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南京中医药大学学报 2015年第6期31卷 571-575页

作者：程海波闫秋莹朱华旭沈卫星孙东东南京中医药大学转化医学研究中心江苏南京210023 江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏南京210023 国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏南京210023

目的建立液质联用同时测定癌痛平乙醇提取物中10种化学成分的方法。方法化学成分定性分析采用UPLC-ESIQ-TOF-MS技术,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6mm×150mm,5μm),梯度洗脱(流动相:乙腈-0.1%甲酸溶液);质谱使用ESI离子源,正离子模式... 详细信息

目的建立液质联用同时测定癌痛平乙醇提取物中10种化学成分的方法。方法化学成分定性分析采用UPLC-ESIQ-TOF-MS技术,色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6mm×150mm,5μm),梯度洗脱(流动相:乙腈-0.1%甲酸溶液);质谱使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。结果鉴定出癌痛平乙醇提取物中10种成分,分别为重楼皂苷Ⅰ、-蜕皮激素、胡椒碱、胡萝卜苷、异夏佛托苷、重楼皂苷Ⅵ、棕榈酸、竹节参苷Ⅳa甲酯、3-乙酰基?α?乳香酸和重楼皂苷Ⅱ等。结论采用液质联用技术鉴定癌痛平复方中化学成分,该方法快速简便,结果可靠,有利于研究癌痛平复方中化学成分。

关键词：癌痛平化学成分液质联用

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UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度

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南京中医药大学学报 2018年第1期34卷 91-95页

作者：范汇森闫秋莹张海彬程海波沈卫星王振中孙东东南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的建立使用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度的方法,并研究其药物代谢动力学特征。方法采用Aglient C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.8μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0~1min,5%~20%B;1~2min,20%~... 详细信息

目的建立使用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度的方法,并研究其药物代谢动力学特征。方法采用Aglient C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.8μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0~1min,5%~20%B;1~2min,20%~60%B;2~6min,60%~70%B;6~6.5min,70%~5%B;6.5~7.5min,5%B),流速0.3mL/min,柱温35℃。大鼠灌胃给药量为4g/(kg·d),使用液质联用色谱法测定给药后不同时间点紫草氰苷和格列风内酯的血药浓度,通过DAS 2.0软件模拟计算,得出相应的药物代谢动力学参数。结果在大鼠血浆中,紫草氰苷在0.701 9~140.4ng/mL,格列风内酯在1.120~240.4ng/mL内线性关系良好,两者日内、日间精密度和准确度RSD均小于15%,回收率在87.22%~107.75%之间。紫草氰苷和格列风内酯在体内吸收均较迅速,0.5h达到最高血药浓度,并且消除速率较快,24h基本消除。结论经方法学检验,此方法准确、稳定,可用于紫草氰苷和格列风内酯的药物代谢动力学研究。

关键词：天葵子紫草氰苷格列风内酯 UPLC-MS/MS 药物代谢动力学

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消癌解毒方含药血清对人结肠癌细胞增殖及糖酵解过程的影响

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中国实验方剂学杂志 2017年第20期23卷 120-125页

作者：石文静谭佳妮沈卫星徐长亮孙东东程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学第一临床医学院南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的:探讨不同浓度消癌解毒方含药血清对人结肠癌细胞增殖及糖酵解过程的影响及其作用机制。方法:8只新西兰兔随机分为含药血清组(消癌解毒方40 g·kg·^(-1)d^(-1))和空白血清组(等体积生理盐水),每组兔子连续灌胃3 d,制备消... 详细信息

目的:探讨不同浓度消癌解毒方含药血清对人结肠癌细胞增殖及糖酵解过程的影响及其作用机制。方法:8只新西兰兔随机分为含药血清组(消癌解毒方40 g·kg·^(-1)d^(-1))和空白血清组(等体积生理盐水),每组兔子连续灌胃3 d,制备消癌解毒方含药血清和空白血清。5%,10%,15%消癌解毒方含药血清处理人结肠癌HT-29与HCT-116细胞后,采用噻唑蓝比色法测定其对HT-29与HCT-116细胞生长的抑制作用,乳酸试剂盒检测HT-29与HCT-116细胞的乳酸生成量,葡萄糖试剂盒检测HT-29与HCT-116细胞的葡萄糖生成量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测己糖激酶(HK2),丙酮酸脱氢酶激酶(PDK1),乳酸脱氢酶(LDHA)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达。结果:消癌解毒方含药血清能够抑制HT-29与HCT-116细胞增殖能力,15%消癌解毒方含药血清对人结肠癌HT-29与HCT-116细胞的抑制率分别为42.7%,50.2%。Western blot结果显示,与空白组比较,消癌解毒方含药血清可降低HK2,PDK1,LDHA,HIF-1α蛋白相对表达量(P<0.05),且随浓度的增加表达降低。乳酸及葡萄糖试剂盒检测结果显示,与空白组比较,消癌解毒方含药血清可降低HT-29与HCT-116细胞的乳酸及葡萄糖水平(P<0.05),且随浓度的增加乳酸及葡萄糖水平降低。结论:消癌解毒方含药血清可以通过抑制人结肠癌HT-29与HCT-116细胞糖酵解的过程从而抑制肿瘤细胞的增殖,其抑制糖酵解过程的机制可能与降低HIF-1α表达,进而减少糖酵解相关酶HK2,PDK1,LDHA表达有关。

关键词：消癌解毒方结肠癌增殖糖酵解

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基于癌毒病机理论的消癌解毒方抗肿瘤研究进展

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南京中医药大学学报 2014年第6期30卷 593-595页

作者：程海波沈卫星姚志华沈政洁孙东东徐长亮谭佳妮南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

介绍了癌毒病机理论的相关内容,认为痰瘀郁毒是肿瘤的核心病机,并在癌毒病机理论的指导下,对消癌解毒方抗肿瘤的临床与实验研究进行了综述,消癌解毒方配合化疗具有较好的増效减毒、提高患者免疫功能的作用,其作用机制可能与其能够降低T... 详细信息

介绍了癌毒病机理论的相关内容,认为痰瘀郁毒是肿瘤的核心病机,并在癌毒病机理论的指导下,对消癌解毒方抗肿瘤的临床与实验研究进行了综述,消癌解毒方配合化疗具有较好的増效减毒、提高患者免疫功能的作用,其作用机制可能与其能够降低TGF-β1表达水平、抑制VEGF的生成、降低MMP-2活性、影响TLRs/NF?κB信号转导通路等有关。

关键词：癌毒病机理论消癌解毒方抗肿瘤述评

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基于HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术分析白花蛇舌草二氯甲烷部位化学成分

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中华中医药杂志 2016年第2期31卷 388-391页

作者：孙东东闫秋莹沈卫星徐长亮程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023 南京中医药大学药学院南京210023

目的:通过HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位中的化学成分进行定性分析。方法:采用LC-MS/MS,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。通过质谱信... 详细信息

目的:通过HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位中的化学成分进行定性分析。方法:采用LC-MS/MS,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。通过质谱信息及元素组成,与相关文献数据对照分析,对白花蛇舌草二氯甲烷萃取部位进行成分鉴定。结果:共鉴定出12个化合物,分别为阿魏酸、对羟基香豆酸、葡萄糖乙苷、对甲氧基桂皮酸、quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-feruloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-glucopyranoside、kaempferol-3-O-[2-O-(6-O-Eferuloyl)-β-D-glucopyranosyl]-β-D-galactopyranoside、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、2-甲基-3-羟基蒽醌、aurantianmide acetate、β-谷甾醇、豆甾醇、豆甾醇-5,22-二烯-3β,7β-二醇。结论:采用LC-MS/MS方法同时鉴定白花蛇舌草中多种化学成分,方法简单,快速,结果准确,为进一步阐明白花蛇舌草的药效物质基础提供证据。

关键词：白花蛇舌草化学成分 HPLC-ESI-Q-TOF-MS

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中药天葵子醇提部位的化学成分分离与分析

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中华中医药杂志 2016年第10期31卷 4172-4175页

作者：闫秋莹程海波张海彬沈卫星陈朝军孙东东南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室南京210023 南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的:分离、分析中药天葵子乙醇提取物中的化学成分。方法:采用HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术,定性分析天葵子95%乙醇提取部位化学成分;利用柱层析技术对醇提部位进行化学成分分离,并通过核磁共振波谱技术,解析鉴定所得单体的结构。结果:通过... 详细信息

目的:分离、分析中药天葵子乙醇提取物中的化学成分。方法:采用HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术,定性分析天葵子95%乙醇提取部位化学成分;利用柱层析技术对醇提部位进行化学成分分离,并通过核磁共振波谱技术,解析鉴定所得单体的结构。结果:通过正离子质谱信息分析,并结合相关文献,定性鉴定出天葵子醇提取物中的6个化合物,分别为Ehretioside B(Ⅰ)、冬青氰苷(Ⅱ)、东方唐松草苷(Ⅲ)、(1E,4α,5β,6α)-4,5,6-trihydroxy-2-cyclohexen-1-ylideneacetonitrile(Ⅳ)、2-丙烯酸-3(4’-羟基苯基)-(4"-羧基苯基)酯(Ⅴ)、苦瓜酚苷A(Ⅵ)。柱层析分离出3个单体,分别鉴定为唐松草酚定(Ⅶ)、小檗碱(Ⅷ)、cirsiumaldehyde(Ⅸ),其中小檗碱(Ⅷ)为首次从天葵子中分离得到。结论:通过现代柱色谱分离以及HPLCESI-Q-TOF-MS技术,结合波谱解析手段,能够对天葵子中化学成分进行有效分离和定性分析,该方法合理、可行,结果准确。

关键词：天葵子化学成分液质联用成分分离结构鉴定

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消癌解毒方联合顺铂通过调控组蛋白去甲基化酶抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长

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中国实验方剂学杂志 2018年第13期24卷 78-84页

作者：孙浩沈卫星徐长亮孙东东谭佳妮许惠琴程海波南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023

目的：观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法：BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂（2 mg·kg-1）、消癌解毒方（1×104mg·kg-1）及两者联合用药进行治疗,给药期... 详细信息

目的：观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法：BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂（2 mg·kg-1）、消癌解毒方（1×104mg·kg-1）及两者联合用药进行治疗,给药期间称量并记录小鼠体质量和瘤体积,15 d后脱颈处死,剥离并称量瘤块质量,计算抑瘤率,苏木素-伊红（HE）染色观察心、肝、脾、肾和瘤块的病理情况,原位末端转移酶标记技术（TUNEL）观察肿瘤细胞凋亡情况并统计凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,组蛋白去甲基化酶1（LSD1）,组蛋白H3（Histone H3）,组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化（Histone H3K4me2）,组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化（Histone H3K9me2）的表达水平。结果：与模型组相比,顺铂给药组小鼠体质量均有下降,其中消癌解毒方＋顺铂组较单用顺铂组体质量增加（P〈0.01）;消癌解毒方＋顺铂较单用顺铂更能缩小移植瘤体积,提高抑瘤率（P〈0.01）;更明显提高了肿瘤细胞凋亡率（P〈0.05,P〈0.01）;更明显下调肿瘤组织Bcl-2表达水平,上调Bax表达水平（P〈0.05,P〈0.01）;各给药组均能下调LSD1蛋白的表达,增加组蛋白H3K4,H3K9的二甲基化,消癌解毒方＋顺铂组作用最为明显（P〈0.05,P〈0.01）。结论：消癌解毒方＋顺铂用药对于4T1荷瘤小鼠抑瘤作用明显,其机制可能与下调组蛋白去甲基化酶水平有关。

关键词：消癌解毒方 4T1荷瘤小鼠顺铂组蛋白去甲基化酶

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消癌解毒方水煎液的化学成分研究

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中华中医药杂志 2019年第8期34卷 3455-3459页

作者：张海彬范汇森程海波沈卫星徐长亮丁岗孙东东国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方研究与产业化工程实验室江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京中医药大学转化医学研究中心南京210023 南京中医药大学药学院南京210023

目的:分离分析消癌解毒方水煎液中的化学成分。方法:建立HPLC-ESI-Q-TOF-MS方法对消癌解毒方水煎液中化学成分进行定性分析;利用柱层析技术对复方进行化学成分分离,并通过核磁共振波谱技术解析所得单体结构。结果:通过分析负离子模式下... 详细信息

目的:分离分析消癌解毒方水煎液中的化学成分。方法:建立HPLC-ESI-Q-TOF-MS方法对消癌解毒方水煎液中化学成分进行定性分析;利用柱层析技术对复方进行化学成分分离,并通过核磁共振波谱技术解析所得单体结构。结果:通过分析负离子模式下质谱信息,结合相关文献报道,鉴定出消癌解毒方水煎液中的21个化合物,其中皂苷类13个,黄酮类3个,三萜类3个,脂肪酸类2个。复方水煎液通过柱层析分离出5个单体,分别鉴定为丁二酸二乙酯(Ⅰ)、D-β-呋喃庚酮糖(Ⅱ)、D-α-呋喃庚酮糖(Ⅲ)、D-α-吡喃庚酮糖(Ⅳ)、Di-β-1-Deoxy-D-xylulofuranose 2,3’:3,2’-dianhydride(Ⅴ),上述5个单体同时且首次从天葵子药材分离得到。结论:本实验所建立的液质联用方法可快速、准确分析鉴别消癌解毒方水煎液中化学成分,结合柱色谱和波谱技术,可对复方中化学成分的分离分析进行有效补充。

关键词：消癌解毒方液质联用化学成分天葵子八月札柴胡

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消癌解毒方通过调控PI3K/AKT通路抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的作用与机制探讨

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南京中医药大学学报 2018年第2期34卷 173-177页

作者：孙浩沈卫星徐长亮孙东东谭佳妮许惠琴程海波南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023 南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

目的研究消癌解毒方抗乳腺癌细胞的活性及作用机制。方法显微镜观察MDA-MB-231细胞形态,MTT法考察细胞的增殖抑制率,流式细胞术观察细胞周期,Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白P53、P21、Cyclin B1、CDK1的表达。结果与对照组相... 详细信息

目的研究消癌解毒方抗乳腺癌细胞的活性及作用机制。方法显微镜观察MDA-MB-231细胞形态,MTT法考察细胞的增殖抑制率,流式细胞术观察细胞周期,Western blot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白P53、P21、Cyclin B1、CDK1的表达。结果与对照组相比,消癌解毒方给药组细胞减少,排列疏松,体积变小,形态变圆;消癌解毒方可以提高MDA-MB-231细胞的增殖抑制率(P<0.05~0.01),使肿瘤细胞的细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.05~0.01),可以抑制与细胞周期相关的PI3K/AKT信号通路,上调P53、P21,下调Cyclin B1、CDK1蛋白的表达(P<0.05~0.01)。结论消癌解毒方能阻滞MDA-MB-231细胞周期,抑制乳腺癌细胞的增殖,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：消癌解毒方乳腺癌细胞细胞增殖 PI3K/AKT通路

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清热解毒与以毒攻毒治法在肿瘤治疗中的比较研究

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时珍国医国药 2017年第9期28卷 2184-2186页

作者：石文静谭佳妮沈卫星徐长亮程海波南京中医药大学转化医学研究中心国家中医药管理局名医验方评价与转化重点实验室江苏省抗肿瘤验方与产业化工程实验室江苏南京210023 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023 江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心江苏南京210023

中医治疗肿瘤已有数千年历史,清热解毒与以毒攻毒作为肿瘤的常用治法在肿瘤临床中占有重要地位。两种治法在治疗肿瘤时的理论依据、机理、方药以及中药抗肿瘤机制均有所不同。针对以上四方面进行总结归纳,以期对肿瘤治法的相关比较有更... 详细信息

中医治疗肿瘤已有数千年历史,清热解毒与以毒攻毒作为肿瘤的常用治法在肿瘤临床中占有重要地位。两种治法在治疗肿瘤时的理论依据、机理、方药以及中药抗肿瘤机制均有所不同。针对以上四方面进行总结归纳,以期对肿瘤治法的相关比较有更加深入的探讨。

关键词：清热解毒以毒攻毒肿瘤

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