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中国中药杂志 2022年第16期47卷 4411-4417页

作者：王彩霞郁红礼吴皓陶兴宝谢雨薇程砚秋曾平王贺鹏张萍崔小兵南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 中国食品药品检定研究院北京100050

为研究商陆皂苷类成分祛腹水药效作用及其机制,采用H22腹水小鼠模型,取ICR雄性小鼠腹腔注射H22细胞混悬液,将造模成功小鼠随机分为模型组、阳性药组(呋塞米,6 mg·kg^(-1))、商陆总提物组和总皂苷组(1.29 g·kg^(-1)),另取雄性... 详细信息

为研究商陆皂苷类成分祛腹水药效作用及其机制,采用H22腹水小鼠模型,取ICR雄性小鼠腹腔注射H22细胞混悬液,将造模成功小鼠随机分为模型组、阳性药组(呋塞米,6 mg·kg^(-1))、商陆总提物组和总皂苷组(1.29 g·kg^(-1)),另取雄性小鼠10只作为空白组。空白组和模型组小鼠灌胃给予含0.5%CMC-Na的生理盐水,阳性药组、商陆总提物组和总皂苷组小鼠灌胃给予相应剂量药物,每日1次,连续给药8 d,考察商陆总皂苷对模型小鼠腹水量、给药后5 h内尿量和粪便含水量的影响,同时以血清抗利尿激素(ADH)、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)相关激素肾素(renin)、血管紧张素2(AngⅡ)和醛固酮(ALD)含量,肾脏组织中水通道蛋白(aquaporin,AQP)1~AQP4表达量,结肠AQP1、AQP3表达量及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路相关蛋白的表达量为指标,探索商陆总皂苷祛腹水作用的机制。结果表明,商陆总皂苷可以增加腹水模型小鼠尿量和粪便含水量,减少腹水量;显著降低肾脏AQP1~AQP4和结肠AQP1、AQP3的表达;显著降低血清ADH、renin、AngⅡ和ALD水平;同时可显著降低腹水模型小鼠肾脏p-PI3K和p-Akt蛋白的表达。商陆总皂苷通过利尿和泻下作用发挥祛腹水功效,其作用机制可能与抑制RAAS、ADH活性;抑制PI3K/Akt信号通路磷酸化从而抑制肾脏和结肠AQPs表达有关。

关键词：商陆总皂苷腹水水通道蛋白 PI3K/Akt 肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)

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大黄不同方法炮制后药理作用及化学成分变化研究进展

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中国新药杂志 2016年第8期25卷 883-887页

作者：祝婷婷刘晓汪小莉朱慧蔡宝昌南京中医药大学药学院南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室南京海昌中药集团有限公司

大黄作为常用中药之一,拥有多种炮制方法,所得炮制品应用广泛,具有宝贵的临床应用价值。现代研究发现不同炮制方法对大黄所含化学成分的影响不同,且不同炮制品的药理作用存在明显差异。本文通过查阅近年来相关文献,就大黄不同炮制品药... 详细信息

大黄作为常用中药之一,拥有多种炮制方法,所得炮制品应用广泛,具有宝贵的临床应用价值。现代研究发现不同炮制方法对大黄所含化学成分的影响不同,且不同炮制品的药理作用存在明显差异。本文通过查阅近年来相关文献,就大黄不同炮制品药理作用及化学成分的变化作一综述,以期对大黄炮制机理方面的进一步深入研究有所帮助。

关键词：大黄炮制药理作用化学成分

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半夏毒针晶的致炎效应与巨噬细胞的相关性研究

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中国中药杂志 2013年第7期38卷 1041-1045页

作者：赵腾斐张倩张雯吴皓郁红礼王慧珠南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210046 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210046 南京中医药大学国家科技部规范化中药药理实验室江苏南京210046

目的:研究半夏毒针晶刺激性毒性产生的机制。方法:采用小鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以培养上清液中TNF-α,IL-1β和IL-6为指标,研究半夏毒针晶致炎的量-毒,时-毒曲线;采用扫描电镜法观察经半夏毒针晶刺激后巨噬细胞表面形态学的改变;... 详细信息

目的:研究半夏毒针晶刺激性毒性产生的机制。方法:采用小鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以培养上清液中TNF-α,IL-1β和IL-6为指标,研究半夏毒针晶致炎的量-毒,时-毒曲线;采用扫描电镜法观察经半夏毒针晶刺激后巨噬细胞表面形态学的改变;使用巨噬细胞-中性粒细胞共培养迁移模型,考察半夏毒针晶刺激巨噬细胞对中性粒细胞迁移的影响。结果:半夏毒针晶刺激巨噬细胞,可引起TNF-α,IL-1β和IL-6含量显著升高,且具有剂量和时间依赖性;扫描电镜显示,半夏毒针晶可被巨噬细胞吞噬,细胞膜表面皱褶明显,伪足数量增多,细胞膜完整性下降,并能显著诱导中性粒细胞迁移。结论:巨噬细胞在毒针晶的致炎过程中起关键的介导作用。半夏毒针晶的毒性机制是毒针晶刺入组织,激活组织中的驻留巨噬细胞,引起吞噬、促炎细胞因子释放、中性粒细胞大量迁移,最终导致强烈的急性炎症反应。

关键词：半夏毒针晶巨噬细胞炎症因子扫描电镜中性粒细胞趋化

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半夏凝集素蛋白单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA的建立

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中国中药杂志 2022年第22期47卷 6076-6081页

作者：谢雨薇郁红礼吴皓陶兴宝王贺鹏程砚秋王彩霞曾平刘冰冰张萍崔小兵南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 中国食品药品检定研究院北京100050

为测定半夏及其炮制品中内源性毒性物质半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin, PTL)的含量,该文采用杂交瘤细胞技术制备PTL特异性单克隆抗体,并建立了PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法,检测条件为:捕获抗体工作浓度为2.5μg·mL... 详细信息

为测定半夏及其炮制品中内源性毒性物质半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin, PTL)的含量,该文采用杂交瘤细胞技术制备PTL特异性单克隆抗体,并建立了PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法,检测条件为:捕获抗体工作浓度为2.5μg·mL-1,检测抗体稀释倍数为1∶450,包被条件为4℃过夜,封闭时间、抗原及检测抗体孵育时间均为90 min,辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(streptavidin-horseradish peroxidase, SA-HRP)孵育时间为15 min。该方法对PTL抗原的定量限为0.375 ng·mL-1;线性范围为75.000~4 800.000 pg·mL-1,R~2=0.997 1;加样回收率在90.0%~110.0%;试验内和试验间精密性变异系数分别在2.0%~3.0%、2.0%~8.5%。采用该方法测定3批半夏及其炮制品中PTL含量,测得半夏中PTL质量分数均值为35.42 mg·g^(-1),其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL质量分数均值分别为1.15 mg·g^(-1)、16.53μg·g^(-1)和122.63 ng·g^(-1),表明炮制后PTL含量显著下降。该文建立的PTL抗原定量双抗夹心ELISA检测方法线性较好,反应灵敏,准确度高,为半夏炮制过程中PTL含量检测提供一种简便有效的监测方法。

关键词：半夏凝集素蛋白单克隆抗体双抗夹心ELISA

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大戟属根类有毒中药醋制前后的毒性比较研究

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中国中药杂志 2012年第6期37卷 796-799页

作者：邱韵萦郁红礼吴皓朱法根陶文婷徐秋香南京中医药大学药学院江苏南京210029 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029 国家中医药管理局中药炮制标准重点研究室江苏南京210029 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029

目的:研究京大戟、甘遂、狼毒炮制前后的毒性变化并比较三者的毒性强弱。方法:采用肠推进运动模型及巨噬细胞炎症模型,评价3种大戟属根类有毒中药炮制前后的毒性。结果:京大戟、甘遂、狼毒生品及醋品均可明显促进小鼠小肠推进运动及巨... 详细信息

目的:研究京大戟、甘遂、狼毒炮制前后的毒性变化并比较三者的毒性强弱。方法:采用肠推进运动模型及巨噬细胞炎症模型,评价3种大戟属根类有毒中药炮制前后的毒性。结果:京大戟、甘遂、狼毒生品及醋品均可明显促进小鼠小肠推进运动及巨噬细胞释放NO的能力,强弱顺序为甘遂>京大戟>狼毒,醋制后三者均可明显缓和这一作用。结论:京大戟、甘遂、狼毒可诱导炎症反应的发生并促进肠推进运动,产生强烈的泻下作用,醋制后致炎及肠推进作用显著减弱,表明醋制可缓和京大戟、甘遂、狼毒的泻下作用。

关键词：大戟属京大戟甘遂狼毒醋制毒性

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基于ROS/NF-κB信号通路的天南星凝集素致炎机制及炮制对蛋白的影响

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中华中医药杂志 2018年第5期33卷 1740-1746页

作者：王卫毛善虎单雪莲程梓烨陈云郁红礼吴皓南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中药炮制重点实验室南京210023 国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心南京210023 国家中医药管理局中药炮制传承基地南京210023

目的:研究天南星科有毒中药天南星凝集素蛋白(AEL)的致炎机制及炮制对蛋白的影响。方法:通过体外培养RAW264.7巨噬细胞,经不同浓度AEL刺激1h后,ELISA法检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的释放,Western blot... 详细信息

目的:研究天南星科有毒中药天南星凝集素蛋白(AEL)的致炎机制及炮制对蛋白的影响。方法:通过体外培养RAW264.7巨噬细胞,经不同浓度AEL刺激1h后,ELISA法检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的释放,Western blot法检测p-IκB、IκB、p-p65、p65蛋白的表达,倒置荧光显微镜及荧光酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位及胞内游离钙离子水平;加入ROS的阻断剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,采用ELISA和Western blot法检测TNF-α、IL-1β及p-IκB、IκB、p-p65、p65蛋白表达的变化。采用8%白矾溶液炮制AEL,ELISA法检测炮制前后炎性因子TNF-α、IL-1β释放的变化。结果:AEL刺激巨噬细胞可导致炎性因子TNF-α、IL-1β大量释放,促进p-IκB、p-p65水平升高,导致巨噬细胞中ROS水平升高,线粒体膜电位降低以及胞内游离钙离子水平升高。当加入ROS的阻断剂NAC后,可明显降低ROS的生成,同时抑制了IκB、p65的磷酸化以及炎性因子TNF-α、IL-1β的大量释放。AEL经8%白矾溶液炮制后,能显著降低巨噬细胞炎性因子TNF-α、IL-1β的大量释放。结论:AEL刺激巨噬细胞后可诱导氧化应激,生成过量ROS,进而激活NF-κB炎性信号通路并导致炎性因子大量释放。AEL经白矾炮制后毒性降低,推测凝集素蛋白在白矾溶液中发生变性或降解,这可能是矾制天南星减毒的机制之一。

关键词：天南星凝集素炮制减毒炎性反应活性氧核因子-κB

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不同炮制品配伍的青娥丸中12种指标成分含量变化研究

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中药新药与临床药理 2016年第5期27卷 684-688页

作者：王恒李伟东高倩倩翁泽斌赵根华陈志鹏蔡宝昌南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的建立HPLC同时测定青娥丸中12种指标成分的方法,研究不同炮制品配伍的青娥丸中指标性成分含量变化。方法色谱柱:Purospher~ STAR LPRP-C_(18)endcapped(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱;流速:1.0 m L... 详细信息

目的建立HPLC同时测定青娥丸中12种指标成分的方法,研究不同炮制品配伍的青娥丸中指标性成分含量变化。方法色谱柱:Purospher~ STAR LPRP-C_(18)endcapped(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱;流速:1.0 m L·min^(-1);检测波长:240 nm;进样量:10μL;柱温:30℃。对不同炮制品配伍的青娥丸中指标性成分进行含量测定。结果在上述色谱条件下,青娥丸中12个成分分离度良好,加样回收率范围96.04%~104.07%,RSD均小于2.95%。盐炙品青娥丸中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、Corlifol A、补骨脂酚、异补骨脂查尔酮7种成分含量明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其他成分无明显变化。结论本研究所建立的方法简单,准确性和稳定性较好,可用于青娥丸的质量控制。盐炙品配伍的青娥丸中补骨脂素、异补骨脂素等成分与生品配伍的青娥丸比较含量明显下降。

关键词：青娥丸配伍盐炙高效液相色谱法含量测定

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盐制对补骨脂中主要化学成分的影响

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中成药 2013年第11期35卷 2470-2474页

作者：颜翠萍吴育翁泽斌陈志鹏蔡宝昌李伟东南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的建立HPLC同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄酮、补骨脂宁、broussochalcone B、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂查尔酮、corylifol A、补骨脂查尔酮和补骨脂酚等13种... 详细信息

目的建立HPLC同时测定补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄酮、补骨脂宁、broussochalcone B、补骨脂定、补骨脂二氢黄酮甲醚、异补骨脂查尔酮、corylifol A、补骨脂查尔酮和补骨脂酚等13种化学成分的方法,比较补骨脂盐制前后主要化学成分量的变化。方法按照《中国药典》规定的盐制法对来源不同的10批补骨脂生品进行炮制,采用HPLC法测定补骨脂中13种指标性成分,在此基础上,对补骨脂主要成分进行归类,分析了补骨脂盐制前后各类成分的变化规律。结果补骨脂盐制后香豆素成分含有量变化不大,而黄酮类成分和补骨脂酚的量略有上升。结论补骨脂的盐制机制还需结合药效学试验进行深入研究。

关键词：补骨脂香豆素黄酮单萜酚 HPLC 盐制

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马钱子生物碱类成分经皮给药后在小鼠体内的药动学研究

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中草药 2011年第12期42卷 2484-2488页

作者：王绚陈军屈艳格蔡宝昌南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029 国家中医药管理局中药炮制标准重点研究实验室江苏南京210029 南京海昌中药集团江苏南京210061

目的考察马钱子碱、马钱子总生物碱和优化马钱子总生物碱凝胶剂经皮给药后在小鼠体内的药动学过程。方法建立测定小鼠血浆中马钱子碱质量浓度的HPLC法,比较含相同剂量(10.8 mg/kg)马钱子碱各凝胶剂经皮给药后,马钱子碱的血药浓度,并对... 详细信息

目的考察马钱子碱、马钱子总生物碱和优化马钱子总生物碱凝胶剂经皮给药后在小鼠体内的药动学过程。方法建立测定小鼠血浆中马钱子碱质量浓度的HPLC法,比较含相同剂量(10.8 mg/kg)马钱子碱各凝胶剂经皮给药后,马钱子碱的血药浓度,并对结果进行药动学拟合。结果经皮给药后马钱子生物碱类成分的药动学行为均符合二室模型。优化马钱子总生物碱凝胶剂能显著增加马钱子碱的体内吸收,相对生物利用度显著提高,AUC0→t是马钱子碱凝胶剂的1.74倍,是马钱子总生物碱凝胶剂的1.89倍,其他药动学参数无显著差异。结论以优化马钱子总生物碱经皮给药,可有效改善单体马钱子碱和总生物碱的体内药动学行为,有利于对马钱子碱的减毒增效。

关键词：马钱子马钱子碱优化马钱子总生物碱马钱子总生物碱药动学经皮给药

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马钱子生物碱类成分经口给药后在大鼠体内的药动学研究

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中草药 2013年第8期44卷 1008-1012页

作者：屈艳格陈军王冬月蔡宝昌南京中医药大学药学院江苏南京210046 江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210029 南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心江苏南京210029 国家中医药管理局中药炮制标准重点研究实验室江苏南京210029 南京海昌中药集团江苏南京210061

目的比较马钱子生物碱类成分(马钱子碱、马钱子总生物碱和马钱子优化总生物碱)ig给药后在大鼠体内的药动学过程。方法大鼠ig给药后取血,以石杉碱甲为内标,HPLC法测定大鼠血浆样品中马钱子碱,DAS 1.0程序拟合房室模型并计算药动学参数。... 详细信息

目的比较马钱子生物碱类成分(马钱子碱、马钱子总生物碱和马钱子优化总生物碱)ig给药后在大鼠体内的药动学过程。方法大鼠ig给药后取血,以石杉碱甲为内标,HPLC法测定大鼠血浆样品中马钱子碱,DAS 1.0程序拟合房室模型并计算药动学参数。结果马钱子生物碱类成分ig给药后马钱子碱的药动学行为均符合二室模型;与马钱子碱单体给药相比,马钱子总生物碱与马钱子优化总生物碱能显著增加马钱子碱的体内吸收,其他药动学参数无显著差异。结论 ig给以马钱子生物碱类成分后,马钱子其他生物碱类成分对马钱子碱有吸收促进作用。

关键词：马钱子马钱子碱马钱子总生物碱马钱子优化总生物碱药动学

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