹参茎叶药材的质量标准研究

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药物分析杂志 2016年第6期36卷 1094-1100页

作者：沙秀秀戴新新宿树兰严辉郭盛钱大玮唐志书段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心南京210023 陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心咸阳712046

目的:丹参花期至初秋地上嫩茎叶部位是制药或制茶的原料,研究制定其质量标准,使其资源化价值不断提升和拓展。方法:运用薄层色谱法分别对芦丁、异槲皮苷、迷迭香酸和丹酚酸B进行定性鉴别,其条件:以醋酸丁酯-甲酸-水(10∶2∶3)为展开剂,... 详细信息

目的:丹参花期至初秋地上嫩茎叶部位是制药或制茶的原料,研究制定其质量标准,使其资源化价值不断提升和拓展。方法:运用薄层色谱法分别对芦丁、异槲皮苷、迷迭香酸和丹酚酸B进行定性鉴别,其条件:以醋酸丁酯-甲酸-水(10∶2∶3)为展开剂,紫外灯(365 nm)下检视;参照中国药典2015年版附录相关方法对丹参茎叶药材的总灰分和酸不溶性灰分进行测定;运用高效液相色谱法分别对丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、芦丁、异槲皮苷、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B进行定量测定,其条件:色谱柱为Grace Apollo C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水(B),梯度洗脱(0~5 min,10% A;5~10 min,10% A→12% A;10~20 min,12% A→14% A;20~25 min,14% A→20% A;25~60 min,20% A→30% A;60~65 min,30% A→40% A);流速1 mL·min^(-1),检测波长280 nm和256 nm。结果:薄层色谱鉴别芦丁、异槲皮苷、迷迭香酸和丹酚酸B,色谱斑点清晰,分离度良好;10批样品中总灰分测定结果为7.14%~9.86%,酸不溶性灰分为0.06%~0.38%;HPLC色谱分析结果表明,丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、芦丁、异槲皮苷、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B进样质量分别在0.163~3.26、0.118~2.36、0.117~2.34、0.158~3.16、0.252~5.04、0.100~2.00、0.132~2.64和0.131~2.62μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(R^2=0.999 4~1.000 0),且分离度良好,平均加样回收率分别为102.1%、95.53%、100.8%、99.63%、97.48%、101.4%、98.44%和102.6%;10批样品各指标成分的含量分别在0.05%~0.11%、0.01%~0.02%、0.07%~0.23%、0.04%~0.35%、0.07%~0.20%、1.17%~4.25%、0.03%~0.16%和1.68%~5.10%之间。结论:建立的定性和定量方法可用于客观评价丹参茎叶及其产品的品质评价与质量控制,为制定丹参茎叶药材质量标准和开发利用丹参茎叶资源提供了可靠的方法和科学依据。

关键词：丹参茎叶丹参素原儿茶醛咖啡酸芦丁异槲皮苷迷迭香酸紫草酸丹酚酸B TLC定性鉴别灰分检查 HPLC含量测定中药材资源开发

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山羊角抗惊厥活性评价及其对小鼠脑内神经递质的影响

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中国实验方剂学杂志 2023年第3期29卷 133-142页

作者：朱昭颖武文星赵晶晶刘睿郭盛段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省中药资源产业化过程协同创新中心国家中医药管理局中药资源循环利用研究重点实验室南京210023

目的:考察山羊角抗惊厥活性及其对模型小鼠脑内主要神经递质含量变化的影响。方法:选择小鼠120只随机分为6组,分别为空白组、模型组、艾司唑仑组(1 mg·kg^(-1))、羚羊角组(0.2 g·kg^(-1))、山羊角低剂量组(1.25 g·kg^(-... 详细信息

目的:考察山羊角抗惊厥活性及其对模型小鼠脑内主要神经递质含量变化的影响。方法:选择小鼠120只随机分为6组,分别为空白组、模型组、艾司唑仑组(1 mg·kg^(-1))、羚羊角组(0.2 g·kg^(-1))、山羊角低剂量组(1.25 g·kg^(-1))、山羊角高剂量组(2.5 g·kg^(-1))。灌胃给药1次,灌胃体积均为10 mL·kg^(-1),空白组及模型组给予同体积0.2%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。小鼠给药后2 h给予阈值电刺激1次,以后肢出现强直性惊厥为观察指标,计算强直性惊厥恢复期、惊厥发生率及死亡率;采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)分析小鼠脑组织主要神经递质含量变化。结果:灌胃给予小鼠山羊角粉2 h后可以缩短惊厥恢复期,与模型组比较可以显著降低惊厥发生率和死亡率(P<0.05),抗惊厥效果由强到弱依次为山羊角高剂量组>羚羊角组>山羊角低剂量组;UPLC-MS/MS分析显示,与模型组比较,山羊角粉低剂量组可明显降低脑组织中谷氨酸含量(P<0.05),山羊角粉高、低剂量组可明显降低脑组织中天冬氨酸含量(P<0.05);山羊角低剂量组和羚羊角粉组明显提高甘氨酸含量(P<0.05);山羊角粉高、低剂量组和羚羊角粉可明显提高γ-氨基丁酸、5-羟色胺含量(P<0.05)。。结论:研究结果表明,山羊角对电惊厥小鼠模型具有抗惊厥作用,其作用机制可能为通过调节脑组织神经递质的含量变化改善其惊厥的发生发展。

关键词：山羊角电惊厥模型神经递质超高效液相色谱-串联质谱法

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矿物药青礞石对戊四氮点燃癫痫大鼠干预作用研究

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中药材 2016年第1期39卷 155-159页

作者：吴露婷刘圣金吴德康喻斌王宇华王瑞杨江南京中医药大学药学院/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 江苏省中医院江苏南京210029

目的:探讨青礞石对戊四氮点燃癫痫大鼠的干预作用。方法:将戊四氮点燃成功的癫痫模型大鼠给药后取脑组织海马区,采用HE染色显微观察组织病理学改变,免疫组化法检测nNOS蛋白表达,黄嘌呤氧化酶法检测T-SOD活性、硫代巴比妥酸法检测MDA含... 详细信息

目的:探讨青礞石对戊四氮点燃癫痫大鼠的干预作用。方法:将戊四氮点燃成功的癫痫模型大鼠给药后取脑组织海马区,采用HE染色显微观察组织病理学改变,免疫组化法检测nNOS蛋白表达,黄嘌呤氧化酶法检测T-SOD活性、硫代巴比妥酸法检测MDA含量、定磷法检测Na+,K+-ATPase及Ca2+,Mg2+-ATPase活性。结果:青礞石粉末、药渣及水煎液均能降低大鼠海马区的病变程度、提高T-SOD活性、降低MDA含量、提高Na+,K+-ATPase及Ca2+,Mg2+-ATPase活性、降低nNOS的蛋白表达,其作用强度依次为:粉末>药渣>水煎液。结论:青礞石具有抗癫痫作用,其机制可能是通过提高脑组织的抗氧化能力,清除氧自由基,保护膜功能,维持脑内离子浓度动态平衡,抑制脑部异常放电,最终达到治疗癫痫的效果。

关键词：矿物药青礞石癫痫海马 nNOS ATP酶 T-SOD MDA

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珍稀植物太白美花草药用归经及相关性研究

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中国中药杂志 2018年第2期43卷 353-362页

作者：刘妍如唐志书段金廒孙晓春宋忠兴史鑫波吕扬张朝钱大玮陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712083 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏省方剂高技术研究重点实验室中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

采用主成分分析法（PCA）和偏最小二乘法（PLS）对太白美花草归经规律进行研究。同时建立高效液相色谱-三重四级杆-电喷雾离子源串联质谱法（HPLC-ESI-MS）同时测定13种毛茛科药材中55种活性成分的定量分析方法。采用Agilent 5TC-C18（... 详细信息

采用主成分分析法（PCA）和偏最小二乘法（PLS）对太白美花草归经规律进行研究。同时建立高效液相色谱-三重四级杆-电喷雾离子源串联质谱法（HPLC-ESI-MS）同时测定13种毛茛科药材中55种活性成分的定量分析方法。采用Agilent 5TC-C18（2）色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以含0.1%甲酸的乙腈-水为流动相梯度洗脱。HPLC-ESI-MS正负离子模式下,以多反应监测（MRM）扫描采集数据,外标法定量。采用PCA,PLS-DA对毛茛科13种代表药材进行多元统计分析,以评价太白美花草和这些药材在性味、归经方面的相似性和差异性。分析结果显示55种化合物线性关系良好,r〉0.99,精密度、重复性和稳定性良好。PCA结果与PLS分析结果判定太白美化草归经为肺、膀胱经,味辛、性温。说明该研究建立的多种小分子化合物的定量分析以及PLS方法适用于发掘中药的性味归经规律,可以作为珍稀草药替代性研究的方法。

关键词：太白美花草毛茛科归经液质联用偏最小二乘法-判别分析

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