检索结果-内蒙古大学图书馆

基于OPA1调控线粒体稳态研究姜黄素对HUVECs增殖、迁移的双向调节作用

中华中医药杂志 2023年第10期38卷 4913-4918页

作者：李彬涂鹏程郭杨潘娅岚孙杰杨光露王礼宁梁众擎马勇南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210029

目的:基于O P A1介导的线粒体稳态明确不同浓度姜黄素双向调节人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的药理作用及机制。方法:高糖DMEM完全培养基培养HUVECs,CD31荧光染色鉴定;不同浓度姜黄素干预HUVECs,CCK8检测增殖活性,结晶紫染色... 详细信息

目的:基于O P A1介导的线粒体稳态明确不同浓度姜黄素双向调节人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的药理作用及机制。方法:高糖DMEM完全培养基培养HUVECs,CD31荧光染色鉴定;不同浓度姜黄素干预HUVECs,CCK8检测增殖活性,结晶紫染色检测克隆增殖状态;细胞划痕实验及Transwell实验检测其迁移能力;RT-qPCR检测HUVECs的VEGFα、HIF-1αmRNA水平;ROS、JC-1试剂盒检测HUVECs ROS水平及线粒体膜电位;Western Blotting检测HUVECs OPA1及其下游蛋白表达。结果:20、30、50μmol/L姜黄素显示显著的HUVECs增殖抑制效果(P<0.01),1μmol/L姜黄素能够促进HUVECs的克隆增殖;与Ctrl组比较,1、10μmol/L姜黄素能够显著促进HUVECs迁移(P<0.01),20、30μmol/L姜黄素能够显著抑制HUVECs细胞迁移(P<0.01);20、30μmol/L姜黄素能够显著抑制HIF-1αmRNA水平(P<0.05);与Ctrl组比较,20μmol/L姜黄素显著上调HUVECsROS水平(P<0.05),20、30μmol/L姜黄素能够显著降低HUVECs线粒体活性(P<0.05);与Ctrl组比较,1、10μmol/L姜黄素均能够显著上调OPA1蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:以10μmol/L为区分,不同浓度的姜黄素对HUVECs的增殖、迁移发挥双向调节作用,并且这一作用与OPA1介导的线粒体稳态密切相关。

关键词：姜黄素线粒体稳态血管内皮细胞 OPA1

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基于16S rDNA分析脊髓康对脊髓损伤小鼠肠道菌群的影响

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中华中医药杂志 2023年第3期38卷 1009-1014页

作者：杨光露马勇郭杨潘娅岚刘孟敏吴承杰涂鹏程南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210023

目的:探讨脊髓康对脊髓损伤(SCI)小鼠肠道菌群的影响。方法:将64只C57BL/6小鼠随机分为假手术+生理盐水组、假手术+脊髓康组、SCI+生理盐水组、SCI+脊髓康组;采用改良Allen’s法建立小鼠SCI模型;用后肢运动功能(BMS)评分及斜板试验评估... 详细信息

目的:探讨脊髓康对脊髓损伤(SCI)小鼠肠道菌群的影响。方法:将64只C57BL/6小鼠随机分为假手术+生理盐水组、假手术+脊髓康组、SCI+生理盐水组、SCI+脊髓康组;采用改良Allen’s法建立小鼠SCI模型;用后肢运动功能(BMS)评分及斜板试验评估小鼠后肢运动功能,HE染色观察脊髓组织形态;采集粪便进行16S rDNA测序分析。结果:BMS评分和斜板试验显示,脊髓康可促进小鼠运动功能恢复;HE染色显示脊髓康可改善受损脊髓组织形态。16S rDNA测序分析显示,SCI小鼠Verrucomicrobia、Elusimicrobia、Akkermansia、Barnesiella等占比显著下降(P<0.05),Alistipes等占比显著增加(P<0.05),脊髓康可逆转以上大部分菌群的占比趋势。结论:脊髓康可调节SCI小鼠肠道菌群结构,促进SCI修复,改善小鼠运动功能。

关键词：脊髓损伤脊髓康肠道菌群 16S rDNA测序

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短链脂肪酸对小胶质细胞活化及组蛋白乙酰化水平的影响

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中国免疫学杂志 2022年第6期38卷 641-648页

作者：杨光露郭杨马勇(指导) 潘娅岚刘孟敏吴承杰涂鹏程南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023

目的:研究短链脂肪酸(SCFAs)对小胶质细胞活化及组蛋白乙酰化水平的作用。方法:将对数生长期BV2永生化小胶质细胞分为对照组(空白对照)、不同浓度曲古霉素(TSA)组(阳性对照)、不同浓度SCFAs组;采用斑点印迹法(Dot blot)筛选各组组蛋白... 详细信息

目的:研究短链脂肪酸(SCFAs)对小胶质细胞活化及组蛋白乙酰化水平的作用。方法:将对数生长期BV2永生化小胶质细胞分为对照组(空白对照)、不同浓度曲古霉素(TSA)组(阳性对照)、不同浓度SCFAs组;采用斑点印迹法(Dot blot)筛选各组组蛋白乙酰化常见位点,寻找与TREM2关联最大的组蛋白乙酰化位点、组别,Western blot验证上述浓度组别;根据筛选结果,采用CCK8检测BV2细胞活性;免疫荧光染色检测BV2细胞Iba1表达;ELISA检测BV2细胞IL-4、IL-13、IL-10、TNF-α、iNOS表达;qRT-PCR检测BV2细胞目的基因TREM2、TNF-α、iNOS、Mincle、IL-10、Arg1 mRNA表达。结果:Dot blot显示H3、H4乙酰化位点中H3K27和H4K8与TREM2关联性较好,根据距离TSA各浓度最近的组别筛选SCFAs,得到10 mmol/L丙酸、1 mmol/L戊酸、10 mmol/L戊酸、1 mmol/L异戊酸、10 mmol/L异戊酸、1 mmol/L SCFAs、10 mmol/L SCFAs、100 mmol/L SCFAs组;Western blot显示H3K27、H4K8与TREM2聚类结果较好,验证了筛选结果,并在干预1 h后,高浓度SCFAs与高浓度TSA作用类似,干预24 h后,低浓度SCFAs与低浓度TSA作用类似;CCK8显示药物干预24 h后,高浓度SCFAs与TSA组相对增殖率均低于对照组(P<0.05);免疫荧光染色显示,各浓度SCFAs组对Iba1的调节作用与TSA基本一致,均可抑制BV2细胞活化,且随着时间延长作用增强(P<0.05),且高浓度SCFAs比低浓度SCFAs抑制作用更强;ELISA显示除1 mmol/L SCFAs外其余各组均可加快IL-4、IL-13释放(P<0.05),高浓度SCFAs可减缓IL-10、TNF-α、iNOS释放(P<0.05);qRT-PCR显示TNF-α、iNOS mRNA表达在各组药物干预1h后有一定下降(P>0.05),但24h后其mRNA表达多数从下降转为上升(P<0.05),TREM2、IL-10、Arg1、Mincle表达在干预1 h后略有上升(P>0.05),24 h后大范围明显下降(P<0.05),其中Arg1表达尤为显著,表现为高浓度SCFAs或TSA组表达明显下降。结论:SCFAs可促进组蛋白乙酰化,且高浓度SCFAs可抑制小胶质细胞增殖并促进其活化,干预早期(24 h内)可促进小胶质细胞M2a型活化,干预晚期(24 h后)可促进小胶质细胞M1型活化。

关键词：短链脂肪酸小胶质细胞组蛋白乙酰化活化

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马勇辨治少阳失和型骨关节炎经验撷英

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辽宁中医杂志 2017年第5期44卷 926-928页

作者：司誉豪马勇郭杨徐力立南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029 南京中医药大学基础医学院江苏南京210023

骨关节炎为中医骨伤科常见病,历代医家多从内外因两方面着手治疗,马勇教授发现骨关节炎中医辨证中亦有少阳失和一型,并主张整体上从"少阳"论治骨关节炎,获得了显著疗效。

关键词：马勇骨关节炎少阳失和经验

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马勇从肝论治筋膜炎经验

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辽宁中医杂志 2017年第8期44卷 1606-1608页

介绍马勇教授治疗筋膜炎的经验,认为筋膜炎发病当责之于肝,治当祛风散寒、疏肝蠲痹。临床中取得了显著疗效。文章从理论依据、临证用药以及验案举隅出发总结老师学术思想,希望为筋膜炎的中医内治理论的进一步拓展抛砖引玉。

关键词：从肝论治筋膜炎名医经验马勇

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“少阳”在中医骨伤科中的运用浅析

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时珍国医国药 2017年第7期28卷 1702-1704页

作者：徐力立司誉豪马勇南京中医药大学基础医学院江苏南京210023 南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院江苏南京210029

《黄帝内经》曾最早提出"少阳"与骨之关系密切,该文简析对"少阳"的理论认识和"少阳证"的历史源流。"少阳枢机"是伤寒论六经中的重要内容,足少阳胆经、少阳胆腑和手少阳三焦共同构成"少阳... 详细信息

《黄帝内经》曾最早提出"少阳"与骨之关系密切,该文简析对"少阳"的理论认识和"少阳证"的历史源流。"少阳枢机"是伤寒论六经中的重要内容,足少阳胆经、少阳胆腑和手少阳三焦共同构成"少阳枢机"影响人体的气血运行。"少阳"在中医骨伤科中运用十分广泛,多种常见骨性疼痛及现代医学检验检查结果均可作为少阳兼证的诊断依据和运用和解少阳法的指征。治疗少阳胆腑不利引起的骨质疏松症和足少阳胆经所过之处骨折时灵活运用和解少阳法可取得较好的临床疗效。

关键词：少阳枢机中医骨伤科临床运用

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模拟微重力培养环境下载威灵仙丝素蛋白微球对软骨细胞表型分化的影响

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中华中医药杂志 2021年第4期36卷 2038-2043页

作者：涂鹏程郭杨马勇曾亮潘娅岚吴承杰杨光露袁永丰孙杰王礼宁南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学中医学院中西医结合学院南京210023 南京中医药大学附属医院影像科南京210029 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210029

目的:研究模拟微重力培养环境下载威灵仙丝素蛋白微球三维培养对软骨细胞表型分化的影响及机制。方法:高压静电法结合冷冻技术制备载威灵仙总皂苷的丝素蛋白多孔微球,扫描电镜观察支架的形貌及孔隙,香草醛-高氯酸显色方法检测威灵仙总... 详细信息

目的:研究模拟微重力培养环境下载威灵仙丝素蛋白微球三维培养对软骨细胞表型分化的影响及机制。方法:高压静电法结合冷冻技术制备载威灵仙总皂苷的丝素蛋白多孔微球,扫描电镜观察支架的形貌及孔隙,香草醛-高氯酸显色方法检测威灵仙总皂苷的释放率。利用液动力聚焦细胞培养系统体外模拟微重力培养环境,将提取的兔膝关节软骨细胞分为3组:空白组,空白微球组、载威灵仙微球组,培养7d后收集细胞;观察各组软骨细胞的形态及与丝素蛋白微球的黏附情况,CCK-8检测各组细胞增殖活性,RT-qPCR检测软骨细胞Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、TGF-β、SMAD2的mRNA表达,Western blotting检测Ⅱ型胶原、蛋白聚糖的蛋白表达。结果:构建的丝素蛋白微球具有较好的孔隙,载威灵仙总皂苷的丝素蛋白微球具有良好的缓释效果;模拟微重力条件下软骨细胞能够自发的黏附于丝素蛋白微球载体;且与空白组比较,模拟微重力培养条件下载威灵仙总皂苷微球软骨细胞增殖率显著增加(P<0.01),蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、TGF-β、SMAD2表达均显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论:载威灵仙总皂苷丝素蛋白微球载体具有良好缓释效果及细胞相容性,在模拟微重力培养环境下能够使软骨细胞黏附进行良好的黏附扩增,提高软骨细胞增殖活性,上调软骨细胞TGF-β/SMAD2活化水平,促进软骨细胞的基质分泌。

关键词：威灵仙丝素蛋白模拟微重力软骨细胞表型维持三维培养

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龟鹿二仙胶在骨质疏松症领域研究进展及其现代应用迷思

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中国骨质疏松杂志 2021年第9期27卷 1400-1404页

作者：司誉豪马勇许奇李绍烁郭杨潘娅岚王礼宁刘孟敏孙杰涂鹏程吴承杰杨光露王建伟尹恒浙江省中医院骨伤科浙江杭州310006 南京中医药大学骨伤研究所、骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院江苏南京210023 南京中医药大学无锡附院骨伤科江苏无锡214071

目前尚无补肾名方龟鹿二仙胶在骨质疏松症领域的系统性总结。本研究整理和分析龟鹿二仙胶相关文献,临床研究发现其能够显著提高患者骨密度,减轻全身骨痛。基础研究认为龟鹿二仙胶能够促进骨形成,抑制骨吸收,改善骨代谢指标,且作用机制... 详细信息

目前尚无补肾名方龟鹿二仙胶在骨质疏松症领域的系统性总结。本研究整理和分析龟鹿二仙胶相关文献,临床研究发现其能够显著提高患者骨密度,减轻全身骨痛。基础研究认为龟鹿二仙胶能够促进骨形成,抑制骨吸收,改善骨代谢指标,且作用机制可能与调控TGF-β、NF-κB等信号通路有关。然而现有研究存在研究数量少、临证应用方法迥异、细胞干预方式争议的问题,对进一步应用龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症造成了阻碍,亟待将来研究重点解决。

关键词：龟鹿二仙胶骨质疏松症临床应用基础实验综述

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“少阳主骨”理论体系构建进展——论肝X受体α为治疗膝骨关节炎的物质基础

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中国中西医结合杂志 2021年第1期41卷 96-100页

作者：司誉豪马勇於浩郭杨顾鸣南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 杜肯大学兰格斯生命健康学院美国宾夕法尼亚州匹兹堡15282 南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023

"少阳主骨"的理论与临床研究对进一步探索其现代物质基础提出了必然要求。笔者认为"少阳主骨"理论的核心物质基础应具备4种属性:根源性,主要来源于中医学"少阳"概念的核心脏腑;沟通性,同时存在于"少... 详细信息

"少阳主骨"的理论与临床研究对进一步探索其现代物质基础提出了必然要求。笔者认为"少阳主骨"理论的核心物质基础应具备4种属性:根源性,主要来源于中医学"少阳"概念的核心脏腑;沟通性,同时存在于"少阳"与"骨"(骨关节)中,起到联系两者的媒介作用;多元性,除了能从"少阳"调控骨关节,起到重要的生理、病理作用以外,同时还能调控其他"少阳"相关脏腑组织;效应性,能反映"少阳主骨"理论指导下的中药复方对骨关节病的治疗效果。肝X受体α(LXRα)来源于肝脏,也大量存在于骨中,同时对"少阳"相关脏腑的治疗产生影响。但是目前仍欠缺"少阳主骨"理论指导下的中药复方经LXRα抗膝骨关节炎的研究,尚无法得出结论。因此,本课题组拟按照此思路展开相关基础研究。

关键词：少阳主骨肝X受体α 膝骨关节炎物质基础中药复方

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基于网络药理学方法分析“龟板-鹿角”药对活性成分治疗骨质疏松症的分子机制

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中国组织工程研究 2020年第35期24卷 5668-5674页

作者：李绍烁顾一丹尹恒郭杨马勇王建伟无锡市中医医院南京中医药大学无锡附属医院江苏省无锡市214071 无锡市第二中医医院江苏省无锡市214121 南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室江苏省南京市210023

背景:“龟板-鹿角”药对是治疗骨质疏松症的经典中药配伍方式,临床被广泛应用,但其药理学分子作用机制目前尚不明确。目的:基于网络药理学方法,探讨经典补肾中药药对“龟板-鹿角”治疗骨质疏松症的分子作用机制。方法:从BATMAN-TCM、TCM... 详细信息

背景:“龟板-鹿角”药对是治疗骨质疏松症的经典中药配伍方式,临床被广泛应用,但其药理学分子作用机制目前尚不明确。目的:基于网络药理学方法,探讨经典补肾中药药对“龟板-鹿角”治疗骨质疏松症的分子作用机制。方法:从BATMAN-TCM、TCM-MESH、化学专业数据库及手工检索文献获取“龟板-鹿角”药对的活性成分及治疗作用靶点。从毒理组学比较数据库、人类基因数据库获取药物治疗骨质疏松症作用靶点,与“龟板-鹿角”作用靶点取交集确定治疗作用靶标基因。通过STRING网站构建靶标基因间蛋白互作网络关系;采用Cytoscape软件构建药对-活性成分-靶标基因网络、核心靶标基因互作网络;借助DAVID、KOBAS等在线工具对靶标基因进行基因本体论及通路富集分析,筛选具有统计学差异的过程或通路(P<0.05);通过SwissDock进行核心基因与活性成分分子对接验证。结果与结论:①检索筛选得到“龟板-鹿角”药对含天冬氨酸、苯丙氨酸等21个有效活性成分,对应183个骨质疏松症治疗靶标基因,药对、活性成分、靶标基因形成紧密联系的互作网络关系;②筛选出INS、ALB、TNF等10个核心基因,靶标基因主要富集于衰老、药物反应等66个基因本体论过程,缺氧诱导因子1、卵巢类固醇生成等27个信号通路;③靶标基因INS与丙氨酸、雄激素,ALB与丙氨酸等获得了较高的分子对接评分,亲和力较好;④结果表明,“龟板-鹿角”药对的活性成分及其治疗骨质疏松症作用靶标基因存在复杂网络关系,靶标基因富集于多个联系密切且复杂的信号通路,涉及细胞增殖分化凋亡、炎症反应、性激素调控等多层次以调节骨修复重建的动态平衡,值得继续深入研究发展。

关键词：网络药理学 “龟板-鹿角”药对骨质疏松症靶标基因分子机制

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