检索结果-内蒙古大学图书馆

中国当代儿科杂志 2013年第5期15卷 335-339页

作者：冯丽梅夏桂枝任榕娜杨朋范周琳瑛梅珍南京军区福州总医院儿科南京军区福州总医院神经外科癫癎中心福建医科大学基础医学院电镜室福建福州350025

目的研究儿童难治性癫癎致癎灶的病理改变及其临床意义。方法儿童难治性癫癎患者30例,手术切除致癎灶,在光镜和电镜下观察其病理学改变。结果致癎灶病理组织学检查发现皮质发育不良14例(47%),海马硬化11例(37%),胚胎发育不良性神经上皮... 详细信息

目的研究儿童难治性癫癎致癎灶的病理改变及其临床意义。方法儿童难治性癫癎患者30例,手术切除致癎灶,在光镜和电镜下观察其病理学改变。结果致癎灶病理组织学检查发现皮质发育不良14例(47%),海马硬化11例(37%),胚胎发育不良性神经上皮瘤1例(3%),节细胞胶质瘤1例(3%),脑软化3例(10%)。电镜下可见海马及海马外皮层突触数量及结构改变,神经元减少及核固缩,星形胶质细胞肿胀、退变,线粒体结构改变。结论海马及海马外皮层病理结构改变,特别是突触重塑,可能是难治性癫癎反复自发性发作的形态学基础,该病理变化与癎样活动的产生及神经系统的兴奋抑制平衡失调有关。

关键词：难治性癫癎超微结构神经元变性突触重塑儿童

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TLR序列在SRP54蛋白与SRPRNA和信号肽结合中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第6期21卷 781-785页

作者：黄俏佳兰风华董荔红朱忠勇南京军区福州总医院分子医学研究中心福州350025

SRP54蛋白是信号识别颗粒(signal recognition particle)的一个关键组分.对人SRP54蛋白328～330位的TLR3个氨基酸进行人工诱变,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达了A3突变体,并对A3突变体进行纯化和Superdex75凝胶过滤分析.观察到A3突变... 详细信息

SRP54蛋白是信号识别颗粒(signal recognition particle)的一个关键组分.对人SRP54蛋白328～330位的TLR3个氨基酸进行人工诱变,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达了A3突变体,并对A3突变体进行纯化和Superdex75凝胶过滤分析.观察到A3突变体丧失了与SRPRNA结合的能力,其自身也不能形成二聚体.结果证明,TLR这3个氨基酸残基与二聚体结构的形成有关,TLR是SRP54蛋白结合SRPRNA和新生蛋白质信号肽所必需的关键性氨基酸序列.

关键词：信号识别颗粒信号肽定点诱变凝胶过滤

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肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎致全身炎症反应中的作用

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中国危重病急救医学 2010年第4期22卷 206-209页

作者：邹忠东张再重王烈王瑜郑国华南京军区福州总医院普通外科、南京军区普通外科研究所福建350025 福建中医学院统计学教研室

目的通过肠系膜淋巴管结扎（MLDL）阻断肠淋巴液回流，观察肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）致全身炎症反应中的作用。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、结扎组和假手术组，每组8只。采用胰胆管逆行注入牛黄胆酸钠... 详细信息

目的通过肠系膜淋巴管结扎（MLDL）阻断肠淋巴液回流，观察肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）致全身炎症反应中的作用。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、结扎组和假手术组，每组8只。采用胰胆管逆行注入牛黄胆酸钠溶液制备SAP合并多器官损伤模型；MLDL于制模前进行。术后24h测定血中二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）和内毒素水平及胰腺、肺脏、肝脏组织髓过氧化物酶（MP0）活性。处死大鼠取材，光镜下观察小肠组织形态学变化；培养肠系膜淋巴结细菌并计算细菌移位率。结果与假手术组比较，模型组血中DAO、D-乳酸、TNF—α、IL-6和内毒素水平均显著升高[DAO：（0．64士0．17）kU／L比（0．37±0．07）kU／L，D-乳酸：（8．16±1．79）ng／L比（3．24±1．00）ng／L，TNF—α：（65．21±13．38）ng／L比（22．16±5．04）ng／L，IL-6：（7．95±1．83）ng／L比（4．26±1．23）ng／L，内毒素：（O．068±0．019）kEU／L比（0．033±0．009）kEU／L3，肠系膜淋巴结细菌移位率显著提高（75．0％比o），胰腺、肺脏、肝脏MPO活性显著升高[胰腺：（5．14±1．24）U／g比（2．88±0．75）U／g，肺脏：（9．07±2．52）U／g比（4．38±1．29）U／g，肝脏：（6．36±1．63）U／g比（3．19±0．96）U／g，均P〈0．01]；与模型组比较，结扎组血中DAO[（0．50±0．13）kU／L]、D-乳酸[（6．23±1．25）ng／L]、TNF-α（（48．50±13．23）ng／L]、IL-6[（6．06土1．64）ng／L3和内毒素[（0．048±0．014）kEU／L3均显著降低，肠系膜淋巴结细菌移位率（12．5％）显著减少，胰腺、肺脏、肝脏MPO活性[胰腺：（4．01±1．05）U／g，肺脏：（6．58±1．96）U／g，肝脏：（4．64±1．34）U／g3显著下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论MLDL可以降低SAP大鼠肠道细菌和内毒素移位，减轻胰腺、肺脏、肝脏组织炎症损伤，保护肠屏障功能。

关键词：胰腺炎,急性肠系膜淋巴管结扎微循环肠屏障功能障碍全身炎症反应综合征

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怎样看待血液及尿分析仪的过筛作用

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临床检验杂志 2003年第6期21卷 321-323页

作者：朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微... 详细信息

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微镜下辨认或计数的细胞，改变为根据细胞的大小、内部和表面结构、加入特殊试剂（如溶血剂、细胞化学试剂和染色剂等）后细胞的变化，用测量其电阻、对高频电磁波的传导性、在不同角度测细胞对光的散射程度以及用光度计测定颜色变化等光学和电学方法，直接或间接地加以计数和区分。虽然这些方法的设计都是有理论根据，并历经数十年的研究、改进和实际应用的考验，认为方法已成熟，所开发的仪器及配套试剂经过法定机构（如美国的FDA）批准后才进入市场的，但它们毕竟不是在显微镜下直接观察细胞，在有些情况，特别有病理条件下，其测定结果并不可靠或难以确定，还需要在显微镜下进行复检（review），这是经过多年实践后的一致看法，并且也是产品监控机构以及所有仪器厂家所承认并要求做到的。因此说，这类仪器仅仅是一种过筛性质的仪器。

关键词：血液分析仪尿液分析仪过筛作用显微镜检查临床检验

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NADH-细胞色素b5还原酶突变型蛋白的结构与功能研究

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临床检验杂志 2007年第1期25卷 13-16页

作者：郑德柱兰风华黄粱浒吴玉水谢飞程烽朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印... 详细信息

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印迹鉴定表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白。应用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RL72P融合蛋白,比较GST-b5R和GST-b5RL72P酶活性。结果突变型酶活性低,为野生型的3%。结论L72P突变可引起蛋白质二级结构改变从而导致酶的活性下降。

关键词： NADH-细胞色素b5还原酶原核表达 GST融合蛋白亲和层析

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小鼠乳酸脱氢酶C4在大肠杆菌中的可溶性表达与鉴定

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解放军医学杂志 2008年第2期33卷 176-179页

作者：张朵熊永忠陈平辛娜兰风华福州南京军区福州总医院分子医学研究所 350025

目的构建小鼠精子特异性乳酸脱氢酶C4(mLDHC4)的原核表达载体并进行重组蛋白的纯化。方法提取小鼠睾丸组织总RNA,反转录合成cDNA。自行设计引物,PCR扩增mLDHC4的编码序列,产物经EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后,克隆至表达载体pET-28a(+)中,获得... 详细信息

目的构建小鼠精子特异性乳酸脱氢酶C4(mLDHC4)的原核表达载体并进行重组蛋白的纯化。方法提取小鼠睾丸组织总RNA,反转录合成cDNA。自行设计引物,PCR扩增mLDHC4的编码序列,产物经EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后,克隆至表达载体pET-28a(+)中,获得重组载体。将重组载体转化大肠杆菌***21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导mLDHC4表达,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和乳酸脱氢酶活性测定方法对重组mLDHC4进行鉴定,Ni+-NTA亲和层析法纯化mLDHC4,并将其与pVAX1-mLDHC4(小鼠mLDHC4的真核表达载体)免疫小鼠的抗血清进行免疫印迹反应。结果重组载体经EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后,可释放大小约1000bp的插入片段,序列分析表明,克隆的DNA片段与GenBank登录的mLDHC4编码序列完全一致,将此重组质粒命名为pET-28a(+)-mLDHC4。在IPTG的诱导下,重组菌可表达大小约35kD的蛋白质,且其裂解液具有很高的乳酸脱氢酶活性,经亲和层析纯化后在聚丙烯酰胺凝肢中仅显示单一蛋白区带,与抗血清反应后在硝酸纤维素膜上形成特异性条带。结论小鼠mLDHC4的全长编码序列已被克隆至原核表达载体pET-28a(+)质粒,并在***21(DE3)中获得高效表达,纯化后的蛋白特异性高、活性强。

关键词：乳酸脱氢酶类基因表达

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病毒白细胞介素-10的基因克隆与原核表达

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第5期21卷 661-662页

作者：连云宗李极品吴玉水程烽朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心

目的:构建病毒白细胞介素IL-10(vIL-10)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:以EB病毒B95-8细胞培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒BCRF1基因。PCR产物经EcoRI和XhoI双酶切后,克隆至原核表达载体pET-28a中,以重组质粒转化大肠杆菌B... 详细信息

目的:构建病毒白细胞介素IL-10(vIL-10)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:以EB病毒B95-8细胞培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒BCRF1基因。PCR产物经EcoRI和XhoI双酶切后,克隆至原核表达载体pET-28a中,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,在IPTG诱导下表达目的蛋白。结果:以终浓度为100μmol/L的IPTG于30℃诱导6h后,重组菌可高效表达相对分子质量(Mr)约为24000的His-vIL-10融合蛋白。结论:成功地克隆vIL-10的编码基因并在大肠杆菌中高效表达,为制备抗vIL-10单克隆抗体(mAb)、分析vIL-10结构与功能的关系提供了条件。

关键词：病毒白细胞介素-10 大肠杆菌表达

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X-常染色体平衡易位两例报告

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遗传 1992年第2期14卷 27-28页

作者：张宝珍朱忠勇南京军区福州总医院检验科遗传室 350001

X染色体和常染色体平衡易位在染色体畸变中较为少见。本文两例均因表现为闭经而就诊。例一为原发性闭经,断裂发生在X染色体的“临界区”Xq 13内,临床表现为第二性征缺乏。例二为继发性闭经,断裂发生在Xq 12,故第二性征发育尚好,但亦影... 详细信息

X染色体和常染色体平衡易位在染色体畸变中较为少见。本文两例均因表现为闭经而就诊。例一为原发性闭经,断裂发生在X染色体的“临界区”Xq 13内,临床表现为第二性征缺乏。例二为继发性闭经,断裂发生在Xq 12,故第二性征发育尚好,但亦影响性腺发育和功能。而两例患者的身高都正常。由此进一步证明身高与X染色体短臂的完整有密切关系。

关键词： X-常染色体易位新核型

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复杂染色体重排的女性携带者与她健康的女儿

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遗传 2004年第5期26卷 612-614页

作者：崔英霞王咏梅姚兵黄宇烽南京军区南京总医院全军医学检验中心生殖遗传室南京210002

一例新生复杂染色体重排的女性携带者(complexchromosomerearrangement,CCR),易位涉及1号、5号和12号染色体。病人因2次自然流产而要求进行外周血淋巴细胞G显带核型分析。最初G显带核型疑为46,XX,t(1;5;12)(1pter→1q25::12q24→12qter;5qter→5p11::1q25→1qter;12pter→12q24::5p11→5pter).经荧光原位杂交(FISH)技术检测,证实患者的核型为46,XX,t(1;5;12)(1pter→1q23::12q22→12qter;5qter→5p11::1q25→1qter;12pter→12q22::1q23→1q25::5p11→5pter).7年后病人再次妊娠,并拒绝产前诊断。女婴足月分娩,生长发育正常。核型为46,XX。比较以前报告的女性复杂易位携带者与我们报告的病例可以认为,CCR并不总是表现为自然流产或分娩畸形儿,仍有机会生出正常的孩子。

关键词：复杂染色体易位女性携带者健康女儿妊娠

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1例新的遗传性高铁血红蛋白血症复合杂合子基因型的鉴定

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临床检验杂志 2005年第1期23卷 22-24页

作者：程鲁京郑德柱吴玉水朱忠勇兰风华南京军区福州总医院全军检验医学中心福州350025

目的　从分子水平对 1例遗传性高铁血红蛋白血症患者进行确诊。方法　通过RT PCR产物直接测序 ,分析患者和正常对照b5R基因的cDNA编码序列。用PCR 限制性内切酶分析患者、其父母和正常人基因组DNA。结果　患者的一个b5R等位基因第 72位... 详细信息

目的　从分子水平对 1例遗传性高铁血红蛋白血症患者进行确诊。方法　通过RT PCR产物直接测序 ,分析患者和正常对照b5R基因的cDNA编码序列。用PCR 限制性内切酶分析患者、其父母和正常人基因组DNA。结果　患者的一个b5R等位基因第 72位密码子 (位于外显子 3)发生了CTC→CCC突变 ,原来的亮氨酸被脯氨酸替换。患者另一个b5R等位基因第 2 0 3位密码子 (位于外显子 7)发生了TGC→TAC突变 ,原先的半胱氨酸被酪氨酸取代。结论　在中国患者确定了一个新的遗传性高铁血红蛋白血症基因型 ,即L72P/C2 0 3Y。

关键词：患者遗传性高铁血红蛋白血症杂合子等位基因基因型突变外显子密码子 DNA 限制性内切酶

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