检索结果-内蒙古大学图书馆

中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2024年第2期14卷 73-82页

作者：凌淑洵涂玥刘思逸南京中医药大学第二附属医院江苏省第二中医院肾内科 210017 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室 210023

目的基于间充质干细胞(MSCs)在慢性肾脏病(CKD)研究领域相关文献的系统分析,探究该领域研究现状、发展趋势及中医药的应用前景。方法该研究通过4个经典的国内外期刊数据库检索文献并进行筛选,利用CiteSpace 6.1.R6软件绘制知识图谱、分... 详细信息

目的基于间充质干细胞(MSCs)在慢性肾脏病(CKD)研究领域相关文献的系统分析,探究该领域研究现状、发展趋势及中医药的应用前景。方法该研究通过4个经典的国内外期刊数据库检索文献并进行筛选,利用CiteSpace 6.1.R6软件绘制知识图谱、分析相关数据。结果共纳入36篇中文文献,712篇英文文献;中文文献整体发文量较少;2004年至2023年每年发表文献量总体呈上升趋势;基金资助主要集中在美国、中国和德国;共纳入583位作者,尚未形成核心作者团队;共纳入57个国家,美国、中国和韩国为核心研究国家,美国、中国、韩国和沙特在研究中起到重要的链接作用;共被引频次最高的期刊是《KIDNEY INTERNATIONAL》,但尚未形成核心期刊;高频被引文献都是2009年以后发表,包括实验研究、临床研究和综述三类;共纳入548个关键词,聚类关键词首位是肾脏纤维化。结论近年来MSCs在CKD领域的研究呈多作者、多团队的加速发展趋势,中国是本领域的核心研究国家之一,起到重要的链接作用。

关键词：间充质干细胞慢性肾脏病 CiteSpace 知识图谱可视化分析

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新医科背景下中医养生学概论课程思政的研究

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中国中医药现代远程教育 2024年第17期22卷 33-35页

作者：涂玥李开平张浩文南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 江苏省中医药健康养生技术工程研究中心江苏南京210023

“新医科”是新时代构建“健康中国”战略的重要基础,它以“医文、医工、医理、医X交叉学科支撑的医学教育新模式”为转变方向,着力培养大批卓越医学人才。文章以中医养生学概论课程为例,分析在“健康中国”战略和“新医科”教育大背景... 详细信息

“新医科”是新时代构建“健康中国”战略的重要基础,它以“医文、医工、医理、医X交叉学科支撑的医学教育新模式”为转变方向,着力培养大批卓越医学人才。文章以中医养生学概论课程为例,分析在“健康中国”战略和“新医科”教育大背景下,通过培养师资队伍、制定教学目标、优化教学内容和考评考核体系、挖掘教学内容思政资源等方面探索课程思政教学的具体策略,实现专业教育、医德教育和思政教育三者的有机融合,为“新医科”教育背景下的医学人才培养,尤其是中医学、中医养生学专业的课程思政教育实践提供参考。

关键词：新医科中医养生学概论课程思政

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黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用和机制

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2856-2861页

作者：王美子王玉万毅刚石岩涂玥史俪婧黄露武九龙戴青青龙燕万子玥南京中医药大学鼓楼临床医学院中医科南京210008 南京大学中医研究院南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科南京210008 辽宁中医药大学沈阳110847 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室南京210023 一桥大学·大学院社会学研究科·社会学部日本东京186-8601

目的:探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制。方法:将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组。采用“高脂饲料喂养、单侧肾切... 详细信息

目的:探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制。方法:将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组。采用“高脂饲料喂养、单侧肾切除、链脲佐菌素(STZ)腹腔注射”3种措施联合建立改良型DKD大鼠模型。成模后,4组大鼠分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及IMA混悬液灌胃,连续4周。在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液和肾组织,采用肾组织病理染色、蛋白质分析和透射电子显微镜等技术进行检测和观察肾组织PMT相关指标。结果:与模型组比较,TFA组和IMA组UNAG与TFA组UACR水平显著降低(P<0.01);细胞外基质和肾间质胶原相对面积显著降低(P<0.01);TFA组和IMA组显著改善周细胞超微结构特征、周细胞和肌成纤维细胞标志分子蛋白表达强度和表达水平(P<0.01,P<0.05);TFA和IMA可以抑制肾组织血管内皮生长因子受体(PDGFR)、血小板源性生长因子受体(VEGFR)信号通路关键信号分子蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:TFA与IMA体内能改善DKD大鼠RIF,其机制可能是通过调控周细胞-内皮细胞相关PDGFR、VEGFR信号通路活性而抑制肾组织PMT。该研究为黄蜀葵花治疗DKD患者RIF提供了可靠的药理学证据。

关键词：糖尿病肾脏疾病黄蜀葵花总黄酮周细胞-肌成纤维细胞转分化血管内皮生长因子受体信号通路血小板源性生长因子受体信号通路伊马替尼肾间质纤维化

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葛根芩连汤加味方改善糖尿病肾病模型鼠足细胞焦亡和胰岛素抵抗的作用和机制

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中国中药杂志 2021年第17期46卷 4471-4479页

作者：王美子岳丽军万毅刚黄煌吴薇涂玥刘不悔房其军袁灿灿王杰李欢 WAN Zi-yue 南京中医药大学鼓楼临床医学院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学国际经方学院江苏南京210023 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 Graduate School of Social Sciences Faculty of Social SciencesHitotsubashi UniversityTokyo 186-8601

为了探究现代经方——葛根芩连汤加味方(Supplemented Gegen Qinlian Decoction Formula,SGDF)在体内改善糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的作用和机制,将60只大鼠随机分为正常组、模型组、SGDF组和罗格列酮(rosiglitazone,ROS)组。通过"高脂饲料喂养+单侧肾切除+链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射"等3种措施建立改良型大鼠DKD模型。成模后,对于4组大鼠,每天经灌胃分别给予其双蒸水、SGDF混悬液以及ROS混悬液。在药物干预第6周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织,进而,针对DKD足细胞焦亡和胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)相关的各项指标进行检测和观察。这些指标包括各组大鼠一般情况,尿液、血液生化指标,肾小球硬化相关指标,足细胞焦亡标志分子,IR相关指标以及肾组织胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)1/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase,Akt)信号通路关键信号分子等。结果显示,对于DKD模型鼠,SGDF和ROS尽管对血糖(blood glucose,BG)无影响,但是都能改善其一般状况、部分肾功能指标以及肾小球硬化;都能改善其足细胞焦亡标志分子的表达特征和表达水平;此外,还能改善其肾组织IR,并不同程度地上调其肾组织IRS1/PI3K/Akt信号通路关键信号分子蛋白表达水平。总之,SGDF与ROS相似,在体内能多靶点地改善DKD,其机制与减轻足细胞焦亡和IR有关;该研究为现代经方——SGDF治疗DKD新药研究与开发提供了初步的药理学证据。

关键词：糖尿病肾病葛根芩连汤加味方足细胞焦亡胰岛素抵抗胰岛素信号通路

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低氧诱导因子的分子调控机制及中药的干预作用

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中国中药杂志 2020年第20期45卷 4805-4811页

作者：刘不悔王美子孙伟万毅刚吴薇房其军王文文 YEE Hong-yun 袁灿灿刘莹露涂玥 CHONG Fee-lan 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 The School of Pharmacy Management and Science UniversityShah Alam 40100Malaysia

低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)是机体内感受和调节细胞氧浓度的关键转录因子。HIF-1由α和β等2个亚基组成,其中,HIF-1α的分子调控机制涉及其降解和活化等主要过程。HIF-1α的降解是由氧依赖性信号途径调控的,包括&qu... 详细信息

低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)是机体内感受和调节细胞氧浓度的关键转录因子。HIF-1由α和β等2个亚基组成,其中,HIF-1α的分子调控机制涉及其降解和活化等主要过程。HIF-1α的降解是由氧依赖性信号途径调控的,包括"希佩尔-林道病恶性肿瘤抑制蛋白(von hippel-lindau protein,pVHL)依赖通路"和"pVHL非依赖性通路";而HIF-1α的活化是由氧非依赖性信号途径调控的,包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/真核生物始动因子4E结合蛋白1(eukaryotic initiation factor 4E-binding protein 1, 4EBP1)/HIF-1α通路、磷脂酰肌醇3激酶(phosph atidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(proteirrserinc-threonine kinases,Akt)/HIF-1α通路以及沉默信息调节因子1(silent information regulator1,Sirt1)/HIF-1α通路等。近年来,基于HIFs的分子调控机制,不仅研制出治疗肾性贫血的新药罗沙司他,在中药提取物中也发现了一些药理作用类似于HIFs的大分子物质,如大黄素、三七皂苷、厚朴酚以及灵仙新苷等,这些天然的大分子物质在炎症反应、自噬、表观遗传修饰以及细胞焦亡中发挥调控性作用。值得注意的是,对于常见的低氧相关疾病,如糖尿病肾病,HIFs介导的"细胞焦亡"可能是清利湿热类中药及其代表性经方(如二妙丸)干预炎症性组织、细胞损伤的新靶点。

关键词：低氧诱导因子中药分子机制信号通路细胞焦亡

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黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用和机制

黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织周细胞-肌成纤维细...

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第十三届全国中医药博士生学术论坛

作者：王美子王玉万毅刚石岩涂玥史俪婧黄露武九龙戴青青龙燕万子玥南京中医药大学鼓楼临床医学院中医科南京 210008 南京大学中医研究院南京 210008 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科南京 210008 辽宁中医药大学沈阳 110847 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室南京 210023 一桥大学·大学院社会学研究科·社会学部日本东京186-8601

目的：探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制.方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组.采用"高脂饲料喂养、单侧... 详细信息

目的：探究黄蜀葵花有效成分黄蜀葵花总黄酮(TFA)在体内抑制糖尿病肾脏疾病(DKD)肾组织周细胞-肌成纤维细胞转分化(PMT)的作用和机制.方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、TFA组和伊马替尼(IMA)组.采用"高脂饲料喂养、单侧肾切除、链脲佐菌素(STZ)腹腔注射"3种措施联合建立改良型DKD大鼠模型.成模后,4组大鼠分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及IMA混悬液灌胃,连续4周.在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液和肾组织,采用肾组织病理染色、蛋白质分析和透射电子显微镜等技术进行检测和观察肾组织PMT相关指标.结果：与模型组比较,TFA组和IMA组UNAG与TFA组UACR水平显著降低(P＜0.01);细胞外基质和肾间质胶原相对面积显著降低(P＜0.01);TFA组和IMA组显著改善周细胞超微结构特征、周细胞和肌成纤维细胞标志分子蛋白表达强度和表达水平(P＜0.01,P＜0.05);TFA和IMA可以抑制肾组织血管内皮生长因子受体(PDGFR)、血小板源性生长因子受体(VEGFR)信号通路关键信号分子蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论：TFA与IMA体内能改善DKD大鼠RIF,其机制可能是通过调控周细胞-内皮细胞相关PDGFR、VEGFR信号通路活性而抑制肾组织PMT.该研究为黄蜀葵花治疗DKD患者RIF提供了可靠的药理学证据.

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基于自噬信号通路探究褐藻多糖硫酸酯改善人近端肾小管上皮细胞衰老的分子机制

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中国中药杂志 2020年第24期45卷 6003-6011页

作者：房其军刘建璟万毅刚刘不悔涂玥吴薇刘莹露王文文王美子 YEE Hong-yun 袁灿灿 CHONG Fee-lan 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210029 江苏省中西医结合医院肾内科江苏南京210028 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院•养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 School of Pharmacy Management and Science UniversityShah Alam 40100

褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作用。然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚。将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常... 详细信息

褐藻多糖硫酸酯(fucoidan,FPS)是临床上治疗慢性肾衰竭中成药海昆肾喜胶囊的有效成分,具有潜在的抗衰老作用。然而,FPS是否能改善肾脏衰老,尤其是对于其抗衰老的分子机制,目前仍不清楚。将体外培养的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)分为正常组(normal group,N)、模型组(D-gal model group,D)、低剂量FPS组(low dose of FPS,L-FPS)、高剂量FPS组(high dose of FPS,H-FPS)以及维生素E组(vitamin E,VE),分别进行不同的干预。N组加入1%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)1 mL;D组加入75 mmol·L^(-1)D-gal;L-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+25μg·mL^(-1)FPS;H-FPS组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)FPS;VE组加入75 mmol·L^(-1)D-gal+50μg·mL^(-1)VE。在干预后24 h,首先,观察D-gal对HK-2细胞β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平和腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)-不协调的51类激酶1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号通路活性的影响;其次,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P53,P21蛋白表达水平的影响;最后,观察FPS和VE对D-gal诱导的HK-2细胞哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)蛋白表达水平以及AMPK-ULK1信号通路活性的影响。结果表明,对于HK-2细胞,75 mmol·L^(-1)的D-gal能安全而有效地诱导细胞SA-β-gal染色特征和klotho,P53,P21蛋白表达水平的变化,也就是引发细胞衰老;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞SA-β-gal染色特征以及klotho,P21,P53蛋白表达水平的变化,也就是拮抗细胞衰老,这里,两者的作用是类似的;D-gal不仅能诱导细胞衰老,还能促进LC3Ⅱ,磷酸化AMPK(phosphorylated-AMPK,p-AMPK)以及磷酸化ULK1(phosphorylated-ULK1,p-ULK1)蛋白高表达,激活自噬相关AMPK-ULK1信号通路;而FPS和VE都能改善D-gal诱导的细胞LC3Ⅱ,p-AMPK以及p-ULK1蛋白表达水平的变化,也就是抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性。总之,对于D-gal诱导的人近端肾小管上皮细胞衰老模型,FPS与VE相似,能改善肾脏细胞衰老,其分子机制可能与抑制自噬相关AMPK-ULK1信号通路活性有关。这一发现为FPS抗肾脏衰老提供了初步的药理学证据。

关键词：衰老褐藻多糖硫酸酯人近端肾小管上皮细胞自噬 AMPK-ULK1信号通路

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糖尿病肾病NLRP3炎症小体活化的分子调控机制及中药的干预作用

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中国中药杂志 2020年第1期45卷 7-13页

作者：王文文韩文贝万毅刚涂玥刘不悔刘莹露吴薇 YEE Hong-yun 房其军姚建南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210008 温州市中西医结合医院肾内科浙江温州325000 南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 Division of Molecular Signaling Department of Advanced Biomedical ResearchInterdisciplinary Graduate School of Medicine and EngineeringUniversity of YamanashiYamanashi 409-3898

在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)进展的过程中,Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein3,NLRP3)炎症小体活化与DN肾损伤密切相关。其特征是组分蛋白——NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protien,ASC)、胱冬肽酶(caspase)-1前体表达水平和结合水平的改变以及下游的效应蛋白——caspase-1,白介素(interleukin,IL)-1β,IL-18表达水平的升高,此外,还有相关炎症介质的释放。NLRP3炎症小体活化的分子调控机制涉及多条信号通路的激活,如活性氧(reactive oxygen species,ROS)/硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)通路、核因子(nuclear factor,NF-κB)通路、核转录因子E-2相关因子-2(nuclear factor erythroid-related factor 2,Nrf2)通路、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)通路以及丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路等。更为重要的是,激酶类的调节因子,如未有丝分裂曲霉相关蛋白激酶7(never in mitosis aspergillus-related kinase 7,Nek7)在上游可与NLRP3靶向结合而直接激活NLRP3炎症小体。一些中药提取物(槲皮素、姜黄素、千金藤素、胡椒碱以及红景天苷)和中药经典复方(乌梅丸)等可以通过多种途径干预NLPR3炎症小体而改善DN炎症性肾损伤。因此,基于NLRP3炎症小体活化的分子调控机制而精准揭示抗炎性中药或中药复方延缓DN进展的作用靶点是今后的发展方向之一。

关键词：糖尿病肾病 NLRP3炎症小体中药分子机制信号通路

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黄葵胶囊对早期糖尿病肾脏疾病患者胰岛素抵抗和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用

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中国中药杂志 2020年第23期45卷 5797-5803页

作者：吴薇刘莹露万毅刚曹东维房其军涂玥刘不悔王文文王美子 YEE Hong-yun 袁灿灿胡巍南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院肾内科江苏南京210008 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京大学医学院附属鼓楼医院药学部江苏南京210008

观察黄葵胶囊(Huangkui Capsules,HKC)对早期糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用。收集83例G2,A2期DKD患者的病例资料,进行回顾性分析。根据不同干预措... 详细信息

观察黄葵胶囊(Huangkui Capsules,HKC)对早期糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和尿微量白蛋白的多靶点治疗作用。收集83例G2,A2期DKD患者的病例资料,进行回顾性分析。根据不同干预措施将全部患者分为对照(A)组40例和治疗(B)组43例。其中,A组患者接受的治疗措施是"常规基础治疗";B组患者接受的治疗措施是"常规基础治疗+HKC"。对于2组患者,先比较其在接受干预措施前的基线参数,再比较其在接受干预措施8周后的中医证候总积分以及IR、尿蛋白、肾功能、血脂、安全性指标的变化情况,并且,针对全部DKD患者干预前后IR指标与尿蛋白指标、中医证候总积分分别进行相关性分析。结果表明,对于接受"常规基础治疗+HKC"干预措施的B组患者,其中医证候总积分、尿蛋白指标[包括尿微量白蛋白(urine microalbumin,micro-UAlb)、尿微量白蛋白/尿肌酐(urine microalbumin/urinary creatinine,UACR)]、IR主要指标[包括空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FIN)、稳态模型评估IR指数(homeostasis model assessment of IR,HOMA-IR)]均有明显改善;全部DKD患者干预前后IR主要指标(FIN,HOMA-IR)与尿蛋白指标(micro-UAlb,UACR)均呈正相关;全部DKD患者干预前后IR主要指标(FIN,HOMA-IR)与中医证候总积分亦呈正相关。此外,2种干预措施对全部DKD患者肾功能、血脂以及安全性指标均无明显影响。总之,"常规基础治疗联合HKC"的干预措施不仅能改善早期DKD患者IR,还能减少尿微量白蛋白。其治疗靶点不只在蛋白尿,还可能是蛋白尿的上游致病因素——IR。

关键词：糖尿病肾脏疾病黄葵胶囊胰岛素抵抗尿微量白蛋白

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雷公藤甲素抑制NLRP3炎症小体活化改善高糖诱导的足细胞上皮-间充质转分化

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中国中药杂志 2019年第24期44卷 5457-5464页

作者：吴薇刘不悔万毅刚孙伟刘莹露王文文房其军涂玥 YEE Hong-yun 袁灿灿万子玥南京大学医学院附属鼓楼医院中医科江苏南京210008 南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院中医科江苏南京210008 南京中医药大学附属医院肾内科江苏南京210029 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院中医养生学教研室江苏南京210023 Department of Social Work Meiji Gakuin UniversityTokyo108-8636

基于糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾组织Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3 inflammasome,NLRP3)炎症小体活化的调控机制而探讨雷公藤有效成分——雷公藤甲素(triptolide,TP)在体外改善高糖(high glucose,HG)诱导足细胞上皮-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用。将体外培养的小鼠永生化足细胞分为正常(the normal,N)组、HG组、低剂量TP(the low dose of TP,L-TP)组、高剂量TP(the high dose of TP,H-TP)组以及甘露醇(the mannitol,MNT)组。分别进行不同的干预,即N组加入5 mmol·L^-1D-葡萄糖(D-glucose,DG),HG组加入30 mmol·L^-1HG,L-TP组加入30 mmol·L^-1HG+5μg·L^-1TP,H-TP组加入30 mmol·L^-1HG+10μg·L^-1TP,MNT组加入5 mmol·L^-1DG+24.5mmol·L^-1MNT。在干预后的不同时间点(24,48,72 h),首先,观察HG或TP对足细胞增殖活性的影响;其次,检测足细胞上皮细胞标志性分子nephrin和ZO-1、间充质细胞标志性分子Ⅰ型胶原(collagenⅠ)和纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的蛋白表达水平;最后,检测足细胞NLRP3炎症小体活化关键信号分子NLRP3,凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protien,ASC)以及下游效应蛋白caspase-1、白介素(interleutin,IL)-1β、IL-18的蛋白表达水平。结果表明,对于体外培养的足细胞,HG能引起nephrin,ZO-1蛋白表达水平下调,collagenⅠ,FN蛋白表达水平上调,诱导其发生EMT;还能引起NLRP3,ASC以及caspase-1,IL-1β,IL-18蛋白表达水平上调,诱导其NLRP3炎症小体活化。此外,L-TP或H-TP与HG联合干预足细胞能恢复nephrin,ZO-1蛋白表达水平,抑制collagenⅠ,FN蛋白表达水平,改善EMT;还能下调NLRP3,ASC蛋白表达水平,抑制NLRP3炎症小体活化,并减少其下游效应分子caspase-1,IL-1β,IL-18蛋白表达水平。总之,HG在体外能激活NLRP3炎症小体而诱导足细胞EMT;TP在适当的剂量范围内能抑制NLRP3炎症小体活性而改善足细胞EMT,这可能是TP保护DKD足细胞炎症性损伤的关键分子机制之一。

关键词：糖尿病肾病雷公藤甲素足细胞 NLRP3炎症小体活化上皮-间充质转分化

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