检索结果-内蒙古大学图书馆

基于nano LC-LTQ/Orbitrap MS分析山羊角中蛋白质多肽类物质

质谱学报 2017年第1期38卷 109-115页

作者：刘睿朱振华钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京210023

基于shotgun混合蛋白质鉴定思路,研究山羊角水提液中蛋白质类、肽类物质组成。采用超高分辨的线性离子阱-静电场轨道阱质谱(LTQ/Orbitrap MS),从山羊角水提液中大于3ku部位鉴定出52个蛋白质,从小于3ku部位鉴定出1 288个肽段,这些肽段源... 详细信息

基于shotgun混合蛋白质鉴定思路,研究山羊角水提液中蛋白质类、肽类物质组成。采用超高分辨的线性离子阱-静电场轨道阱质谱(LTQ/Orbitrap MS),从山羊角水提液中大于3ku部位鉴定出52个蛋白质,从小于3ku部位鉴定出1 288个肽段,这些肽段源于46个蛋白质。鉴定出的蛋白质主要为角蛋白、胶原蛋白、角蛋白相关蛋白等结构蛋白。根据每个氨基酸出现的频次,将蛋白质上的肽段标记,绘制热图(heat map),据此推测山羊角水提液中多肽类物质形成的过程为:从蛋白质的热区(hot regions)中经过降解、脱落、溶出,形成水提液中的各种肽段。该方法能够快速、高效地分析鉴定山羊角水提液中蛋白质肽类物质组成,可用于角类动物药蛋白质类物质组成与分析,也可为中药动物药的系统研究提供借鉴与方法参考。

关键词：山羊角蛋白质肽类 shotgun 鉴定

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四角蛤蜊壳制备L-天门冬氨酸螯合钙工艺及表征研究

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中国海洋药物 2017年第4期36卷 87-94页

作者：王青刘睿程建明王欣之吴皓彭九嫚杜俊潮倪骏南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

目的以废弃物四角蛤蜊贝壳为钙源,经过中药煅法炮制后,与L-天门冬氨酸制备氨基酸螯合钙。方法以得率和螯合率为指标综合评分考查L-天门冬氨酸与四角蛤蜊贝壳的螯合工艺并进行优化,且通过红外和差示扫描量热仪等对其产物进行组成表征研... 详细信息

目的以废弃物四角蛤蜊贝壳为钙源,经过中药煅法炮制后,与L-天门冬氨酸制备氨基酸螯合钙。方法以得率和螯合率为指标综合评分考查L-天门冬氨酸与四角蛤蜊贝壳的螯合工艺并进行优化,且通过红外和差示扫描量热仪等对其产物进行组成表征研究。结果确定L-天门冬氨酸螯合钙的最佳螯合工艺:pH=5.0,反应温度为65℃,反应时间为1.5h,摩尔比(氨基酸∶Ca2+)为2∶1,且初步研究发现结构为带2个结晶水的螯环结构。结论 L-天门冬氨酸螯合钙的制备,能有效利用贝壳废弃物,补充人体钙元素和基本氨基酸,为L-天门冬氨酸螯合钙的工业生产提供理论基础。

关键词：氨基酸螯合钙 L-天门冬氨酸螯合工艺结构表征

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羚羊角与山羊角蛋白质类成分比较研究

羚羊角与山羊角蛋白质类成分比较研究

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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：刘睿朱振华吴佳钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学药学院江苏南京 210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心南京中医药大学药学院江苏南京 210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学药学院江苏南京 210023

应用SDS-PAGE 与LC-MS/MS 技术对羚羊角与山羊角中蛋白质类成分进行鉴定分析研究.采用胶内酶切制备羚羊角与山羊角酶解肽段，通过nano LCLTQ/Orbitrap MS 鉴定蛋白质，从羚羊角中鉴定了101 个蛋白质，山羊角中鉴定了140个蛋白质;羚羊角... 详细信息

应用SDS-PAGE 与LC-MS/MS 技术对羚羊角与山羊角中蛋白质类成分进行鉴定分析研究.采用胶内酶切制备羚羊角与山羊角酶解肽段，通过nano LCLTQ/Orbitrap MS 鉴定蛋白质，从羚羊角中鉴定了101 个蛋白质，山羊角中鉴定了140个蛋白质;羚羊角中共含有43 个角蛋白(KRT)及角蛋白相关蛋白(KAP)，占总蛋白数量的42.6％，山羊角中KRT 与KAP 共52 个，占总蛋白数量的37.1％.羚羊角与山羊角比较结果表明，两者共性成分是以角蛋白为主的分子结构相关蛋白质，两者在蛋白质种类构成方面具有相似性.本文研究为羚羊角与山羊角系统物质基础研究提供测定方法与实验数据，对角类动物药的功效物质基础研究、质量标准研究等方面具有指导意义.

关键词：羚羊角山羊角蛋白质比较 LC-MS/MS

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银桑颗粒对db/db小鼠降糖作用的研究（英文）

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南京中医药大学学报 2017年第3期33卷 252-257页

作者：张文英杨小林王欣之刘睿杜俊潮张倩吴皓卞慧敏南京中医药大学江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023

目的研究银桑颗粒对自发性2型糖尿病模型db/db小鼠的降血糖作用。方法将db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和银桑颗粒低、中、高剂量组,另设db/m小鼠为正常组。前7周每周测定空腹血糖(FBG);第9、10、11周分别测定口服糖耐量(OGTT)、... 详细信息

目的研究银桑颗粒对自发性2型糖尿病模型db/db小鼠的降血糖作用。方法将db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和银桑颗粒低、中、高剂量组,另设db/m小鼠为正常组。前7周每周测定空腹血糖(FBG);第9、10、11周分别测定口服糖耐量(OGTT)、胰岛素耐量(ITT)、淀粉耐量(STT);12周时测定肝糖原、胰岛素(INS)、糖化血红蛋白(GHb)、糖化血清蛋白(GSP)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量,采用HE染色法进行肾脏、胰腺病理学观察。结果与模型组相比,银桑颗粒给药组的OGTT、ITT、STT各测定点的血糖值显著降低(P<0.05~0.01),曲线下面积减小(P<0.05~0.01);肝糖原、HDL-C含量皆显著升高(P<0.05~0.01);FBG、GSP、INS、GHb、T-CHO、TG、LDL-C含量皆显著降低(P<0.05~0.01);病理切片显示肾小管上皮细胞颗粒变性程度减轻,肾盂扩张程度也减轻;胰岛细胞边缘较规则,且细胞出现空泡样变性程度减轻。结论银桑颗粒能够增加胰岛素的敏感性,从而综合地调节db/db小鼠的血糖和血脂。

关键词：银桑颗粒糖尿病胰岛素抵抗降血糖降血脂

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高效液相色谱法测定四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸

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食品与发酵工业 2017年第3期43卷 224-228页

作者：张倩刘睿王欣之程建明张文英杜俊潮吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心江苏南京210023

建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸5’-尿苷酸(5’-UMP)、5’-鸟苷酸(5’-GMP)、5’-肌苷酸(5’-IMP)和5’-腺苷酸(5’-AMP)含量。采用Waters Atlantis T3(4.6 mm×250 mm,3μm)色谱柱,以0.01 mol/L KH_2PO_4溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,紫外检测器在260 nm处进行检测,外标法进行定量。结果表明:各呈味核苷酸线性关系良好,相关系数R^2均为0.999 9,回收率在96.19%~103.25%内,相对标准偏差在1.08%~1.28%内。四角蛤蜊与菲律宾蛤仔中均含有4种呈味核苷酸,其中5’-AMP含量最多,其次是5’-IMP和5’-UMP,而5’-GMP含量最低。该方法简单,重现性好、灵敏度和准确度高,适用于四角蛤蜊、菲律宾蛤仔中呈味核苷酸含量测定,为研究贝类风味及贝类食品的开发提供一定的依据。

关键词：高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC) 四角蛤蜊菲律宾蛤仔呈味核苷酸

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山羊角中巯基的测定及山羊角对体内巯基的干预研究

山羊角中巯基的测定及山羊角对体内巯基的干预研究

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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：刘睿朱振华钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京 210 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京 210023

目的测定山羊角提取液及大鼠血浆中游离巯基(-SH)与总-SH 的含量。方法采用Ellman 法测定山羊角提取液中游离-SH 与总-SH 的含量;大鼠连续灌胃给予山羊角提取物后，测定大鼠血浆中游离-SH 和总-SH 的水平;大鼠灌胃给予山羊角提取物后... 详细信息

目的测定山羊角提取液及大鼠血浆中游离巯基(-SH)与总-SH 的含量。方法采用Ellman 法测定山羊角提取液中游离-SH 与总-SH 的含量;大鼠连续灌胃给予山羊角提取物后，测定大鼠血浆中游离-SH 和总-SH 的水平;大鼠灌胃给予山羊角提取物后，连续测定给药后大鼠血浆中游离-SH 含量随时间变化曲线。

关键词：山羊角巯基血浆测定

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江苏沿海地区四种低值贝类软体中砷的形态及含量分布研究

江苏沿海地区四种低值贝类软体中砷的形态及含量分布研究

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第十三届海洋药物学术年会暨2017国际海洋药物研讨会

作者：王欣之陈翔刘睿吴皓江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学药学院南京210009

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基于定量蛋白质组分析可持续资源替代濒危角类动物药资源的可行性

基于定量蛋白质组分析可持续资源替代濒危角类动物药资源的可行性

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第二届中国中药资源大会--纪念李时珍诞辰500周年学术会

作者：刘睿朱振华钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学药学院江苏南京 210023 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心南京中医药大学药学院江苏南京 210023

本文基于iTRAQ 定量蛋白质组学研究方法比较分析了犀角、羚羊角、藏羚羊角、牦牛角、水牛角及山羊角中蛋白质含量差异，从所有角类样品中共鉴定了591 个蛋白质，对其中321 个蛋白质进行了定量分析，根据蛋白质的分子功能、细胞组成及生... 详细信息

本文基于iTRAQ 定量蛋白质组学研究方法比较分析了犀角、羚羊角、藏羚羊角、牦牛角、水牛角及山羊角中蛋白质含量差异，从所有角类样品中共鉴定了591 个蛋白质，对其中321 个蛋白质进行了定量分析，根据蛋白质的分子功能、细胞组成及生物进程对鉴定的蛋白质进行分析归类。主成分分析与聚类分析将犀角、水牛角归为一类，羚羊角、藏羚羊角及山羊角归为一类，牦牛角为第三类。此外，在鉴定出的蛋白质中，有些蛋白质被作为不同物种间的特征蛋白，如转谷氨酰胺酶、桥粒糖蛋白及延长因子。定量蛋白质组学的比较分析方法为可持续资源替代濒危珍稀角类动物药提供进一步的研究依据。

关键词： iTRAQ 蛋白质组角类药材主成分分析聚类

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基于定量蛋白质组学研究珍稀角类动物药替代资源

基于定量蛋白质组学研究珍稀角类动物药替代资源

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2018中医药青年托举人才论坛暨项目交流会

作者：刘睿朱振华钱大玮段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心

本文采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)的定量蛋白质组学的研究方法对濒危动物的角(犀角、赛加羚羊角、藏羚羊角)及普通动物的角(牦牛角、水牛角、山羊角)进行比较分析。一共鉴定出591个蛋白质，其中321个蛋白质可进行定量。我们根... 详细信息

本文采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)的定量蛋白质组学的研究方法对濒危动物的角(犀角、赛加羚羊角、藏羚羊角)及普通动物的角(牦牛角、水牛角、山羊角)进行比较分析。一共鉴定出591个蛋白质，其中321个蛋白质可进行定量。我们根据这些蛋白质的分子功能、细胞组成及生物进程进行归类分析，主成分分析(PCA)和聚类分析(HCA)根据不同样品中蛋白质的含量将角类样品分为3个主要类簇，其中转谷氨酰胺酶、桥粒糖蛋白及延长因子被认为是不同角类样品的特征蛋白成分。基于定量蛋白质组学的研究方法可以为珍稀角类动物药替代资源的评价与应用提供进一步证据。

关键词： iTRAQ 蛋白质组动物角主成分分析聚类

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四角蛤蜊核苷类成分纯化工艺研究

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食品研究与开发 2017年第18期38卷 30-35页

作者：张倩刘睿程建明王欣之杜俊潮张文英吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省海洋药用生物资源研究与开发重点实验室江苏南京210023 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

采用大孔吸附树脂与阳离子交换树脂串联纯化四角蛤蜊醇沉上清液中核苷类成分,以核苷的纯度和回收率为指标,考察树脂的型号、上样浓度、水洗体积、洗脱剂浓度及流速对纯化效果的影响,以期得到最佳的纯化工艺。确定大孔吸附树脂的型号及... 详细信息

采用大孔吸附树脂与阳离子交换树脂串联纯化四角蛤蜊醇沉上清液中核苷类成分,以核苷的纯度和回收率为指标,考察树脂的型号、上样浓度、水洗体积、洗脱剂浓度及流速对纯化效果的影响,以期得到最佳的纯化工艺。确定大孔吸附树脂的型号及最佳工艺为:SP207型,质量浓度250 mg/m L,p H值为5.0,水洗除杂体积是3 BV,洗脱液为体积分数5%乙醇。进一步通过离子交换树脂纯化,确定树脂型号及最佳纯化工艺为:001~*7阳离子交换树脂,质量浓度6.3 mg/m L,氨水∶乙醇(体积比3∶30)溶液洗脱,洗脱流速是3 BV/h。经两种树脂串联纯化后,四角蛤蜊醇沉上清液中核苷类成分的质量分数由1.80%提高至50.60%,总回收率为70.32%。工艺验证结果表明SP207大孔吸附树脂与001~*7阳离子交换树脂串联纯化核苷类成分的方法稳定可行,能够用于四角蛤蜊核苷类成分的分离纯化。

关键词：四角蛤蜊核苷大孔吸附树脂阳离子交换树脂纯化

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