检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2004年第6期31卷 572-575页

作者：黄梁浒郑德柱曾健辛娜兰风华南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

在基因组DNA水平 ,应用基因突变分析的方法对肾上腺脑白质营养不良进行分子诊断十分重要 .由于人体内存在多个肾上腺脑白质营养不良假基因的拷贝 ,应用PCR RFLP和PCR产物直接测序等常规方法难以检测一部分的基因突变 .为了排除基因组DN... 详细信息

在基因组DNA水平 ,应用基因突变分析的方法对肾上腺脑白质营养不良进行分子诊断十分重要 .由于人体内存在多个肾上腺脑白质营养不良假基因的拷贝 ,应用PCR RFLP和PCR产物直接测序等常规方法难以检测一部分的基因突变 .为了排除基因组DNA中假基因的干扰 ,利用扩增阻滞突变系统 ,成功地分析了一个肾上腺脑白质营养不良 (R6 17G突变 )家系成员的基因型 .结果表明 ,扩增阻滞突变系统是排除假基因干扰的有效方法之一 .

关键词：肾上腺脑白质营养不良分子诊断 ABCD1基因假基因扩增阻滞突变系统

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人血清脂蛋白(a)中纤维蛋白溶酶原位点测定

引用

生物化学与生物物理进展 1998年第2期25卷 170-174页

作者：汪俊军庄一义南京军区南京总医院全军医学检验中心

用单克隆抗载脂蛋白（ａ）抗体为包被抗体，酶标抗纤维蛋白溶酶原（Ｐｇ）抗体为检测抗体建立了人血清脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］中Ｐｇ位点的酶联免疫吸附试验法．方法特异，测定范围为２８～８８０ｍｇ／Ｌ，变异系数批内为４％～６... 详细信息

用单克隆抗载脂蛋白（ａ）抗体为包被抗体，酶标抗纤维蛋白溶酶原（Ｐｇ）抗体为检测抗体建立了人血清脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］中Ｐｇ位点的酶联免疫吸附试验法．方法特异，测定范围为２８～８８０ｍｇ／Ｌ，变异系数批内为４％～６％，批间为７％～９％．检测了正常人、冠心病（ＣＨＤ）和肾衰血透患者（ＣＲＦ）血清Ｌｐ（ａ）、Ｌｐ（ａ）中Ｐｇ位点和Ｐｇ／Ｌｐ（ａ）比值．结果示正常人血清Ｌｐ（ａ）水平分别同Ｐｇ、Ｐｇ／Ｌｐ（ａ）呈正、负相关．ＣＨＤ和ＣＲＦ患者Ｌｐ（ａ）、Ｐｇ位点和Ｐｇ／Ｌｐ（ａ）比值明显高于正常人，认为Ｌｐ（ａ）中Ｐｇ位点测定对于动脉粥样硬化的病理生理研究具有特殊的价值．

关键词：脂蛋白纤溶酶原酶联免疫吸附法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用全血直接PCR酶切法快速诊断儿童脊肌萎缩症

引用

中华儿科杂志 2005年第9期43卷 701-702页

作者：曾健黄梁浒杨渤生吴玉水兰风华叶礼燕南京军区福州总医院全军医学检验中心 350025 南京军区福州总医院神经内科南京军区福州总医院儿科

2003年5月-2004年11月，我们采用改进的无须DNA抽提的全血直接PCR-酶切法，成功地建立了一种更为简单、快速、准确的进行性脊髓性肌肉萎缩症（简称脊肌萎缩症，SMA）分子诊断方法，并将其应用于临床。报道如下

关键词： PCR-酶切法脊肌萎缩症快速诊断全血脊髓性肌肉萎缩症 2003年5月儿童 2004年 DNA抽提

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞核抗原Sm B′的基因克隆和原核表达

引用

临床检验杂志 2006年第3期24卷 166-168页

作者：杨湘越兰小鹏廖剑钟智强朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

目的为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B′。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B′全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEx-5T载体中,转入大肠杆菌B... 详细信息

目的为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B′。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B′全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEx-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(western blot)鉴定。结果PCR产物约为700 bp,与预期657 bp接近,测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-5T-Sm B′重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和western blot结果显示融合蛋白分子量为51 000,具有与抗Sm B′抗体的反应性。结论成功克隆表达核抗原Sm B′,为建立抗Sm自身抗体检测方法奠定了基础。

关键词：核抗原克隆分子融合基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

IRISiQ200全自动尿沉渣分析仪与Sysmex UF-100分析仪及人工镜检的比较和评价

引用

中华检验医学杂志 2006年第4期29卷 374-375页

作者：陈津王德春王丹兰小鹏朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

尿沉渣中有形成分检查经典的方法是在显微镜下进行人工判别.人工镜检最大的问题是速度慢,在当前临床检查的标本不断增加的大医院,每份尿都进行人工镜检难以做到.20世纪80年代,美国IRIS公司推出的Yellow IRIS全自动尿沉渣分析仪采用流式... 详细信息

尿沉渣中有形成分检查经典的方法是在显微镜下进行人工判别.人工镜检最大的问题是速度慢,在当前临床检查的标本不断增加的大医院,每份尿都进行人工镜检难以做到.20世纪80年代,美国IRIS公司推出的Yellow IRIS全自动尿沉渣分析仪采用流式细胞仪的进样技术和电脑控制的自动识别尿中有形成分的"自动智能显微镜"(automated intelligence microscopy AIM)[1,2] ,对流动视野中的有形成分进行摄影、判别和分析,并定量报告,使尿沉渣检测自动化、标准化和便捷化.该仪器一经推出,就受到广泛的好评.2002年,美国IRIS公司在YELLOW IRIS基本原理基础上,推出了iQ200全自动尿沉渣分析仪,我们通过与其他方法进行对比观察,对该仪器的性能特点作初步分析。

关键词：全自动尿沉渣分析仪 IRIS 人工镜检 Sysmex UF-100 有形成分显微镜下临床检查流式细胞仪检测自动化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

自身抗原组氨酰转移核糖核酸合成酶的基因克隆和原核表达研究

引用

中华检验医学杂志 2005年第11期28卷 1201-1203页

作者：杨湘越兰小鹏廖剑钟智强朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心 350025

目的研究建立用克隆、表达和鉴定人自身抗原组氨酰转移核糖核酸合成酶(HARS,亦称Jo1抗原)检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)自身免疫抗体的方法。方法用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)从HL60细胞株中克隆人自身抗原Jo1全长基因,将PCR产物直接进... 详细信息

目的研究建立用克隆、表达和鉴定人自身抗原组氨酰转移核糖核酸合成酶(HARS,亦称Jo1抗原)检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)自身免疫抗体的方法。方法用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)从HL60细胞株中克隆人自身抗原Jo1全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX5T载体中,并转入大肠杆菌BL21;阳性克隆鉴定后在异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,然后对其产物进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和蛋白质印迹法(IBT)检测。结果PCR产物约1500bp,与预期1526bp接近,测序结果与基因库核酸完全一致。pGEX5TJo1重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDSPAGE和IBT结果显示,融合蛋白分子量75000,具有天然人自身抗原Jo1的免疫原性。结论成功克隆表达人自身抗原Jo1,为建立PM/DM自身免疫抗体检测方法奠定了基础。

关键词：自身抗原克隆,分子融合基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

怎样看待血液及尿分析仪的过筛作用

引用

临床检验杂志 2003年第6期21卷 321-323页

作者：朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微... 详细信息

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微镜下辨认或计数的细胞，改变为根据细胞的大小、内部和表面结构、加入特殊试剂（如溶血剂、细胞化学试剂和染色剂等）后细胞的变化，用测量其电阻、对高频电磁波的传导性、在不同角度测细胞对光的散射程度以及用光度计测定颜色变化等光学和电学方法，直接或间接地加以计数和区分。虽然这些方法的设计都是有理论根据，并历经数十年的研究、改进和实际应用的考验，认为方法已成熟，所开发的仪器及配套试剂经过法定机构（如美国的FDA）批准后才进入市场的，但它们毕竟不是在显微镜下直接观察细胞，在有些情况，特别有病理条件下，其测定结果并不可靠或难以确定，还需要在显微镜下进行复检（review），这是经过多年实践后的一致看法，并且也是产品监控机构以及所有仪器厂家所承认并要求做到的。因此说，这类仪器仅仅是一种过筛性质的仪器。

关键词：血液分析仪尿液分析仪过筛作用显微镜检查临床检验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

NADH-细胞色素b5还原酶突变型蛋白的结构与功能研究

引用

临床检验杂志 2007年第1期25卷 13-16页

作者：郑德柱兰风华黄粱浒吴玉水谢飞程烽朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印... 详细信息

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印迹鉴定表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白。应用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RL72P融合蛋白,比较GST-b5R和GST-b5RL72P酶活性。结果突变型酶活性低,为野生型的3%。结论L72P突变可引起蛋白质二级结构改变从而导致酶的活性下降。

关键词： NADH-细胞色素b5还原酶原核表达 GST融合蛋白亲和层析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用双侧扩增阻滞突变系统排除肾上腺脑白质营养不良分子诊断中假基因的干扰

引用

中华医学遗传学杂志 2006年第5期23卷 558-560页

作者：王志红黄梁浒兰风华南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

目的应用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutationsystem,ARMS)排除ABCD1假基因的干扰,对肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy, ALD)家系进行基因突变分析。方法按ARMS引物设计原则设计上游引物(正常引物、突变引物... 详细信息

目的应用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutationsystem,ARMS)排除ABCD1假基因的干扰,对肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy, ALD)家系进行基因突变分析。方法按ARMS引物设计原则设计上游引物(正常引物、突变引物)和下游公共引物,对家系成员的基因组DNA分别进行PCR扩增。结果R617C突变患者及其母亲的突变引物均扩增出特异性条带(107 bp) ,患者父亲和对照则未见条带,在基因组DNA水平证实了R617C突变的存在。结论双侧ARMS方法可以快速、有效地排除假基因干扰。

关键词：肾上腺脑白质营养不良分子诊断 ABCD1基因假基因扩增阻滞突变系统

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

初乳中丙型肝炎病毒标志物的测定

引用

中华妇产科杂志 1997年第3期32卷 138-140页

作者：熊华李保仝武建国杨毓华齐名南京军区南京总医院全军医学检验中心

目的：检测乳汁中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，探讨丙型肝炎病毒通过母乳传播的可能性。方法：用间接酶联免疫吸附试验同时检测血清和初乳中抗ＨＣＶ－ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ３类抗体；并用逆转录聚合酶链反应检测ＨＣＶＲＮＡ。结... 详细信息

目的：检测乳汁中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，探讨丙型肝炎病毒通过母乳传播的可能性。方法：用间接酶联免疫吸附试验同时检测血清和初乳中抗ＨＣＶ－ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ３类抗体；并用逆转录聚合酶链反应检测ＨＣＶＲＮＡ。结果：在血清抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性的３５例产妇初乳标本中，抗ＨＣＶ－ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体分别检出１９例、６例及１例。ＨＣＶＲＮＡ在３５份血清中阳性检出率为４０．０％（１４／３５），而初乳中仅检出２例（５．７％；２／３５），两者之间有明显差异（Ｐ＜０．０１）。结论：血清抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性产妇初乳中的抗ＨＣＶ抗体以ＩｇＡ类为主；血清中ＨＣＶＲＮＡ的检出率明显高于初乳。血清抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性的产妇，尤其是初乳中抗ＨＣＶ－ＩｇＡ和ＨＣＶＲＮＡ也为阳性者，有可能通过哺乳而导致婴儿感染ＨＣＶ。

关键词：初乳丙型肝炎病毒标志物测定垂直传播

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：