检索结果-内蒙古大学图书馆

中国现代医学杂志 2017年第18期27卷 1-6页

作者：王礼宁马勇郑苏阳郭杨袁翰孙杰南京中医药大学骨伤研究所(骨伤修复与重建新技术实验室) 江苏南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029

目的建立一种简便高效的体外分离大鼠骨髓单核细胞的方法,观察其体外生长特性,并诱导其分化为破骨细胞。方法无菌条件下分离出SD大鼠的胫骨和股骨,使用环氧树脂管(EP管)和移液枪头快速分离骨髓组织,再用红细胞裂解液去除红细胞。细胞培... 详细信息

目的建立一种简便高效的体外分离大鼠骨髓单核细胞的方法,观察其体外生长特性,并诱导其分化为破骨细胞。方法无菌条件下分离出SD大鼠的胫骨和股骨,使用环氧树脂管(EP管)和移液枪头快速分离骨髓组织,再用红细胞裂解液去除红细胞。细胞培养过夜后收集悬浮细胞,加入巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)继续培养扩增后得到贴壁的骨髓单核细胞。观察骨髓单核细胞生长过程中的形态学特征;通过细胞计数试剂盒法(CCK-8)测绘细胞的生长曲线;用流式细胞仪检测细胞表面CD11b的表达;在加入M-CSF和核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导分化后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和降钙素受体(CTR)免疫荧光染色鉴定其是否能分化为成熟破骨细胞。结果通过该方法获得的大鼠骨髓单核细胞培养1 d后基本呈小圆形,杂细胞较少。3 d后细胞数目稍多,两端开始出现触角,5 d后数目增多,细胞呈椭圆形,两端触角明显;细胞的增殖依赖于M-CSF;流式结果显示,通过此方法获得的单核细胞纯度较高;TRAP染色和CTR免疫荧光染色结果提示,通过该方法获得的单核细胞可以诱导为成熟破骨细胞。结论通过EP管和移液枪头装置可快速分离获取单核细胞,获得的细胞表型稳定,适合用于骨代谢疾病的进一步研究。

关键词：分离培养方法破骨细胞骨髓单核细胞分化骨代谢疾病

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基于内质网应激研究蛇床子素对成骨细胞增殖与分化的影响

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中国组织工程研究 2018年第12期22卷 1817-1822页

作者：郑苏阳马勇郭杨王礼宁潘娅岚南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室江苏省南京市210023 南京中医药大学附属医院(江苏省中医院)骨伤科江苏省南京市210029

背景:研究表明,蛇床子素可以通过促进成骨细胞分化而促进骨形成,但是蛇床子素抗骨质疏松效应的机制尚不明确。目的:观察蛇床子素对体外培养大鼠成骨细胞增殖与分化的影响,探究其抗骨质疏松效应的机制。方法:采用二次酶消化法分离大鼠成... 详细信息

背景:研究表明,蛇床子素可以通过促进成骨细胞分化而促进骨形成,但是蛇床子素抗骨质疏松效应的机制尚不明确。目的:观察蛇床子素对体外培养大鼠成骨细胞增殖与分化的影响,探究其抗骨质疏松效应的机制。方法:采用二次酶消化法分离大鼠成骨细胞,并使用碱性磷酸酶染色以及矿化结节染色进行鉴定。实验分5组,分别为溶剂对照组、β-雌二醇组以及蛇床子素低、中、高剂量组(1×10^(-6),1×10^(-5),1×10^(-4) mol/L)。用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶活力以及矿化结节染色评价细胞分化情况,蛋白免疫印迹法检测GRP78、PDI、CHOP蛋白表达。结果与结论:(1)1×10^(-4),1×10^(-5) mol/L蛇床子素可抑制成骨细胞增殖;(2)10^(-4) mol/L蛇床子素可增加成骨细胞碱性磷酸酶活力、增强成骨细胞矿化能力;(3)10^(-4)mol/L蛇床子素可降低GRP78蛋白水平,增加PDI及CHOP蛋白表达;(4)结果表明,蛇床子素可促进成骨细胞分化,可能通过内质网应激抑制成骨细胞增殖。

关键词：蛇床子素成骨细胞内质网应激 GRP78 PDI CHOP 组织构建蛇床属成骨细胞内质网组织工程

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超声药物促透作用机制及应用的研究进展

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实用医学杂志 2016年第13期32卷 2238-2240页

作者：王礼宁郭杨郑苏阳周龙云马勇南京中医药大学骨伤研究所、骨伤修复与重建新技术实验室南京市210023 南京中医药大学附属医院骨伤科南京市210029

超声药物促透（***，UTDD），又称超声促透、超声促渗，是利用超声促进药物经皮肤或黏膜吸收以达到治疗效果的给药方法。其不仅能避免口服给药中肝脏的“首过效应”．与注射给药相比还具有非侵入性等优点。该方法作为经皮给药系统中的... 详细信息

超声药物促透（***，UTDD），又称超声促透、超声促渗，是利用超声促进药物经皮肤或黏膜吸收以达到治疗效果的给药方法。其不仅能避免口服给药中肝脏的“首过效应”．与注射给药相比还具有非侵入性等优点。该方法作为经皮给药系统中的一种物理促透方法，因其具备良好的促透效果成为近年来的研究热点。本文就超声促透作用机制及应用进行综合论述。

关键词：超声促透促透作用药物应用经皮给药系统给药方法治疗效果非侵入性

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中医药治疗腰椎间盘突出症微创术后残留症状的研究进展

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中华中医药杂志 2021年第5期36卷 2830-2834页

作者：戎毅马勇郭杨司誉豪於浩王凌南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤研究所南京210023 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023

腰椎间盘突出症微创术后患者常残留腰腿疼痛麻木等症状,日常生活受到影响,中医药治疗此症状具有独特疗效。文章通过阐述其病因病机、总结中医药治疗方式(包括口服中药煎剂、针灸、针刀、中药熏洗外敷、推拿等),希望引起广大医学工作者... 详细信息

腰椎间盘突出症微创术后患者常残留腰腿疼痛麻木等症状,日常生活受到影响,中医药治疗此症状具有独特疗效。文章通过阐述其病因病机、总结中医药治疗方式(包括口服中药煎剂、针灸、针刀、中药熏洗外敷、推拿等),希望引起广大医学工作者的关注,进行大样本、多参数、高质量的随机对照临床试验以及数据挖掘,建立以经方为基础的相对统一的辨证论治体系,为临床上诊治腰椎间盘突出症微创术后残留症状提供参考。

关键词：腰椎间盘突出症微创术后残留症状中医药经方

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强骨胶囊与维生素D对骨质疏松性骨折患者治疗有效性及安全性的系统评价

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中国骨质疏松杂志 2017年第9期23卷 1218-1223,1249页

作者：马勇司誉豪徐力立郭杨曹鲁梅南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029 南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学基础医学院江苏南京210023

目的系统评价强骨胶囊与维生素D治疗骨质疏松性骨折的有效性及安全性。以期为临床骨质疏松性骨折患者的药物选择提供参考。方法计算机检索Pub Med、Web of science、Cochrane图书馆、中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(... 详细信息

目的系统评价强骨胶囊与维生素D治疗骨质疏松性骨折的有效性及安全性。以期为临床骨质疏松性骨折患者的药物选择提供参考。方法计算机检索Pub Med、Web of science、Cochrane图书馆、中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、中文科技期刊全文数据库(VIP)、万方数据库。搜集强骨胶囊与维生素D用于治疗骨质疏松性骨折的随机对照试验(RCT),检索年限均为建库以来至2017年1月27日。由两位研究者独立筛选文献、提取资料,并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Rev Man 5.2软件进行Meta分析。结果最终纳入3个RCT,包括510例患者。Meta分析结果显示:强骨胶囊组患者的骨折愈合时间显著低于维生素D组,两组比较差异有统计学意义[MD=-3.68,95%CI(-4.60,-2.76),P<0.00001]。强骨胶囊组的治疗后股骨颈骨密度(bone mineral density,BMD)高于维生素D组,且差异均具有统计学意义[MD=0.03,95%CI(0.01,0.04),P=0.0002]。强骨胶囊组患者轻度不良反应发生数显著高于维生素D组,两组比较差异有统计学意义[OR=23.89,95%CI(4.56,125.11),P=0.0002]。结论强骨胶囊可以减少骨质疏松性骨折患者的骨折愈合时间,增强骨密度,但相较于维生素D,仍需注意胃肠道的不良反应。

关键词：强骨胶囊维生素D 骨质疏松性骨折系统评价

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“温肾通络止痛方”治疗原发性骨质疏松症的疗效观察及处方优化

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辽宁中医杂志 2016年第10期43卷 2098-2100页

作者：郑苏阳马勇郭杨董维范竞黄桂成南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室江苏南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029

目的:评价"温肾通络止痛方"3种方剂组成治疗骨质疏松症的临床疗效及安全性,筛选出最优处方。方法:采用多中心、随机、对照、盲态评价的原则,选择符合纳入标准的原发性骨质疏松症患者75例,随机分为A、B、C3组各25例,分别予以&q... 详细信息

目的:评价"温肾通络止痛方"3种方剂组成治疗骨质疏松症的临床疗效及安全性,筛选出最优处方。方法:采用多中心、随机、对照、盲态评价的原则,选择符合纳入标准的原发性骨质疏松症患者75例,随机分为A、B、C3组各25例,分别予以"温肾通络止痛方"试验A方、试验B方、试验C方治疗。3组治疗时间均为2个月,对3组治疗前、治疗后2个月的临床症状、骨密度及骨代谢生化指标进行比较,以观察临床疗效;疗程结束后,比较治疗前后的血、尿、粪常规、肝、肾功能、心电图等安全性指标的变化,以观察其安全性。结果:(1)3组"温肾通络止痛方"在改善骨质疏松患者临床症状方面均有显著效果,其中试验B组最佳。(2)3组"温肾通络止痛方"在疗程内无法明显改善骨质疏松患者骨密度。(3)3组"温肾通络止痛方"血清骨钙素水平未明显变化,试验C组血清降钙素水平未明显变化,试验A组与试验B组血清降钙素水平较治疗前升高,3组甲状旁腺激素水平均较治疗前降低。(4)安全性指标方面,一般情况良好,未观察到明显全身毒性等反应,血、尿、粪及心电图检查均无明显异常改变。结论:"温肾通络止痛方"A、B、C三方治疗骨质疏松症有明显疗效,能改善临床症状,无明显不良反应,能有效防治骨质疏松症。方剂优化筛选结果提示"温肾通络止痛方"B方剂疗效最佳。

关键词：骨质疏松症温肾通络止痛方处方优化

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模拟微重力环境下威灵仙维持兔膝关节软骨细胞表型的效应与机制

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中国现代应用药学 2022年第1期39卷 12-19页

作者：涂鹏程马勇郭杨潘娅岚吴承杰杨光露孙杰王礼宁南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学第一临床医学院南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210023

目的研究模拟微重力培养环境下威灵仙提取物对兔软骨细胞表型维持的作用及机制。方法利用液动力聚焦细胞培养系统体外模拟微重力培养环境,同时使用威灵仙提取物进行干预,将兔膝关节软骨细胞分为空白组(平面培养)、威灵仙组(平面培养+威... 详细信息

目的研究模拟微重力培养环境下威灵仙提取物对兔软骨细胞表型维持的作用及机制。方法利用液动力聚焦细胞培养系统体外模拟微重力培养环境,同时使用威灵仙提取物进行干预,将兔膝关节软骨细胞分为空白组(平面培养)、威灵仙组(平面培养+威灵仙提取物)、微重力组(微重力培养)、微重力-威灵仙组(微重力培养+威灵仙提取物)4组,培养7 d;观察各组软骨细胞形态学变化,CCK-8检测各组细胞增殖活性,流式细胞技术检测各组软骨细胞凋亡率;RT-qPCR检测成软骨相关mRNAⅡ型胶原蛋白、蛋白多糖、TGF-β、SOX9,以及与软骨去分化相关mRNA MMP13、Ⅰ型胶原蛋白;Western blotting检测Ⅱ型胶原蛋白、蛋白聚糖、TGF-β及MMP13蛋白表达;同时对细胞内葡萄糖、ATP、乳酸含量进行检测,评估各组软骨细胞能量代谢状态。结果形态学观察显示微重力组、微重力-威灵仙组软骨细胞保持良好形态,空白组、威灵仙组梭形细胞增多。与空白组相比,模拟微重力培养条件与威灵仙提取物均能提高软骨细胞48,72 h的增殖活性,降低细胞凋亡率,上调蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白、TGF-β的蛋白及mRNA表达,降低MMP13的蛋白及mRNA表达,上调SOX9 mRNA表达,降低Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达,上调软骨细胞内葡萄糖、ATP、乳酸含量,两者结合效果最为显著(P<0.01)。结论模拟微重力培养环境与威灵仙提取物均能够促进软骨细胞能量代谢,保持增殖活性以及软骨细胞表型维持,而二者联合应用可以发挥协同作用。

关键词：威灵仙模拟微重力软骨细胞表型维持能量代谢

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负载威灵仙总皂苷丝素蛋白微载体复合软骨细胞促进兔膝关节软骨缺损修复的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2022年第3期36卷 343-351页

作者：涂鹏程马勇潘娅岚汪志芳孙杰陈凯杨光露王礼宁刘孟敏郭杨南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210023 南京中医药大学张家港附属医院中医骨伤科江苏苏州215699

目的制备负载威灵仙总皂苷(clematis total saponins,CTS)丝素蛋白微载体,探讨其复合软骨细胞后促进兔膝关节软骨缺损修复的效果。方法取5%丝素蛋白溶液与10 mg/mL CTS溶液、甘油混匀后,利用高压静电场结合冷冻干燥方法制备负载CTS丝素... 详细信息

目的制备负载威灵仙总皂苷(clematis total saponins,CTS)丝素蛋白微载体,探讨其复合软骨细胞后促进兔膝关节软骨缺损修复的效果。方法取5%丝素蛋白溶液与10 mg/mL CTS溶液、甘油混匀后,利用高压静电场结合冷冻干燥方法制备负载CTS丝素蛋白微载体,扫描电镜对样本表征并检测CTS累积释放量;同时制备丝素蛋白微载体。取6只4周龄新西兰大白兔膝关节软骨,分离培养软骨细胞并传代。取第3代细胞分别与两种微载体在微重力条件下共培养7d,期间倒置相差显微镜及扫描电镜观察软骨细胞在微载体上黏附情况,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖活性,并与正常培养细胞比较。取30只3月龄新西兰大白兔制备双侧膝关节软骨缺损模型后随机分为3组(n=20),A组膝关节软骨缺损不作任何处理,B、C组分别采用丝素蛋白微载体-软骨细胞复合物、负载CTS丝素蛋白微载体-软骨细胞复合物填充关节软骨缺损。术后12周取材,ELISA检测关节液基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、MMP-13、MMP组织抑制因子1(tissue inhibitor of MMP 1,TIMP-1)水平;大体观察及组织学观察(HE、甲苯胺蓝染色)评估软骨缺损修复情况;Western blot检测Ⅱ型胶原及蛋白聚糖表达;组织学及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)免疫组织化学染色观察关节滑膜炎症程度。结果负载CTS丝素蛋白微载体呈类球形,直径主要在300~500μm之间,表面呈多孔结构,孔隙率达35.63%±3.51%;药物缓释检测示微载体中CTS可长期缓慢释放。微重力条件下随培养时间延长,两种微载体表面黏附的软骨细胞逐渐增多,培养24 h时软骨细胞增殖活性均较正常培养细胞提高(P<0.05),两种微载体间差异无统计学意义(P>0.05)。动物体内实验观察,与A、B组相比,C组关节液中MMP-9、MMP-13含量均降低(P<0.05),TIMP-1含量上调(P<0.05)。与A组相比,B、C组软骨缺损均有组织填充,且C组修复表面更完整,与周围软骨结合较好;组织学观察及Western blot检测显示B、C组国际软骨修复评分准则(ICRS)评分以及Ⅱ型胶原、蛋白聚糖相对表达量均优于A组,C组优于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。关节滑膜组织学观察显示,与A、B组相比,C组滑膜炎症细胞浸润及小血管增生减少,免疫组织化学染色示C组iNOS表达水平降低(P<0.05)。结论负载CTS丝素蛋白微载体具有良好的CTS缓释效果及生物相容性,在微重力条件下能促进共培养的软骨细胞增殖,植入体内后能促进兔膝关节软骨缺损修复。

关键词：软骨组织工程软骨修复丝素蛋白威灵仙总皂苷微重力细胞培养兔

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施杞另辟蹊径论治膝骨关节炎——“少阳主骨”辨析

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中国中医基础医学杂志 2017年第11期23卷 1536-1538页

作者：马勇司誉豪郭杨徐桂华南京中医药大学附属医院南京210029 南京中医药大学骨伤研究所骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学护理学院南京210023

施杞在提出从肝肾论治膝骨关节炎学术思想的基础上,对"少阳主骨"理论进行辨析,发现"骨繇"可能是世界上对于膝骨关节炎最早的论述,同时将石氏伤科精髓与"和"法相结合,并从症状、病机两方面认识膝骨关节炎... 详细信息

施杞在提出从肝肾论治膝骨关节炎学术思想的基础上,对"少阳主骨"理论进行辨析,发现"骨繇"可能是世界上对于膝骨关节炎最早的论述,同时将石氏伤科精髓与"和"法相结合,并从症状、病机两方面认识膝骨关节炎以及运用圣愈汤分期论治膝骨关节炎,进一步提出运用"少阳主骨"理论治疗膝骨关节炎的新观点,制定了和解少阳、调和气血、以衡为期的治疗大法。故从"少阳主骨"理论辨析出发总结施杞学术思想,希望为骨伤内治理论的进一步拓展抛砖引玉。

关键词：少阳主骨膝骨关节炎骨繇圣愈汤施杞

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脊髓康通过IRE1-XBP1通路抑制内质网应激诱导的PC12细胞凋亡

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中国中西医结合杂志 2020年第8期40卷 972-978页

作者：涂鹏程郭杨马勇王磊黄桂成吴承杰潘娅岚南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023 南京中医药大学中西医结合护理研究所南京210029

目的基于IRE1-XBP1通路探究脊髓康(JSK)抑制内质网应激(ERS)诱导的PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞为神经元样细胞并通过流式细胞技术鉴定;诱导后细胞分为空白组(无干预措施)、模型组[2μmol/L毒胡萝... 详细信息

目的基于IRE1-XBP1通路探究脊髓康(JSK)抑制内质网应激(ERS)诱导的PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞为神经元样细胞并通过流式细胞技术鉴定;诱导后细胞分为空白组(无干预措施)、模型组[2μmol/L毒胡萝卜素(TG)]、脊髓康组(2μmol/L TG及0.0521 g/mL JSK水提物冻干粉,合生药0.625 g/mL);CCK8法检测各组细胞24、48、72 h增殖活性,流式细胞技术检测各组细胞凋亡状态,Western Blot与q-PCR检测1型内质网转膜蛋白激酶(IRE1)、X盒结合蛋白1(XBP1)、葡萄糖调节蛋白78(Grp78)及C/EBP同源蛋白(CHOP)的蛋白及mRNA表达情况,透射电镜扫描各组细胞观察细胞及内质网形态学特征。结果与空白组比较,模型组NGF诱导的神经元样PC12细胞增殖活性显著降低(P<0.05),晚期凋亡明显增高(P<0.01),电镜扫描显示其细胞粗面内质网结构肿胀,囊泡化,呈典型的细胞凋亡形态;Grp78、CHOP蛋白表达显著升高(P<0.05),XBP1及IRE1蛋白表达也有微微上调,但差异无统计学意义(P>0.05);Grp78、CHOP、XBP1及IRE1 mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,JSK组24、48、72 h PC12细胞增殖活性升高(P<0.05),晚期凋亡及早期凋亡均明显降低(P<0.05,P<0.01);Grp78、CHOP的蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05),XBP1及IRE1蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05)。透射电镜观察JSK组内质网结构仍存在,存在完整的外膜,内质网膜破损较轻,可见部分凋亡形态学改变。结论JSK可能通过活化IRE1-XBP1途径改善TG诱导的内质网应激状态,从而抑制ERS导致的神经元样PC12细胞凋亡,这可能是其有效改善脊髓损伤后神经元功能修复的机制。

关键词：脊髓损伤脊髓康内质网应激 IRE1-XBP1信号通路神经元凋亡

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