检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2025年第1期56卷 68-78页

作者：丁羽戴慧莲姜德利李昱苏联麟季德陆兔林李林南京中医药大学药学院国家教育部中药炮制规范化及标准化教育部工程研究中心

目的构建酒当归不同炮制程度快速辨识模型，为酒当归饮片智能化生产奠定基础。方法采用测色仪提取炮制过程的颜色特征值，利用超快速气相电子鼻获取气味信息，借助近红外光谱仪获取近红外光谱（near infrared spectroscopy,NIRS）信... 详细信息

目的构建酒当归不同炮制程度快速辨识模型，为酒当归饮片智能化生产奠定基础。方法采用测色仪提取炮制过程的颜色特征值，利用超快速气相电子鼻获取气味信息，借助近红外光谱仪获取近红外光谱（near infrared spectroscopy,NIRS）信息，通过化学计量学分析对数据进行处理分析，建立不同炮制程度酒当归快速辨识模型。结果基于色度值结合主成分分析（principal component analysis,PCA）、基于气味信息结合判别因子分析（discriminant factor analysis,DFA）和正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）、基于NIRS信息结合OPLS-DA建立的辨识模型均能够准确辨识4类不同炮制程度的酒当归样品。共鉴定出22种气味成分，发现α-蒎烯、癸酸甲酯、β-蒎烯、2-甲基呋喃、十二内酯、丁酸辛酯、环己甲酸乙酯、肉桂酸异丙酯、柠檬烯、2-异丁基-3-甲氧基吡嗪10个气味成分作为引起当归炮制过程产生差异性的挥发性物质。结论基于智能感官技术及NIRS技术实现了对不同炮制程度酒当归的快速准确辨识，为酒当归及其他中药饮片的炮制程度的快速识别及质量控制提供参考。

关键词：酒当归炮制程度色度值超快速气相电子鼻近红外光谱化学计量学气味差异物质快速辨识

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狼毒(月腺大戟)毒性部位诃子汤制前后肠道毒性变化与成分组成变化的相关性研究

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2441-2450页

作者：林伟豪郁红礼吴皓王欣之崔小兵刘睿刘璐曹杰曾敏许艳青南京中医药大学药学院江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心

为探究狼毒(月腺大戟)诃子汤制前后肠道毒性变化与成分组成变化的相关性,在整体动物模型水平灌胃给药,以小鼠的粪便含水量,肠道不同部位炎症因子及病理损伤情况为指标,比较月腺大戟生品二氯甲烷提取部位(二氯部位)、诃子汤制品二氯部位... 详细信息

为探究狼毒(月腺大戟)诃子汤制前后肠道毒性变化与成分组成变化的相关性,在整体动物模型水平灌胃给药,以小鼠的粪便含水量,肠道不同部位炎症因子及病理损伤情况为指标,比较月腺大戟生品二氯甲烷提取部位(二氯部位)、诃子汤制品二氯部位与模拟诃子汤制月腺大戟二氯部位的肠道毒性作用差异,考察诃子汤制对月腺大戟肠道毒性的影响。同时构建月腺大戟和诃子成分结构数据库,采用HPLC-TOF-MS分析这3个提取部位的二萜类成分与鞣质酚酸类成分组成变化。采用HPLC测定炮制前后月腺大戟饮片和炮制后锅壁残留物中的4种主要二萜类成分ent-11α-hydroxyabicta-8(14)、13(15)-dien-16,12-olide(HAO)、jolkinolide B(JNB)、fischeria A(FA)、jolkinolide E(JNE)的含量,考察诃子汤炮制是否对二萜类成分的含量与结构产生影响。结果表明,月腺大戟生品二氯部位组可显著增加小鼠的粪便含水量和各肠段炎症因子TNF-α和IL-1β释放水平,且发现肠道组织受损并伴随明显炎症细胞浸润,而与生品二氯部位组比较,模拟诃子汤制月腺大戟二氯部位组肠道组织损伤减轻,炎症细胞浸润减少,肠道毒性显著下降。质谱分析结果显示月腺大戟二氯部位模拟诃子汤制后二萜类成分含量无明显差异,但新增了大量来源于诃子的鞣质酚酸类等成分。HPLC结果显示,月腺大戟诃子汤炮制后4种萜类成分含量有不同程度下降,下降幅度在-0.35%~-19.74%,下降部分主要残留于锅壁,表明诃子汤制并未改变月腺大戟中毒性二萜类成分的结构。诃子汤中鞣质酚酸类成分拮抗作用是月腺大戟诃子汤炮制后肠道毒性下降的主要原因,民族药诃子汤炮制狼毒具有科学性。

关键词：月腺大戟诃子汤制模拟炮制肠道毒性二萜类成分成分变化

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基于近红外光谱分析技术对不同蒸制程度天麻的质量评价研究

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中草药 2025年第3期56卷 975-986页

作者：王彬董佳佳申柯李昱李铭轩张玖捌张云飞王俊蓉梅茜毛春芹陆兔林南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

目的探讨近红外光谱(near infrared spectroscopy,NIRS)技术在天麻Gastrodia elata质量评价中的应用,通过对不同蒸制程度的天麻进行判别分析,进一步构建天麻有效成分含量预测模型,为天麻质量评价提供新方法。方法建立天麻中天麻素(gastr... 详细信息

目的探讨近红外光谱(near infrared spectroscopy,NIRS)技术在天麻Gastrodia elata质量评价中的应用,通过对不同蒸制程度的天麻进行判别分析,进一步构建天麻有效成分含量预测模型,为天麻质量评价提供新方法。方法建立天麻中天麻素(gastrodin,GAS)、对羟基苯甲醇(p-hydroxybenzyl alcohol,HBA)、巴利森苷B(parishin B,PB)、巴利森苷C(parishin C,PC)、巴利森苷A(parishin A,PA)含量测定的高效液相色谱法,并以其测定值为参比。采集天麻样品的NIRS,结合线性判别分析(linear discriminant analysis,LDA)算法,建立不同蒸制时间的天麻定性判别模型。选择偏最小二乘法(partial least squares,PLS)等化学计量学方法建立有效成分的测定值与NIRS的定量校正模型,对建模过程的各个阶段进行优化,构建天麻各有效成分的最优PLS定量模型。结果基于LDA算法建立的天麻蒸制程度的定性判别模型准确度达到96.2%,混淆矩阵图与接收器工作特性(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价模型的预测性能良好;天麻近红外原始光谱经标准正态变换(standard normal variate,SNV)或平滑法(savitzky-golay,SG)预处理后,以竞争性自适应重加权抽样-偏最小二乘法(competitive adaptive eeweighted sampling-partial least squares,CARS-PLS)构建的定量模型准确度较高,建立的GAS、HBA、PB、PC、PA最佳PLS定量模型的校正决定系数(R^(2)c)分别为0.9753、0.9864、0.9700、0.9636、0.9659,预测决定系数(R^(2)p)分别为0.9704、0.9840、0.9779、0.9786、0.9855,5个定量模型的预测偏差(residual prediction deviation,RPD)均大于6。表明NIRS定量模型预测值与测定值具有良好的线性关系,模型预测效果良好。结论所建立的天麻近红外LDA定性和CARS-PLS定量模型准确、可靠,可实现天麻蒸制程度的定性鉴别以及GAS、HBA、PB、PC、PA 5个有效成分含量的快速定量分析,为天麻的质量评价与控制提供新的参考。

关键词：天麻蒸制近红外光谱化学计量学质量评价天麻素对羟基苯甲醇巴利森苷B 巴利森苷C 巴利森苷A

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同科属有毒中药炮制解毒共性规律——以大戟科京大戟、月腺大戟、狼毒大戟炮制研究为例

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中国中药杂志 2025年

作者：江恩赐郁红礼张舒睿刘冰冰王欣之吴皓南京中医药大学药学院江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心

中药炮制是一门传统制药技术，首要目的是降低药物毒性。京大戟Euphorbia pekinensis、月腺大戟E. ebracteolata和狼毒大戟E. afischeriana 3者同为大戟科大戟属药物，均为峻下逐水药，具有“逐水消肿、攻毒散结”等功效，但均可引起腹... 详细信息

中药炮制是一门传统制药技术，首要目的是降低药物毒性。京大戟Euphorbia pekinensis、月腺大戟E. ebracteolata和狼毒大戟E. afischeriana 3者同为大戟科大戟属药物，均为峻下逐水药，具有“逐水消肿、攻毒散结”等功效，但均可引起腹痛、腹泻等毒副反应，往往共同采用醋制、奶制、诃子制来降低毒性。该文对3种药物的化学成分、药理作用、炮制沿革、炮制解毒机制等进行综述，发现其主要毒性成分为萜类，其中月腺大戟和狼毒大戟主要含二萜类成分，京大戟含二萜、三萜、倍半萜等成分。研究显示醋制可促进二萜类成分发生醚键水解、内酯环开环、酯化、氧化、环氧环开环等反应，毒性成分含量下降从而毒性下降；奶制牛奶均可促进毒性成分溶出到辅料残液中，饮片中毒性成分含量下降；诃子汤制则均增加鞣质酚酸类成分，拮抗肠道毒副作用。3种有毒药物炮制存在解毒共性规律。基于此，该文提出“同科属有毒药物炮制解毒共性规律”理论——同科属的有毒药物，临床具有类似毒性，采用相同的炮制技术进行炮制解毒，具有共性的炮制解毒机制。以同科属多品种药物开展共性炮制机制研究可作为一种研究策略。炮制解毒机制研究为有毒中药安全性提供理论和实践支持。

关键词：大戟属有毒药物化学成分药理作用炮制技术毒效转化共性解毒机制

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基于液质联用和模拟炮制的诃子汤制狼毒大戟减毒机制研究

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南京中医药大学学报 2024年第7期40卷 674-692页

作者：张巧陈富贵曹杰郁红礼陈忆菁段煜蔡皓吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

目的基于液质联用(LC-MS)和模拟炮制初探诃子汤制狼毒大戟的减毒机制。方法采用LC-MS分析狼毒大戟诃子汤制前后和狼毒大戟生品二氯甲烷部位诃子汤模拟炮制后的化学成分变化;小鼠分别灌胃给予狼毒大戟生品乙醇提取物、狼毒大戟水制品乙... 详细信息

目的基于液质联用(LC-MS)和模拟炮制初探诃子汤制狼毒大戟的减毒机制。方法采用LC-MS分析狼毒大戟诃子汤制前后和狼毒大戟生品二氯甲烷部位诃子汤模拟炮制后的化学成分变化;小鼠分别灌胃给予狼毒大戟生品乙醇提取物、狼毒大戟水制品乙醇提取物、诃子汤乙醇提取物、狼毒大戟诃子汤制品乙醇提取物、狼毒大戟生品二氯甲烷提取物、狼毒大戟诃子汤制品二氯甲烷提取物、狼毒大戟生品二氯甲烷部位诃子汤模拟炮制提取物,以粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平以及肠道病理损伤情况评价诃子汤制狼毒大戟和诃子汤模拟炮制狼毒大戟生品二氯甲烷部位的毒性变化。结果狼毒大戟中共鉴定出115种化合物,诃子汤中共鉴定出53种化合物。狼毒大戟经诃子汤炮制后有58种化合物的含量显著降低,12种化合物的含量显著升高。与空白对照组相比,狼毒大戟生品组及其水制品组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平均显著升高(P<0.01),肠道损伤明显。与狼毒大戟生品组相比,诃子汤组和狼毒大戟诃子汤制品组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平均显著降低(P<0.01),肠道损伤得到修复。狼毒大戟生品二氯甲烷部位经诃子汤模拟炮制后,二萜类化合物和鞣质酚酸类化合物的离子强度变化率分别为-6.75%~8.09%和66.06%~100.00%。狼毒大戟诃子汤制品二氯甲烷部位二萜类化合物的离子强度变化率为-9.92%~54.72%,无鞣质酚酸类化合物。与空白对照组相比,狼毒大戟生品二氯甲烷部位组和狼毒大戟诃子汤制品二氯甲烷部位组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平均显著升高(P<0.01),肠道损伤严重。与狼毒大戟生品二氯甲烷部位组相比,狼毒大戟生品二氯甲烷部位诃子汤模拟炮制组的粪便含水量、TNF-α和IL-1β的释放水平显著降低(P<0.01),肠道未见明显损伤。结论诃子汤制能缓和狼毒大戟肠道毒性,其减毒机制可能是狼毒大戟在炮制过程中引入的诃子汤中大量的鞣质酚酸类化合物在动物体内起到了药理拮抗作用。

关键词：狼毒大戟诃子汤液质联用模拟炮制炎症因子

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基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS探究山茱萸酒制前后与黄芪相关组分配伍对糖尿病肾病大鼠血浆代谢组学的影响

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3493-3504页

作者：陈忆菁朱慧刘鑫段煜裴科张巧宋沛祥蔡皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 山西中医药大学中药与食品工程学院山西晋中030619

基于炮制和配伍探究山茱萸与黄芪相关组分对糖尿病肾病大鼠血浆代谢组学的影响。SD大鼠随机分为4组,用高脂饲料联合30 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型。采用HE、PAS和Masson染色对各组大鼠的肾脏组织切片进行病... 详细信息

基于炮制和配伍探究山茱萸与黄芪相关组分对糖尿病肾病大鼠血浆代谢组学的影响。SD大鼠随机分为4组,用高脂饲料联合30 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型。采用HE、PAS和Masson染色对各组大鼠的肾脏组织切片进行病理学观察。超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)代谢组学方法研究山茱萸酒制前后与黄芪相关组分配伍给药后对糖尿病肾病大鼠血浆代谢物的影响。给予药物治疗后,糖尿病肾病大鼠的肾组织损伤情况和间质胶原纤维沉积面积均有不同程度的改善(P<0.001)。血浆代谢组学的检测结果显示,在患病大鼠中共鉴定出71种与糖尿病肾病发病机制相关的生物标志物,主要涉及亚油酸代谢,咖啡因代谢,甘油磷脂代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,花生四烯酸代谢,苯丙氨酸代谢,视黄醇代谢,乙醚脂质代谢。经药物干预后,其中有26种发生显著性回调,以精准炮制药对(P-CG_(5))疗效更好。该研究从血浆代谢组学的角度阐述了P-CG_(5)可从苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,咖啡因代谢等途径改善糖尿病肾病的代谢紊乱,为山茱萸与黄芪相关组分配伍在中医临床上的应用提供了理论支撑和实验依据。

关键词：山茱萸黄芪酒制组分配伍糖尿病肾病血浆代谢组学

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基于蛋白质组学的狼毒（月腺大戟）诃子汤制降低肠道毒副作用机制研究

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中国中药杂志 2025年

作者：陈蒨淋郁红礼吴皓王欣之李佟拉嘎刘冰冰李鑫谷雨欣许艳青南京中医药大学药学院江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心内蒙古民族大学附属医院

为探究狼毒（月腺大戟）经蒙古族医药诃子汤制前后对肠道毒性变化及炮制减毒机制，以小鼠粪便量、血清二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LA）含量、各肠段及其内容物含水量、肠段炎症因子含量为指标，比较月腺大戟生品及诃子汤制品95%醇提... 详细信息

为探究狼毒（月腺大戟）经蒙古族医药诃子汤制前后对肠道毒性变化及炮制减毒机制，以小鼠粪便量、血清二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LA）含量、各肠段及其内容物含水量、肠段炎症因子含量为指标，比较月腺大戟生品及诃子汤制品95%醇提物对小鼠肠道毒性差异。同时采用串联质量标签（TMT）定量蛋白质组学技术分析炮制前后与肠道毒性变化相关的关键蛋白。结果表明，与空白组比较，月腺大戟生品可显著增加小鼠粪便量、血清DAO、D-LA含量、回肠段及其内容物含水量、回肠段炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）释放水平（P<0.05），表明月腺大戟可致泻下、肠道通透性增加及肠道炎症；与生品组相比，诃子汤制品组各指标均显著降低（P<0.05）。TMT定量蛋白质组学分析结果显示，在小鼠回肠组织中共鉴定出6 487个蛋白质，与空白组相比，生品组有182个蛋白发生显著变化，与生品组相比，诃子汤制品组有907个蛋白发生显著变化。将2个对比组的差异蛋白取交集，显示共有的差异蛋白有38种，其中肠道屏障紧密连接蛋白claudin 3、鲨烯单氧化酶Sqle、聚合蛋白clusterin、交换调节辅因子NHE-RF3、Y+L氨基酸转运蛋白Slc7a7的蛋白水平炮制前后变化差异大且与肠道屏障功能密切相关。与空白组相比，生品组claudin 3、NHE-RF3、Slc7a7表达显著下调（P<0.05）；Sqle、clusterin表达显著上调（P<0.05）；与生品组相比，诃子汤制品组claudin 3、NHE-RF3、Slc7a7表达显著上调（P<0.05）；Sqle、clusterin表达显著下调（P<0.05）。采用免疫蛋白印迹（Western blot）检测各组小鼠回肠紧密连接蛋白claudin 3表达水平，结果显示相较于空白组，生品组claudin 3表达水平显著降低（P<0.01）；相较于生品组，诃子汤制品组claudin 3表达水平显著升高（P<0.01），与TMT蛋白质组学结果一致，提示claudin 3蛋白水平可以作为月腺大戟肠道损伤的关键指标。综上所述，诃子汤制月腺大戟可降低其肠道毒性，肠道屏障紧密连接蛋白claudin 3及其他肠道相关蛋白水平回调是降低肠道屏障损伤的主要原因。

关键词：月腺大戟诃子汤制肠道通透性串联质量标签(TMT)定量蛋白质组学紧密连接蛋白

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黄酒类型和酒制方法对当归化学成分、抗凝血作用的影响

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中成药 2025年第5期47卷 1443-1448页

作者：王颖邓雅依葛雪琪朱慧段煜闫晓宁蔡皓裴科南京中医药大学药学院国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 山西中医药大学中药与食品工程学院山西晋中030619

目的考察黄酒类型和酒制方法对当归化学成分、抗凝血作用的影响。方法分别以不同类型、年限的黄酒制备酒洗品和酒炙品,HPLC法测定色氨酸、绿原酸、香草酸、邻苯二甲酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、藁本内酯的含量... 详细信息

目的考察黄酒类型和酒制方法对当归化学成分、抗凝血作用的影响。方法分别以不同类型、年限的黄酒制备酒洗品和酒炙品,HPLC法测定色氨酸、绿原酸、香草酸、邻苯二甲酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、藁本内酯的含量,检测家兔血浆PT、APTT、TT。结果酒炙品中酚酸、挥发性成分含量低于生品中(P<0.05),而酒洗品中无明显变化(洋川芎内酯I除外)(P>0.05);酒洗品中挥发性成分含量高于酒炙品中(P<0.05);与甜型黄酒炮制后比较,干型黄酒炮制后各成分含量升高(P<0.05)。与生品比较,3年半干型黄酒所制备的炮制品PT、APTT、TT延长(P<0.05,P<0.01)。结论黄酒最优类型为3年半干型。酒洗当归中阿魏酸、挥发性成分含量较高,活血化瘀效果可能更强。

关键词：当归黄酒类型酒制方法化学成分抗凝血作用 HPLC

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石灰水炮制半夏对毒性成分凝集素蛋白的影响研究

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中国中药杂志 2023年第4期48卷 951-957页

作者：陶兴宝吴皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023

为探究法半夏炮制过程中炮制辅料石灰水浸泡对其毒性成分凝集素蛋白的影响,阐释法半夏炮制过程中石灰水解毒的科学内涵。以Western blot法考察不同pH石灰水(pH 10、11、12.4)、饱和氢氧化钠及碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量的影响;采... 详细信息

为探究法半夏炮制过程中炮制辅料石灰水浸泡对其毒性成分凝集素蛋白的影响,阐释法半夏炮制过程中石灰水解毒的科学内涵。以Western blot法考察不同pH石灰水(pH 10、11、12.4)、饱和氢氧化钠及碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量的影响;采用SDS-PAGE法结合银染技术测定不同pH石灰水浸泡凝集素蛋白后上清与沉淀中蛋白组成;以MALDI-TOF-MS/MS技术检测不同pH石灰水浸泡凝集素蛋白后上清及沉淀中肽段相对分子质量分布,圆二色谱检测浸泡过程中凝集素蛋白二级结构比例变化。结果显示,pH>12的石灰水及饱和氢氧化钠溶液浸泡均可使凝集素蛋白含量显著下降,而pH<12的石灰水及饱和碳酸氢钠溶液浸泡对凝集素蛋白含量无显著影响。pH>12的石灰水浸泡凝集素蛋白后其上清和沉淀均在12 kDa位置未检测到对应的凝集素蛋白条带和分子离子峰。这是由于pH>12的石灰水浸泡可使凝集素蛋白的二级结构比例发生明显改变,出现了不可逆变性过程,而pH<12的石灰水浸泡未使凝集素蛋白的二级结构比例发生明显改变,未出现变性过程。pH>12是法半夏炮制过程中石灰水解毒的关键条件。石灰水(pH>12)浸泡可使凝集素蛋白发生不可逆变性,致使半夏致炎毒性显著下降,起到炮制解毒的关键作用。

关键词：半夏石灰水凝集素蛋白炮制解毒机制

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基于血清药物化学及蛋白芯片技术探讨加味六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制

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中药新药与临床药理 2025年第3期36卷 357-367页

作者：张帅周明宋沛祥刘雪邓雅依王颖蔡皓南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学中医学院江苏南京210023

目的基于血清药物化学及蛋白芯片技术探讨加味六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制。方法(1)将Wistar大鼠随机分成空白对照组、加味六君子汤组(43.36 g·kg^(-1)),每日灌胃给药2次,持续7 d,制备加味六君子汤含药血清及空白血清。... 详细信息

目的基于血清药物化学及蛋白芯片技术探讨加味六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制。方法(1)将Wistar大鼠随机分成空白对照组、加味六君子汤组(43.36 g·kg^(-1)),每日灌胃给药2次,持续7 d,制备加味六君子汤含药血清及空白血清。基于血清药物化学方法,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)分析技术,并结合文献报道和数据库信息,确认加味六君子汤的入血成分。(2)使用PharmMapper网站进行入血成分作用靶点预测;利用GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD和DrugBank数据库筛选慢性萎缩性胃炎疾病相关靶点;将上述靶点输入韦恩图制作平台,所得交集靶点即为加味六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎的潜在作用靶点。通过STRING数据平台对潜在作用靶点进行蛋白互作(PPI)网络构建及核心靶点筛选。通过Cytoscape软件导入加味六君子汤入血成分、潜在作用靶点,构建“入血成分-靶点”网络,筛选核心成分。通过DAVID数据库对潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。利用AutoDock Vina软件对核心成分和核心靶点进行分子对接验证。(3)采用CCK-8法检测GES-1细胞活性,筛选1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)最合适的造模浓度及加味六君子汤含药血清的最佳给药浓度。采用40μmol·L^(-1)MNNG干预GES-1细胞,构建慢性萎缩性胃炎细胞模型,同时以20%含药血清干预24 h后,进行CSP100 plus磷酸化抗体芯片检测。结果(1)共鉴定出加味六君子汤入血成分23种。得到入血成分对应的作用靶点424个,慢性萎缩性胃炎疾病相关靶点1028个,取交集得到加味六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎的潜在作用靶点109个。筛选得到加味六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎的核心靶点:TP53、IL6、TNF、SRC、EGFR、AKT1、CTNNB1、MMP9、CASP3、MAPK8,以及核心成分:甘草酸、DL-精氨酸、芸香柚皮苷、大豆素、茯苓酸G、人参皂苷Rg2、人参皂苷Ro、香风草甙、芹糖异甘草苷、人参皂苷Rb1。潜在作用靶点涉及的生物过程主要有对氧化应激的反应、脂多糖反应、细胞来源分子反应、凋亡信号通路等;KEGG通路主要涉及病毒、癌症、炎症等方面,主要通路包括PI3K/AKT信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路、MAPK信号通路等。核心成分与核心靶点的100组分子对接结果中,结合能≤-5 kcal·mol^(-1)的对接组合有93组,结合能≤-7 kcal·mol^(-1)的对接组合有73组。(2)与模型组比较,经含药血清干预后,共有49个磷酸化抗体和46个非磷酸化抗体发生了明显变化。其中,在PI3K/AKT信号通路中有18个磷酸化抗体和11个非磷酸化抗体发生了显著变化;在MAPK信号通路中有13个磷酸化抗体和17个非磷酸化抗体发生了显著变化。结论加味六君子汤可能通过甘草酸、人参皂苷Rg2、大豆素等入血成分,调控PI3K/AKT、MAPK关键信号通路,发挥治疗慢性萎缩性胃炎并延缓其向胃癌转变的作用。

关键词：加味六君子汤慢性萎缩性胃炎血清药物化学网络药理学蛋白芯片技术 PI3K/AKT信号通路 MAPK信号通路 GES-1人胃黏膜上皮细胞大鼠血清

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