检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2000年第2期16卷 61-63页

作者：李晓军武建国郭大文徐建平南京军区南京总医院全军医学检验中心免疫室南京210002

目的:构建人钙调素(CaM)基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达人CaM蛋白。方法:用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢcDNA),将其插入表达载体pBV220,构建重组表达质粒hCaMⅢ/pBV220,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆。结果:阳... 详细信息

目的:构建人钙调素(CaM)基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达人CaM蛋白。方法:用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢcDNA),将其插入表达载体pBV220,构建重组表达质粒hCaMⅢ/pBV220,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆。结果:阳性重组子在大肠杆菌DH5α中经温度诱导可高效表达CaM蛋白,经15%SDSPAGE分析,可观察到一分子量与理论值相符(约17kD)的诱导表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的20%。进一步分析表达产物的性质表明,CaM主要以可溶性形式表达。Westernblot结果证实,17kD的表达条带可与标准鼠抗CaMMcAb起特异反应。结论:用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人CaM,为进一步研究CaM的生物学功能及研制抗CaM单克隆抗体奠定基础。

关键词：钙调素基因表达大肠杆菌 DH5α

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男性生精障碍的细胞遗传学和分子遗传学检测

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中国男科学杂志 2006年第1期20卷 28-31页

作者：涂向东谢飞张宝珍兰风华朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心实验科福州350025

目的从遗传学角度分析男性生精障碍的病因,为临床提供治疗和遗传咨询的依据。方法对91例无精子症患者和42例严重少精子症患者,采用外周血染色体核型分析和Y染色体AZF区域微缺失联合检测。结果91例原发性无精子症患者中,染色体数量异常... 详细信息

目的从遗传学角度分析男性生精障碍的病因,为临床提供治疗和遗传咨询的依据。方法对91例无精子症患者和42例严重少精子症患者,采用外周血染色体核型分析和Y染色体AZF区域微缺失联合检测。结果91例原发性无精子症患者中,染色体数量异常者16例,占总数17.5%;染色体平衡易位5例,占总数5%;10例AZF区域STS位点缺失,占总数11%;二项检测异常发生率为34%。42例严重少精子症患者检出染色体平衡易位4例,占总数9.5%;AZF区域STS位点缺失5例,占总数11.9%,二项检测异常发生率为21.4%。结论染色体核型分析和Y染色体微缺失是男性生精障碍重要的遗传检测指标。

关键词：男性生精障碍细胞遗传学分子生物学

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高压氧联合干细胞治疗创伤性颅脑损伤的研究进展

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中华物理医学与康复杂志 2011年第4期33卷 309-312页

作者：白志峰彭慧平王如密卢晓欣福建医科大学福总临床医学院福州350025 南京军区福州总医院高压氧科南京军区福州总医院神经外科

创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）已成为发达国家青少年伤病致死的首位病因，而我国的颅脑损伤发生率和因颅脑损伤致残、致死的伤员也逐年增加。临床及实验证实了干细胞治疗TBI的效果，也证实了高压氧能促进内源及外源性干... 详细信息

创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）已成为发达国家青少年伤病致死的首位病因，而我国的颅脑损伤发生率和因颅脑损伤致残、致死的伤员也逐年增加。临床及实验证实了干细胞治疗TBI的效果，也证实了高压氧能促进内源及外源性干细胞的增殖、分化，并趋于向脑损伤部位分布，高压氧联合干细胞治疗脑损伤在临床上得到一定程度的应用，也取得了一定临床效果。现将近年来关于高压氧及干细胞治疗TBI的研究情况综述如下。

关键词：创伤性颅脑损伤干细胞治疗高压氧创伤性脑损伤临床效果 brain 损伤发生率发达国家

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HIF—1α基因多态性与鼻咽癌放疗敏感性的相关性研究

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中华放射医学与防护杂志 2011年第4期31卷 430-432页

作者：傅志超程惠华李东石王凤玫林贵山福建医科大学福州总医院临床医学院南京军区福州总医院放疗科 350025 福建医科大学福州总医院临床医学院南京军区福州总医院妇产科 350025

目的研究低氧诱导因子-1α基因（HIF-1α）第12外显子1790（G—A）单核苷酸多态性与鼻咽癌放疗敏感性的关系。方法收治的经病理明确诊断、完成根治性放疗、随访3年以上的189例鼻咽癌患者，根据随访结果分为治愈组135例和复发组54例，利... 详细信息

目的研究低氧诱导因子-1α基因（HIF-1α）第12外显子1790（G—A）单核苷酸多态性与鼻咽癌放疗敏感性的关系。方法收治的经病理明确诊断、完成根治性放疗、随访3年以上的189例鼻咽癌患者，根据随访结果分为治愈组135例和复发组54例，利用聚合酶链式反应．限制性片段长度多态性PCR—RFLP技术检测HIF-1α基因第12外显子1790（G→A）的单核苷酸多态性基因型，并分析其基因多态性特征。结果治愈组和复发组HIF-1α基因1790（G→A）单核苷酸多态性的GG、GA和AA基因型频率分别为77．04％、20．74％、2．22％和59．26％、38．89％、1．85％。G、A等位基因频率分别为87．4％、13．9％和78．7％、21．3％。鼻咽癌复发组HIF-1α基因1790（G→A）单核苷酸多态性等位基因分布频率高于治愈组（x^2=6．619，P〈0．05）。结论HIF-1α基因1790（G→A）多态性可能与鼻咽癌放射敏感性相关。

关键词：低氧诱导因子单核苷酸多态性鼻咽癌放射敏感性

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制备单克隆抗体检测PES1的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第2期28卷 174-176,180页

作者：李杰萍庄庆仁兰小鹏曾国彬罗小锋叶棋浓武警福建总队医院检验科南京军区福州总医院检验医学研究所福建福州350003

目的:制备PES1单克隆抗体(mAb)并用所制备的抗体检测PES1在多种肿瘤细胞中的表达及其在成年大鼠不同组织中的表达分布。方法:纯化GST-PES1(1-322aa)融合蛋白后注入小鼠进行免疫,经过细胞融合、筛选以及用Western blot进行特异性鉴定后获... 详细信息

目的:制备PES1单克隆抗体(mAb)并用所制备的抗体检测PES1在多种肿瘤细胞中的表达及其在成年大鼠不同组织中的表达分布。方法:纯化GST-PES1(1-322aa)融合蛋白后注入小鼠进行免疫,经过细胞融合、筛选以及用Western blot进行特异性鉴定后获得mAb。再用制备的mAb检测PES1在不同的人肿瘤细胞和大鼠不同组织中的表达。结果:所制备的PES1 mAb能特异地识别PES1。用所制备的mAb检测发现,在所检测的人乳腺癌、卵巢癌、肝癌以及肺癌等细胞中均有不同程度的表达;PES1类似物pescadillo在大鼠的乳腺和卵巢组织中表达,但在其他组织中没有被检测到。结论:成功地制备了PES1的mAb。PES1可能与肿瘤的发生发展有一定的关系;由于PES1明显表达于雌激素重要的靶器官,所以可能参与雌激素信号通路。

关键词： PES1 单克隆抗体基因表达

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舒巴坦单剂及舒巴坦与第三代头孢菌素联合对鲍曼不动杆菌的体外抗菌作用比较

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中国抗生素杂志 2006年第8期31卷 488-491页

作者：谈华邵海枫王锦娜王卫萍李珍大南京军区南京总医院全军医学检验中心微生物实验室南京210002

目的比较舒巴坦(SB)单剂和舒巴坦联合第三代头孢菌素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性,探讨舒巴坦在联合制剂中的实际作用。方法从临床分离的表型为对头孢哌酮(CPZ)、头孢他啶(CAZ)和头孢噻肟(CTX)3种第三代头孢菌素中1种以上耐药或中介的5... 详细信息

目的比较舒巴坦(SB)单剂和舒巴坦联合第三代头孢菌素对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性,探讨舒巴坦在联合制剂中的实际作用。方法从临床分离的表型为对头孢哌酮(CPZ)、头孢他啶(CAZ)和头孢噻肟(CTX)3种第三代头孢菌素中1种以上耐药或中介的56株鲍曼不动杆菌分为3组。A组(27株)对上述2种以上药物耐药;B组(11株)仅对CPZ耐药;C组(18株)仅对CPZ或CTX中介。采用微量肉汤稀释法检测SB单剂以及SB分别联合上述3种第三代头孢菌素敏感和耐药折点浓度的最低抑菌浓度(MICs)。采用CPZ三维酶提取和抑制试验检测β-内酰胺酶,并选择对CPZ中介(A株)和耐药(B株)进行杀菌曲线试验。结果SB对B组和C组菌的MICs≤1μg/ml;SB对A组菌的MICs范围在4～64μg/ml之间,并且与CPZ、CAZ或CTX任一药物的敏感和耐药折点浓度联合,均不能使联合后SB的MICs低于单剂SB的MICs。在三维β-内酰胺酶抑制试验中,酶活性不能被SB抑制的菌株,其SB的MICs值高于酶活性能被SB抑制的菌株。杀菌曲线显示在SB和CPZ之间无协同作用。结论SB单剂对多重耐药的鲍曼不动杆菌有抗菌活性,这些菌株对联合制剂的敏感可能主要是SB在发挥杀菌作用。

关键词：舒巴坦鲍曼不动杆菌 β-内酰胺酶抑制剂

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精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗的构建及免疫避孕效果的实验研究

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中国科学（C辑） 2008年第2期38卷 115-123页

作者：陈勇张朵辛娜熊永忠陈平李博涂向东兰风华南京军区福州总医院全军计划生育优生优育研究所医学遗传研究室福州350025

精子特异性乳酸脱氢酶是精子能量代谢的一个关键酶,具有很强的组织特异性和免疫原性.在本研究中,将人和小鼠(Mus musculus)的精子特异性乳酸脱氢酶编码序列分别与真核表达载体pVAX1连接,构建了两个DNA疫苗:pVAX1-hLDHC和pVAX1-mLDHC.将... 详细信息

精子特异性乳酸脱氢酶是精子能量代谢的一个关键酶,具有很强的组织特异性和免疫原性.在本研究中,将人和小鼠(Mus musculus)的精子特异性乳酸脱氢酶编码序列分别与真核表达载体pVAX1连接,构建了两个DNA疫苗:pVAX1-hLDHC和pVAX1-mLDHC.将这两个DNA疫苗通过黏膜表面滴注的方式分别免疫雌雄两性BALB/c小鼠,在实验小鼠的血清和雌性实验小鼠的阴道分泌液中均检测到特异性抗体的存在,滴度随免疫次数的增加而升高.交配实验中,实验组出生子代的数量明显减少,有的小鼠甚至未生育,与未免疫组和pVAX1空质粒免疫组在统计学上有显著性差异.精子凝集实验表明,实验小鼠血清和雌性实验小鼠阴道分泌液均可引起正常雄性小鼠的精子悬液发生凝集反应.免疫组化结果显示:实验小鼠血清和雌性实验小鼠阴道分泌液中的抗体与位于正常精子胞质、顶体外膜及顶体囊中的乳酸脱氢酶抗原发生特异性结合.本研究初步显示了人用避孕DNA疫苗免疫效果,为以后可能进行的临床实验奠定了基础.

关键词：精子特异性乳酸脱氢酶 DNA疫苗避孕疫苗黏膜免疫

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随机化临床试验及随机化的SAS实现

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中国临床药理学与治疗学 2001年第3期6卷 193-195页

作者：刘玉秀姚晨杨友春陈峰南京军区南京总医院信息科南京210002 解放军总医院医学统计教研室南通医学院医学统计教研室

从科学的观点来看,临床试验中有足够样本含量的随机化、对照、盲法临床试验是最理想的研究设计.不采用随机化和盲法设计,当临床医生对某种疗法偏爱或厌恶时,会有意无意地影响试验效应的判定,甚至剔除某些对象或改变对象处理安排,给试验... 详细信息

从科学的观点来看,临床试验中有足够样本含量的随机化、对照、盲法临床试验是最理想的研究设计.不采用随机化和盲法设计,当临床医生对某种疗法偏爱或厌恶时,会有意无意地影响试验效应的判定,甚至剔除某些对象或改变对象处理安排,给试验带来偏倚,难以保证结果的可靠性.目前临床试验中最多采用的是多中心、随机、对照、平行、双盲试验.随机化保证了研究对象有相同的机会进入处理组或对照组,但并不是所有的随机化方案都是等效的.有些研究人员自称的随机方案其实并不是真正的随机,不能有效地控制偏倚.一些时有报道使用的交替分配、表格号码(奇或偶)或出生日期等分配方法,貌似随机,可能并未真正随机.这些方法会潜在影响分配决定,因为负责分配病人的调研人员可能会事先知道下一个处理是什么,从而决定病人是否进入研究或根据自己对处理的偏好来分配病人;另外,这样的分配有时还会和病人自身的某些规律暗合,因而这些都不是真正的随机方案.洗牌、抛硬币等方法尽管是随机的,但不能检查或重复.使用随机数字表、随机排列表是很好的方法,因为表中的数字是经过随机产生后定下来的,因此可以重复,但较为麻烦,对于样本量较大的临床试验,也很费时.在目前计算机应用非常普及的情况下,用统计软件中的随机化功能,事先给出种子数,进行随机化,既简单,又可重复,符合随机化要求,应予提倡.本文介绍用SAS系统实现临床试验随机化的方法,并兼论随机化试验的盲法及伦理问题.

关键词：随机化临床试验 SAS系统随机方案设计

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L-肉碱对奥硝唑所致弱精子症大鼠的治疗作用

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中华男科学杂志 2009年第7期15卷 604-607页

作者：张稳刘清珍商学军黄宇烽王浩洋南京军区南京总医院计划生育办公室南京军区南京总医院解放军检验医学研究所江苏南京210002

目的:探讨L-肉碱(LC)对奥硝唑(ORN)所致的弱精子症雄性大鼠的治疗作用。方法:性成熟雄性SD大鼠(200～230g)40只,随机均分为5组,连续灌胃20d,1次/d,每次1ml。A组(对照组):0.5%的羧甲基纤维素钠(溶剂);B组:ORN[400mg/(kg.d)];C组:ORN[400m... 详细信息

目的:探讨L-肉碱(LC)对奥硝唑(ORN)所致的弱精子症雄性大鼠的治疗作用。方法:性成熟雄性SD大鼠(200～230g)40只,随机均分为5组,连续灌胃20d,1次/d,每次1ml。A组(对照组):0.5%的羧甲基纤维素钠(溶剂);B组:ORN[400mg/(kg.d)];C组:ORN[400mg/(kg.d)]+LC[100mg/(kg.d)];D组:ORN[800mg/(kg.d)];E组:ORN[800mg/(kg.d)]+LC[100mg/(kg.d)]。将各组半数大鼠末次给药24h后,麻醉处死,取附睾,进行精子活力检测,并对附睾尾精子进行计数,剩余大鼠进行交配实验。结果:①与A组相比,B组,D组附睾头和附睾尾精子活力显著降低(P<0.05);精子数目显著减少(P<0.05)。②与B组相比,C组精子活力明显升高(P<0.05),精子数目明显增多(P<0.05),与A组比较无显著差异(P>0.05)。③E组大鼠的精子活力没有显著的提高,精子数目无明显增多,并且与D组相比没有差别(P>0.05)。结论:LC治疗后能提高ORN所致弱精子症大鼠的精子活力,增加精子密度。

关键词： L-肉碱奥硝唑弱精子症精子活力精子密度雄性大鼠

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人血清中地尔硫高效液相色谱法测定及药代动力学参数

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色谱 1997年第5期15卷 451-453页

作者：李克张昕袁倚盛罗楠谭力解放军医学检验中心南京军区南京总医院中心仪器分析室

建立了反相高效液相色谱法监测人口服地尔硫艹卓缓释片后血药浓度。血样用正己烷－氯仿－异丙醇混合溶剂（６０４０５）提取后，以Ｃ１８化学键合硅胶为固定相，甲醇－水－三乙胺为流动相，安定为内标，在２３９ｎｍ波长处定量检测。血... 详细信息

建立了反相高效液相色谱法监测人口服地尔硫艹卓缓释片后血药浓度。血样用正己烷－氯仿－异丙醇混合溶剂（６０４０５）提取后，以Ｃ１８化学键合硅胶为固定相，甲醇－水－三乙胺为流动相，安定为内标，在２３９ｎｍ波长处定量检测。血药浓度在１５～３００μｇ／Ｌ范围内线性关系良好，最低检测浓度为３μｇ／Ｌ。批内（ｎ＝７）及批间（ｎ＝５）测定相对标准偏差分别小于６．８％和８．４％，回收率为９１％～１０４％。监测了８名健康人口服盐酸地尔硫艹卓缓释片后的不同时间的血药浓度变化，计算了有关的药代动力学参数。

关键词：高效液相色谱地尔硫Zuo 人血清硫氮Zuo酮

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