检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2005年第3期27卷 349-350页

作者：周秦崔英霞王咏梅黄宇烽南京军区南京总医院全军医学检验中心生殖遗传室南京210002

报告1例孕38w经剖腹产出生的畸形男儿。患儿双侧唇裂,严重腭裂,胸骨畸形,骶部脊柱裂,双侧睾丸未降,足内翻。出生后10min由于呼吸衰竭而夭折。患儿经外周血淋巴细胞染色体核型分析为47,XY,+13,后经荧光原位杂交技术加以证实。对患儿及其... 详细信息

报告1例孕38w经剖腹产出生的畸形男儿。患儿双侧唇裂,严重腭裂,胸骨畸形,骶部脊柱裂,双侧睾丸未降,足内翻。出生后10min由于呼吸衰竭而夭折。患儿经外周血淋巴细胞染色体核型分析为47,XY,+13,后经荧光原位杂交技术加以证实。对患儿及其父母进行短重复序列D13S317位点检测,证实患儿额外的13号染色体源自父亲第一次减数分裂不分离。

关键词： Patau综合征额外13号染色体 D13S317位点

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复杂染色体重排的女性携带者与她健康的女儿

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遗传 2004年第5期26卷 612-614页

作者：崔英霞王咏梅姚兵黄宇烽南京军区南京总医院全军医学检验中心生殖遗传室南京210002

一例新生复杂染色体重排的女性携带者(complexchromosomerearrangement,CCR),易位涉及1号、5号和12号染色体。病人因2次自然流产而要求进行外周血淋巴细胞G显带核型分析。最初G显带核型疑为46,XX,t(1;5;12)(1pter→1q25::12q24→12qter;5qter→5p11::1q25→1qter;12pter→12q24::5p11→5pter).经荧光原位杂交(FISH)技术检测,证实患者的核型为46,XX,t(1;5;12)(1pter→1q23::12q22→12qter;5qter→5p11::1q25→1qter;12pter→12q22::1q23→1q25::5p11→5pter).7年后病人再次妊娠,并拒绝产前诊断。女婴足月分娩,生长发育正常。核型为46,XX。比较以前报告的女性复杂易位携带者与我们报告的病例可以认为,CCR并不总是表现为自然流产或分娩畸形儿,仍有机会生出正常的孩子。

关键词：复杂染色体易位女性携带者健康女儿妊娠

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中国人遗传性高铁血红蛋白血症二个家系所见 Cytb5R 基因 Arg^(57)→Gln 突变

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中华血液学杂志 1997年第4期18卷 200-203页

作者：黄长晖谢毅王瑶吴玉水叶韫辉朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心复旦大学遗传研究所

目的：探明遗传性高铁血红蛋白血症ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（Ｃｙｔｂ５Ｒ）缺陷的分子机制。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，克隆３个遗传性高铁血红蛋白血症家系Ｃｙｔｂ５Ｒ９２１ｂｐ的ｃＤＮＡ编码序列... 详细信息

目的：探明遗传性高铁血红蛋白血症ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶（Ｃｙｔｂ５Ｒ）缺陷的分子机制。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，克隆３个遗传性高铁血红蛋白血症家系Ｃｙｔｂ５Ｒ９２１ｂｐ的ｃＤＮＡ编码序列，并用限制性酶切ＰＣＲ产物分析３个家系的基因组ＤＮＡ。结果：２个家系存在Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变，３个家系均未发现Ｇｌｕ２２２→Ｇｌｙ突变。结论：Ａｒｇ５７→Ｇｌｎ突变是中国人遗传性高铁血红蛋白血症的致病原因之一。

关键词： cDNA序列测定遗传性高铁血红蛋白血症

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人钙调素基因表达载体的构建及在大肠杆菌DH5α中的表达

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中国免疫学杂志 2000年第2期16卷 61-63页

作者：李晓军武建国郭大文徐建平南京军区南京总医院全军医学检验中心免疫室南京210002

目的:构建人钙调素(CaM)基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达人CaM蛋白。方法:用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢcDNA),将其插入表达载体pBV220,构建重组表达质粒hCaMⅢ/pBV220,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆。结果:阳... 详细信息

目的:构建人钙调素(CaM)基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达人CaM蛋白。方法:用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢcDNA),将其插入表达载体pBV220,构建重组表达质粒hCaMⅢ/pBV220,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆。结果:阳性重组子在大肠杆菌DH5α中经温度诱导可高效表达CaM蛋白,经15%SDSPAGE分析,可观察到一分子量与理论值相符(约17kD)的诱导表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的20%。进一步分析表达产物的性质表明,CaM主要以可溶性形式表达。Westernblot结果证实,17kD的表达条带可与标准鼠抗CaMMcAb起特异反应。结论:用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人CaM,为进一步研究CaM的生物学功能及研制抗CaM单克隆抗体奠定基础。

关键词：钙调素基因表达大肠杆菌 DH5α

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舒巴坦单剂及舒巴坦与第三代头孢菌素联合对鲍曼不动杆菌的体外抗菌作用比较

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中国抗生素杂志 2006年第8期31卷 488-491页

作者：谈华邵海枫王锦娜王卫萍李珍大南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物实验室南京210002

目的比较舒巴坦(SB)单剂和舒巴坦联合第三代头孢菌素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性,探讨舒巴坦在联合制剂中的实际作用。方法从临床分离的表型为对头孢哌酮(CPZ)、头孢他啶(CAZ)和头孢噻肟(CTX)3种第三代头孢菌素中1种以上耐药或中介的5... 详细信息

目的比较舒巴坦(SB)单剂和舒巴坦联合第三代头孢菌素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性,探讨舒巴坦在联合制剂中的实际作用。方法从临床分离的表型为对头孢哌酮(CPZ)、头孢他啶(CAZ)和头孢噻肟(CTX)3种第三代头孢菌素中1种以上耐药或中介的56株鲍曼不动杆菌分为3组。A组(27株)对上述2种以上药物耐药;B组(11株)仅对CPZ耐药;C组(18株)仅对CPZ或CTX中介。采用微量肉汤稀释法检测SB单剂以及SB分别联合上述3种第三代头孢菌素敏感和耐药折点浓度的最低抑菌浓度(MICs)。采用CPZ三维酶提取和抑制试验检测β-内酰胺酶,并选择对CPZ中介(A株)和耐药(B株)进行杀菌曲线试验。结果SB对B组和C组菌的MICs≤1μg/ml;SB对A组菌的MICs范围在4～64μg/ml之间,并且与CPZ、CAZ或CTX任一药物的敏感和耐药折点浓度联合,均不能使联合后SB的MICs低于单剂SB的MICs。在三维β-内酰胺酶抑制试验中,酶活性不能被SB抑制的菌株,其SB的MICs值高于酶活性能被SB抑制的菌株。杀菌曲线显示在SB和CPZ之间无协同作用。结论SB单剂对多重耐药的鲍曼不动杆菌有抗菌活性,这些菌株对联合制剂的敏感可能主要是SB在发挥杀菌作用。

关键词：舒巴坦鲍曼不动杆菌 β-内酰胺酶抑制剂

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膜上斑点洁显示人红细胞b_5还原酶活性

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生物化学与生物物理进展 1996年第4期23卷 379-380页

作者：兰风华唐玉钗朱忠勇吴玉水南京军区福州总医院全军医学检验中心第四军医大学生化教研室

人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类，其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症．目前，主要通过分光光度法测定ｂ５还原酶活性．我们将ｂ５还原酶抗体点于硝酸纤维膜上，以此捕获并富集红细胞胞浆ｂ５还... 详细信息

人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类，其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症．目前，主要通过分光光度法测定ｂ５还原酶活性．我们将ｂ５还原酶抗体点于硝酸纤维膜上，以此捕获并富集红细胞胞浆ｂ５还原酶．有ｂ５还原酶活性的斑点用噻唑蓝染色．此法简单直观，可用于ｂ５还原酶的定性和半定量测定，为遗传性高铁血红蛋白血症的诊断提供了一种新的实验手段．

关键词：高铁血红蛋白血症 b5还原酶红细胞膜上斑点法

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肺炎克雷伯菌中质粒介导的AMPC酶及相关表型研究

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中华检验医学杂志 2006年第2期29卷 117-119页

作者：邵海枫赵晓智王卫萍王锦娜李珍大南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室 210002

目的证实临床分离的部分肺炎克雷伯菌(KP)除产超广谱Β内酰胺酶(ESBLS)外,还同时产AMPC酶,并探讨了AMPC酶编码基因存在方式。方法对临床分离的可疑同时产ESBLS和其他高活性广谱Β内酰胺酶的8株KP进行接合试验,并对供体菌和接合子同时采... 详细信息

目的证实临床分离的部分肺炎克雷伯菌(KP)除产超广谱Β内酰胺酶(ESBLS)外,还同时产AMPC酶,并探讨了AMPC酶编码基因存在方式。方法对临床分离的可疑同时产ESBLS和其他高活性广谱Β内酰胺酶的8株KP进行接合试验,并对供体菌和接合子同时采用三维试验、ESBLS试验、AMPC酶诱导试验和Β内酰胺类抗生素最低抑菌浓度(MIC)试验测定,并进行AMPC基因携带状态、表达方式和酶活性分析。结果8株KP菌通过接合试验共得到10株接合子,其中有6株供体菌均只得到同时表达AMPC和ESBLS的1种接合子;另2株供体菌,各得2株接合子,1株同时表达AMPC和ESBLS,1株仅表达ESBLS;8株供体菌均未得到单独表达AMPC的接合子。表达AMPC接合子的耐药表型与受体菌非常接近,酶的活性也必须用克拉维酸(CA)和邻氯西林(CLO)两种酶抑制剂才能完全抑制,其中有5株可被头孢西丁(FOX)诱导使某些指示药出现截平现象。结论在KP中,已出现质粒携带的AMPC基因,有可能与编码ESBLS的基因存在于同一质粒上,并具有诱导型和非诱导型两种表达形式。

关键词：克雷伯氏菌,肺炎质粒 β内酰胺酶类基因

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CyP A三类Ig自身抗体测定方法的建立与临床应用

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临床检验杂志 1998年第5期16卷 262-265页

作者：虞伟李芳秋赵权武建国南京军区南京总医院全军医学检验中心临床免疫实验室

利用基因重组技术，大肠杆菌表达人环胞菌素Ａ结合蛋白（ｒｈＣｙＰＡ），建立测定抗ＣｙＰＡ自身抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），探讨抗ＣｙＰＡ抗体与临床疾病的关系。重组菌可溶性蛋白经饱和硫酸铵盐析和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈ... 详细信息

利用基因重组技术，大肠杆菌表达人环胞菌素Ａ结合蛋白（ｒｈＣｙＰＡ），建立测定抗ＣｙＰＡ自身抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），探讨抗ＣｙＰＡ抗体与临床疾病的关系。重组菌可溶性蛋白经饱和硫酸铵盐析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ柱层析，获取ｒｈＣｙＰＡ蛋白，用该纯化物作为抗原，方阵滴定，建立ＥＬＩＳＡ技术，对各类自身免疫病进行评估测定。ｒｈＣｙＰＡ经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，分子量为１８ｋＤ。在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中，发现有４０．３％的病人检出有抗ＣｙＰＡ自身抗体（５８／１４４），三类Ｉｇ中，又以ＩｇＧ类抗体检出率最为突出，为２８％（４０／１４４）；而其他自身免疫病病人抗ＣｙＰＡ抗体总体检出率为０％～１８．１％。

关键词：环胞素A 结合蛋白自身免疫病自身抗体 CyP-A

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多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌中质粒介导的AmpC酶基因

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临床检验杂志 2005年第6期23卷 414-417页

作者：邵海枫崔蕾蕾赵晓智王锦娜王卫萍南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京210002

目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(***)中质粒型ampC基因。方法收集临床分离的表型可疑为产AmpC酶的24株***,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mu l-PCR),用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,... 详细信息

目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(***)中质粒型ampC基因。方法收集临床分离的表型可疑为产AmpC酶的24株***,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mu l-PCR),用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,结合mu l-PCR、三维酶抑制试验和表型试验进行基因和表型分析。同时选择4株菌(3株ampC基因阳性,1株阴性)进行转质粒试验,以证实质粒型基因的存在。结果在mu l-PCR试验中,有22株扩增出C-4族中长度405 bp的片段,1株扩增出C-1族中长度462 bp的片段;1株未扩增出目的条带。三维酶抑制试验中,24株菌中有19株菌未检出AmpC酶,但药物敏感试验中有诱导耐药现象,符合C-4(DHA)族基因诱导表达的特性。转质粒试验中,3株ampC基因阳性的供体菌均将其ampC基因转入受体菌。结论采用多重PCR技术可以简化质粒型ampC基因的检测方法。在我院临床分离的***中,出现质粒编码的AmpC酶,以C-4族基因为主要流行型。

关键词：质粒 AmpC酶 ESBLs 肺炎克雷伯菌

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用于三维试验的最适酶抑制剂浓度探讨

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临床检验杂志 2003年第6期21卷 352-353页

作者：邵海枫刘金波张小卫王卫萍李珍大南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京210002

目的　筛选用于三维试验和鉴别ESBLs及AmpC两类 β 内酰胺酶的适宜酶抑制剂浓度。方法　选择能抑制ESBLs的克拉维酸 (CA)和能抑制AmpC酶的邻氯西林 (CLO) ,稀释成不同浓度 ,对E .coliDH5αTEM 1、E .coliDH5αSHV 1、肺炎克雷伯菌(K .p... 详细信息

目的　筛选用于三维试验和鉴别ESBLs及AmpC两类 β 内酰胺酶的适宜酶抑制剂浓度。方法　选择能抑制ESBLs的克拉维酸 (CA)和能抑制AmpC酶的邻氯西林 (CLO) ,稀释成不同浓度 ,对E .coliDH5αTEM 1、E .coliDH5αSHV 1、肺炎克雷伯菌(K .pne)ATCC70 0 6 0 3、阴沟肠杆菌 (E .clo) 0 2 9、E .clo 1 1 94E、E .clo 0 2 9M和E .coliDH5αACT 1等 7株已知菌进行单一抑制剂最佳浓度的选择 ,再据此进行两种抑制剂的联合抑酶作用检测。用耐药性较强的临床分离的 1 38株阴沟肠杆菌考察方法的可行性。结果　CA和CLO的最适浓度分别为 2 0mg/L和 2mol/L ,产AmpC酶的E .clo 0 2 9M和E .coliDH5αACT 1 ,以及产ESBLs的K .pneATCC70 0 6 0 3菌的酶活性均可被各自相应的酶抑制剂抑制 ,也可被两种酶抑制剂联合抑制 ,而不显现抑制剂自身对试验指示菌的抑制作用。临床分离株中同时产ESBLs和AmpC酶的菌株 ,不被单一的酶抑制剂抑制或只能部分抑制 ,需用CA和CLO联合才能抑制酶的全部活性。结论　所选择的两种抑制剂的浓度能对产单一ESBLs或AmpC酶的菌株。

关键词：三维试验 β-内酰胺酶抑制剂 β-内酰胺酶耐药性阴沟肠杆菌鉴别

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