检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2021年第14期46卷 3487-3493页

作者：蒋梦彤黄潇正蔡朔赵珂璇赵明段金廒刘睿南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023

该文采用纳升液相-串联质谱法对鹿角胶(DCG)与鹿皮胶(DHG)样品的糖基化肽类进行分析,以Label-free定量(LFQ)多肽组学方法对糖基化肽类成分的相对含量进行比较分析,筛选确定DCG与DHG样品中差异显著的糖基化肽类成分。结果从5批次DCG样品... 详细信息

该文采用纳升液相-串联质谱法对鹿角胶(DCG)与鹿皮胶(DHG)样品的糖基化肽类进行分析,以Label-free定量(LFQ)多肽组学方法对糖基化肽类成分的相对含量进行比较分析,筛选确定DCG与DHG样品中差异显著的糖基化肽类成分。结果从5批次DCG样品中共鉴定了5736个肽段,其中含半乳糖基化赖氨酸(galactosyl-hydroxylysine,GalHyl)的肽段共213个,含葡萄糖半乳糖基化赖氨酸(glucosyl-galactosyl-hydroxylysine,Glc-Gal-Hyl)的肽段共102个;从5批次DHG样品中共鉴定了6836个肽段信息,含Gal-Hyl的肽段共250个,含Glc-Gal-Hyl的肽段共98个。以肽段峰面积差异大于3倍,且组间有极显著性差异(P<0.01)为条件筛选差异肽段,确定444个肽段在DCG与DHG中差异显著,其中含Gal-Hyl的肽段共16个,含Glc-Gal-Hyl的肽段共5个;进一步以选择离子峰的峰型、峰面积标准偏差及差异倍数筛选确定了5个在DCG与DHG样品中差异极显著的糖基化肽,可作为潜在的区分DCG与DHG的标记物。该文研究为DCG与DHG的鉴别区分提供了新的思路,为胶类中药的物质基础研究、质量标准提升研究提供方法依据,具有较好的理论意义与应用价值。

关键词：鹿角胶鹿皮胶 Ⅰ型胶原糖基化肽标记物 Label-free多肽组

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马氏珍珠贝软体酶法制备降糖肽的工艺优化及肽段分析

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食品工业科技 2021年第22期42卷 202-211页

作者：李佳芸王欣之韦源青卞慧敏刘睿吴皓江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

目的:以二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase,DPP-Ⅳ)抑制率和葡萄糖消耗量为指标优化马氏珍珠贝软体的酶解工艺,并对酶法制备的降糖肽进行分析。方法:以人肝癌细胞(HepG-2)胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量、体外二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl... 详细信息

目的:以二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase,DPP-Ⅳ)抑制率和葡萄糖消耗量为指标优化马氏珍珠贝软体的酶解工艺,并对酶法制备的降糖肽进行分析。方法:以人肝癌细胞(HepG-2)胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量、体外二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase,DPP-Ⅳ)抑制率为评价指标,比较筛选了酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对马氏珍珠贝软体的酶解效果,通过单因素及正交试验分析酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间等因素对酶解物降糖活性的影响,确定最佳酶解工艺,以液相串联质谱(Nano LC-MS/MS)分析酶解物中肽类物质组成。结果:酸性蛋白酶酶解的产物葡萄糖消耗量和DPP-Ⅳ抑制率优于其他种类蛋白酶,马氏珍珠贝软体制备降糖肽的最佳酶解条件为:45℃、3 h、料液比1:3.5(w:w)、加酶量1000 U/g,在此条件下的葡萄糖消耗量为37.53%、DPP-Ⅳ抑制率为74.21%。最佳工艺制备的马氏珍珠贝软体酶解物中93.88%的肽段分子量低于2000 Da,22.63%的肽段为疏水性肽段,74.92%的肽段N端至少有含有一个疏水性氨基酸。结论:本研究酶法制备的马氏珍珠贝软体降糖肽可通过抑制DPP-Ⅳ的活性及减少胰岛素抵抗发挥降糖作用,对功能食品的研发具有一定的指导意义。

关键词：马氏珍珠贝软体酶解降血糖肽葡萄糖消耗量二肽基肽酶-Ⅳ抑制率

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鹿皮胶Ⅰ型胶原赖氨酸位点的羟基化与O-糖基化修饰分析

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中国中药杂志 2021年第3期46卷 591-598页

作者：刘睿蔡朔赵珂璇蒋梦彤郑云枫徐浩坤侯蓉黄勇赵明段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 贵州广济堂健康药业有限公司贵州贵阳550014

该文采用纳升液相-串联质谱法对鹿皮胶样品进行分析,以PEAKS Studio蛋白质搜库鉴定软件对鹿皮胶赖氨酸位点的羟基化与O-糖基化修饰进行全面鉴定,明确鹿皮胶Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)与α2链(COL1A2)发生羟基化与O-糖基化的主要位点、... 详细信息

该文采用纳升液相-串联质谱法对鹿皮胶样品进行分析,以PEAKS Studio蛋白质搜库鉴定软件对鹿皮胶赖氨酸位点的羟基化与O-糖基化修饰进行全面鉴定,明确鹿皮胶Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)与α2链(COL1A2)发生羟基化与O-糖基化的主要位点、类型及数量。结果从4批次鹿皮胶样品中共鉴定了5284个肽段信息,主要来源于COL1A1与COL1A2,其中羟基化赖氨酸(hydroxylysine,Hyl)共449个,半乳糖基化赖氨酸(galactosyl-hydroxylysine,Gal-Hyl)共442个,葡萄糖半乳糖基化赖氨酸(glucosyl-galactosyl-hydroxylysine,Glc-Gal-Hyl)共449个。鹿皮胶的Ⅰ型胶原发生羟基化与O-糖基化的主要位点有:N-末端肽的α1-9N与α2-5N,三螺旋结构域的α1-87,α1-174,α1-930,α2-87,α2-174,α2-933,C-末端肽的α1-16C。这些羟基化与糖基化赖氨酸与Ⅰ型胶原的三螺旋结构及胶原纤维形成密切相关,而鹿皮经高温高压熬制的过程破坏胶原的共价连接有利于胶原蛋白与胶原肽的溶出,形成具有糖基化修饰的胶原肽类成分。该文研究为鹿皮胶的功效物质基础的深入揭示提供了研究思路与方法依据,具有较好的理论意义与应用价值。

关键词：鹿皮胶修饰组 Ⅰ型胶原赖氨酸位点羟基化糖基化

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麋鹿角药材物质表征及分析

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南京中医药大学学报 2022年第10期38卷 904-914页

作者：王倩肖东刘睿朱悦杨滨丁玉华白加德温华军吴海荣段金廒赵明南京中医药大学/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/国家中医药管理局中药资源循环利用重点研究室江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 中国中医科学院中药研究所北京100700 江苏大丰麋鹿国家级自然保护区江苏大丰224136 北京麋鹿生态实验中心北京100076 湖北石首麋鹿国家级自然保护区湖北石首434407 江苏省溱湖国家湿地公园麋鹿苑江苏泰州225500

目的通过系统分析,为麋鹿角的物质组成解析提供更为全面的化学信息,为揭示麋鹿角样品的区域特征和深入挖掘其资源价值与多元化利用途径提供科学依据。方法基于39批代表性样品,围绕水浸出物、水溶性蛋白质类、氨基酸类、无机元素及重金... 详细信息

目的通过系统分析,为麋鹿角的物质组成解析提供更为全面的化学信息,为揭示麋鹿角样品的区域特征和深入挖掘其资源价值与多元化利用途径提供科学依据。方法基于39批代表性样品,围绕水浸出物、水溶性蛋白质类、氨基酸类、无机元素及重金属类成分进行物质组成的定性定量分析。结果获取了39批代表性样品物质组成的基本数据,揭示了麋鹿角样品的区域特征性。结论对麋鹿角物质组成及区域特征性有了较全面的认识,可有效促进麋鹿角的深入研究、利用。

关键词：麋鹿麋鹿角物质组成多元分析资源利用

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高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定海藻中5种砷形态

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食品与发酵工业 2020年第15期46卷 270-275页

作者：陈露嵇晶金佳颖郑丽杰韩威王欣之刘睿吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

建立一种同时测定海藻中5种砷形态的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(high performance liquid chromatography-inductively coupled plasma-mass spectrometry,HPLC-ICP-MS)检测方法。采用阴离子交换色谱柱,以25 mmol/L磷酸二氢铵溶液和水作为流动相梯度洗脱分析。对比2种提取方法对海藻中总砷提取率的影响,并对提取剂浓度、提取温度进行优化。结果表明,硝酸溶液浓度为0.3 mol/L,提取温度为100℃条件下,海藻的总砷提取率最高;5种砷形态在各自的质量浓度范围内线性关系良好,仪器精密度良好,加标回收率在79.50%~115.73%;将建立的方法对不同海藻进行测定,结果表明,铜藻、羊栖菜中毒性大的无机砷为主要的砷化物,海带、裙带菜、鼠尾藻中主要以无毒性的AsB形式存在。该方法灵敏度高、简单、快速,适用于分析海藻中的5种砷形态,并为其食用安全及标准制定提供参考。

关键词：海藻砷形态高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱提取方法优化无机砷比例

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半夏水煎液不同部位拮抗小鼠呼吸道炎症作用及其效应部位成分分析

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中国中药杂志 2021年第22期46卷 5912-5921页

作者：薛凡郁红礼刘睿吴皓张元斌刘东方张萍陈盛君李松南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 中国食品药品检定研究院北京100050 江阴天江药业有限公司江苏江阴214400 嘉善县中医医院浙江嘉兴314100

探究半夏水煎液治疗呼吸道炎症的物质基础及作用机制。采用香烟烟雾联合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠呼吸道炎症模型,以小鼠肺泡灌洗液(broncho-alveolar lavage fluid,BALF)中炎症因子IL-6、IL-8表达水平,肺组织p38、Iκ... 详细信息

探究半夏水煎液治疗呼吸道炎症的物质基础及作用机制。采用香烟烟雾联合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠呼吸道炎症模型,以小鼠肺泡灌洗液(broncho-alveolar lavage fluid,BALF)中炎症因子IL-6、IL-8表达水平,肺组织p38、IκB蛋白及其磷酸化水平为指标;采用香烟提取物(cigarette smoke extraction,CSE)诱导的支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cell,16-HBE)损伤模型,以胞内IL-6、IL-8 mRNA表达水平及炎症信号通路关键蛋白p38、IκB蛋白及其磷酸化水平为指标,评价半夏水煎液不同部位的抗炎作用。结果表明,半夏水煎液具有显著的拮抗小鼠呼吸道炎症的作用,能下调呼吸道炎症小鼠及CSE诱导16-HBE细胞炎症因子IL-6、IL-8表达水平,抑制p38、IκB蛋白磷酸化;半夏水煎液的二氯甲烷、乙酸乙酯部位具有显著的拮抗炎症作用,其他部位无明显作用。同时构建半夏成分结构数据库,采用HPLC-TOF-MS和Nano-LC-MS/MS对效应部位成分进行成分组成分析,结果显示2个效应部位的成分组成类型相似,故合并2个部位后以阳离子交换树脂分为生物碱部位与非生物碱部位。体外效应研究结果显示,半夏的非生物碱部位具有显著的抗炎效应,但生物碱部位无明显作用。质谱分析结果显示,半夏非生物碱部位含有172种多肽和7种有机酸。以BCA法测定半夏非生物碱部位中肽质量分数为63.5%,以电位滴定法测定有机酸质量分数为9.92%。半夏水煎液可通过抑制p38、IκB磷酸化,阻断MAPK、NF-κB信号通路活化发挥拮抗小鼠呼吸道炎症作用,其效应成分可能与其所含的肽类、有机酸类成分相关。

关键词：半夏呼吸道炎症 p38 MAPK/NF-κB 非生物碱部位

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基于“蛋白质/肽组学-修饰组学”研究动物药功效物质基础的思路与方法

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药学学报 2020年第8期55卷 1735-1743页

作者：刘睿赵明段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

动物药是传统中药的重要组成部分,由于缺乏适宜的研究思路与方法,中药动物药功效物质基础、质量评价研究等不够系统与完善,制约着动物药临床使用、制药工艺和质量控制等方面的应用与发展。为此,本文基于对角类、胶类动物药的研究及认识... 详细信息

动物药是传统中药的重要组成部分,由于缺乏适宜的研究思路与方法,中药动物药功效物质基础、质量评价研究等不够系统与完善,制约着动物药临床使用、制药工艺和质量控制等方面的应用与发展。为此,本文基于对角类、胶类动物药的研究及认识,结合国内外动物药研究进展与现状,探索性地提出基于"蛋白质/肽组学-修饰组学"研究动物药蛋白质、肽类物质与功效关联规律的思路及方法,即以蛋白质/肽组学的方法系统研究动物药物质组成,并以修饰组学研究蛋白质、肽类成分发生的化学修饰情况与规律,进一步探讨传统功效、成分和修饰组间的规律性与关联性,以期为中药动物药现代化研究和功效物质基础研究等提供借鉴与参考。

关键词：角类胶类动物药蛋白质组学多肽组学修饰组学

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海螵蛸蛋白质、肽类物质基础研究

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中国中药杂志 2020年第16期45卷 3883-3889页

作者：刘睿魏爽王欣之程建明吴皓江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究海洋中药海螵蛸蛋白质类、肽类物质组成。以酸化甲醇提取海螵蛸粗多肽,采用强阳离子交换树脂(SCX)进一步富集其中多肽类成分;提取海螵蛸粗蛋白,通过胰蛋白酶(trypsin)酶解制备蛋白酶解液。采用nano... 详细信息

基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究海洋中药海螵蛸蛋白质类、肽类物质组成。以酸化甲醇提取海螵蛸粗多肽,采用强阳离子交换树脂(SCX)进一步富集其中多肽类成分;提取海螵蛸粗蛋白,通过胰蛋白酶(trypsin)酶解制备蛋白酶解液。采用nano-LC Q Exactive Orbitrap质谱仪分析鉴定海螵蛸蛋白质、肽类成分。基于软体动物门Mollusca蛋白质数据库比对分析,从海螵蛸中共鉴定出16个蛋白质类成分,168个多肽类成分,从头测序(De novosequence)方法鉴定了328个多肽类成分。蛋白质类成分主要为血蓝蛋白(hemocyanin)、烯醇化酶(enolase)、肌球蛋白(myosin)、肌动蛋白(actin)、钙调蛋白(calmodulin)等;多肽类成分主要来源于肌动蛋白、组蛋白(histone)、微管蛋白(tubulin)等。这些蛋白质、肽类成分构成了海洋中药海螵蛸的重要物质基础。该文为海螵蛸的功效物质基础系统研究及反映传统功效的活性成分的发现提供理论依据与研究基础。

关键词：海洋中药海螵蛸蛋白质多肽物质基础

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杂色蛤酶解物的降糖活性初步评价及其物质基础研究

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食品工业科技 2020年第14期41卷 311-315,322页

作者：韩威郑丽杰陈露金佳颖王欣之刘睿吴皓江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的:明确杂色蛤酶解肽对降糖活性相关指标的作用,研究其肽类成分组成。方法:利用酸性蛋白酶制备杂色蛤酶解物样品,通过60%乙醇沉淀得到上清部分,采用Sep-Pak C18固相萃取小柱在不同浓度乙腈洗脱条件下对分离上清部分,以二肽基肽酶-Ⅳ(D... 详细信息

目的:明确杂色蛤酶解肽对降糖活性相关指标的作用,研究其肽类成分组成。方法:利用酸性蛋白酶制备杂色蛤酶解物样品,通过60%乙醇沉淀得到上清部分,采用Sep-Pak C18固相萃取小柱在不同浓度乙腈洗脱条件下对分离上清部分,以二肽基肽酶-Ⅳ(DDP-Ⅳ)体外抑制模型与人肝癌细胞(HepG-2)胰岛素抵抗模型筛选杂色蛤酶解物的最佳活性部分,采用Nano LC-MS/MS串联质谱对活性部分进行分析鉴定。结果:经10%乙腈洗脱部分具有最佳的抑制DPP-Ⅳ活性作用,可促进胰岛素抵抗细胞的葡萄糖摄取量,杂色蛤酶解物的10%乙腈洗脱部分中共鉴定114个多肽,其中83.3%为亲水性多肽,90.4%的肽分子量低于2000 Da,且N末端疏水性氨基酸较多。结论:杂色蛤酶解物中肽类成分可通过抑制DPP-Ⅳ的活性及减少胰岛素抵抗发挥降糖作用。

关键词：杂色蛤 DPP-Ⅳ抑制胰岛素抵抗多肽物质基础

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铜藻中有害元素的脱除工艺优化及脱除前后砷形态的变化

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食品工业科技 2020年第14期41卷 179-185,209页

作者：陈露郑丽杰金佳颖韩威王欣之刘睿吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

为降低铜藻中有害元素铬、砷、镉、铅含量,对最佳脱除剂进行选择,通过单因素实验、正交试验优化脱除工艺,以及采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)联用技术分析脱除前后铜藻中砷形态的变化,并将优化后的工艺应用于羊栖... 详细信息

为降低铜藻中有害元素铬、砷、镉、铅含量,对最佳脱除剂进行选择,通过单因素实验、正交试验优化脱除工艺,以及采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)联用技术分析脱除前后铜藻中砷形态的变化,并将优化后的工艺应用于羊栖菜、马尾藻。结果表明,以1.5%EDTA-2Na作为脱除剂,在料液比为1∶30 g/mL,时间为4 h,温度为30℃的工艺条件下,对铬的脱除率为71.34%;对总砷的脱除率为66.32%,其中对毒性较大的As^3+、As^5+脱除率分别为100%、91.43%;对镉的脱除率为87.40%;对铅的脱除率为87.64%,脱除后铅的含量低于GB 2762-2017《食品中污染物限量》的限量规定,脱除后铜藻中岩藻黄质损失率在可接受范围内。该工艺对羊栖菜中的有害元素铬、砷、镉、铅的脱除率分别为57.27%、66.00%、87.14%、88.88%;对马尾藻中有害元素铬、砷、镉、铅的脱除率分别为55.56%、56.89%、87.14%、96.44%。此工艺简单易操作,能脱除大部分毒性较大的无机砷,且具有一定的适用性,为工业上降低海藻中有害元素的含量提供思路。

关键词：铜藻铬砷镉铅脱除 HPLC-ICP-MS 砷形态

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