检索结果-内蒙古大学图书馆

现代肿瘤医学 2024年第12期32卷 2140-2146页

作者：褚小莉陈林朱栋炜南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)检验科江苏南京210009 南京医科大学附属逸夫医院检验科江苏南京211100 江苏大学医学院免疫学教研室江苏省临床检验诊断重点实验室江苏镇江212013

目的:探究脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells, UCMSCs)来源的外泌体(exosomes, EX)对胃癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:将脐带剪碎后培养,收集第三代到第五代的UCMSCs培养上清,制备UCMSCs来源的EX(UCMSCs-EX)。通... 详细信息

目的:探究脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells, UCMSCs)来源的外泌体(exosomes, EX)对胃癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:将脐带剪碎后培养,收集第三代到第五代的UCMSCs培养上清,制备UCMSCs来源的EX(UCMSCs-EX)。通过透射电子显微镜观察其形态、流式粒径分析以及Western blot检测特异性蛋白表达的方法对UCMSCs-EX进行鉴定。通过CCK-8和Transwell实验分别检测UCMSCs-EX对胃癌细胞株HGC-27增殖和侵袭的影响。皮下注射HGC-27到裸鼠体内构建胃癌移植瘤小鼠模型,通过尾静脉注射UCMSCs-EX,然后观察UCMSCs-EX对移植瘤小鼠模型体积和生存率的影响。对UCMSCs-EX进行circRNA测序分析,对表达前5位的circRNA进行qRT-PCR验证,运用siRNA干扰筛选circRNA表达的方法,观察UCMSCs-EX携带的circRNA对HGC-27增殖和侵袭的影响。结果:UCMSCs呈梭形生长,成功制备UCMSCs-EX。相比于空白对照组,40μg/mL和60μg/mL的UCMSCs-EX可以明显抑制HGC-27的增殖和侵袭。尾静脉注射UCMSCs-EX可以明显降低胃癌移植瘤体积以及增加模型小鼠的生存率。相比于si-RNA阴性对照,经过si-RNA-circ_0027599处理后制备的UCMSCs-EX中circ_0027599表达量降低,其抑制HGC-27增殖和侵袭的作用明显减弱。结论:UCMSCs-EX可以抑制胃癌细胞HGC-27的增殖和侵袭,UCMSCs-EX携带的circ-0027599可以在体外抑制HGC-27的增殖和侵袭。

关键词：脐带间充质干细胞外泌体环状RNA 胃癌

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血浆胞外囊泡中LncRNA Linc01305在乳腺癌中的表达及意义

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现代肿瘤医学 2025年第2期33卷 234-240页

作者：梁丽沈健彭辉勇张磊朱栋炜南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)检验科江苏南京210000 江苏大学医学院免疫学教研室江苏省临床检验诊断重点实验室江苏镇江212000 镇江市第一人民医院(江苏大学附属人民医院)检验科江苏镇江212000

目的:筛选乳腺癌(breast cancer,BC)血浆胞外囊泡中差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),并验证其诊断BC的价值。方法:采用电镜、粒径分析、Western blot检测等方法鉴定血浆样本中制备的胞外囊泡。对8例BC病人和8例健... 详细信息

目的:筛选乳腺癌(breast cancer,BC)血浆胞外囊泡中差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),并验证其诊断BC的价值。方法:采用电镜、粒径分析、Western blot检测等方法鉴定血浆样本中制备的胞外囊泡。对8例BC病人和8例健康人的血浆胞外囊泡进行LncRNA测序分析。qRT-PCR测定65例BC病人和65例健康对照样本以及鉴别诊断疾病乳腺纤维腺瘤、乳腺囊性增生病、浆细胞性乳腺炎病人的胞外囊泡中Linc01305的表达水平。qRT-PCR检测乳腺癌细胞系中Linc01305的表达水平。qRT-PCR检测BC病人术前与术后血浆胞外囊泡中Linc01305的表达水平。统计分析BC病人血浆胞外囊泡Linc01305的表达量与临床病理特征的相关性。结果:电镜、粒径分析、Western blot检测发现典型的胞外囊泡特征。测序结果显示Linc01305在BC病人血浆胞外囊泡中的表达水平高于健康人,qRT-PCR结果确认了测序结果,并且Linc01305在乳腺癌细胞系中高表达(P均<0.01),而在BC病人手术切除肿瘤后表达降低(P<0.01)。BC病人血浆胞外囊泡Linc01305的高表达与BC的肿瘤大小、TNM分期、浸润深度和淋巴结转移相关。血浆胞外囊泡Linc01305诊断BC病人的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.7712(P<0.0001)。结论:Linc01305在BC病人血浆胞外囊泡中高表达,且与肿瘤大小、TNM分期、浸润深度和淋巴结转移相关,有望成为BC新的诊断标志物。

关键词： Linc01305 乳腺癌血浆胞外囊泡

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羟基红花黄色素A对内皮细胞***926缺氧复氧后凋亡的抑制作用研究

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中草药 2019年第16期50卷 3897-3903页

作者：杨学攀征宗梅余曦刘亭宇施洪飞朱明明南京中医药大学第二临床医学院营养学教研室

目的观察羟基红花黄色素A(HSYA)对缺氧复氧诱导的人脐静脉内皮细胞***926凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测不同缺氧(8、12h)、复氧(4、8、12h)时间对细胞活力的影响以及不同浓度HSYA(0.1、1、10、100μmol/L)对缺氧12h、复氧8h后... 详细信息

目的观察羟基红花黄色素A(HSYA)对缺氧复氧诱导的人脐静脉内皮细胞***926凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测不同缺氧(8、12h)、复氧(4、8、12h)时间对细胞活力的影响以及不同浓度HSYA(0.1、1、10、100μmol/L)对缺氧12h、复氧8h后细胞活力的影响。Western blotting法检测HSYA对缺氧12h,复氧8h后***926细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9蛋白表达的影响。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HSYA对缺氧12 h复氧8 h后***926细胞中Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响。Hoechest染色、流式细胞术检测HSYA对缺氧12 h复氧8 h后***926细胞凋亡的影响。结果与对照组比较,缺氧8、12h,复氧4、8、12h后***926细胞活力均显著下降,其中缺氧12 h、复氧8 h后细胞活力下降最为显著(P<0.001),且Bax、cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著上升、Bcl-2蛋白表达水平显著下降。与模型组比较,HSYA 10μmol/L能够明显提高缺氧复氧后细胞活力(P<0.01),并显著上调Bcl-2蛋白表达水平,下调Bax、cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3蛋白表达水平。结论HSYA能有效抑制缺氧复氧导致的***926凋亡,其机制可能与下调Bax、cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3蛋白表达、上调Bcl-2蛋白表达有关。

关键词：细胞凋亡内皮细胞羟基红花黄色素A 心肌缺血再灌注损伤缺氧复氧模型

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环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的作用研究

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现代肿瘤医学 2024年第1期32卷 35-41页

作者：戴万辉彭辉勇戴锦东朱栋炜南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)检验科江苏南京210000 镇江市第一人民医院(江苏大学附属人民医院)检验科江苏镇江212000 江苏大学医学院免疫学教研室江苏省临床检验诊断重点实验室江苏镇江212000

目的:探讨环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的临床意义。方法:采集10例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析,以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ_104939作为研究对象。利用qRT-PCR检测30对肺腺癌组织与癌旁组织中ci... 详细信息

目的:探讨环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的临床意义。方法:采集10例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析,以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ_104939作为研究对象。利用qRT-PCR检测30对肺腺癌组织与癌旁组织中circ_104939的表达量,验证测序结果。用qRT-PCR检测和分析circ_104939在肺腺癌细胞系(HCC-78、A549、KTA-7以及PC-9)和正常人支气管上皮细胞BEAS-2B中的表达差异。siRNA敲减circ_104939后,用MTT、平板划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测细胞周期实验分别检测肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)增殖、迁移、侵袭以及细胞周期的变化。利用RNA pulldown和荧光素酶报告实验验证circ_104939的可能靶标miR-191-5p。siRNA敲减circ_104939后,将肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)分别皮下注射到裸鼠体内构建荷瘤小鼠模型,检测移植瘤体积以及质量。结果:相比癌旁组织,肺腺癌组织中的circ_104939表达显著增高(P<0.01);circ_104939在肺腺癌细胞中的表达水平明显高于正常人支气管上皮细胞(P<0.05或P<0.01)。circ_104939敲减后,KTA-7和PC-9细胞增殖、侵袭能力、细胞周期进展、PC-9细胞迁移能力下降(P<0.05或P<0.01)。circ_104939能够海绵样吸附miR-104939。circ_104939敲减后,荷瘤小鼠肿瘤体积减小(P<0.05或P<0.01),肿瘤质量显著降低(P<0.01或P<0.001)。结论:circ_104939在肺腺癌组织中呈高表达,有望作为肺腺癌诊断和治疗的靶点。

关键词：肺腺癌环状RNA circ_104939

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维生素D对乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞凋亡的影响

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现代肿瘤医学 2020年第6期28卷 877-882页

作者：梁欢征宗梅杨学攀施洪飞朱明明南京中医药大学第二临床医学院营养教研室

目的:探究维生素D对人乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测维生素D对乳腺癌SUM159细胞活力的影响;Hoechst33258染色检测维生素D对乳腺癌SUM159细胞凋亡的影响;实时定量PCR法检测维生素D对乳腺癌SUM159细胞凋亡相关分子... 详细信息

目的:探究维生素D对人乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测维生素D对乳腺癌SUM159细胞活力的影响;Hoechst33258染色检测维生素D对乳腺癌SUM159细胞凋亡的影响;实时定量PCR法检测维生素D对乳腺癌SUM159细胞凋亡相关分子Bax和Bcl-2 mRNA表达水平的影响;无血清悬浮培养法(serum-free medium,SFM)富集乳腺癌干细胞,显微镜下观察维生素D对乳腺癌干细胞球大小和数量的影响;实时定量PCR法检测维生素D对乳腺癌干细胞凋亡相关分子Bax、Bcl-2 mRNA表达水平的影响。结果:MTT法检测结果显示,维生素D可显著抑制乳腺癌细胞活力,且随着维生素D浓度升高,乳腺癌SUM159细胞活力的下降具有一定的剂量依赖效应,单因素方差分析显示,差异具有统计学意义(P<0.01);Hoechst33258染色结果显示,维生素D可诱导乳腺癌SUM159细胞发生细胞凋亡形态改变;进一步PCR法检测结果显示,维生素D可显著上调乳腺癌SUM159细胞促凋亡蛋白Bax mRNA的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2 mRNA的表达,单因素方差分析显示,差异具有统计学意义(P<0.01)。SFM培养可有效富集乳腺癌干细胞,维生素D干预可明显抑制SFM富集的乳腺癌干细胞球的大小和数量,且与对照组相比,维生素D可显著上调乳腺癌干细胞球Bax mRNA的表达水平,下调Bcl-2 mRNA的表达水平,单因素方差分析显示,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:维生素D可抑制乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞活力,诱导乳腺癌细胞凋亡。

关键词：维生素D 乳腺癌肿瘤干细胞细胞凋亡

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lncRNA FEZF1-AS1促进黑色素瘤细胞增殖和侵袭的实验研究

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现代肿瘤医学 2024年第19期32卷 3631-3635页

作者：刘冰雪王润芊薛林怡彭辉勇朱栋炜南京中医药大学附属南京医院/南京市第二医院检验科南京市公共卫生医疗中心江苏南京211100 江苏大学医学院免疫学教研室江苏临床检验诊断重点实验室江苏镇江215031 江苏大学附属镇江市第一人民医院检验科江苏镇江215031

目的:观察lncRNA FEZF1-AS1对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法:对黑色素瘤病人的肿瘤组织和癌旁组织进行lncRNA测序分析,以肿瘤组织表达增加最明显的lncRNA FEZF1-AS1作为研究对象。通过转染慢病毒载体沉默黑色素瘤细胞A375中lncRNA... 详细信息

目的:观察lncRNA FEZF1-AS1对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法:对黑色素瘤病人的肿瘤组织和癌旁组织进行lncRNA测序分析,以肿瘤组织表达增加最明显的lncRNA FEZF1-AS1作为研究对象。通过转染慢病毒载体沉默黑色素瘤细胞A375中lncRNA FEZF1-AS1的表达。利用流式细胞术和qRT-PCR验证转染效果。通过CCK-8和Transwell实验检测A375细胞的增殖水平和侵袭能力。将敲减lncRNA FEZF1-AS1前后的A375细胞皮下注射到小鼠体内,检测移植瘤体积、质量以及生存时间。Western blot检测敲减lncRNA FEZF1-AS1前后A375细胞中Notch1的表达水平。结果:相比癌旁组织,黑色素瘤组织中lncRNA FEZF1-AS1的表达显著增高。通过转染慢病毒敲减,A375细胞中lncRNA FEZF1-AS1的表达明显降低。沉默lncRNA FEZF1-AS1后,A375细胞的增殖率降低,侵袭能力下降。敲减lncRNA FEZF1-AS1后,黑色素瘤模型小鼠肿瘤体积减小,质量降低,生存时间明显延长。沉默lncRNA FEZF1-AS1后细胞中Notch1蛋白表达降低。结论:lncRNA FEZF1-AS1能够增强黑色素瘤细胞A375的增殖和侵袭,这种作用与lncRNA FEZF1-AS1增强Notch1信号通路相关。

关键词： lncRNA FEZF1-AS1 黑色素瘤增殖侵袭

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低氧诱导因子的分子调控机制及中药的干预作用

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中国中药杂志 2020年第20期45卷 4805-4811页

作者：刘不悔王美子孙伟万毅刚吴薇房其军王文文 YEE Hong-yun 袁灿灿刘莹露涂玥 CHONG Fee-lan 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 The School of Pharmacy Management and Science UniversityShah Alam 40100Malaysia

低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)是机体内感受和调节细胞氧浓度的关键转录因子。HIF-1由α和β等2个亚基组成,其中,HIF-1α的分子调控机制涉及其降解和活化等主要过程。HIF-1α的降解是由氧依赖性信号途径调控的,包括&qu... 详细信息

低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)是机体内感受和调节细胞氧浓度的关键转录因子。HIF-1由α和β等2个亚基组成,其中,HIF-1α的分子调控机制涉及其降解和活化等主要过程。HIF-1α的降解是由氧依赖性信号途径调控的,包括"希佩尔-林道病恶性肿瘤抑制蛋白(von hippel-lindau protein,pVHL)依赖通路"和"pVHL非依赖性通路";而HIF-1α的活化是由氧非依赖性信号途径调控的,包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/真核生物始动因子4E结合蛋白1(eukaryotic initiation factor 4E-binding protein 1, 4EBP1)/HIF-1α通路、磷脂酰肌醇3激酶(phosph atidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(proteirrserinc-threonine kinases,Akt)/HIF-1α通路以及沉默信息调节因子1(silent information regulator1,Sirt1)/HIF-1α通路等。近年来,基于HIFs的分子调控机制,不仅研制出治疗肾性贫血的新药罗沙司他,在中药提取物中也发现了一些药理作用类似于HIFs的大分子物质,如大黄素、三七皂苷、厚朴酚以及灵仙新苷等,这些天然的大分子物质在炎症反应、自噬、表观遗传修饰以及细胞焦亡中发挥调控性作用。值得注意的是,对于常见的低氧相关疾病,如糖尿病肾病,HIFs介导的"细胞焦亡"可能是清利湿热类中药及其代表性经方(如二妙丸)干预炎症性组织、细胞损伤的新靶点。

关键词：低氧诱导因子中药分子机制信号通路细胞焦亡

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黄葵胶囊对早期糖尿病肾脏疾病患者胰岛素抵抗和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用

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中国中药杂志 2020年第23期45卷 5797-5803页

作者：吴薇刘莹露万毅刚曹东维房其军涂玥刘不悔王文文王美子 YEE Hong-yun 袁灿灿胡巍南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院肾内科江苏南京210008 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京大学医学院附属鼓楼医院药学部江苏南京210008

观察黄葵胶囊(Huangkui Capsules,HKC)对早期糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用。收集83例G2,A2期DKD患者的病例资料,进行回顾性分析。根据不同干预措... 详细信息

观察黄葵胶囊(Huangkui Capsules,HKC)对早期糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用。收集83例G2,A2期DKD患者的病例资料,进行回顾性分析。根据不同干预措施将全部患者分为对照(A)组40例和治疗(B)组43例。其中,A组患者接受的治疗措施是"常规基础治疗";B组患者接受的治疗措施是"常规基础治疗+HKC"。对于2组患者,先比较其在接受干预措施前的基线参数,再比较其在接受干预措施8周后的中医证候总积分以及IR、尿蛋白、肾功能、血脂、安全性指标的变化情况,并且,针对全部DKD患者干预前后IR指标与尿蛋白指标、中医证候总积分分别进行相关性分析。结果表明,对于接受"常规基础治疗+HKC"干预措施的B组患者,其中医证候总积分、尿蛋白指标[包括尿微量白蛋白(urine microalbumin,micro-UAlb)、尿微量白蛋白/尿肌酐(urine microalbumin/urinary creatinine,UACR)]、IR主要指标[包括空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FIN)、稳态模型评估IR指数(homeostasis model assessment of IR,HOMA-IR)]均有明显改善;全部DKD患者干预前后IR主要指标(FIN,HOMA-IR)与尿蛋白指标(micro-UAlb,UACR)均呈正相关;全部DKD患者干预前后IR主要指标(FIN,HOMA-IR)与中医证候总积分亦呈正相关。此外,2种干预措施对全部DKD患者肾功能、血脂以及安全性指标均无明显影响。总之,"常规基础治疗联合HKC"的干预措施不仅能改善早期DKD患者IR,还能减少尿微量白蛋白。其治疗靶点不只在蛋白尿,还可能是蛋白尿的上游致病因素——IR。

关键词：糖尿病肾脏疾病黄葵胶囊胰岛素抵抗尿微量白蛋白

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黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用和机制

黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细...

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第十三届全国中医药博士生学术论坛

作者：王美子王玉万毅刚石岩涂玥史俪婧黄露武九龙戴青青龙燕万子玥南京中医药大学鼓楼临床医学院中医科南京 210008 南京大学中医研究院南京 210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科南京 210008 辽宁中医药大学沈阳 110847 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室南京 210023 一桥大学·大学院社会学研究科·社会学部日本东京186-8601

目的：探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制.方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组.采用"高脂饲料喂养、单侧... 详细信息

目的：探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制.方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组.采用"高脂饲料喂养、单侧肾切除、链脲佐菌素(STZ)腹腔注射"3种措施联合建立改良型DKD大鼠模型.成模后,4组大鼠分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及IMA混悬液灌胃,连续4周.在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液和肾组织,采用肾组织病理染色、蛋白质分析和透射电子显微镜等技术进行检测和观察肾组织PMT相关指标.结果：与模型组比较,TFA组和IMA组UNAG与TFA组UACR水平显著降低(P＜0.01);细胞外基质和肾间质胶原相对面积显著降低(P＜0.01);TFA组和IMA组显著改善周细胞超微结构特征、周细胞和肌成纤维细胞标志分子蛋白表达强度和表达水平(P＜0.01,P＜0.05);TFA和IMA可以抑制肾组织血管内皮生长因子受体(PDGFR)、血小板源性生长因子受体(VEGFR)信号通路关键信号分子蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论：TFA与IMA体内能改善DKD大鼠RIF,其机制可能是通过调控周细胞-内皮细胞相关PDGFR、VEGFR信号通路活性而抑制肾组织PMT.该研究为黄蜀葵花治疗DKD患者RIF提供了可靠的药理学证据.

关键词：糖尿病肾脏疾病黄蜀葵花总黄酮周细胞-肌成纤维细胞转分化血管内皮生长因子受体信号通路血小板源性生长因子受体信号通路伊马替尼肾间质纤维化

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基于自噬信号通路探究褐藻多糖硫酸酯改善人近端肾小管上皮细胞衰老的分子机制

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中国中药杂志 2020年第24期45卷 6003-6011页

作者：房其军刘建璟万毅刚刘不悔涂玥吴薇刘莹露王文文王美子 YEE Hong-yun 袁灿灿 CHONG Fee-lan 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210029 江苏省中西医结合医院肾内科江苏南京210028 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院•养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 School of Pharmacy Management and Science UniversityShah Alam 40100

褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作用。然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚。将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常... 详细信息

褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作用。然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚。将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常组(normal group,N)、模型组(D-gal model group,D)、低剂量FPS组(low dose of FPS,L-FPS)、高剂量FPS组(high dose of FPS,H-FPS)以及维生素E组(vitamin E,VE),分别进行不同的干预。N组加入1%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)1 mL;D组加入75 mmol·L^(-1)D-gal;L-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+25μg·mL^(-1)FPS;H-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)FPS;VE组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)VE。在干预后24 h,首先,观察D-gal对HK-2细胞β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平和腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)-不协调的51类激酶1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号通路活性的影响;其次,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平的影响;最后,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)蛋白表达水平以及AMPK-ULK1信号通路活性的影响。结果表明,对于HK-2细胞,75 mmol·L^(-1)的D-gal能安全而有效地诱导细胞SA-β-gal染色特征和klotho,P53,P21蛋白表达水平的变化,也就是引发细胞衰老;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P21,P53蛋白表达水平的变化,也就是拮抗细胞衰老,这里,两者的作用是类似的;D-gal不仅能诱导细胞衰老,还能促进LC3Ⅱ,磷酸化AMPK(phosphorylated-AMPK,p-AMPK)以及磷酸化ULK1(phosphorylated-ULK1,p-ULK1)蛋白高表达,激活自噬相关AMPK-ULK1信号通路;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞LC3Ⅱ,p-AMPK以及p-ULK1蛋白表达水平的变化,也就是抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性。总之,对于D-gal诱导的人近端肾小管上皮细胞衰老模型,FPS与VE相似,能改善肾脏细胞衰老,其分子机制可能与抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性有关。这一发现为FPS抗肾脏衰老提供了初步的药理学证据。

关键词：衰老褐藻多糖硫酸酯人近端肾小管上皮细胞自噬 AMPK-ULK1信号通路

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