目的:探讨蛇床子素(Osthole,OST)体外对小鼠单核细胞RAW264.7细胞系向破骨细胞分化的影响及相关机制.方法:通过使用RAW264.7细胞系体外诱导培养破骨细胞;采用CCK-8法筛选无细胞毒性的药物浓度组;通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)法测定TRAP阳性细胞数和融合指数;通过测定骨吸收板上溶解坑面积和培养液中的荧光强度评估OST对骨吸收功能的影响;使用荧光素酶报告基因法观察OST对RAW264.7细胞系中转录因子NFAT和NF-κB表达情况的影响;应用q-PCR法检测OST对RAW264.7细胞系中相关破骨基因NFATc1、CTSK、MMP-9、TRAP、INTE-BETA3、C-SRC 表达的影响;应用 Western blotting技术检测OST对RAW264.7细胞系中NF-κB信号通路上相关蛋白膜p65、IκB、p-IκB、核p65表达的影响.
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