检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2020年第16期45卷 3883-3889页

作者：刘睿魏爽王欣之程建明吴皓江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究海洋中药海螵蛸蛋白质类、肽类物质组成。以酸化甲醇提取海螵蛸粗多肽,采用强阳离子交换树脂(SCX)进一步富集其中多肽类成分;提取海螵蛸粗蛋白,通过胰蛋白酶(trypsin)酶解制备蛋白酶解液。采用nano... 详细信息

基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究海洋中药海螵蛸蛋白质类、肽类物质组成。以酸化甲醇提取海螵蛸粗多肽,采用强阳离子交换树脂(SCX)进一步富集其中多肽类成分;提取海螵蛸粗蛋白,通过胰蛋白酶(trypsin)酶解制备蛋白酶解液。采用nano-LC Q Exactive Orbitrap质谱仪分析鉴定海螵蛸蛋白质、肽类成分。基于软体动物门Mollusca蛋白质数据库比对分析,从海螵蛸中共鉴定出16个蛋白质类成分,168个多肽类成分,从头测序(De novosequence)方法鉴定了328个多肽类成分。蛋白质类成分主要为血蓝蛋白(hemocyanin)、烯醇化酶(enolase)、肌球蛋白(myosin)、肌动蛋白(actin)、钙调蛋白(calmodulin)等;多肽类成分主要来源于肌动蛋白、组蛋白(histone)、微管蛋白(tubulin)等。这些蛋白质、肽类成分构成了海洋中药海螵蛸的重要物质基础。该文为海螵蛸的功效物质基础系统研究及反映传统功效的活性成分的发现提供理论依据与研究基础。

关键词：海洋中药海螵蛸蛋白质多肽物质基础

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铜藻主要化学成分分析及抗氧化活性评价

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食品工业科技 2020年第22期41卷 232-239页

作者：郑丽杰缪晓冬韩威陈露金佳颖刘睿王欣之吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京210023

对江苏海域“金潮”爆发产生的铜藻进行多成分测定以评价该铜藻的品质和优势成分,同时对铜藻可溶性多糖、褐藻多酚、岩藻黄质三种抗氧化活性成分所在的不同乙醇提取部位进行抗氧化活性研究。采用常规理化方法对铜藻与其他六种常见褐藻... 详细信息

对江苏海域“金潮”爆发产生的铜藻进行多成分测定以评价该铜藻的品质和优势成分,同时对铜藻可溶性多糖、褐藻多酚、岩藻黄质三种抗氧化活性成分所在的不同乙醇提取部位进行抗氧化活性研究。采用常规理化方法对铜藻与其他六种常见褐藻进行常规营养成分及其他活性成分对比分析;对铜藻的不同乙醇提取物进行DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力的抗氧化活性初步研究。结果显示,铜藻与其他褐藻中各营养成分含量差异较大。与其他褐藻相比,铜藻中蛋白质品质较佳且蛋白氨基酸组成符合FAO/WTO推荐的理想蛋白氨基酸组成模式;铜藻中岩藻黄质含量显著(P<0.05)高于其他六种褐藻,为优势成分;铜藻中饱和脂肪酸略高于不饱和脂肪酸,饱和脂肪酸以棕榈酸相对含量最高,单不饱和脂肪酸以油酸相对含量最高,多不饱和脂肪酸以花生四烯酸相对含量最高;10种微量元素中Zn、Fe较高;根据自由基的半数清除率(IC50值)判断各提取物抗氧化能力大小,DPPH体系中抗氧化大小为:30%乙醇提取物(IC50=0.097 mg/mL)>50%乙醇提取物(IC50=0.102 mg/mL)>90%乙醇提取物(IC50=0.136 mg/mL)>水提取物(IC50=0.160 mg/mL)>70%乙醇提取物(IC50=0.162 mg/mL);在ABTS体系中抗氧化大小为30%乙醇提取物(IC50=0.028 mg/mL)>50%乙醇提取物(IC50=0.033 mg/mL)>70%乙醇提取物(IC50=0.044 mg/mL)>水提取物(IC50=0.055 mg/mL)>90%乙醇提取物(IC50=0.066 mg/mL);可知以30%乙醇提取物具有较好的DPPH自由基和ABTS自由基清除能力,且与可溶性多糖成分相关性最高,呈负相关。综上,“金潮”灾害所产生的大量铜藻资源蛋白质品质较佳,铜藻可作为岩藻黄质开发来源,且将其作抗氧化功能产品开发时以30%乙醇提取物最佳。

关键词：金潮铜藻品质开发利用抗氧化活性

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基于“蛋白质组-修饰组”研究砂炒炮制对穿山甲蛋白质类成分的影响

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中草药 2020年第13期51卷 3416-3423页

作者：刘睿刘逊赵明段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 苏州卫生职业技术学院江苏苏州215009

目的基于蛋白质、肽类物质组成及修饰组成的变化,研究砂炒炮制对穿山甲物质基础的影响。方法采用Nano LC-MS/MS对炮制前后穿山甲蛋白质、肽类组成及变化进行分析鉴定,对鉴定的蛋白质、肽类发生的脱酰胺修饰与氧化修饰进行比较。结果穿... 详细信息

目的基于蛋白质、肽类物质组成及修饰组成的变化,研究砂炒炮制对穿山甲物质基础的影响。方法采用Nano LC-MS/MS对炮制前后穿山甲蛋白质、肽类组成及变化进行分析鉴定,对鉴定的蛋白质、肽类发生的脱酰胺修饰与氧化修饰进行比较。结果穿山甲主要由角蛋白、连接蛋白、桥粒蛋白等结构蛋白及促进角质致密结构形成的异构酶类组成。穿山甲经炮制后,可溶性蛋白质、肽类的鉴定数量未见明显变化,难溶性蛋白质鉴定数量显著降低;炮制后蛋白质、肽类的脱酰胺修饰数量显著增加;炮制后I型、II型角蛋白的鉴定肽段数量显著增加,Asn与Gln发生脱酰胺修饰的数量显著增加;穿山甲炮制前后鉴定肽段的相对分子质量分布及亲疏水性无显著变化。结论尽管炮制会降低穿山甲整体蛋白质鉴定的数量,但可显著增加角蛋白的鉴定肽段数量,可显著提高蛋白质、肽类成分的脱酰胺修饰数量。结果提示炮制过程有利于角蛋白等结构蛋白的蛋白质、肽类成分的溶出与释放。为穿山甲物质基础研究,炮制对角质类动物药物质基础的影响研究等提供依据,也为穿山甲替代资源寻找与评价提供研究思路与方法。

关键词：穿山甲蛋白质组修饰组物质基础脱酰胺修饰砂炒炮制蛋白质 Nano LC-MS/MS 肽类角蛋白连接蛋白桥粒蛋白结构蛋白异构酶

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麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分区域差异性分析

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中国中药杂志 2021年第14期46卷 3494-3503页

作者：王倩刘睿朱悦杨滨丁玉华白加德温华军吴海荣段金廒赵明南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心国家中医药管理资源循环利用重点研究室中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 中国中医科学院中药研究所北京100700 江苏大丰麋鹿国家级自然保护区江苏大丰224136 北京麋鹿生态实验中心北京100076 湖北石首麋鹿国家级自然保护区湖北石首434407 江苏省溱湖国家湿地公园麋鹿苑江苏泰州225500

为了揭示麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分的区域特征,采用UPLC-QTRAPⓇ/MS2方法对4个地区39批次麋鹿角中37种核苷类和氨基酸类成分进行含量测定,并利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及聚类分析法(CA)进行综合质量评价。结果显示,不同地... 详细信息

为了揭示麋鹿角中核苷类和氨基酸类成分的区域特征,采用UPLC-QTRAPⓇ/MS2方法对4个地区39批次麋鹿角中37种核苷类和氨基酸类成分进行含量测定,并利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及聚类分析法(CA)进行综合质量评价。结果显示,不同地区麋鹿角中均含有丰富的核苷类和氨基酸类成分,总质量分数分别可达45.09、634.80μg·g-1,所含成分种类及总量差异较小,但各地区之间各成分含量存在显著差异,主要差异成分为Ura、Hpro、Thr、Glu、G5P、2'-dG、Adeno、Met、Ade、Gln、Orni、Phe、2'-dA、Hit、Lys和Ile。其中,Ura、Met、Glu和Ile分别在江苏大丰、江苏溱湖、北京和湖北石首这些区域的麋鹿角药材中含量最高。OPLS-DA及CA分析结果均显示基于核苷类、游离氨基酸类成分的数据信息可将所有麋鹿角样品分为3类,反映出麋鹿角样品的区域特征性。研究结果提示麋鹿角中核苷类、游离氨基酸类成分的积累与其生境密切相关,为麋鹿角药材的品质形成研究、内在质量评价及控制以及麋鹿角的综合利用提供了有益参考。鉴于研究发现,建议可将Ura、Met、Glu和Ile的含量因素作为不同地区药材特征纳入麋鹿角质量标准体系。

关键词：麋鹿角核苷类氨基酸类区域差异

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基于“多肽组-修饰组”比较分析鹿皮与鹿皮胶物质基础

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药学学报 2020年第8期55卷 1882-1888页

作者：刘睿朱悦郑云枫赵明刘逊黄勇徐浩坤段金廒南京中医药大学中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 苏州卫生职业技术学院江苏苏州215009 贵州广济堂药业有限公司贵州贵阳550014

胶原蛋白为胶类动物药主要物质基础,鹿皮在高温煎煮熬制加工成鹿皮胶的过程中胶原蛋白的部分氨基酸位点会发生羟基化与脱酰胺修饰,本文基于"多肽组-修饰组"结合的研究思路系统比较了鹿皮与鹿皮胶的蛋白质肽类物质基础。采用... 详细信息

胶原蛋白为胶类动物药主要物质基础,鹿皮在高温煎煮熬制加工成鹿皮胶的过程中胶原蛋白的部分氨基酸位点会发生羟基化与脱酰胺修饰,本文基于"多肽组-修饰组"结合的研究思路系统比较了鹿皮与鹿皮胶的蛋白质肽类物质基础。采用纳升液相-串联质谱法分析鉴定鹿皮与鹿皮胶中蛋白质类、肽类成分组成,并进一步比较鹿皮与鹿皮胶的修饰数量与修饰位点。结果表明,鹿皮胶的羟基化修饰与脱酰胺修饰数量均显著多于鹿皮,提示在高温熬制加工过程中,鹿皮胶原蛋白的部分氨基酸位点发生了修饰,这些修饰与胶原蛋白的特定氨基酸结构单元、亲疏水性等因素有关,鹿皮胶原蛋白发生修饰的阶段与机制有待后续研究阐释。本文为鹿皮胶物质基础研究、加工过程及胶原蛋白修饰的相关性研究提供了重要理论依据,有利于开展鹿皮胶工艺优化、质量标准提升等研究。

关键词：多肽组修饰组鹿皮鹿皮胶物质基础

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核壳型Fe3O4@PDA@Au纳米材料对水牛角含巯基肽类成分的富集研究

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南京中医药大学学报 2020年第3期36卷 396-400页

作者：刘婷韩疏影康安邓海山朱栋池玉梅刘睿南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

目的通过制备核壳型Fe3O4@PDA@Au纳米材料对水牛角中含巯基(-SH)肽类成分进行富集、鉴定与表征。方法采用种子生长法制备核壳型Fe3O4@PDA@Au磁性纳米材料,将材料应用于水牛角提取液含-SH肽类成分的富集;分别采用Ellman法和多肽试剂盒测... 详细信息

目的通过制备核壳型Fe3O4@PDA@Au纳米材料对水牛角中含巯基(-SH)肽类成分进行富集、鉴定与表征。方法采用种子生长法制备核壳型Fe3O4@PDA@Au磁性纳米材料,将材料应用于水牛角提取液含-SH肽类成分的富集;分别采用Ellman法和多肽试剂盒测定富集前后溶液中-SH及多肽的含量;采用nano LC-MS/MS系统分析鉴定水牛角提取液肽类组成。结果Fe3O4@PDA@Au纳米材料对水牛角含-SH肽类成分的富集因子为23.41,水牛角提取液中共鉴定了4114个肽段,其中含有半胱氨酸(Cys)的肽段共11个;富集液中共鉴定了2254个肽段,其中含有Cys的肽段共709个,富集后的含Cys的肽段与总肽段的比值从0.003增加到0.314,表明材料对水牛角提取物中含-SH肽段完成了较好的富集。结论Fe3O4@PDA@Au纳米材料对水牛角中含巯基肽类成分具有良好的富集效果,对水牛角功效物质基础研究具有重要意义。

关键词： Fe3O4@PDA@Au 水牛角巯基肽富集

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超声辅助酶解与串联质谱联用检测阿胶中马皮成分

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南京中医药大学学报 2020年第5期36卷 623-628页

作者：蔡朔蒋梦彤赵珂璇韩疏影费菲曹蓓赵明段金廒刘睿南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京鼓楼医院Ⅰ期临床试验室江苏南京210008 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023

目的超声辅助快速酶解与串联质谱联用实现准确、高效检测阿胶中的马皮成分,为阿胶质量标准研究提供实验依据。方法采用超声辅助胰蛋白酶酶解的方法,快速制备阿胶酶解液样品,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS)对阿胶... 详细信息

目的超声辅助快速酶解与串联质谱联用实现准确、高效检测阿胶中的马皮成分,为阿胶质量标准研究提供实验依据。方法采用超声辅助胰蛋白酶酶解的方法,快速制备阿胶酶解液样品,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS)对阿胶酶解液进行检测,在电喷雾离子化的正离子模式下,多反应监测模式(MRM),以驴专属肽m/z 691.0→809.4、马专属肽m/z 698.3→809.4为离子对,检测阿胶样品中的马专属肽,以及驴专属肽与马专属肽的相对峰面积比例。结果采用的方法可在20 min内准确判别阿胶中是否掺有马皮成分,及掺入的马皮成分的比例,马皮成分的检出限为1%。结论超声辅助快速酶解与串联质谱联用的方法准确可靠、专属性强、检测效率高,可用于阿胶中马皮成分的快速检测。

关键词：阿胶马皮成分超声辅助酶解串联质谱专属肽

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基于nano LC-MS/MS法的黄明胶胶原蛋白鉴定研究

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南京中医药大学学报 2020年第1期36卷 105-109页

作者：张涛宋世震刘睿武汉科技大学医学院湖北武汉430065 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究黄明胶中胶原类物质组成,探讨其胶原蛋白的修饰。方法采用胰蛋白酶酶切黄明胶样品,纳升液相串联质谱(nano-LC Q Exactive Orbitrap MS)技术,对黄明胶酶解液进行分析获得MS/MS图谱,利用PEAKS软... 详细信息

目的基于shotgun混合蛋白鉴定技术,系统研究黄明胶中胶原类物质组成,探讨其胶原蛋白的修饰。方法采用胰蛋白酶酶切黄明胶样品,纳升液相串联质谱(nano-LC Q Exactive Orbitrap MS)技术,对黄明胶酶解液进行分析获得MS/MS图谱,利用PEAKS软件对获得的MS/MS图谱搜索牛科蛋白质库,以鉴定其中蛋白质组成。结果从2个批次的黄明胶酶解液样品中鉴定了1 378个肽段,共鉴定了30蛋白质,胶原Ⅰ蛋白α1链、α2链,胶原Ⅲ蛋白α1链为黄明胶的主要物质基础,研究发现黄明胶中蛋白主要有4种修饰形式:羟基化(Hydroxylation)、脱酰胺化(Deamidation)、N-端酰胺化(Acetylation)及氧化(Oxidation)修饰。结论黄明胶的主要物质基础源于胶原Ⅰ蛋白和胶原Ⅲ蛋白,胶原蛋白经熬制后,变性、溶出、修饰获得的产物共同构成了黄明胶的物质基础。

关键词：黄明胶胶原蛋白鉴定修饰物质基础

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不同海域浒苔品质差异评价

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食品工业科技 2019年第17期40卷 321-326页

作者：王婷婷郑丽杰韩威王欣之刘睿程建明吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

为系统地比较我国不同海域的浒苔原料品质,采用常规理化方法对浒苔中的膳食纤维、多糖、蛋白质、氨基酸、脂肪酸、矿物元素、灰分、有害元素进行分析,并结合SPSS对各类成分进行差异性比较。结果表明,浒苔中功效成分和有害成分存在较大... 详细信息

为系统地比较我国不同海域的浒苔原料品质,采用常规理化方法对浒苔中的膳食纤维、多糖、蛋白质、氨基酸、脂肪酸、矿物元素、灰分、有害元素进行分析,并结合SPSS对各类成分进行差异性比较。结果表明,浒苔中功效成分和有害成分存在较大的海域差异,具有地域优势性。与其他海域相比,山东青岛浒苔中总膳食纤维、可溶性膳食纤维、水溶性多糖含量最高,分别为49.33%、22.03%、16.92%;江苏盐城浒苔中粗蛋白含量最高为38.70%;江苏南通浒苔中氨基酸组成最接近理想蛋白模式;山东青岛浒苔鲜味氨基酸含量最高,达90.53 g/kg;浙江宁波浒苔EPA相对含量最高,占总脂肪酸的1.19%;江苏南通浒苔中铁元素含量最高,达4967.41 mg/kg;江苏南通浒苔酸不溶性灰分含量最高,达5.66%;除汞外,各海域浒苔中砷、铅、镉、铬含量多超过藻类制品、保健食品最高允许限量,其中青岛浒苔各有害元素含量相对较低。该实验可为浒苔资源的进一步研究开发提供更加详尽的理论依据。

关键词：浒苔功效成分有害成分品质

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角类中药的游离巯基含量测定

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中国中药杂志 2019年第6期44卷 1216-1219页

作者：王春雪刘睿钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023

采用荧光衍生法测定不同品种、不同产地角类中药中游离巯基(-SH)的含量。以三(2-羧乙基)膦为二硫键的还原剂,7-氟苯唑-2-氧-1,3二唑-4-磺酸铵为-SH衍生化试剂,在最大激发波长为375 nm,发射波长为510 nm的条件下,采用荧光法测定角类药材... 详细信息

采用荧光衍生法测定不同品种、不同产地角类中药中游离巯基(-SH)的含量。以三(2-羧乙基)膦为二硫键的还原剂,7-氟苯唑-2-氧-1,3二唑-4-磺酸铵为-SH衍生化试剂,在最大激发波长为375 nm,发射波长为510 nm的条件下,采用荧光法测定角类药材水提液中游离-SH含量。结果表明,在最优的衍生化条件下,不同角类中药提取物中均测定出游离-SH,其中山羊角提取液中游离-SH的含量最高,其次是牦牛角与水牛角,麋鹿角中含量最低。该文提出一种关于角类中药物质基础的观点:即提取物中含-SH类成分可能为角质类动物药的重要物质基础,围绕此观点,建立了准确、灵敏、快速的测定游离-SH的方法,可为角类中药的质量评价以及功效物质基础研究提供一定的借鉴与方法依据。

关键词：荧光衍生法巯基角类中药含量测定

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