检索结果-内蒙古大学图书馆

东南大学学报（医学版） 2024年第2期43卷 262-266页

作者：叶子陈晨刘媛程健吕茹李政杰魏洪霞成骢南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)感染性疾病科江苏南京210000

目的:分析人类免疫缺陷病毒(HIV)感染合并肾脏疾病患者的肾脏病理类型、临床特征及预后。方法:回顾性分析2016年1月至2023年1月在南京市第二医院感染性疾病科行肾穿刺组织检查的HIV感染合并肾脏疾病患者的临床资料。结果:25例患者纳入... 详细信息

目的:分析人类免疫缺陷病毒(HIV)感染合并肾脏疾病患者的肾脏病理类型、临床特征及预后。方法:回顾性分析2016年1月至2023年1月在南京市第二医院感染性疾病科行肾穿刺组织检查的HIV感染合并肾脏疾病患者的临床资料。结果:25例患者纳入本研究,平均年龄(45.0±12.1)岁,男23例(92%),4例(16%)合并糖尿病,5例(20%)合并高血压,4例(16%)合并乙肝,3例(12%)合并丙肝。肾穿刺病理5例(20%)为HIV相关肾损伤(HIVAN),9例(36%)为IgA肾病,7例(28%)为HIV相关免疫复合物肾病(HIVICK),2例(8%)为间质性肾炎,缺血性肾病、糖尿病肾病各1例(4%)。15例患者在抗逆转录病毒治疗(ART)前即出现肾脏损伤,其中5例表现为HIVAN,4例表现为IgA肾病,3例膜性肾病,2例免疫复合物沉积性肾病,1例肾小管间质损伤。接受ART后出现肾脏损伤患者中,5例为IgA肾病,膜增生性肾小球肾炎、缺血性肾病、免疫复合物沉积性肾病、间质性肾炎、糖尿病肾病各1例。20例(80%)患者肾活检时存在肾小球滤过率下降。平均随访36.5个月,末次随访时,14例患者获得肾脏缓解,其中9例获得完全缓解。与基线相比,末次随访尿蛋白显著下降,肾小球滤过率显著升高。3例(12%)患者进展为终末期肾病,无患者死亡。结论:HIV感染患者在ART前出现肾脏损伤病理改变以HIVAN、HIVICK为主,而ART后以IgA肾病为主。积极行ART及免疫抑制剂治疗能显著改善蛋白尿及肾功能。HIV合并肾脏损伤,就诊时肾功能受损较重,迫切需要早期发现、及时治疗。

关键词：人类免疫缺陷病毒感染肾活检病理诊断

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音乐疗法对炎症性肠病患者负性情绪干预效果的系统评价

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医药高职教育与现代护理 2024年第2期7卷 156-162页

作者：孔方刘青陈丹蕾南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)消化病诊疗中心江苏南京210003 南京中医药大学护理学院江苏南京210023

目的评价音乐疗法对炎症性肠病(IBD)患者负性情绪干预效果、肠道功能的影响。方法计算机检索维普、中国知网、万方数据、CBM、Web of Science、PubMed、 Embase、The Cochrane Library、CINAHL等9个中外文数据库。检索时限从建库日起... 详细信息

目的评价音乐疗法对炎症性肠病(IBD)患者负性情绪干预效果、肠道功能的影响。方法计算机检索维普、中国知网、万方数据、CBM、Web of Science、PubMed、 Embase、The Cochrane Library、CINAHL等9个中外文数据库。检索时限从建库日起至2023年1月23日。两位研究人员根据纳入和排除标准,完成文献搜索、筛选、数据提取和质量评估,最终使用RevMan5.4.1软件进行了Meta分析。结果经过对纳入的12项随机对照试验(RCT)文献进行评估(涉及900例患者),结果显示音乐疗法可以显著改善患者的焦虑水平[SMD=-1.68,95%CI(-2.35,-1.00),P<0.000 01]和抑郁水平[SMD=-4.74,95%CI(-6.20,-3.29),P<0.000 01];音乐疗法可以显著改善溃疡性结肠炎(UC)患者的肠道功能[MD=-2.39,95%CI(-2.57,2.20),P<0.000 01]。结论音乐疗法可以缓解IBD患者的负性情绪,改善患者的肠道功能和症状,对IBD患者治疗起积极作用。

关键词：炎症性肠病音乐疗法负性情绪肠道症状系统评价

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能谱CT成像对甲状腺癌局部浸润深度的诊断价值及其定量参数与肿瘤组织中Ki67、VEGF、CD34、EGFR的相关性

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现代生物医学进展 2023年第3期23卷 483-488页

作者：沈娟丁怀银杜超袁军李怀花南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)放射科江苏南京210003

目的:探讨能谱CT成像对甲状腺癌局部浸润深度的诊断价值及其定量参数与肿瘤组织中Ki67、VEGF、CD34、EGFR的相关性。方法:回顾性分析2018年6月-2021年6月我院经手术或穿刺活检病理证实为甲状腺肿瘤性病变的患者96例,其中29例为甲状腺癌... 详细信息

目的:探讨能谱CT成像对甲状腺癌局部浸润深度的诊断价值及其定量参数与肿瘤组织中Ki67、VEGF、CD34、EGFR的相关性。方法:回顾性分析2018年6月-2021年6月我院经手术或穿刺活检病理证实为甲状腺肿瘤性病变的患者96例,其中29例为甲状腺癌局部浸润组(A组),34例为甲状腺癌无浸润组(B组),33例为甲状腺腺瘤组(C组)。另取56例甲状腺另一侧叶正常组织作为对照组(D组)。所有患者均完善能谱CT检查,采集图像后在能谱CT Viewer分析软件上测量病变区碘浓度,计算能谱曲线斜率。采用免疫组织化学染色分析Ki-67、VEGF、CD34、EGFR的表达情况。采用Spearman秩相关分析评价碘浓度、能谱曲线斜率与甲状腺癌肿瘤组织中Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达的相关性。结果:在平扫、动脉期、静脉期,A组、B组、C组和D组的碘浓度逐渐增大,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。甲状腺癌局部浸润组织能谱曲线呈"低平型",斜率为较小负值,正常甲状腺组织能谱曲线为下降型,斜率为负值;在平扫、动脉期、静脉期,A组、B组、C组和D组的能谱曲线斜率逐渐变小,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组中Ki-67、VEGF、CD34和EGFR的阳性表达率均高于B组和C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。碘浓度在动脉期、静脉期与Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达呈正相关(P<0.05),碘浓度在平扫与Ki-67表达呈正相关(P<0.05),碘浓度在平扫与VEGF、CD34、EGFR表达无相关性(P>0.05)。能谱曲线斜率在动脉期、静脉期与Ki-67、VEGF、CD34、EGFR表达呈正相关(P<0.05),能谱曲线斜率在平扫与VEGF表达呈正相关(P<0.05),能谱曲线斜率在平扫与Ki-67、CD34、EGFR表达无相关性(P>0.05)。结论:能谱CT成像检查对甲状腺癌局部浸润深度的判断具有重要的价值,其定量参数碘浓度、能谱曲线斜率与Ki67、VEGF、CD34、EGFR具有相关性,可间接反映肿瘤微血管、肿瘤血管生成、甲状腺癌分化程度、浸润程度等情况,对评价甲状腺癌生物学行为可提供有价值的信息。

关键词：能谱CT成像甲状腺癌浸润深度 Ki67 VEGF CD34 EGFR 相关性诊断价值

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异丙酚-芬太尼与咪达唑仑-芬太尼用于晚期肝病胃肠内镜检查安全性比较

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河北医科大学学报 2023年第6期44卷 707-712页

作者：刘婷婷解东明邓友明南京中医药大学附属南京医院南京市第二医院麻醉科江苏南京210000

目的比较异丙酚-芬太尼与咪达唑仑-芬太尼用于晚期肝病患者胃肠内镜检查的安全性。方法招募因肝硬化接受胃肠内镜检查的晚期肝病患者86例。所有患者均进行上消化道内镜检查,根据麻醉用药方案将患者分为异丙酚-芬太尼组和咪达唑仑-芬太尼... 详细信息

目的比较异丙酚-芬太尼与咪达唑仑-芬太尼用于晚期肝病患者胃肠内镜检查的安全性。方法招募因肝硬化接受胃肠内镜检查的晚期肝病患者86例。所有患者均进行上消化道内镜检查,根据麻醉用药方案将患者分为异丙酚-芬太尼组和咪达唑仑-芬太尼组,每组43例。异丙酚-芬太尼组给予静脉注射异丙酚2 mg/kg和芬太尼0.5μg/kg。咪达唑仑-芬太尼组给予静脉注射咪达唑仑3 mg和芬太尼0.5μg/kg。比较诱导前(T0)、镇静后5 min(T1)、镇静后10 min(T2)、镇静后15 min(T3),镇静后30 min(T4)、手术结束前5 min(T5)血流动力学参数[血氧饱和度(oxygen saturation,SpO_(2))、心率(heart rate,HR)、平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)]变化。比较T0~T5时点Ramsay镇静评分。比较术前、麻醉诱导、气管插管和术后的脑电图双谱指数(bispectral index,BIS)值、脑电图θ波和δ波波段频率。比较受试者手术期间不良反应发生情况。结果2组SpO_(2)水平呈逐渐升高趋势,HR水平呈逐渐降低趋势,异丙酚-芬太尼组SpO_(2)水平升高幅度大于咪达唑仑-芬太尼组,HR水平降低幅度大于咪达唑仑-芬太尼组,组间、时点间、组间·时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。2组Ramsay镇静评分、脑电图δ波波段均呈先升高再降低趋势,BIS和脑电图θ波波段呈先降低再升高趋势,异丙酚-芬太尼组Ramsay镇静评分、BIS、脑电图θ波波段、脑电图δ波波段波动幅度大于咪达唑仑-芬太尼组,组间、时点间、组间·时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。异丙酚-芬太尼组低血压发生率高于咪达唑仑-芬太尼组(P<0.05)。结论异丙酚或咪达唑仑与芬太尼联合使用对上消化道内窥镜检查的晚期肝病患者的镇静作用是有效的,与咪达唑仑相比,异丙酚药物能更好的发挥深度镇静作用,体现在BIS降低和脑电图δ波段频率升高,然而会增加低血压的发生风险。

关键词：终末期肝病内窥镜检查异丙酚咪达唑仑

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分级诊疗制度下江苏省安宁疗护服务项目需求与实施现状调查

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中国卫生经济 2023年第8期42卷 60-65页

作者：张慧超吴金凤苏孟宇李晓燕周宁周智陈燕子李捷吴静张玉玺南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院) 南京210003 南京中医药大学南京210046 江苏省护理学会南京210009 南京医科大学南京211166 中国人民解放军东部战区空军医院南京210000 南京明基医院南京210019 南京医科大学第一附属医院(江苏省人民医院) 南京210029

目的:调查江苏省安宁疗护服务项目的开展现况,分析江苏省不同级别医院对安宁疗护服务项目的需求、实施情况,并结合相关文献、医保政策等提出建议。方法:采用自行设计的“安宁疗护服务项目开展现状调查表”进行调查。结果:实际调查63家... 详细信息

目的:调查江苏省安宁疗护服务项目的开展现况,分析江苏省不同级别医院对安宁疗护服务项目的需求、实施情况,并结合相关文献、医保政策等提出建议。方法:采用自行设计的“安宁疗护服务项目开展现状调查表”进行调查。结果:实际调查63家实施安宁疗护服务的医院,包括41家三级医院、10家二级医院和12家一级医院。114个安宁疗护相关服务项目,根据不同医院的等级分组,得出已纳入医保相关服务项目需求-实施均值为:一级医院10.40%,二级医院31.10%,三级医院23.90%;未纳入医保相关服务项目需求-实施均值:为一级医院16.40%,二级医院43.10%,三级医院32.40%。结论:分级诊疗制度下的安宁疗护亟待从三级医院下沉至一级、二级医院。部分已纳入医保的相关服务项目难以在安宁疗护科室享受医保待遇,难以实施。未纳入医保的安宁疗护相关服务项目有较大发展空间。

关键词：安宁疗护服务项目分级诊疗医保政策江苏

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α-硫辛酸对2型糖尿病胰岛素抵抗的机制研究

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中国临床医生杂志 2024年第3期52卷 354-357页

作者：马力王仲建南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)临床药学部江苏南京210037

目的观察α-硫辛酸调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体对2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗的机制。方法选取南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)2021年6月至2023年6月就诊的102例T2DM患者研究,在组间基线特征可比... 详细信息

目的观察α-硫辛酸调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体对2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗的机制。方法选取南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)2021年6月至2023年6月就诊的102例T2DM患者研究,在组间基线特征可比的原则上,以随机数字表法将其分为基础组和观察组,各51例。基础组给予基础降糖治疗,观察组在基础组基础上给予α-硫辛酸治疗,比较两组患者血糖指标、血脂指标、血清NLRP3及下游炎性因子、胰岛素抵抗指标。结果观察组患者治疗后糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清NLRP3、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-1β(IL-1β)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均低于基础组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和稳态模型胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)高于基础组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论α-硫辛酸通过下调T2DM患者NLRP3及下游炎性因子,可改善胰岛素抵抗,降低血糖、血脂,效果显著。

关键词： α-硫辛酸核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 炎性小体 2型糖尿病胰岛素抵抗

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2型糖尿病合并SARS-CoV-2感染患者25-羟维生素D水平与胰岛素抵抗的相关性研究

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现代医药卫生 2025年第2期41卷 293-296,302页

作者：陈玉华徐健朱博钰李楠贾佳戴芳芳南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京市第二医院江苏南京210029

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者感染新型冠状病毒(SARS-CoV-2)后25-羟维生素D[25(OH)D]与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法选取2023年1月1日至12月31日南京中医药大学附属医院T2DM合并SARS-CoV-2感染的住院患者892例,根据25(OH)D四分位数水... 详细信息

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者感染新型冠状病毒(SARS-CoV-2)后25-羟维生素D[25(OH)D]与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法选取2023年1月1日至12月31日南京中医药大学附属医院T2DM合并SARS-CoV-2感染的住院患者892例,根据25(OH)D四分位数水平将其分为D1组(≤12 ng/mL)、D2组(13~16 ng/mL)、D3组(17~20 ng/mL)和D4组(≥21 ng/mL),每组223例。比较各组患者临床资料[包括总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FPG)、尿酸(UA)、糖化血红蛋白(HbA1c)、24 h尿蛋白定量(24 hUTP)、空腹胰岛素(FINS)等]。分析稳态模型IR指数(HOMA-IR)的影响因素,以及25(OH)D水平与IR关系。结果D2、D3、D4组患者年龄、HOMA-IR及TC、FPG、FINS、HbA1c、LDL-C、24 hUTP水平低于D1组,而HDL-C水平高于D1组;D4组患者TC、FPG水平低于D2、D3组,HOMA-IR低于D2组,而HOMA-IR及UA、HDL-C、LDL-C水平高于D3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。25(OH)D水平与年龄、UA水平呈正相关(P<0.05),与HbA1c、FPG、HOMA-IR、FINS、24 hUTP水平呈负相关(P<0.05)。HbA1c、TG、HDL-C、24 hUTP、25(OH)D水平与HOMA-IR独立相关(P<0.05)。D2、D3、D4组发生IR的风险分别是D1组的0.948(P=0.032)、0.941(P=0.025)、0.854(P=0.001)。结论感染SARS-CoV-2后,T2DM患者25(OH)D水平与IR密切相关。

关键词： 2型糖尿病 25-羟维生素D 胰岛素抵抗新型冠状病毒

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黄芪多糖通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进肝癌细胞铁死亡并抑制细胞增殖

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中国中西医结合外科杂志 2025年第1期31卷 123-127页

作者：朱礼青王之心曹辉童宁张引兰南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)药学部上海210037 上海中医药大学附属曙光医院急诊内科上海201203

目的:研究黄芪多糖(APS)在肝癌铁死亡机制的调控作用。方法:用不同浓度APS(0、50、100、200 mg/L)处理肝癌HepG2细胞48 h,分别记作对照组和APS低、中、高剂量组。采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,同时采用试剂盒检测各组细胞的谷胱甘肽... 详细信息

目的:研究黄芪多糖(APS)在肝癌铁死亡机制的调控作用。方法:用不同浓度APS(0、50、100、200 mg/L)处理肝癌HepG2细胞48 h,分别记作对照组和APS低、中、高剂量组。采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,同时采用试剂盒检测各组细胞的谷胱甘肽(GSH)、活性氧自由基(ROS)和脂质过氧化物水平,采用流式细胞术检测各组细胞的铁离子水平。通过免疫印迹法检测各组细胞的铁死亡标志蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰CoA合成酶4(ACSL)以及Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白Wnt和β-catenin蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,APS高、中、低剂量组均能抑制肝癌HepG2细胞的增殖,且随着APS的浓度升高,抑制效果更显著(P<0.05)。与对照组相比,高、中、低剂量组均能降低肝癌HepG2细胞中GSH水平,并提高ROS和脂质过氧化物水平,同时提高铁离子水平,且随着APS浓度升高效果更显著(P <0.05)。同时,与对照组相比,APS高、中、低剂量组均能降低GPX4蛋白表达水平,提高ACSL4蛋白表达水平,且呈剂量依赖性(P <0.05)。与对照组相比,APS高、中、低剂量组均能降低Wnt和β-catenin蛋白表达水平,随着APS剂量升高,蛋白表达抑制效果更显著(P <0.05)。结论:APS通过增强ROS和脂质过氧化物的积累增强铁死亡,抑制肝癌细胞的增殖,这一过程可能与Wnt/β-catenin信号通路的抑制相关。

关键词：黄芪多糖铁死亡肝癌 Wnt/β-catenin信号通路增殖

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安罗替尼对宫颈癌细胞增殖和迁移与侵袭的影响及作用机制

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热带医学杂志 2023年第2期23卷 137-142,148,132页

作者：夏娜娜杨京蕊戴劲余敏敏南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)妇科江苏南京210003

目的研究安罗替尼对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法取对数生长期宫颈癌SiHa细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验根据半数抑制浓度(IC50)确定安罗替尼实验浓度,将SiHa细胞分为对照组(0μmol/L)、低浓度组(5μmol... 详细信息

目的研究安罗替尼对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法取对数生长期宫颈癌SiHa细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验根据半数抑制浓度(IC50)确定安罗替尼实验浓度,将SiHa细胞分为对照组(0μmol/L)、低浓度组(5μmol/L)、中浓度组(10μmol/L)、高浓度组(20μmol/L)。以平板克隆实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测安罗替尼对SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。以Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、上皮钙黏附素(E-cadherin)、无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。结果 CCK-8实验显示安罗替尼能够剂量依赖性抑制SiHa细胞的增殖,作用24、48和72 h的IC50分别为(26.96±2.25)、(13.59±1.13)和(9.27±0.75)μmol/L。平板克隆实验显示,处理SiHa细胞48 h后,对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组细胞克隆形成率分别为(62.05±7.88)%、(39.96±5.10)%、(24.02±4.98)%和(15.14±3.03)%。与对照组相比,低、中、高浓度组SiHa细胞克隆率显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。随着药物剂量的增加,SiHa细胞克隆率也逐渐减小,具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验显示,对照组、低浓度组、中浓度组细胞迁移率分别为(72.03±5.40)%、(56.98±6.55)%和(41.33±7.02)%。与对照组相比,低浓度组、中浓度组SiHa细胞迁移率显著下降,差异均有统计学意义(P均<0.05),随着药物剂量的增加,SiHa细胞迁移率也逐渐减小,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell细胞侵袭实验结果显示,对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组侵袭细胞数分别为(180±10)、(125±10)、(78±8)和(30±5)个,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,低浓度组和高浓度组的E-cadherin蛋白表达升高,VEGF、MMP-9、Wnt1和β-catenin的蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论安罗替尼可能通过Wnt/β-catenin通路发挥抑制SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的作用。

关键词：宫颈癌安罗替尼迁移侵袭 Wnt/β-catenin通路

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中华实用诊断与治疗杂志 2023年第3期37卷 252-260页

作者：夏娜娜杨安银余敏敏南京中医药大学附属南京医院、南京市第二医院妇科江苏南京210003

目的应用生物信息学方法筛选宫颈癌顺铂耐药相关的枢纽基因,探讨KRT6A表达对顺铂耐药宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响。方法(1)收集TCGA数据库306份宫颈癌标本的mRNA表达数据,基于GDSC数据库,应用R软件包“pRRophetic”预测宫颈癌样本... 详细信息

目的应用生物信息学方法筛选宫颈癌顺铂耐药相关的枢纽基因,探讨KRT6A表达对顺铂耐药宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响。方法(1)收集TCGA数据库306份宫颈癌标本的mRNA表达数据,基于GDSC数据库,应用R软件包“pRRophetic”预测宫颈癌样本顺铂化疗的敏感度,采用线性回归分析顺铂的半数抑制浓度(the half inhibitory concentration,IC_(50))。依据IC_(50)值将宫颈癌样本分为顺铂敏感组和耐药组,应用limma软件包进行差异表达mRNA分析,对其进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,应用Cytoscape软件构建差异表达基因的蛋白互作网络,进行模块分析并筛选枢纽基因。选择KRT6A基因进行细胞实验。(2)取对数生长期SiHa和顺铂耐药SiHa(SiHa/DDP)细胞,采用实时荧光定量PCR法检测KRT6A mRNA相对表达量;分别应用0、0.625、1.25、2.5、5、10、20 mg/L顺铂处理48 h,采用CCK-8法检测2组细胞增殖率。(3)取对数生长期SiHa/DDP细胞分为转染组(转染siRNA-KRT6A)和对照组(转染siRNA-NC),转染48 h,2组采用实时荧光定量PCR法检测KRT6A mRNA相对表达量,采用Western blot法检测KRT6A蛋白相对表达量;然后采用CCK-8法检测应用0、0.625、1.25、2.5、5、10、20 mg/L顺铂处理48 h细胞增殖,计算顺铂的IC_(50)值。转染48 h取转染组和对照组细胞,应用5 mg/L(IC_(50)值)浓度的顺铂处理48 h,采用流式细胞术检测处理0、48 h时细胞凋亡。结果(1)顺铂敏感组与顺铂耐药组差异表达基因有190个,与顺铂敏感组比较,顺铂耐药组74个基因表达上调、116个基因表达下调。GO分析结果提示差异表达基因参与表皮发育、肽酶活性调节、角质形成细胞分化、蛋白质水解和水解酶活性的负调控等生物过程,其产物参与细胞间连接、顶端质膜、中间体、侧质膜等细胞组分,发挥丝氨酸型内肽酶抑制剂活性、氧化还原酶活性、钙依赖性蛋白结合和细胞骨架的结构成分等生物学分子功能。KEGG富集分析结果显示,差异表达基因主要富集于雌激素信号通路、补体和凝血级联反应、白细胞介素-17信号通路、酪氨酸代谢、肾素分泌和组氨酸代谢等。通过蛋白互作网络和聚类分析得到6个宫颈癌顺铂耐药的枢纽基因,分别为KRT6A、KRT5、KRT14、SPRR1B、KRT16和SPRR1A。(2)SiHa/DDP细胞KRT6A mRNA相对表达量(6.310±0.417)高于SiHa细胞(1.000±0.110)(t=21.314,P<0.001)。2.5、5、10、20 mg/L顺铂处理48 h,SiHa/DDP细胞增殖率[(72.461±3.598)%、(70.862±3.474)%、(63.013±3.565)%、(47.754±5.023)%]均高于SiHa细胞[(50.702±6.477)%、(22.593±4.413)%、(5.964±1.396)%、(3.555±1.263)%](t=5.086,P=0.007;t=14.886,P<0.001;t=25.811,P<0.001;t=14.781,P<0.001)。(3)转染48 h,转染组KRT6A mRNA及蛋白相对表达量(0.290±0.053、0.457±0.046)均低于对照组(0.987±0.023、0.457±0.046)(t=20.880,P<0.001;t=10.228,P=0.001)。1.25、2.5、5、10、20 mg/L浓度顺铂处理48 h,转染组细胞增殖率[(65.676±3.358)%、(53.150±1.902)%、(40.932±2.455)%、(33.580±2.949)%、(18.042±3.183)%]均低于对照组[(75.557±3.573)%、(66.144±3.843)%、(53.801±2.276)%、(41.683±1.422)%、(28.953±3.065)%](t=3.529,P=0.024;t=5.294,P=0.006;t=6.658,P=0.003;t=4.287,P=0.013;t=4.276,P=0.013)。5 mg/L顺铂处理0、48 h,转染组细胞凋亡率[(14.039±2.410)%、(32.963±3.133)%)]高于对照组[(4.455±1.028)%、(23.004±3.613)%](t=6.377,P=0.003;t=3.594,P=0.022)。结

关键词：宫颈癌差异表达基因顺铂耐药 KRT6A基因 SiHa细胞 SiHa/DDP细胞

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