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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：刘睿朱振华吴佳钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学药学院江苏南京 210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心南京中医药大学药学院江苏南京 210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学药学院江苏南京 210023

应用SDS-PAGE 与LC-MS/MS 技术对羚羊角与山羊角中蛋白质类成分进行鉴定分析研究.采用胶内酶切制备羚羊角与山羊角酶解肽段，通过nano LCLTQ/Orbitrap MS 鉴定蛋白质，从羚羊角中鉴定了101 个蛋白质，山羊角中鉴定了140个蛋白质;羚羊角... 详细信息

应用SDS-PAGE 与LC-MS/MS 技术对羚羊角与山羊角中蛋白质类成分进行鉴定分析研究.采用胶内酶切制备羚羊角与山羊角酶解肽段，通过nano LCLTQ/Orbitrap MS 鉴定蛋白质，从羚羊角中鉴定了101 个蛋白质，山羊角中鉴定了140个蛋白质;羚羊角中共含有43 个角蛋白(KRT)及角蛋白相关蛋白(KAP)，占总蛋白数量的42.6％，山羊角中KRT 与KAP 共52 个，占总蛋白数量的37.1％.羚羊角与山羊角比较结果表明，两者共性成分是以角蛋白为主的分子结构相关蛋白质，两者在蛋白质种类构成方面具有相似性.本文研究为羚羊角与山羊角系统物质基础研究提供测定方法与实验数据，对角类动物药的功效物质基础研究、质量标准研究等方面具有指导意义.

关键词：羚羊角山羊角蛋白质比较 LC-MS/MS

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山羊角中巯基的测定及山羊角对体内巯基的干预研究

山羊角中巯基的测定及山羊角对体内巯基的干预研究

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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：刘睿朱振华钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京 210 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京 210023

目的测定山羊角提取液及大鼠血浆中游离巯基(-SH)与总-SH 的含量。方法采用Ellman 法测定山羊角提取液中游离-SH 与总-SH 的含量;大鼠连续灌胃给予山羊角提取物后，测定大鼠血浆中游离-SH 和总-SH 的水平;大鼠灌胃给予山羊角提取物后... 详细信息

目的测定山羊角提取液及大鼠血浆中游离巯基(-SH)与总-SH 的含量。方法采用Ellman 法测定山羊角提取液中游离-SH 与总-SH 的含量;大鼠连续灌胃给予山羊角提取物后，测定大鼠血浆中游离-SH 和总-SH 的水平;大鼠灌胃给予山羊角提取物后，连续测定给药后大鼠血浆中游离-SH 含量随时间变化曲线。

关键词：山羊角巯基血浆测定

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基于定量蛋白质组分析可持续资源替代濒危角类动物药资源的可行性

基于定量蛋白质组分析可持续资源替代濒危角类动物药资源的可行性

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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：刘睿朱振华钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学药学院江苏南京 210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心南京中医药大学药学院江苏南京 210023

本文基于iTRAQ 定量蛋白质组学研究方法比较分析了犀角、羚羊角、藏羚羊角、牦牛角、水牛角及山羊角中蛋白质含量差异，从所有角类样品中共鉴定了591 个蛋白质，对其中321 个蛋白质进行了定量分析，根据蛋白质的分子功能、细胞组成及生... 详细信息

本文基于iTRAQ 定量蛋白质组学研究方法比较分析了犀角、羚羊角、藏羚羊角、牦牛角、水牛角及山羊角中蛋白质含量差异，从所有角类样品中共鉴定了591 个蛋白质，对其中321 个蛋白质进行了定量分析，根据蛋白质的分子功能、细胞组成及生物进程对鉴定的蛋白质进行分析归类。主成分分析与聚类分析将犀角、水牛角归为一类，羚羊角、藏羚羊角及山羊角归为一类，牦牛角为第三类。此外，在鉴定出的蛋白质中，有些蛋白质被作为不同物种间的特征蛋白，如转谷氨酰胺酶、桥粒糖蛋白及延长因子。定量蛋白质组学的比较分析方法为可持续资源替代濒危珍稀角类动物药提供进一步的研究依据。

关键词： iTRAQ 蛋白质组角类药材主成分分析聚类

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银桑颗粒对db/db小鼠降糖作用的研究（英文）

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南京中医药大学学报 2017年第3期33卷 252-257页

作者：张文英杨小林王欣之刘睿杜俊潮张倩吴皓卞慧敏南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023

目的研究银桑颗粒对自发性2型糖尿病模型db/db小鼠的降血糖作用。方法将db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和银桑颗粒低、中、高剂量组,另设db/m小鼠为正常组。前7周每周测定空腹血糖(FBG);第9、10、11周分别测定口服糖耐量(OGTT)、... 详细信息

目的研究银桑颗粒对自发性2型糖尿病模型db/db小鼠的降血糖作用。方法将db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和银桑颗粒低、中、高剂量组,另设db/m小鼠为正常组。前7周每周测定空腹血糖(FBG);第9、10、11周分别测定口服糖耐量(OGTT)、胰岛素耐量(ITT)、淀粉耐量(STT);12周时测定肝糖原、胰岛素(INS)、糖化血红蛋白(GHb)、糖化血清蛋白(GSP)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量,采用HE染色法进行肾脏、胰腺病理学观察。结果与模型组相比,银桑颗粒给药组的OGTT、ITT、STT各测定点的血糖值显著降低(P<0.05~0.01),曲线下面积减小(P<0.05~0.01);肝糖原、HDL-C含量皆显著升高(P<0.05~0.01);FBG、GSP、INS、GHb、T-CHO、TG、LDL-C含量皆显著降低(P<0.05~0.01);病理切片显示肾小管上皮细胞颗粒变性程度减轻,肾盂扩张程度也减轻;胰岛细胞边缘较规则,且细胞出现空泡样变性程度减轻。结论银桑颗粒能够增加胰岛素的敏感性,从而综合地调节db/db小鼠的血糖和血脂。

关键词：银桑颗粒糖尿病胰岛素抵抗降血糖降血脂

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高效液相色谱法测定四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸

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食品与发酵工业 2017年第3期43卷 224-228页

作者：张倩刘睿王欣之程建明张文英杜俊潮吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸5’-尿苷酸(5’-UMP)、5’-鸟苷酸(5’-GMP)、5’-肌苷酸(5’-IMP)和5’-腺苷酸(5’-AMP)含量。采用Waters Atlantis T3(4.6 mm×250 mm,3μm)色谱柱,以0.01 mol/L KH_2PO_4溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,紫外检测器在260 nm处进行检测,外标法进行定量。结果表明:各呈味核苷酸线性关系良好,相关系数R^2均为0.999 9,回收率在96.19%~103.25%内,相对标准偏差在1.08%~1.28%内。四角蛤蜊与菲律宾蛤仔中均含有4种呈味核苷酸,其中5’-AMP含量最多,其次是5’-IMP和5’-UMP,而5’-GMP含量最低。该方法简单,重现性好、灵敏度和准确度高,适用于四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸含量测定,为研究贝类风味及贝类食品的开发提供一定的依据。

关键词：高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC) 四角蛤蜊菲律宾蛤仔呈味核苷酸

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四角蛤蜊核苷类成分纯化工艺研究

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食品研究与开发 2017年第18期38卷 30-35页

作者：张倩刘睿程建明王欣之杜俊潮张文英吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

采用大孔吸附树脂与阳离子交换树脂串联纯化四角蛤蜊醇沉上清液中核苷类成分,以核苷的纯度和回收率为指标,考察树脂的型号、上样浓度、水洗体积、洗脱剂浓度及流速对纯化效果的影响,以期得到最佳的纯化工艺。确定大孔吸附树脂的型号及... 详细信息

采用大孔吸附树脂与阳离子交换树脂串联纯化四角蛤蜊醇沉上清液中核苷类成分,以核苷的纯度和回收率为指标,考察树脂的型号、上样浓度、水洗体积、洗脱剂浓度及流速对纯化效果的影响,以期得到最佳的纯化工艺。确定大孔吸附树脂的型号及最佳工艺为:SP207型,质量浓度250 mg/m L,p H值为5.0,水洗除杂体积是3 BV,洗脱液为体积分数5%乙醇。进一步通过离子交换树脂纯化,确定树脂型号及最佳纯化工艺为:001~*7阳离子交换树脂,质量浓度6.3 mg/m L,氨水∶乙醇(体积比3∶30)溶液洗脱,洗脱流速是3 BV/h。经两种树脂串联纯化后,四角蛤蜊醇沉上清液中核苷类成分的质量分数由1.80%提高至50.60%,总回收率为70.32%。工艺验证结果表明SP207大孔吸附树脂与001~*7阳离子交换树脂串联纯化核苷类成分的方法稳定可行,能够用于四角蛤蜊核苷类成分的分离纯化。

关键词：四角蛤蜊核苷大孔吸附树脂阳离子交换树脂纯化

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正交试验优化文蛤水溶性多糖的水提醇沉工艺

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中国实验方剂学杂志 2016年第5期22卷 18-21页

作者：陈丽叶王令充吴皓程建明刘睿柴尧彭九嫚冯子芳程颖南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏省中药资源产业化过程协同创新中心南京210023

目的:优选文蛤水溶性多糖的水提醇沉工艺,为该有效部位的保健品开发提供实验依据。方法:采用蒽酮-硫酸法测定水溶性多糖的含量,检测波长625 nm。以水溶性多糖转移率为指标,通过单因素试验考察提取溶剂p H及绞碎程度对文蛤水溶性多糖转... 详细信息

目的:优选文蛤水溶性多糖的水提醇沉工艺,为该有效部位的保健品开发提供实验依据。方法:采用蒽酮-硫酸法测定水溶性多糖的含量,检测波长625 nm。以水溶性多糖转移率为指标,通过单因素试验考察提取溶剂p H及绞碎程度对文蛤水溶性多糖转移率的影响。以水溶性多糖转移率为指标,通过正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对文蛤水溶性多糖水提工艺的影响。以水溶性多糖得率及质量分数的综合评分为指标,通过正交试验考察浓缩程度、醇沉浓度、醇沉时间对文蛤水溶性多糖醇沉工艺的影响。结果:文蛤水溶性多糖的最佳水提工艺为加3倍水煎煮3次,每次40 min,水提液浓缩至原料的1/2,加乙醇醇沉至体积分数达80%,醇沉12 h,抽滤,60℃减压干燥。文蛤水溶性多糖得率7.71%,质量分数42.53%。结论:优选的文蛤水溶性多糖水提醇沉工艺稳定可行,可兼顾该有效部位的得率和纯度,为该部位的研究与开发提供参考。

关键词：文蛤总多糖蒽酮-硫酸法转移率

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四角蛤蜊醇沉上清液的脱盐工艺优化

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中国实验方剂学杂志 2016年第4期22卷 1-5页

作者：冯子芳刘睿程建明王欣之陈丽叶程颖殷嘉晨吴皓南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏省中药资源产业化过程协同创新中心南京210023

目的:优化四角蛤蜊醇沉上清液的电渗析脱盐工艺,分析脱盐前后的成分变化和安全性,为该资源的研究与开发提供参考。方法:以脱盐率、含固量转移率和氨基酸(以牛磺酸、丙氨酸计)转移率为综合评价指标,通过正交试验考察上样液质量浓度、药液... 详细信息

目的:优化四角蛤蜊醇沉上清液的电渗析脱盐工艺,分析脱盐前后的成分变化和安全性,为该资源的研究与开发提供参考。方法:以脱盐率、含固量转移率和氨基酸(以牛磺酸、丙氨酸计)转移率为综合评价指标,通过正交试验考察上样液质量浓度、药液p H和脱盐时间对电渗析脱盐工艺的影响,比较四角蛤蜊醇沉上清液脱盐前后成分的变化,采用急性毒性试验评价脱盐前后的安全性。结果:四角蛤蜊醇沉上清液的最佳脱盐工艺为药液质量浓度34.00 g·L^(-1),药液p H 4~5,脱盐时间1.5 h。脱盐率>90%,含固量转移率>65%,牛磺酸、丙氨酸保留率均>90%。脱盐前半数致死量(LD50)27.18 g·kg^(-1),经电渗析脱盐后最大耐受量37.48 g·kg^(-1)。结论:脱盐后的四角蛤蜊醇沉上清液毒性成分、盐分显著下降,效应物质基本保留,安全性明显提高。优选的脱盐工艺稳定可行,为该资源的后续研究与开发提供了理论依据。

关键词：四角蛤蜊脱盐工艺综合评分急性毒性试验脱盐率

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柱前衍生化HPLC-UV法检测桑叶中1-脱氧野尻霉素含量

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时珍国医国药 2016年第5期27卷 1096-1098页

作者：唐静柴尧彭九嫚陈丽叶杜俊潮薛珍珍程建明南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023

目的建立芴甲氧羰酰氯柱前衍生化HPLC-UV法检测桑叶中1-脱氧野尻霉素（DNJ）含量的方法。方法采用HPLC-UV法检测,以芴甲氧羰酰氯为衍生化试剂,色谱柱为Hedera ODS-2 C18柱（4.6×250 mm,5μm）;以乙腈和0.1%磷酸水溶液作为流动相,... 详细信息

目的建立芴甲氧羰酰氯柱前衍生化HPLC-UV法检测桑叶中1-脱氧野尻霉素（DNJ）含量的方法。方法采用HPLC-UV法检测,以芴甲氧羰酰氯为衍生化试剂,色谱柱为Hedera ODS-2 C18柱（4.6×250 mm,5μm）;以乙腈和0.1%磷酸水溶液作为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为254 nm;柱温30℃。结果 DNJ在0.00460.2960 mg/m L范围内线性关系良好（R2=0.9999）,平均回收率为99.33%,RSD为2.75%（n=9）。结论方法快速、简便、准确,适用于桑叶中DNJ的定量分析。

关键词：桑叶 1-脱氧野尻霉素 HPLC-UV 柱前衍生化

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玉竹百合蛤蜊汤煎煮工艺及抗疲劳作用的研究

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南京中医药大学学报 2016年第2期32卷 186-190页

作者：程颖王欣之刘睿吴皓程建明邱韵萦杨小林陈丽叶冯子芳南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

目的研究经典食疗方玉竹百合蛤蜊汤的最佳煎煮方法及其抗疲劳的作用,为今后以该方为基础的抗疲劳保健品的开发提供理论依据。方法为优选玉竹百合蛤蜊汤的煎煮工艺,以浸膏得率,总多糖、牛磺酸的含量为考察指标,以加水量、提取时间、提取... 详细信息

目的研究经典食疗方玉竹百合蛤蜊汤的最佳煎煮方法及其抗疲劳的作用,为今后以该方为基础的抗疲劳保健品的开发提供理论依据。方法为优选玉竹百合蛤蜊汤的煎煮工艺,以浸膏得率,总多糖、牛磺酸的含量为考察指标,以加水量、提取时间、提取次数为考察因素,采用正交试验优选其煎煮方法;并按照2003版《保健食品检验与评价技术规范实施手册》的要求,设正常组、模型组、阳性组及玉竹百合蛤蜊汤低、中、高3个剂量组,经口给予样品,采用小鼠游泳疲劳模型,对比各组小鼠负质量游泳时间、不负质量游泳后血清乳酸(LA)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)指标的差异,观察玉竹百合蛤蜊汤对小鼠的抗疲劳能力影响。结果玉竹百合蛤蜊汤最佳煎煮工艺为加10倍量水,提取3次,每次60min,在最佳煎煮工艺下,总多糖含量为(79.48±7.82)mg/g,牛磺酸含量为(1.95±0.02)mg/g,干浸膏得率为(26.82±0.53)%。高、中剂量组的玉竹百合蛤蜊汤能显著延长小鼠负质量游泳时间(P<0.05);与模型组相比,3个剂量组的玉竹百合蛤蜊汤能显著降低小鼠血清乳酸(P<0.01)及丙二醛(P<0.01)的含量,且呈剂量依赖性,并能显著降低肌酸激酶(P<0.01)、乳酸脱氢酶(P<0.01)的活力,并升高超氧化物歧化酶的活力。结论本实验确定了玉竹百合蛤蜊汤的最佳煎煮工艺,并证明了该食疗方具有较好的抗疲劳功效,为该方作为保健食品进一步开发提供依据。

关键词：玉竹百合蛤蜊汤煎煮工艺抗疲劳保健食品

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