检索结果-内蒙古大学图书馆

Akkermansia muciniphila对大鼠高温运动后器官损伤的影响

中国微生态学杂志 2024年第2期36卷 125-134,146页

作者：杨展孙学伟秦明珂崔茜张昕蕊张若男路寒张明燕朱进郑峰唐成亮东部战区疾病预防控制中心江苏南京210002 滨州医学院基础医学院陆军军医大学军事预防医学系军队劳动卫生学教研室东部战区空军医院南京中医药大学医学院整合医学学院南京医科大学病原生物学系南京医科大学第二附属医院南京中医药大学金陵临床医学院

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(... 详细信息

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(AKK干预组,n=8)、高温粪菌移植组(HT.R组,n=4)和***粪菌移植组(AKK.R组,n=4),在力竭运动后采集大鼠的血液、组织及粪便样本,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的变化。通过16S rRNA基因测序和GC-MS方法分析粪便中菌群和代谢产物的改变,对结肠组织和肝脏组织进行病理检测,采用免疫组化方法评估肠道屏障功能。结果HT组和AKK干预组大鼠在(35±2)℃、湿度(55±5)%的环境下平均运动时间分别为(13.76±3.454)和(19.55±1.997)min,差异有统计学意义(t=4.104,P=0.0011)。***干预后,大鼠血清的AST(U/mL)、ALT(U/mL)、BUN(mmol/L)和Cr(μmol/L)平均水平(3.953±1.877、2.622±1.086、10.040±1.088、65.800±12.010)均低于HT组(6.358±1.436、4.335±1.304、15.010±1.913、93.980±39.110),其中AST、ALT、BUN水平检测差异均有统计学意义(t=2.878、2.856、6.381,P=0.0122、0.0127、<0.0001)。肠道菌群组成结构在属水平上发生变化,粪便中代谢产物水平有不同程度的改变。病理结果显示,AKK干预组大鼠的肝脏损伤较HT组有显著缓解。AKK干预组大鼠的肠道屏障相关连接蛋白ZO-1和Occludin表达量的累积光密度值(6330±481.8、6140±281.7)较HT组(3425±257.0、3943±242.1)上调(t=9.216、10.250,P=0.0008、0.0005)。结论***能够在一定程度上通过维持肠道屏障功能,改善肠道微生态,减轻高温运动带来的肠道及肝脏损伤。

关键词：运动高温嗜黏蛋白阿克曼菌肠道菌群器官损伤

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磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路介导葛根素改善缺氧复氧损伤的作用及机制

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中国循环杂志 2021年第8期36卷 814-821页

作者：杨学攀朱明明余曦贺稳陈晗施洪飞南京中医药大学翰林学院江苏省泰州市225300 南京中医药大学第二临床医学院营养学教研室

目的:探讨磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路介导葛根素改善缺氧复氧损伤的作用及机制。方法:应用噻唑蓝法筛选出合适的葛根素以及PI3K抑制剂LY294002干预人脐静脉内皮细胞***926的浓度。分为对照组、缺氧复氧组、缺氧复氧... 详细信息

目的:探讨磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路介导葛根素改善缺氧复氧损伤的作用及机制。方法:应用噻唑蓝法筛选出合适的葛根素以及PI3K抑制剂LY294002干预人脐静脉内皮细胞***926的浓度。分为对照组、缺氧复氧组、缺氧复氧+葛根素组(葛根素组),缺氧复氧+葛根素+LY294002处理组(葛根素+抑制剂组),每组均设3个复孔。应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测葛根素预处理细胞后以及葛根素预处理细胞的同时加入LY294002后对B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、活化天冬氨酸蛋白水解酶-9(cleaved caspase-9)、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、Akt蛋白表达的影响。应用实时荧光定量PCR检测葛根素预处理对***926细胞缺氧复氧后天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)和Bcl-2信使核糖核酸(mRNA)表达的影响。应用Hoechest染色检测葛根素预处理对***926细胞凋亡的影响。结果:葛根素(10^(-7)mol/L)明显升高缺氧复氧后***926细胞活力(P<0.001),并显著上调Bcl-2蛋白水平的表达,下调Bax、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3蛋白水平的表达(P均<0.01)。与缺氧复氧组相比,葛根素预处理后,p-Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。加入LY294002(10μmol/L)后p-Akt蛋白表达水平下降,且抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平下降,促凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bax的表达水平升高(P均<0.01)。结论:葛根素对缺氧复氧诱导的***926细胞凋亡具有抑制作用,其抑制作用可能与其对PI3K/Akt信号通路的调控有关。

关键词：细胞凋亡内皮细胞葛根素心肌缺血再灌注损伤磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路

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黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用和机制

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2856-2861页

作者：王美子王玉万毅刚石岩涂玥史俪婧黄露武九龙戴青青龙燕万子玥南京中医药大学鼓楼临床医学院中医科南京210008 南京大学中医研究院南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科南京210008 辽宁中医药大学沈阳110847 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室南京210023 一桥大学·大学院社会学研究科·社会学部日本东京186-8601

目的:探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制。方法:将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组。采用“高脂饲料喂养、单侧肾切... 详细信息

目的:探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制。方法:将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组。采用“高脂饲料喂养、单侧肾切除、链脲佐菌素(STZ)腹腔注射”3种措施联合建立改良型DKD大鼠模型。成模后,4组大鼠分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及IMA混悬液灌胃,连续4周。在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液和肾组织,采用肾组织病理染色、蛋白质分析和透射电子显微镜等技术进行检测和观察肾组织PMT相关指标。结果:与模型组比较,TFA组和IMA组UNAG与TFA组UACR水平显著降低(P<0.01);细胞外基质和肾间质胶原相对面积显著降低(P<0.01);TFA组和IMA组显著改善周细胞超微结构特征、周细胞和肌成纤维细胞标志分子蛋白表达强度和表达水平(P<0.01,P<0.05);TFA和IMA可以抑制肾组织血管内皮生长因子受体(PDGFR)、血小板源性生长因子受体(VEGFR)信号通路关键信号分子蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:TFA与IMA体内能改善DKD大鼠RIF,其机制可能是通过调控周细胞-内皮细胞相关PDGFR、VEGFR信号通路活性而抑制肾组织PMT。该研究为黄蜀葵花治疗DKD患者RIF提供了可靠的药理学证据。

关键词：糖尿病肾脏疾病黄蜀葵花总黄酮周细胞-肌成纤维细胞转分化血管内皮生长因子受体信号通路血小板源性生长因子受体信号通路伊马替尼肾间质纤维化

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葛根芩连汤加味方改善糖尿病肾病模型鼠足细胞焦亡和胰岛素抵抗的作用和机制

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中国中药杂志 2021年第17期46卷 4471-4479页

作者：王美子岳丽军万毅刚黄煌吴薇涂玥刘不悔房其军袁灿灿王杰李欢 WAN Zi-yue 南京中医药大学鼓楼临床医学院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学国际经方学院江苏南京210023 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 Graduate School of Social Sciences Faculty of Social SciencesHitotsubashi UniversityTokyo 186-8601

为了探究现代经方——葛根芩连汤加味方(Supplemented Gegen Qinlian Decoction Formula,SGDF)在体内改善糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的作用和机制,将60只大鼠随机分为正常组、模型组、SGDF组和罗格列酮(rosiglitazone,ROS)组。通过"高脂饲料喂养+单侧肾切除+链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射"等3种措施建立改良型大鼠DKD模型。成模后,对于4组大鼠,每天经灌胃分别给予其双蒸水、SGDF混悬液以及ROS混悬液。在药物干预第6周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织,进而,针对DKD足细胞焦亡和胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)相关的各项指标进行检测和观察。这些指标包括各组大鼠一般情况,尿液、血液生化指标,肾小球硬化相关指标,足细胞焦亡标志分子,IR相关指标以及肾组织胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)1/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase,Akt)信号通路关键信号分子等。结果显示,对于DKD模型鼠,SGDF和ROS尽管对血糖(blood glucose,BG)无影响,但是都能改善其一般状况、部分肾功能指标以及肾小球硬化;都能改善其足细胞焦亡标志分子的表达特征和表达水平;此外,还能改善其肾组织IR,并不同程度地上调其肾组织IRS1/PI3K/Akt信号通路关键信号分子蛋白表达水平。总之,SGDF与ROS相似,在体内能多靶点地改善DKD,其机制与减轻足细胞焦亡和IR有关;该研究为现代经方——SGDF治疗DKD新药研究与开发提供了初步的药理学证据。

关键词：糖尿病肾病葛根芩连汤加味方足细胞焦亡胰岛素抵抗胰岛素信号通路

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羟基红花黄色素A对内皮细胞***926缺氧复氧后凋亡的抑制作用研究

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中草药 2019年第16期50卷 3897-3903页

作者：杨学攀征宗梅余曦刘亭宇施洪飞朱明明南京中医药大学第二临床医学院营养学教研室

目的观察羟基红花黄色素A(HSYA)对缺氧复氧诱导的人脐静脉内皮细胞***926凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测不同缺氧(8、12h)、复氧(4、8、12h)时间对细胞活力的影响以及不同浓度HSYA(0.1、1、10、100μmol/L)对缺氧12h、复氧8h后... 详细信息

目的观察羟基红花黄色素A(HSYA)对缺氧复氧诱导的人脐静脉内皮细胞***926凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测不同缺氧(8、12h)、复氧(4、8、12h)时间对细胞活力的影响以及不同浓度HSYA(0.1、1、10、100μmol/L)对缺氧12h、复氧8h后细胞活力的影响。Western blotting法检测HSYA对缺氧12h,复氧8h后***926细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9蛋白表达的影响。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HSYA对缺氧12 h复氧8 h后***926细胞中Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响。Hoechest染色、流式细胞术检测HSYA对缺氧12 h复氧8 h后***926细胞凋亡的影响。结果与对照组比较,缺氧8、12h,复氧4、8、12h后***926细胞活力均显著下降,其中缺氧12 h、复氧8 h后细胞活力下降最为显著(P<0.001),且Bax、cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著上升、Bcl-2蛋白表达水平显著下降。与模型组比较,HSYA 10μmol/L能够明显提高缺氧复氧后细胞活力(P<0.01),并显著上调Bcl-2蛋白表达水平,下调Bax、cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3蛋白表达水平。结论HSYA能有效抑制缺氧复氧导致的***926凋亡,其机制可能与下调Bax、cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3蛋白表达、上调Bcl-2蛋白表达有关。

关键词：细胞凋亡内皮细胞羟基红花黄色素A 心肌缺血再灌注损伤缺氧复氧模型

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低氧诱导因子的分子调控机制及中药的干预作用

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中国中药杂志 2020年第20期45卷 4805-4811页

作者：刘不悔王美子孙伟万毅刚吴薇房其军王文文 YEE Hong-yun 袁灿灿刘莹露涂玥 CHONG Fee-lan 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 The School of Pharmacy Management and Science UniversityShah Alam 40100Malaysia

低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)是机体内感受和调节细胞氧浓度的关键转录因子。HIF-1由α和β等2个亚基组成,其中,HIF-1α的分子调控机制涉及其降解和活化等主要过程。HIF-1α的降解是由氧依赖性信号途径调控的,包括&qu... 详细信息

低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)是机体内感受和调节细胞氧浓度的关键转录因子。HIF-1由α和β等2个亚基组成,其中,HIF-1α的分子调控机制涉及其降解和活化等主要过程。HIF-1α的降解是由氧依赖性信号途径调控的,包括"希佩尔-林道病恶性肿瘤抑制蛋白(von hippel-lindau protein,pVHL)依赖通路"和"pVHL非依赖性通路";而HIF-1α的活化是由氧非依赖性信号途径调控的,包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/真核生物始动因子4E结合蛋白1(eukaryotic initiation factor 4E-binding protein 1, 4EBP1)/HIF-1α通路、磷脂酰肌醇3激酶(phosph atidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(proteirrserinc-threonine kinases,Akt)/HIF-1α通路以及沉默信息调节因子1(silent information regulator1,Sirt1)/HIF-1α通路等。近年来,基于HIFs的分子调控机制,不仅研制出治疗肾性贫血的新药罗沙司他,在中药提取物中也发现了一些药理作用类似于HIFs的大分子物质,如大黄素、三七皂苷、厚朴酚以及灵仙新苷等,这些天然的大分子物质在炎症反应、自噬、表观遗传修饰以及细胞焦亡中发挥调控性作用。值得注意的是,对于常见的低氧相关疾病,如糖尿病肾病,HIFs介导的"细胞焦亡"可能是清利湿热类中药及其代表性经方(如二妙丸)干预炎症性组织、细胞损伤的新靶点。

关键词：低氧诱导因子中药分子机制信号通路细胞焦亡

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黄葵胶囊对早期糖尿病肾脏疾病患者胰岛素抵抗和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用

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中国中药杂志 2020年第23期45卷 5797-5803页

作者：吴薇刘莹露万毅刚曹东维房其军涂玥刘不悔王文文王美子 YEE Hong-yun 袁灿灿胡巍南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院肾内科江苏南京210008 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京大学医学院附属鼓楼医院药学部江苏南京210008

观察黄葵胶囊(Huangkui Capsules,HKC)对早期糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用。收集83例G2,A2期DKD患者的病例资料,进行回顾性分析。根据不同干预措... 详细信息

观察黄葵胶囊(Huangkui Capsules,HKC)对早期糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用。收集83例G2,A2期DKD患者的病例资料,进行回顾性分析。根据不同干预措施将全部患者分为对照(A)组40例和治疗(B)组43例。其中,A组患者接受的治疗措施是"常规基础治疗";B组患者接受的治疗措施是"常规基础治疗+HKC"。对于2组患者,先比较其在接受干预措施前的基线参数,再比较其在接受干预措施8周后的中医证候总积分以及IR、尿蛋白、肾功能、血脂、安全性指标的变化情况,并且,针对全部DKD患者干预前后IR指标与尿蛋白指标、中医证候总积分分别进行相关性分析。结果表明,对于接受"常规基础治疗+HKC"干预措施的B组患者,其中医证候总积分、尿蛋白指标[包括尿微量白蛋白(urine microalbumin,micro-UAlb)、尿微量白蛋白/尿肌酐(urine microalbumin/urinary creatinine,UACR)]、IR主要指标[包括空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FIN)、稳态模型评估IR指数(homeostasis model assessment of IR,HOMA-IR)]均有明显改善;全部DKD患者干预前后IR主要指标(FIN,HOMA-IR)与尿蛋白指标(micro-UAlb,UACR)均呈正相关;全部DKD患者干预前后IR主要指标(FIN,HOMA-IR)与中医证候总积分亦呈正相关。此外,2种干预措施对全部DKD患者肾功能、血脂以及安全性指标均无明显影响。总之,"常规基础治疗联合HKC"的干预措施不仅能改善早期DKD患者IR,还能减少尿微量白蛋白。其治疗靶点不只在蛋白尿,还可能是蛋白尿的上游致病因素——IR。

关键词：糖尿病肾脏疾病黄葵胶囊胰岛素抵抗尿微量白蛋白

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黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用和机制

黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细...

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第十三届全国中医药博士生学术论坛

作者：王美子王玉万毅刚石岩涂玥史俪婧黄露武九龙戴青青龙燕万子玥南京中医药大学鼓楼临床医学院中医科南京 210008 南京大学中医研究院南京 210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科南京 210008 辽宁中医药大学沈阳 110847 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室南京 210023 一桥大学·大学院社会学研究科·社会学部日本东京186-8601

目的：探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制.方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组.采用"高脂饲料喂养、单侧... 详细信息

目的：探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制.方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组.采用"高脂饲料喂养、单侧肾切除、链脲佐菌素(STZ)腹腔注射"3种措施联合建立改良型DKD大鼠模型.成模后,4组大鼠分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及IMA混悬液灌胃,连续4周.在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液和肾组织,采用肾组织病理染色、蛋白质分析和透射电子显微镜等技术进行检测和观察肾组织PMT相关指标.结果：与模型组比较,TFA组和IMA组UNAG与TFA组UACR水平显著降低(P＜0.01);细胞外基质和肾间质胶原相对面积显著降低(P＜0.01);TFA组和IMA组显著改善周细胞超微结构特征、周细胞和肌成纤维细胞标志分子蛋白表达强度和表达水平(P＜0.01,P＜0.05);TFA和IMA可以抑制肾组织血管内皮生长因子受体(PDGFR)、血小板源性生长因子受体(VEGFR)信号通路关键信号分子蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论：TFA与IMA体内能改善DKD大鼠RIF,其机制可能是通过调控周细胞-内皮细胞相关PDGFR、VEGFR信号通路活性而抑制肾组织PMT.该研究为黄蜀葵花治疗DKD患者RIF提供了可靠的药理学证据.

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《推拿学》见习课程中形成性评价的研究与实践

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中国继续医学教育 2020年第27期12卷 53-57页

作者：杨靖颐沈潜国生郝曈付国兵北京中医药大学第二临床医学院推拿学教研室北京100078

目的比较《推拿学》见习课程中形成性评价模式的教学效果,以期选择最佳教学的评价方法。方法在推拿学见习课程教学中试验组以形成性评价模式进行教学,对照组以传统教学模式教学,在见习课程结束后以手法考核成绩、综合实践考核成绩、试... 详细信息

目的比较《推拿学》见习课程中形成性评价模式的教学效果,以期选择最佳教学的评价方法。方法在推拿学见习课程教学中试验组以形成性评价模式进行教学,对照组以传统教学模式教学,在见习课程结束后以手法考核成绩、综合实践考核成绩、试卷成绩及课程成绩为指标,比较两组教学效果。结果试验组的学生的手法考核成绩、综合实践考核成绩、试卷成绩及课程成绩均高于对照组(P<0.05)。结论采用形成性评价模式的教学效果更好,学生在评价过程中处于主动的地位,学生的自尊心和自信心得到了保护,学生充分发挥了主观能动性,学习热情高、学习效果好、操作技能及临床思维均得到很大程度的提高,授课教师通过“测试-反馈-调整教学计划”不断地改进教学方法,对自己的教学水平提出较高的要求。

关键词：中医学教育形成性评价推拿学见习教学教学效果教学评价

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基于自噬信号通路探究褐藻多糖硫酸酯改善人近端肾小管上皮细胞衰老的分子机制

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中国中药杂志 2020年第24期45卷 6003-6011页

作者：房其军刘建璟万毅刚刘不悔涂玥吴薇刘莹露王文文王美子 YEE Hong-yun 袁灿灿 CHONG Fee-lan 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210029 江苏省中西医结合医院肾内科江苏南京210028 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院•养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 School of Pharmacy Management and Science UniversityShah Alam 40100

褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作用。然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚。将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常... 详细信息

褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作用。然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚。将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常组(normal group,N)、模型组(D-gal model group,D)、低剂量FPS组(low dose of FPS,L-FPS)、高剂量FPS组(high dose of FPS,H-FPS)以及维生素E组(vitamin E,VE),分别进行不同的干预。N组加入1%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)1 mL;D组加入75 mmol·L^(-1)D-gal;L-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+25μg·mL^(-1)FPS;H-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)FPS;VE组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)VE。在干预后24 h,首先,观察D-gal对HK-2细胞β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平和腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)-不协调的51类激酶1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号通路活性的影响;其次,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平的影响;最后,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)蛋白表达水平以及AMPK-ULK1信号通路活性的影响。结果表明,对于HK-2细胞,75 mmol·L^(-1)的D-gal能安全而有效地诱导细胞SA-β-gal染色特征和klotho,P53,P21蛋白表达水平的变化,也就是引发细胞衰老;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P21,P53蛋白表达水平的变化,也就是拮抗细胞衰老,这里,两者的作用是类似的;D-gal不仅能诱导细胞衰老,还能促进LC3Ⅱ,磷酸化AMPK(phosphorylated-AMPK,p-AMPK)以及磷酸化ULK1(phosphorylated-ULK1,p-ULK1)蛋白高表达,激活自噬相关AMPK-ULK1信号通路;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞LC3Ⅱ,p-AMPK以及p-ULK1蛋白表达水平的变化,也就是抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性。总之,对于D-gal诱导的人近端肾小管上皮细胞衰老模型,FPS与VE相似,能改善肾脏细胞衰老,其分子机制可能与抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性有关。这一发现为FPS抗肾脏衰老提供了初步的药理学证据。

关键词：衰老褐藻多糖硫酸酯人近端肾小管上皮细胞自噬 AMPK-ULK1信号通路

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