检索结果-内蒙古大学图书馆

临床检验杂志 2006年第2期24卷 122-124页

作者：王锦娜邵海枫姚兵王卫萍艾冬琴史利宁张小卫南京师范大学生命科学学院南京210097 南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京210002

目的从临床分离的大肠埃希菌(***)中检测AmpC酶及质粒介导的ampC基因。方法选择从临床分离的可疑产ESBLs和AmpC 2种酶的40株大肠埃希菌,用NCCLS推荐的微量肉汤稀释法检测耐药表型,三维酶试验检测AmpC酶和ES-BLs,PCR扩增质粒型ampC基因和... 详细信息

目的从临床分离的大肠埃希菌(***)中检测AmpC酶及质粒介导的ampC基因。方法选择从临床分离的可疑产ESBLs和AmpC 2种酶的40株大肠埃希菌,用NCCLS推荐的微量肉汤稀释法检测耐药表型,三维酶试验检测AmpC酶和ES-BLs,PCR扩增质粒型ampC基因和ESBLs基因,肉汤交配法检测质粒型ampC基因的接合传递性。结果在三维试验中,40株菌中有39株产β-内酰胺酶,其中21株产ESBLs和AmpC 2种酶,15株单产ESBLs,3株单产AmpC酶。在PCR扩增试验中,8株扩增出质粒介导的ampC基因,7株为C IT型,1株为DHA型;34株扩增出b laTEM、b laCTX-M、b laOXA 3型ESBLs基因中的至少1个型,未扩增出b laSHV。8株携带质粒型ampC基因的菌株,共筛选出9株接合子。结论AmpC酶已在我院的大肠埃希菌中出现,由质粒编码的AmpC酶可在细菌间传递。

关键词： AmpC酶 ESBLs 大肠埃希菌质粒

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丙型肝炎病毒核心抗原C33的测定

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中华实验和临床病毒学杂志 1999年第1期13卷 68-70页

作者：李保仝杨毓华马勇邵海枫熊华赵权张小卫武建国南京军区总医院全军医学检验中心微生物学实验室解放军第123医院传染科

目的探索丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｃ３３抗原在正常人群及各类临床病人血清及肝组织中分布状况。方法用人工合成的ＨＣＶ核心抗原Ｃ３３肽（含３３个氨基酸）与小鼠血清白蛋白，经异型双功能交联剂ＳＰＤＰ连接后免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，... 详细信息

目的探索丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｃ３３抗原在正常人群及各类临床病人血清及肝组织中分布状况。方法用人工合成的ＨＣＶ核心抗原Ｃ３３肽（含３３个氨基酸）与小鼠血清白蛋白，经异型双功能交联剂ＳＰＤＰ连接后免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，制成２株Ｃ３３肽单克隆抗体（ＭｃＡｂ），分别用作包被抗体和酶标抗体，建立检测血清中Ｃ３３肽抗原的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），共检测了１２３６例各类病人。并用免疫荧光及固相免疫酶法检测肝活检组织中的ＨＣＶＣ３３肽抗原。结果急性丙型肝炎（ＨＣ）患者，Ｃ３３肽的阳性检出率为１４．０％（６／４３）；仅抗－ＨＣＶＩｇＧ阳性患者Ｃ３３肽的阳性检出率为８．８％（３５／３９６）；慢性丙型肝炎患者为６．５％（４／６２）；白血病患者为４．３％（１／２３）；血透病人为３．３％（１９／５７６）；普通住院病人为１．５％（２／１３６）；正常供血员为１．４％（６／４３８）。肝活检免疫荧光、固相免疫酶检测显示ＨＣＶＣ３３肽在细胞核、细胞质、细胞膜上均有表达，在胞质中或集中于全胞质一侧或弥散分布于胞质中。结论ＨＣＶＣ３３抗原测定，可以作为ＨＣＶ感染的标志物之一。

关键词：丙型肝炎病毒核心抗原 ELISA

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人亲环素A基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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中华微生物学和免疫学杂志 1998年第3期18卷 210-211页

作者：李芳秋赵权武建国单祥年南京军区南京总医院全军医学检验中心分子生物学实验室南京师范大学生物系

人亲环素Ａ基因的克隆及在大肠杆菌中的表达李芳秋赵权武建国单祥年环孢素Ａ（ＣｓＡ）是防治器官移植免疫排斥及自身免疫病的重要药物，该药发挥作用必须由体内受体蛋白，即亲环素（ＣｙＰ）来介导。ＣｙＰ是一个功能相关的蛋白家族，... 详细信息

人亲环素Ａ基因的克隆及在大肠杆菌中的表达李芳秋赵权武建国单祥年环孢素Ａ（ＣｓＡ）是防治器官移植免疫排斥及自身免疫病的重要药物，该药发挥作用必须由体内受体蛋白，即亲环素（ＣｙＰ）来介导。ＣｙＰ是一个功能相关的蛋白家族，具有肽基脯氨酸顺／反异构酶（ＰＰＩ...

关键词：亲环素A 基因克隆大肠杆菌表达

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精液中钙调素mRNA的检测

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实用男科杂志 1996年第1期2卷 17-18页

作者：徐建平王咏梅商学军黄宇烽南京军区南京总医院解放军医学检验中心生殖遗传实验室

本文报告了以地高辛标记ＣａＭ基因ⅢｃＤＮＡ探针检测１５例生育男性和２０例不育男性精液中的ＣａＭｍＲＮＡ．９例出现蓝色阳性斑点的精液中均含有生精细胞（＞４个／ＨＰ），其中１例不育男性精液中见有大量白细胞（＞１０个／ＨＰ... 详细信息

本文报告了以地高辛标记ＣａＭ基因ⅢｃＤＮＡ探针检测１５例生育男性和２０例不育男性精液中的ＣａＭｍＲＮＡ．９例出现蓝色阳性斑点的精液中均含有生精细胞（＞４个／ＨＰ），其中１例不育男性精液中见有大量白细胞（＞１０个／ＨＰ）。所有未出现杂交斑点的精液中未见或偶见生精细胞与白细胞。作者认为，精子为含有极少胞质的高度特异化的细胞，要从分子水平上探讨ＣａＭ与男性不育的关系，需从研究各级生精细胞着手。

关键词：不育症男性精液调钙蛋白 mRNA 病理

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双波长法检测精浆中唾液酸含量

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实用男科杂志 1996年第1期2卷 13-16页

作者：戈一峰黄宇烽徐建平商学军南京军区南京总医院解放军医学检验中心生殖遗传实验室

由于果糖与精浆中的唾液酸（ＳＡ）有相似的吸收峰，为消除果糖对测定ＳＡ的干扰，采用双波长法测定精浆ＳＡ，结果表明，２４例正常生育男性和９８例不育男性精浆ＳＡ含量，双波长法较单波长法差异显著；正常男性与精子活动力低下、阻... 详细信息

由于果糖与精浆中的唾液酸（ＳＡ）有相似的吸收峰，为消除果糖对测定ＳＡ的干扰，采用双波长法测定精浆ＳＡ，结果表明，２４例正常生育男性和９８例不育男性精浆ＳＡ含量，双波长法较单波长法差异显著；正常男性与精子活动力低下、阻塞性无精、少精症差异显著。ＳＡ与精子活力、精子在附睾中发育的程度以及精子密度等密切相关，双波长法为消除干扰提供了一个新的途径。

关键词：不育症男性唾液酸精浆诊断

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精液中脱落细胞的研究及应用

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实用男科杂志 1995年第1期1卷 38-41页

作者：黄宇烽商学军徐建平沙国柱南京军区南京总医院解放军医学检验中心生殖遗传研究室

精液中脱落细胞检查包括对精液中精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞、精子、中性粒细胞、支持细胞、生殖道上皮细胞等各种细胞成分的鉴别分析，是对传统精液检查的一种创新，是一项无创伤的睾丸生殖功能检查方法。

关键词：精液脱落细胞睾丸生殖功能

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人精子蛋白17基因在大肠杆菌中的表达

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第四军医大学学报 2005年第20期26卷 1892-1894页

作者：杨爱龙李芳秋张建琼许联红东南大学基础医学院遗传学研究中心江苏南京210009 南京军区南京总医院全军医学检验中心江苏南京210002

目的:克隆人精子蛋白17(hSp17)基因,构建重组表达载体并表达重组蛋白.方法:用RTPCR法从人睾丸中克隆hSp17基因,构建重组表达质粒pET28a(+)/hSp17,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDSPAGE检测,用特异性hSp17的mAb进行Westernblot鉴... 详细信息

目的:克隆人精子蛋白17(hSp17)基因,构建重组表达载体并表达重组蛋白.方法:用RTPCR法从人睾丸中克隆hSp17基因,构建重组表达质粒pET28a(+)/hSp17,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDSPAGE检测,用特异性hSp17的mAb进行Westernblot鉴定,NiNTAHisBind树脂纯化重组蛋白.结果:克隆到hSp17cDNA(456bp)并经过DNA测序证实,表达和纯化得到重组蛋白hSp17(表观Mr为27500),并经过Westernblot鉴定.结论:成功克隆和表达hSp17基因.

关键词：人精子蛋白17 克隆,分子基因表达印迹法,蛋白质

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多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌中质粒介导的AmpC酶基因

多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌中质粒介导的AmpC酶基因

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第十届全军检验医学学术会议

作者：邵海枫史利宁崔蕾蕾赵晓智王锦娜王卫萍南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物室

目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(***)中质粒型ampC基因.方法收集临床分离的表型可疑为产Ampc酶的24株***,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mul-PCR)。用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,结... 详细信息

目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(***)中质粒型ampC基因.方法收集临床分离的表型可疑为产Ampc酶的24株***,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mul-PCR)。用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,结合mul-PCR、三维酶抑制试验和表型试验进行基因和表型分析.同时选择4株菌(3株ampc基因阳性,1株阴性)进行转质粒试验,以证实质粒型基因的存在.结果在mul-PCR试验中。有22株扩增出C-4族中长度405bp的片段,1株扩增出C-1族中长度462bp的片段;1株未扩增出目的条带.三维酶抑制试验中,24株菌中有19株菌未检出AmpC酶,但药物敏感试验中有诱导耐药现象,符合DHA族基因诱导表达的特性.转质粒试验中,3株ampC基因阳性的供体菌均将其ampC基因转入受体菌.结论采用多重PCR技术可以简化质粒型ampC基因的检测方法.在我院临床分离的***中.出现质粒编码的AmpC酶,以C-4族基因为主要流行型.

关键词：质粒 AmpC酶 ESBLs 肺炎克雷伯菌

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DcR3双抗体夹心ELISA法的建立及其在原发性肝癌中的应用前景

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实用医学杂志 2009年第6期25卷 970-972页

作者：孙艳兰小鹏张鲁榕赵猛杨湘越朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心 350025 美国乔治敦大学医学中心实验室华盛顿20057-1002

目的:建立一种新的双抗体夹心ELISA法,以检测血清中DcR3抗原的浓度,辅助诊断原发性肝癌。方法:探索建立DcR3双抗体夹心ELISA法最适反应条件。结果:所建立方法线性范围广、灵敏度较高、精密度较好、回收率较高,批间和批内变异系数均<... 详细信息

目的:建立一种新的双抗体夹心ELISA法,以检测血清中DcR3抗原的浓度,辅助诊断原发性肝癌。方法:探索建立DcR3双抗体夹心ELISA法最适反应条件。结果:所建立方法线性范围广、灵敏度较高、精密度较好、回收率较高,批间和批内变异系数均<10%。对50例正常对照组的检测结果进行统计学分析,确定参考值范围为1.59～60.71ng/mL(x±2s)。原发性肝癌组同正常对照组血清DcR3抗原水平差异有显著性(P<0.01)。结论:该法是一种较好的定量测定血清DcR3抗原的ELISA法,它可以为原发性肝癌患者的诊断提供一种新的辅助指标。

关键词：肝肿瘤 DcR3 酶联免疫吸附试验

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毕赤酵母重组Annexin32的分子特征及其对血凝与血栓形成的影响

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中国生物工程杂志 2004年第11期24卷 33-37页

作者：杨湘越兰小鹏颜宏利张毅朱忠勇孙树汉南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025 第二军医大学医学遗传学教研室上海200433

采用SDS PAGE、等电聚焦、脱磷酸反应、蛋白质N端氨基酸测序、KPTT及大鼠下腔静脉血栓形成观察 ,发现毕赤酵母重组Annexin32的分子特征较原核产物有了明显变化。有主、次 2条带 ,主带的分子量比原核产物大 ,等电点较理论值低 ,已被磷酸... 详细信息

采用SDS PAGE、等电聚焦、脱磷酸反应、蛋白质N端氨基酸测序、KPTT及大鼠下腔静脉血栓形成观察 ,发现毕赤酵母重组Annexin32的分子特征较原核产物有了明显变化。有主、次 2条带 ,主带的分子量比原核产物大 ,等电点较理论值低 ,已被磷酸化 ,2条带的N端均携带了来自载体的 4个氨基酸 ,可能对其与活化血小板表面磷脂的结合有所下调 ,导致血凝与血栓形成受到一定的影响 ,但仍具有明显的抗凝及抑制血栓形成作用。

关键词：血栓形成血凝原核分子特征 Annexin32 KPTT 活化血小板毕赤酵母等电点等电聚焦

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