检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2003年第12期26卷 785-787页

作者：朱晓辉何菊英朱忠勇南京军区福州总医院检验医学中心 350025

血液分析仪的普遍使用，大大提高了临床血液学检验的质量和效率。然而，这类仪器在鉴别血细胞的形态和结构等方面还不够完善，目前仅可作为全因细胞分析的一种过筛手段。在遇见疑问时，还必须在显微镜下复查血片，经过确认、修正或补充... 详细信息

血液分析仪的普遍使用，大大提高了临床血液学检验的质量和效率。然而，这类仪器在鉴别血细胞的形态和结构等方面还不够完善，目前仅可作为全因细胞分析的一种过筛手段。在遇见疑问时，还必须在显微镜下复查血片，经过确认、修正或补充后才能发出报告。关于复查的标准、内容、方法和程序，现有的检验医学教科书和操作规程都没有明确的论述。为此，我们根据实践和体会，并结合国内外有关文献，对其标准、内容、方法和程序等作初步探讨。

关键词：血液分析仪复查内容血片复查方法复查程序

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一起死亡事故中难辨尸体的个体基因识别

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解放军医学杂志 2006年第10期31卷 994-996页

作者：兰风华郑德柱黄梁浒柯龙凤涂向东程烽王志红王水良张朵庄岳鹏董荔红南京军区福州总医院分子医学研究中心

目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA,采用荧光多重PCR技术,扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列(STR)基因座。... 详细信息

目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA,采用荧光多重PCR技术,扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列(STR)基因座。将遇难者STR基因型与父母的STR基因型进行比对,确定遇难者的家庭归属。结果常规病理检查示部分肌肉组织结构完全破坏,但软骨组织结构尚完整。肌肉组织基因组DNA的凝胶电泳呈3种类型:基本无降解、部分降解、完全降解。只有部分肌肉组织DNA可用于确定STR基因型,所有软骨的DNA样本均可用于STR-PCR。结论以STR基因型分析为基础的亲子鉴定技术是确定事故遇难者身份的有效方法。对腐烂尸体的STR分析而言,尸体软骨组织是首选。

关键词：事故 DNA指纹法 DNA 卫星聚合酶链反应

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细胞核抗原Sm B′的基因克隆和原核表达

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临床检验杂志 2006年第3期24卷 166-168页

作者：杨湘越兰小鹏廖剑钟智强朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

目的为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B′。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B′全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEx-5T载体中,转入大肠杆菌B... 详细信息

目的为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B′。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B′全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEx-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(western blot)鉴定。结果PCR产物约为700 bp,与预期657 bp接近,测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-5T-Sm B′重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和western blot结果显示融合蛋白分子量为51 000,具有与抗Sm B′抗体的反应性。结论成功克隆表达核抗原Sm B′,为建立抗Sm自身抗体检测方法奠定了基础。

关键词：核抗原克隆分子融合基因

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TLR序列在SRP54蛋白与SRPRNA和信号肽结合中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第6期21卷 781-785页

作者：黄俏佳兰风华董荔红朱忠勇南京军区福州总医院分子医学研究中心福州350025

SRP54蛋白是信号识别颗粒(signal recognition particle)的一个关键组分.对人SRP54蛋白328～330位的TLR3个氨基酸进行人工诱变,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达了A3突变体,并对A3突变体进行纯化和Superdex75凝胶过滤分析.观察到A3突变... 详细信息

SRP54蛋白是信号识别颗粒(signal recognition particle)的一个关键组分.对人SRP54蛋白328～330位的TLR3个氨基酸进行人工诱变,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达了A3突变体,并对A3突变体进行纯化和Superdex75凝胶过滤分析.观察到A3突变体丧失了与SRPRNA结合的能力,其自身也不能形成二聚体.结果证明,TLR这3个氨基酸残基与二聚体结构的形成有关,TLR是SRP54蛋白结合SRPRNA和新生蛋白质信号肽所必需的关键性氨基酸序列.

关键词：信号识别颗粒信号肽定点诱变凝胶过滤

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肝癌细胞系BEL-7402中siRNA表达载体介导靶向c-myc基因

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肿瘤 2006年第4期26卷 307-310页

作者：黄清流连云宗兰风华王水良南京军区福州总医院医学检验中心实验科

目的:探索经载体介导的RNA干涉对肝癌细胞cmyc基因表达抑制的可行性。方法:设计并合成2条靶向癌基因cmyc的RNA干涉模板片段,分别将其连接至pSilencer1.0U6载体上构建siRNA真核表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入BEL7402肝癌细胞... 详细信息

目的:探索经载体介导的RNA干涉对肝癌细胞cmyc基因表达抑制的可行性。方法:设计并合成2条靶向癌基因cmyc的RNA干涉模板片段,分别将其连接至pSilencer1.0U6载体上构建siRNA真核表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入BEL7402肝癌细胞株。半定量RTPCR分析cmyc基因的表达抑制效率,以及cmyc基因表达下调细胞中CDK4、hTERT和Gadd45β基因表达的改变。结果:获得2个能在细胞内有效转录生成靶向cmyc基因siRNA的重组载体pSicmyc1和pSicmyc2;其中pSicmyc2可有效介导肝癌细胞BEL7402cmyc基因的表达抑制,抑制率高达90%以上;在cmyc基因经RNAi抑制的细胞中,CDK4和hTERT基因的表达分别下调至85%和57%;而Gadd45β的表达上调约110%。结论:肝癌细胞BEL7402中cmyc基因的表达可被载体介导诱发的RNA干涉有效抑制,进而导致细胞中与增殖和凋亡相关基因的表达改变。

关键词：基因 c-myc RNA干扰基因表达 BEL-7402细胞肝癌

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血清甲状腺球蛋白抗体的斑点免疫金渗滤法

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临床检验杂志 1996年第6期14卷 301-302页

作者：冯修高唐玉钗朱忠勇叶大付杨丽珠李珍儿兰小鹏黄俏佳南京军区福州总医院全军医学检验中心

血清甲状腺球蛋白抗体的斑点免疫金渗滤法冯修高唐玉钗朱忠勇叶大付杨丽珠①李珍儿＊兰小鹏黄俏佳（南京军区福州总医院全军医学检验中心，福州３５０００１）关键词斑点免疫金渗滤法抗体甲状腺球蛋白血清甲状腺球蛋白抗体（ＴｇＡｂ）... 详细信息

血清甲状腺球蛋白抗体的斑点免疫金渗滤法冯修高唐玉钗朱忠勇叶大付杨丽珠①李珍儿＊兰小鹏黄俏佳（南京军区福州总医院全军医学检验中心，福州３５０００１）关键词斑点免疫金渗滤法抗体甲状腺球蛋白血清甲状腺球蛋白抗体（ＴｇＡｂ）的检测，对自身免疫性甲状腺疾病的诊...

关键词：斑点免疫金渗滤法抗体甲状腺球蛋白血清

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Notch1受体表达水平在移植肾排斥反应诊断中的意义

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中华器官移植杂志 2010年第1期31卷 25-27页

作者：郑凯谭建明吴卫真杨顺良南京军区福州总医院全军器官移植中心福州350025

目的探讨肾移植受者外周血单个核细胞（PBMC）上Notch1受体表达水平与移植肾排斥反应之间的关系。方法肾移植受者40例均采用环孢素A（或他克莫司）、吗替麦考酚酯和糖皮质激素预防排斥反应。根据移植肾穿刺活检结果（Banff’97标准）将... 详细信息

目的探讨肾移植受者外周血单个核细胞（PBMC）上Notch1受体表达水平与移植肾排斥反应之间的关系。方法肾移植受者40例均采用环孢素A（或他克莫司）、吗替麦考酚酯和糖皮质激素预防排斥反应。根据移植肾穿刺活检结果（Banff’97标准）将受者分成3组，其中急性排斥反应组11例，钙调磷酸酶抑制剂（CNI）中毒组16例，肾功能稳定组13例，抽取血液样本；急性排斥反应组中有8例于排斥反应逆转后再次抽取血液样本；另取11名正常人的血液样本作为对照。常规提取样本中PBMC，用流式细胞仪间接荧光法检测Notch1的表达水平。结果急性排斥反应组受者外周血PBMC上Notch1的荧光强度明显高于CNI中毒组、肾功能稳定组和正常对照组（P〈0．05）。CNI中毒组、肾功能稳定组和正常对照组荧光强度的差异无统计学意义（P〉0．05）。40例受者外周血PBMC上Notch1的荧光强度为2．60±2．37，血肌酐为（241．2±137．1）／2mol／L，二者之间存在相关性（r=0．358，P〈0．05）。急性排斥反应组受者排斥反应逆转后的Notch1的荧光强度低于排斥反应期间，差异有统计学意义。结论肾移植受者急性排斥反应期间外周血PBMC上Notch1受体表达水平增高。Notch1可做为监测肾移植受者免疫状态的指标，其表达水平与同期肌酐水平有相关性，可在一定程度上反映排斥反应对肾功能的损害程度。

关键词： Notch1 移植物排斥肾移植流式细胞术

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舒莱在肾移植免疫诱导治疗中有效性和安全性研究

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免疫学杂志 2007年第5期23卷 556-558页

作者：郑凯谭建明吴卫真杨顺良徐廷昭南京军区福州总医院全军器官移植中心福州350025

目的探讨在肾移植免疫诱导治疗中巴利昔单抗(舒莱)的有效性和安全性。方法随机选取69例肾移植受者,在常规三联免疫抑制方案的基础上,分别接受舒莱或ATG诱导治疗,对比观察两组的人/肾存活率、排斥反应以及包括感染在内的药物相关副作用... 详细信息

目的探讨在肾移植免疫诱导治疗中巴利昔单抗(舒莱)的有效性和安全性。方法随机选取69例肾移植受者,在常规三联免疫抑制方案的基础上,分别接受舒莱或ATG诱导治疗,对比观察两组的人/肾存活率、排斥反应以及包括感染在内的药物相关副作用的差异。结果接受舒莱的患者组药物相关副作用显著低于接受ATG的患者组(P<0.05),两组患者的人/肾存活率、急性排斥反应和肺部感染的发生率均无显著差异(P>0.05)。移植物功能(移植后血肌酐水平及下降速度)在移植早期舒莱组优于ATG组,而长期随访结果显示两组之间无显著差异。结论肾移植受者接受巴利昔单抗(舒莱)免疫诱导治疗是安全和有效的,与ATG诱导治疗方法比较具有更少的副作用。

关键词：舒莱 ATG 肾移植诱导治疗

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NADH-细胞色素b5还原酶突变型蛋白的结构与功能研究

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临床检验杂志 2007年第1期25卷 13-16页

作者：郑德柱兰风华黄粱浒吴玉水谢飞程烽朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印... 详细信息

目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印迹鉴定表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白。应用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RL72P融合蛋白,比较GST-b5R和GST-b5RL72P酶活性。结果突变型酶活性低,为野生型的3%。结论L72P突变可引起蛋白质二级结构改变从而导致酶的活性下降。

关键词： NADH-细胞色素b5还原酶原核表达 GST融合蛋白亲和层析

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怎样看待血液及尿分析仪的过筛作用

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临床检验杂志 2003年第6期21卷 321-323页

作者：朱忠勇南京军区福州总医院全军医学检验中心福州350025

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微... 详细信息

当前，自动化的血液及尿分析仪在我国已相当普及，它不仅大大提高了临床检验的效率，减轻劳动强度，促进了检验方法的标准化和结果的可比性，而且在一定程度上也提高了检验的精密度和准确性。这类仪器的显著特点之一是，将原先要在显微镜下辨认或计数的细胞，改变为根据细胞的大小、内部和表面结构、加入特殊试剂（如溶血剂、细胞化学试剂和染色剂等）后细胞的变化，用测量其电阻、对高频电磁波的传导性、在不同角度测细胞对光的散射程度以及用光度计测定颜色变化等光学和电学方法，直接或间接地加以计数和区分。虽然这些方法的设计都是有理论根据，并历经数十年的研究、改进和实际应用的考验，认为方法已成熟，所开发的仪器及配套试剂经过法定机构（如美国的FDA）批准后才进入市场的，但它们毕竟不是在显微镜下直接观察细胞，在有些情况，特别有病理条件下，其测定结果并不可靠或难以确定，还需要在显微镜下进行复检（review），这是经过多年实践后的一致看法，并且也是产品监控机构以及所有仪器厂家所承认并要求做到的。因此说，这类仪器仅仅是一种过筛性质的仪器。

关键词：血液分析仪尿液分析仪过筛作用显微镜检查临床检验

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