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南方医科大学学报 2008年第2期28卷 284-287页

作者：程惠华傅志超王凤玫南京军区福州总医院／福建医科大学福总临床医学院放疗科福建福州350025 南京军区福州总医院／福建医科大学福总临床医学院妇产科福建福州350025

目的探讨缺氧条件下电离辐射对肝癌细胞HepG2中缺氧诱导因子(HIF)-1α及血管生成因子(VEGF)表达的影响,从理论上寻找一种提高放射治疗肿瘤有效性的方法。方法将HepG2肝癌细胞分为对照组、缺氧组、单纯照射组和缺氧加照射组。缺氧组:氯... 详细信息

目的探讨缺氧条件下电离辐射对肝癌细胞HepG2中缺氧诱导因子(HIF)-1α及血管生成因子(VEGF)表达的影响,从理论上寻找一种提高放射治疗肿瘤有效性的方法。方法将HepG2肝癌细胞分为对照组、缺氧组、单纯照射组和缺氧加照射组。缺氧组:氯化钴处理细胞模拟缺氧条件;单纯照射组:按照照射率4Gy/min,共8Gy的剂量利用X射线照射细胞;缺氧加照射组:氯化钴处理细胞一定时间后,按照与单纯照射组相同的剂量照射细胞。利用荧光显微镜观察各组肝癌细胞的凋亡情况,MTT法分析细胞存活分数,RT-PCR技术检验各组肝癌细胞中的HIF-1α和VEGF表达情况。结果(1)细胞凋亡情况:对照组未观察到细胞凋亡,缺氧组中少部分肝癌细胞出现凋亡,单纯照射组中大量肝癌细胞出现凋亡,但缺氧加照射组肝癌细胞凋亡情况较单纯照射组明显减少(P<0.05)。(2)MTT检测结果:细胞存活分数排列顺序为:对照组>缺氧组>缺氧加照射组>单纯照射组。(3)HIF-1α表达情况:缺氧加照射组>缺氧组>正常组(P<0.05),单纯照射组与正常组无明显差异;VEGF表达变化情况:缺氧加照射组>缺氧组>单纯照射组>正常组(P<0.05)。结论提示HIF-1α可能通过VEGF发挥重要的保护作用,从而降低实体瘤中内部癌细胞对辐射的敏感性。

关键词：缺氧电离辐射低氧诱导因子血管内皮生成因子肝肿瘤

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乙型肝炎病毒相关性膜性肾病中nephrin的表达及意义

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中华内科杂志 2011年第9期50卷 766-770页

作者：庄永泽魏丽芳余英豪曾玲熊喜生吴在增南京军区福州总医院福建医科大学福总临床医学院肾脏病科福州350025 南京军区福州总医院福建医科大学福总临床医学院病理科福州350025

目的观察nephrin在HBV相关性膜性肾病（HBV—MN）中的表达特点，研究***中足细胞的损伤程度及意义。方法采用免疫组化方法检测35例HBV—MN患者肾组织nephrin的表达情况，并进行半定量评分，分析其与临床病理指标的相关性。结果35例HBV... 详细信息

目的观察nephrin在HBV相关性膜性肾病（HBV—MN）中的表达特点，研究***中足细胞的损伤程度及意义。方法采用免疫组化方法检测35例HBV—MN患者肾组织nephrin的表达情况，并进行半定量评分，分析其与临床病理指标的相关性。结果35例HBV—MN患者中I期6例、Ⅱ期20例和Ⅲ期9例。正常肾组织nephrin于肾小球上皮侧呈线性高强度表达，HBV—MN患者肾组织nephrin表达显著减少，在HBV—MN的不同分期中nephrin表达无显著性差异（P〉0．05），但肾病综合征组nephrin的表达明显低于非肾病综合征组患者（P〈0．01），且不同程度尿蛋白患者其表达也有显著性差异（P〈0．05）。Spearman相关分析显示肾组织nephrin与24h尿蛋白定量之间存在负相关（r=-0．378，P〈0．05）。Ⅱ期患者呈肾病综合征者nephrin的表达也明显低于非肾病综合征患者（P〈0．01）。结论HBV-MN早期足细胞即受损伤，肾组织nephrin表达明显下调，尤其在肾病综合征患者更明显，HBV—MN中nephrin表达下调与蛋白尿的产生密切相关。

关键词：肝炎病毒乙型肾小球肾炎膜性病理学 Nephrin 免疫组织化学

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磁共振弥散张量示踪用于颈椎管内肿瘤的形态学研究

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第二军医大学学报 2015年第11期36卷 1187-1191页

作者：魏梁锋王守森郑兆聪薛亮田君应建彬第二军医大学福州临床医学院(南京军区福州总医院)神经外科福州350025

目的探讨颈椎管内肿瘤患者颈髓弥散张量纤维束示踪(DTT)的影像特点及其与脊髓功能、预后的关系。方法选取2014年2月至2015年1月在南京军区福州总医院经手术切除的颈椎管内肿瘤24例,在术前3d及术后1个月行颈髓弥散张量成像(DTI)扫描,并通... 详细信息

目的探讨颈椎管内肿瘤患者颈髓弥散张量纤维束示踪(DTT)的影像特点及其与脊髓功能、预后的关系。方法选取2014年2月至2015年1月在南京军区福州总医院经手术切除的颈椎管内肿瘤24例,在术前3d及术后1个月行颈髓弥散张量成像(DTI)扫描,并通过DTT重建白质纤维束,观察纤维束走行及完整性情况。采用McCormick分级法进行脊髓功能的评估。结果 DTT可清晰显现纤维束的饱满或稀疏情况、完整或中断现象,也可以观察纤维束与肿瘤之间的空间位置关系,如纤维束是受肿瘤推压移位还是包绕肿瘤。术前纤维束形态与McCormick分级及预后有关系,纤维束形态完整的患者术前脊髓功能状态及术后1个月时的预后均优于中断型(P<0.05)。结论 DTT能直观显示白质纤维束的形态,并对颈椎管内肿瘤的预后判断具有参考价值。

关键词：磁共振成像弥散张量成像弥散张量纤维束示踪颈椎管内肿瘤 McCormick分级预后

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一个Ⅱ型神经纤维瘤病家系的临床表现和NF2基因突变分析

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中华医学遗传学杂志 2010年第6期27卷 688-691页

作者：崔英霞夏欣一黄婷婷魏丽范晓博姚兵戈一峰李晓军黄宇烽南京军区南京总医院解放军检验医学研究所临床中心实验科 210002

目的报告1个Ⅱ型神经纤维瘤病家系NF2基因的剪接突变（IVS3＋3A＞C）,并探讨基因型与表型的关系.方法先证者有听神经瘤家族史,2年前因听神经瘤已经伽玛刀治疗.提取该家系所有患者、疑似患者、正常成员和150个无血缘关系健康人的血样... 详细信息

目的报告1个Ⅱ型神经纤维瘤病家系NF2基因的剪接突变（IVS3＋3A＞C）,并探讨基因型与表型的关系.方法先证者有听神经瘤家族史,2年前因听神经瘤已经伽玛刀治疗.提取该家系所有患者、疑似患者、正常成员和150个无血缘关系健康人的血样本基因组DNA.选择与NF2基因连锁的短串联重复（short tandem repeat,STR）位点（D22S1150、D22S268）对家系成员进行多态性分析,并计算2点连锁的LOD值.对先证者NF2基因的启动子、17个外显子和外显子内含子剪接处进行 PCR,对其产物进行测序.对家系另外3例患者,1例疑似患者和有血缘关系的9名健康者及150名无血缘的健康对照者进行第3外显子-第3内含子剪接处PCR和测序.结果两点连锁分析显示NF2基因为疾病的候选基因（Zmax=2.109,θ=0.00,D22S1150位点）.PCR产物测序发现先证者NF2基因IVS3＋3A＞C,呈杂合突变.3例患者和1例疑似患者均带有与先证者相同的突变,但9名健康成员和150名无血缘关系的健康对照者均无此改变.结论 NF2基因的INS3＋3A＞C突变是该家系疾病的分子原因.

关键词： Ⅱ型神经纤维瘤病 NF2基因 RNA剪接突变

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人Ⅱ型丙氨酸氨基转移酶表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

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临床检验杂志 2004年第4期22卷 273-275页

作者：谢飞涂向东兰风华朱忠勇南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科福州352200

目的　构建基因工程菌株 ,以获得重组人II型丙氨酸氨基转移酶 (ALT2 )蛋白。方法　逆转录PCR法从人肌肉组织总RNA中扩增ALT2基因片段 ,插入原核表达载体pET - 2 8a ,构建成融合表达质粒pET2 8 ALT2 ,将其转化大肠杆菌BL2 1DE3,IPTG诱导... 详细信息

目的　构建基因工程菌株 ,以获得重组人II型丙氨酸氨基转移酶 (ALT2 )蛋白。方法　逆转录PCR法从人肌肉组织总RNA中扩增ALT2基因片段 ,插入原核表达载体pET - 2 8a ,构建成融合表达质粒pET2 8 ALT2 ,将其转化大肠杆菌BL2 1DE3,IPTG诱导表达。SDS PAGE、活力测定、活性染色及westernblot鉴定表达产物。结果　重组质粒pET2 8 ALT2测序和酶切结果与预期完全符合。IPTG诱导后 ,阳性菌体裂解物上清ALT2活性很高 ,PAGE出现一分子量 5 80 0 0蛋白条带 ,可被抗ALT1抗血清识别 ,酶活性染色显示有ALT活性。结论　已成功将ALT2基因克隆到pET 2 8a载体 ,ALT2蛋白得到可溶性高效表达。

关键词：人Ⅱ型丙氨酸氨基转移酶表达载体构建大肠杆菌表达

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一例遗传性凝血因子Ⅴ缺乏症发病机制研究

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中华血液学杂志 2001年第9期22卷 453-456页

作者：谢飞程烽朱晓辉宋昌礼兰风华朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心实验科 350025

目的　研究遗传性凝血因子Ⅴ (FⅤ )缺乏症的发病机制。方法　通过免疫学方法和发色底物法检测血浆和血小板中的FⅤ含量 ,采用PCR产物直接测序和限制性酶切分析FⅤ基因 ,应用分子模建对所鉴定突变的生物结构病理学进行研究。结果　先证... 详细信息

目的　研究遗传性凝血因子Ⅴ (FⅤ )缺乏症的发病机制。方法　通过免疫学方法和发色底物法检测血浆和血小板中的FⅤ含量 ,采用PCR产物直接测序和限制性酶切分析FⅤ基因 ,应用分子模建对所鉴定突变的生物结构病理学进行研究。结果　先证者血浆和血小板中FⅤ均缺乏。先证者FⅤ基因第 176 3位核苷酸存在A→C突变 (176 3A→C ,EMBLAJ2 972 5 4)。模建分析表明 ,该突变将导致分子内部形成空洞 ,并可能破坏Tyr5 30与Glu330之间形成的氢键。结论　 176 3A→C突变将导致FⅤ稳定性降低。

关键词：凝血因子V 基因突变分子模拟遗传性凝血因子V缺乏症发病机制

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人Ⅰ型丙氨酸氨基转移酶的可溶性表达及抗血清反应模式

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中华检验医学杂志 2004年第12期27卷 857-860页

作者：谢飞涂向东兰风华朱忠勇南京军区福州总医院解放军医学检验中心实验科福州350025

目的　克隆表达重组人I型丙氨酸氨基转移酶 (ALT1)蛋白及制备抗血清 ,探讨建立ALT1特异性检测方法思路。方法　逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增人ALT1cDNA ,插入pGEX 2T ,构建原核表达载体 pGEX 2T ALT1,并转入大肠杆菌进行表达。SDS P... 详细信息

目的　克隆表达重组人I型丙氨酸氨基转移酶 (ALT1)蛋白及制备抗血清 ,探讨建立ALT1特异性检测方法思路。方法　逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增人ALT1cDNA ,插入pGEX 2T ,构建原核表达载体 pGEX 2T ALT1,并转入大肠杆菌进行表达。SDS PAGE ,活力测定和活性染色鉴定表达产物。表达产物免疫小鼠所得抗血清对天然ALT1,重组ALT1及重组ALT2进行Westernblot分析。结果　重组质粒测序和酶切结果显示ALT1基因已经成功克隆到pGEX 2T载体。SDS PAGE和活性染色表明所表达蛋白具有天然活性。抗ALT1血清除识别重组ALT1外 ,还可识别天然蛋白和重组ALT2。结论　重组人ALT1得到高效可溶性表达。用目前方法制备的抗血清特异性不高 ,如建立ALT1的免疫学检测方法需要采用特异性识别ALT1的抗体 ,以避免交叉反应引起的假性升高。

关键词： ALT 丙氨酸氨基转移酶抗血清天然蛋白可溶性表达假性活性染色克隆表达特异性识别

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肝移植术后并发症的CT影像学研究

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中国临床医学影像杂志 2006年第11期17卷 616-618页

作者：陈凯董其龙陈自谦南京军区福州总医院95临床部放射科福建莆田351100 南京军区福州总医院医学影像科福建福州350025

目的:系统性研究肝移植术后各种并发症的CT影像学表现。资料与方法:对2003～2005年3年之间资料完整的23例同种异体原位肝移植术后CT影像学表现进行回顾性研究。结果:所有肝移植术后患者均出现肝周积液、胸腔积液及右下肺肺炎及门静脉伴... 详细信息

目的:系统性研究肝移植术后各种并发症的CT影像学表现。资料与方法:对2003～2005年3年之间资料完整的23例同种异体原位肝移植术后CT影像学表现进行回顾性研究。结果:所有肝移植术后患者均出现肝周积液、胸腔积液及右下肺肺炎及门静脉伴行影。肝梗死4例,局限性脾梗死1例,肝内血肿2例,腹膜后血肿1例,胆总管下段胆泥阻塞伴胆管扩张5例,13例肝癌患者中肝移植术后单纯双肺转移3例,单纯移植肝转移1例,多脏器转移8例,1例因术后循环衰竭而死亡。结论:双螺旋CT能清楚显示肝移植术后的并发症影像。

关键词：肝移植体层摄影术,X线计算机

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CyP A三类Ig自身抗体测定方法的建立与临床应用

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临床检验杂志 1998年第5期16卷 262-265页

作者：虞伟李芳秋赵权武建国南京军区南京总医院全军医学检验中心临床免疫实验室

利用基因重组技术，大肠杆菌表达人环胞菌素Ａ结合蛋白（ｒｈＣｙＰＡ），建立测定抗ＣｙＰＡ自身抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），探讨抗ＣｙＰＡ抗体与临床疾病的关系。重组菌可溶性蛋白经饱和硫酸铵盐析和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈ... 详细信息

利用基因重组技术，大肠杆菌表达人环胞菌素Ａ结合蛋白（ｒｈＣｙＰＡ），建立测定抗ＣｙＰＡ自身抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），探讨抗ＣｙＰＡ抗体与临床疾病的关系。重组菌可溶性蛋白经饱和硫酸铵盐析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ柱层析，获取ｒｈＣｙＰＡ蛋白，用该纯化物作为抗原，方阵滴定，建立ＥＬＩＳＡ技术，对各类自身免疫病进行评估测定。ｒｈＣｙＰＡ经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，分子量为１８ｋＤ。在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中，发现有４０．３％的病人检出有抗ＣｙＰＡ自身抗体（５８／１４４），三类Ｉｇ中，又以ＩｇＧ类抗体检出率最为突出，为２８％（４０／１４４）；而其他自身免疫病病人抗ＣｙＰＡ抗体总体检出率为０％～１８．１％。

关键词：环胞素A 结合蛋白自身免疫病自身抗体 CyP-A

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普萘洛尔凝胶治疗婴幼儿血管瘤的疗效观察

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中华整形外科杂志 2013年第1期29卷 25-28页

作者：翟亚楠宋洪涛陈少全张敏新黎成金夏印王烈福建医科大学福总临床医学院南京军区福州总医院普通外科福建福州350025 福建医科大学福总临床医学院南京军区福州总医院普药剂科福建福州350025

目的评价普奈洛尔凝胶外涂治疗婴幼儿血管瘤的临床疗效与安全性。方法2010年10月至2011年9月，采用外涂普萘洛尔凝胶的方法治疗51例血管瘤患儿，动态观察患儿血管瘤大小、质地、颜色、瘤体血流峰值、阻力系数等变化及不良反应。结果按照... 详细信息

目的评价普奈洛尔凝胶外涂治疗婴幼儿血管瘤的临床疗效与安全性。方法2010年10月至2011年9月，采用外涂普萘洛尔凝胶的方法治疗51例血管瘤患儿，动态观察患儿血管瘤大小、质地、颜色、瘤体血流峰值、阻力系数等变化及不良反应。结果按照Achauer疗效评定法，51例患儿疗效评定I级4例（7．84％），Ⅱ级18例（35．29％），Ⅲ级22例（43．14％），Ⅳ级7例（13．73％，P〈0．05）。彩色超声多普勒血流仪检查示血管瘤血流峰值减少、阻力系数增加（P〈0．05）。浅表型血管瘤疗效优于深部型及混合型血管瘤（P〈0．05），而不同部位的血管瘤疗效之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论外涂普萘洛尔凝胶治疗婴幼儿浅表型血管瘤治疗效果满意，无明显不良反应。

关键词：普萘洛尔水凝胶婴幼儿血管瘤

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