检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2022年第12期53卷 4450-4460页

作者：李林宫彬彬王广力赵梅张源淑邢台学院生物科学与工程学院邢台054001 河北医科大学附属邢台人民医院病理科邢台054031 南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

通过向油酸诱导的大鼠肝成纤维细胞(BRL-3A)脂肪变性模型中添加不同浓度(2、4、8 mmol·L^(-1))的乙酸钠,探讨其对脂肪变性细胞模型脂代谢的调控机理及细胞损伤的修复作用。试验方法:1)用不同浓度的油酸(0、0.03、0.06、0.12、0.24... 详细信息

通过向油酸诱导的大鼠肝成纤维细胞(BRL-3A)脂肪变性模型中添加不同浓度(2、4、8 mmol·L^(-1))的乙酸钠,探讨其对脂肪变性细胞模型脂代谢的调控机理及细胞损伤的修复作用。试验方法:1)用不同浓度的油酸(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48)mmol·L^(-1)刺激BRL-3A细胞24 h后,分别检测细胞相对活力、总脂滴面积、三酰甘油(TG)含量、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,建立脂肪变性细胞模型;2)向BRL-3A细胞中添加不同浓度的乙酸钠,通过流式细胞术检测细胞凋亡率;3)用不同浓度的乙酸钠和0.12 mmol·L^(-1)油酸共同孵育BRL-3A细胞,试验分为4组,分别为油酸处理组、2 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组、4 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组和8 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组,分别对细胞脂滴、TG含量、AST、ALT活性、AMPK信号通路蛋白以及脂代谢关键基因进行检测。结果显示:1)用0.12 mmol·L^(-1)油酸处理BRL-3A细胞24 h,成功建立BRL-3A细胞脂肪变性模型。2)不同浓度的乙酸钠对BRL-3A细胞凋亡率没有影响;3)4、8 mmol·L^(-1)乙酸钠处理脂肪变性细胞模型后,与油酸处理组相比,细胞总脂滴面积、每平方毫米脂滴数、TG含量、AST和ALT活性均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下降,P-AMPK表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上升;脂合成代谢相关基因ACC、FAS以及SCD-1 mRNA表达水平均有一定程度下降;脂分解代谢相关基因CPT-1、CPT-2以及ACO mRNA表达水平均有一定程度上升。本研究表明,乙酸钠会通过AMPK通路激活脂分解代谢,减轻肝细胞脂质蓄积,并且对油酸诱导的BRL-3A细胞脂肪变性模型的损伤具有一定缓解作用。

关键词： BRL-3A细胞乙酸钠脂肪变性细胞模型脂代谢

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不同粗饲料苜蓿干草和稻秸对湖羊饲喂效果的比较研究

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动物营养学报 2020年第11期32卷 5285-5292页

作者：陈希姜婉茹高铭谣谢娜娜张源淑南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

粗饲料是反刍动物不可或缺的营养来源,本研究比较了苜蓿干草和稻秸对湖羊的饲喂效果。选取12只体重[(41.25±3.07) kg]相近的健康成年雄性湖羊,随机分为苜蓿干草组(饲粮为精料+苜蓿干草)和稻秸组(饲粮为精料+稻秸),每组6只。2组饲... 详细信息

粗饲料是反刍动物不可或缺的营养来源,本研究比较了苜蓿干草和稻秸对湖羊的饲喂效果。选取12只体重[(41.25±3.07) kg]相近的健康成年雄性湖羊,随机分为苜蓿干草组(饲粮为精料+苜蓿干草)和稻秸组(饲粮为精料+稻秸),每组6只。2组饲粮精粗比均为60∶40,预试期10 d,正试期为28 d。结果显示:1)与饲喂苜蓿干草相比,饲喂稻秸显著降低了湖羊的平均日采食量(P<0.05),但平均日增重和料重比没有显著差异(P>0.05)。2)2组湖羊胸腺、肝脏、脾脏和胰腺指数无显著差异(P>0.05);2组湖羊胰腺、肝脏和脾脏组织均无异常变化。3)与苜蓿干草组相比,稻秸组湖羊血液中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)的活性极显著降低(P<0.01),葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)含量与谷丙转氨酶(ALT)活性无显著差异(P>0.05)。4)与饲喂苜蓿干草相比,饲喂稻秸显著降低了湖羊血液中胰岛素(INS)的含量(P<0.05),显著升高了瘦素(LEP)和胆囊收缩素(CCK)的含量(P>0.05),甲状腺素(T4)和皮质醇(COR)含量无显著变化(P>0.05)。由此得出,单独用稻秸代替苜蓿干草作为粗饲料饲喂对湖羊整体健康无影响;饲喂稻秸通过上调湖羊血液中瘦素和胆囊收缩素的含量抑制湖羊的食欲,降低湖羊的采食量。

关键词：湖羊苜蓿干草稻秸采食量激素

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中国麻鸭血管紧张素转化酶2(ACE2)的基因克隆及基因结构的序列解析

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畜牧兽医学报 2020年第7期51卷 1597-1606页

作者：李帅纪晓霞杨博许濛张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

血管紧张素转化酶2(ACE2)被发现以来,其病理生理功能,特别是作为SARS、COVID-19等冠状病毒侵入细胞的功能性受体,显示了巨大的潜能,明确其在不同物种的基因序列及结构可为冠状病毒感染机制研究提供依据。本研究以中国麻鸭为研究对象,利... 详细信息

血管紧张素转化酶2(ACE2)被发现以来,其病理生理功能,特别是作为SARS、COVID-19等冠状病毒侵入细胞的功能性受体,显示了巨大的潜能,明确其在不同物种的基因序列及结构可为冠状病毒感染机制研究提供依据。本研究以中国麻鸭为研究对象,利用RT-PCR和Western blot检测ACE2在中国麻鸭各组织中的表达,然后用PCR技术,扩增出中国麻鸭ACE2基因的完整ORF序列,再TA克隆至pMD-19T载体中进行测序,对所得序列进行生物信息学解析。结果证实,ACE2在中国麻鸭心、肝、肺、肾等组织中均有表达。基因克隆结果显示,该中国麻鸭ACE2基因的CDS序列全长为2435 bp,编码805个氨基酸残基,与人ACE2核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为66.2%和66.4%,且处在不同进化树分支上。通过对与SARS病毒S蛋白结合有关的18个关键氨基酸残基分析发现,中国麻鸭除第330和353位氨基酸外,其余均与人不相同。结构分析发现,中国麻鸭ACE2为Ⅰ型跨膜蛋白,有多处N-糖基化位点。研究首次获得中国麻鸭ACE2基因的完整ORF序列及相关基础资料,所得序列已上传GenBank并被成功收录,研究结果为开展ACE2在鸭上的功能研究提供了理论依据。

关键词：中国麻鸭血管紧张素转化酶2 基因克隆基因序列解析

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慢性皮质酮暴露对肉鸡生长性能及肝脏铁稳态的影响

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南京农业大学学报 2020年第4期43卷 714-719页

作者：刘明妮胡云方茜马文强赵茹茜南京农业大学农业农村部动物生理生化重点实验室/动物医学院江苏南京210095

[目的]本文旨在研究慢性皮质酮处理后肉鸡生长性能及肝脏铁稳态的变化。[方法]选取30只49日龄如皋黄羽雄性肉鸡,随机均分为对照组和皮质酮组。肉鸡均饲喂玉米豆粕型日粮,对照组肉鸡注射15%(体积分数)乙醇4.0 mg·kg^-1,皮质酮组肉... 详细信息

[目的]本文旨在研究慢性皮质酮处理后肉鸡生长性能及肝脏铁稳态的变化。[方法]选取30只49日龄如皋黄羽雄性肉鸡,随机均分为对照组和皮质酮组。肉鸡均饲喂玉米豆粕型日粮,对照组肉鸡注射15%(体积分数)乙醇4.0 mg·kg^-1,皮质酮组肉鸡注射4.0 mg·kg^-1皮质酮,连续注射7 d。记录试验起始及结束时肉鸡体质量,检测肉鸡血清及组织铁代谢指标、十二指肠和肝脏铁代谢相关基因及蛋白的表达。[结果]与对照组相比,皮质酮暴露极显著抑制肉鸡生长(P<0.01),且极显著增加肉鸡血清铁含量,提高总铁结合力、不饱和铁结合力和转铁蛋白饱和度(P<0.01)及上调肝脏转铁蛋白(TF)表达(P<0.01),但降低肝脏铁含量(P<0.01)及肝脏转铁蛋白受体1(TFR1)蛋白的表达(P=0.06)。[结论]慢性皮质酮暴露可降低肉鸡生长性能,增加血清铁水平和总铁结合力,减少肝脏铁沉积,并且此暴露对肝脏铁稳态的调节与TF高表达和TFR1低表达密切相关。

关键词：皮质酮肉鸡肝脏铁代谢

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文冠果粕替代豆粕对21~42日龄肉鸡生长性能和盲肠菌群结构的影响

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动物营养学报 2020年第8期32卷 3624-3635页

作者：张云龙郑卫江姚文南京农业大学消化道生物实验室江苏省消化道营养与动物健康重点实验室南京210095 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

本试验旨在探究文冠果粕替代豆粕对21~42日龄肉鸡生长性能、屠宰性能、养分利用率、盲肠食糜短链脂肪酸组成及菌群结构的影响。选取192只21日龄爱拔益加(AA)肉鸡,随机分为3组,每组8个重复,每个重复8只鸡(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲... 详细信息

本试验旨在探究文冠果粕替代豆粕对21~42日龄肉鸡生长性能、屠宰性能、养分利用率、盲肠食糜短链脂肪酸组成及菌群结构的影响。选取192只21日龄爱拔益加(AA)肉鸡,随机分为3组,每组8个重复,每个重复8只鸡(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别饲喂用文冠果粕替代50%和100%豆粕的饲粮,试验期为21 d。试验期间每周记录体重和采食量;于试验第20天采集粪样,测定养分表观利用率;于试验第21天屠宰。结果表明:1)与对照组相比,文冠果粕替代豆粕显著降低肉鸡42日龄体重、平均日增重和平均日采食量(P<0.05);且试验Ⅱ组肉鸡屠宰率和全净膛率显著低于对照组(P<0.05)。2)与对照组相比,文冠果粕替代豆粕显著降低肉鸡饲粮粗灰分表观利用率(P<0.05),且试验Ⅱ组肉鸡饲粮粗蛋白质表观利用率显著低于对照组(P<0.05)。3)与对照组相比,文冠果粕替代豆粕不仅显著降低肉鸡盲肠食糜中短链脂肪酸含量(P<0.05),还显著降低了盲肠食糜中真杆菌属coprostanoligenes群([Eubacterium] coprostanoligenes group)和风疹菌属(Tyzzerella)的相对丰度(P <0.05);此外,试验Ⅱ组肉鸡盲肠食糜中不可培养巴氏杆菌科相关菌属(Barnesiellaceae uncultured)的相对丰度也显著降低(P<0.05),但粪杆菌属(Coprobacter)和颤杆菌属(Oscillibacter)的相对丰度显著升高(P<0.05)。综上,文冠果粕替代饲粮中豆粕对21~42日龄阶段肉鸡生长性能、养分利用率和肠道菌群结构具有一定的负面作用;因此,肉鸡饲粮中文冠果粕替代豆粕的比例建议低于50%(占饲粮比例<14%)。

关键词：文冠果粕豆粕肉鸡生长性能盲肠短链脂肪酸菌群结构

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三种小鼠肠道病毒多重PCR检测方法的建立和初步应用

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实验动物科学 2024年第5期41卷 36-41页

作者：赵迎峰马畅刘彪尤金炜张旭亮恽时锋中国人民解放军东部战区总医院第三派驻门诊部南京210002 中国人民解放军东部战区总医院医疗保障中心实验动物室南京210002 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

目的建立一种同时检测小鼠细小病毒(MVM)、肝炎病毒(MHV)和诺如病毒(MNV)的多重PCR检测方法。方法分别根据MVM、MHV和MNV基因保守区应用软件设计特异性引物,构建在同一反应体系中可同时检测MVM、MHV和MNV的多重PCR检测方法,验证其特异... 详细信息

目的建立一种同时检测小鼠细小病毒(MVM)、肝炎病毒(MHV)和诺如病毒(MNV)的多重PCR检测方法。方法分别根据MVM、MHV和MNV基因保守区应用软件设计特异性引物,构建在同一反应体系中可同时检测MVM、MHV和MNV的多重PCR检测方法,验证其特异性、敏感性及重复性,并进行初步检测应用。结果通过优化PCR扩增条件成功建立多重PCR检测方法,特异性实验结果表明,该方法可同时扩增MVM、MHV和MNV的目的片段,片段大小与预期相符,未出现非特异性片段;敏感性测试显示,MVM、MHV和MNV三种病毒的最低检测下限为10^(2)、10^(4)、10^(2) copies/μL;重复性实验显示该方法在不同时间、不同场所应用的重复性稳定。应用该方法对287份小鼠结肠匀浆样品进行检测,与单重PCR检测结果完全一致。结论所建立的MVM、MHV和MNV三种病毒多重PCR检测方法具有特异性高、敏感性强和重复性优的特点,适用于三种病原体感染的临床样品检测和大量样品的流行病学调查。

关键词：小鼠细小病毒小鼠肝炎病毒小鼠诺如病毒多重PCR检测方法

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肾素-血管紧张素系统2条通路在油酸致大鼠BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝中的作用

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南京农业大学学报 2020年第5期43卷 910-918页

作者：王换换刘颖李帅何晟朱斌张源淑南京农业大学农业农村部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

[目的]通过建立油酸诱导的大鼠肝脏间质BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝(NAFLD)损伤模型,探讨BRL-3A细胞中RAS的ACE/AngⅡ/AT1R和ACE2/Ang-1-7/Mas这2条通路相互负向调节与NAFLD细胞损伤的关系。[方法]采用不同浓度油酸(0.025、0.05、0.1和0.2... 详细信息

[目的]通过建立油酸诱导的大鼠肝脏间质BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝(NAFLD)损伤模型,探讨BRL-3A细胞中RAS的ACE/AngⅡ/AT1R和ACE2/Ang-1-7/Mas这2条通路相互负向调节与NAFLD细胞损伤的关系。[方法]采用不同浓度油酸(0.025、0.05、0.1和0.2 mmol·L^-1)处理BRL-3A细胞24 h,通过检测细胞活力、细胞内甘油三酯(TG)含量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性以及油红染色确立NAFLD细胞模型条件,然后选取低、中、高3个浓度(0.025、0.1和0.2 mmol·L^-1)油酸作用于细胞24 h,用ELISA法检测细胞上清液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)水平;Western blot分析细胞内血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平;斯皮尔曼相关分析法分析油酸浓度与细胞内ACE、ACE2表达水平的相关性。[结果]1)用0.1 mmol·L^-1油酸处理BRL-3A细胞24 h,成功建立BRL-3A细胞NAFLD模型。2)油酸处理24 h后,BRL-3A细胞出现脂滴沉积,在0.025 mmol·L^-1油酸(低浓度)组,ACE2、MasR表达水平和Ang1-7水平有升高趋势,AngⅡ水平与AT1R表达水平下降,ACE/ACE2值下降;0.1 mmol·L^-1油酸(中浓度)组ACE、AT1R表达水平显著升高,其他RAS成员变化不明显;0.2 mmol·L^-1油酸(高浓度)组,ACE2、MasR表达水平和Ang1-7水平下降,AngⅡ水平和ACE、AT1R表达水平及ACE/ACE2值升高。3)斯皮尔曼相关分析显示,油酸浓度、血液相关生化指标(TG含量、AST和ALT活性)和脂滴数及脂滴面积与ACE2表达水平和Ang1-7水平负相关,而与ACE表达水平和AngⅡ水平正相关。[结论]BRL-3A细胞中的2条轴共同参与了油酸致BRL-3A细胞NAFLD损伤的发生和发展过程。低浓度油酸时,ACE2介导的Ang1-7/MasR通路占优势;高浓度油酸处理细胞损伤加重,ACE介导的AngⅡ/AT1R通路占主导地位。ACE2与油酸致细胞炎性损伤的程度呈显著负相关关系。

关键词：血管紧张素系统(RAS) BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝病(NAFLD)细胞模型

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添加益生菌和苜蓿草粉对肉鸡生长性能和肠道菌群组成的影响

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畜牧与兽医 2020年第9期52卷 50-56页

作者：冯宇妍梅文晴姚志浩倪迎冬南京农业大学农业部动物生理生化重点实验室江苏南京210095

旨在探索饲料中添加益生菌和苜蓿草粉对肉鸡生长性能及肠道菌群组成的影响。试验选取144只1日龄青脚麻鸡分为3组,即对照组、益生菌组和苜蓿组,每组6个重复,每个重复8只鸡。益生菌组肉鸡于2日龄以每天60 mg/只的剂量饮水饲喂益生菌;苜蓿... 详细信息

旨在探索饲料中添加益生菌和苜蓿草粉对肉鸡生长性能及肠道菌群组成的影响。试验选取144只1日龄青脚麻鸡分为3组,即对照组、益生菌组和苜蓿组,每组6个重复,每个重复8只鸡。益生菌组肉鸡于2日龄以每天60 mg/只的剂量饮水饲喂益生菌;苜蓿组肉鸡于22日龄在饲料中添加4%苜蓿,饲喂3周。试验期间记录肉鸡采食量,并分别于第8、15、22、35、44日龄时称重;于44日龄时屠宰采集肠内容物和黏膜上皮组织,观察十二指肠上皮形态结构,采用实时荧光定量PCR检测肠道紧密连接、营养素转运等相关基因的表达,16S高通量测序法检测盲肠内容物微生物的组成。生产性能结果:与对照组相比,益生菌组和苜蓿组肉鸡平均日增重升高,36~44日龄时,料重比有降低趋势,但差异均不显著(P>0.05);实时荧光定量PCR结果显示:和对照组相比,早期益生菌处理显著升高肉鸡十二指肠Occludin基因mRNA的表达水平(P<0.05);高通量测序结果:和对照组相比,益生菌和苜蓿处理提高了肉鸡盲肠细菌多样性和拟杆菌门/厚壁菌门细菌丰度比值,益生菌组肉鸡盲肠狄氏副拟杆菌属的丰度相比对照组和苜蓿组显著升高(P<0.05),乳酸杆菌属等有益菌的丰度也有一定程度升高,但差异不显著(P>0.05)。研究表明,早期益生菌处理和苜蓿处理均可提高肉鸡的生长性能,肉鸡生长性能的提高可能与肠道菌群多样性的提高以及拟杆菌和乳酸杆菌等有益菌在肠道的定植有关。

关键词：益生菌苜蓿肠道形态小肠上皮结构盲肠微生物区系肉鸡

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姜黄素对樱桃谷肉鸭生长性能、胸肌肉品质和肠道健康的影响

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畜牧与兽医 2023年第7期55卷 29-37页

作者：王军杨晓志齐秋子任善茂张响英孙国波穆晓惠李晓鸣张干生纪荣超李杨吕海玲陈超杨伟光周仕卓贾逸敏王健江苏农牧科技职业学院江苏泰州225300 国家水禽基因库江苏泰州225511 泰州丰达农牧科技有限公司江苏泰州225511 南京农业大学动物医学院/农业农村部生理生化重点实验室江苏南京210095 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心江苏南京210095

为了探究姜黄素对樱桃谷肉鸭生长性能、胸肌肉品质和肠道健康的影响,将480只1日龄健康樱桃谷肉鸭随机分为4组,对照组饲喂正常日粮,试验组日粮分别添加150、300和450 mg/kg的姜黄素,试验周期为42 d。结果表明:日粮中添加姜黄素对肉鸭生... 详细信息

为了探究姜黄素对樱桃谷肉鸭生长性能、胸肌肉品质和肠道健康的影响,将480只1日龄健康樱桃谷肉鸭随机分为4组,对照组饲喂正常日粮,试验组日粮分别添加150、300和450 mg/kg的姜黄素,试验周期为42 d。结果表明:日粮中添加姜黄素对肉鸭生产性能无显著影响,但添加450 mg/kg姜黄素显著降低了胸肌重。日粮中添加150和450 mg/kg姜黄素显著缓解了宰后24 h的pH值下降。肠道HE染色结果显示:日粮中添加姜黄素显著降低了十二指肠的绒毛高度和绒隐比值,同时显著增加隐窝深度。肠道基因表达结果显示:日粮中分别添加300和450 mg/kg姜黄素显著降低了肠道干细胞增殖标志物Bmi1的mRNA含量,并促进了炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。此外,日粮中添加姜黄素显著降低了血浆谷胱甘肽(GSH)的含量和血红素加氧酶1(HO1)的mRNA表达量。由此表明:日粮中添加150 mg/kg姜黄素能改善樱桃谷肉鸭的肌肉品质,改善机体抗氧化能力,但添加450 mg/kg姜黄素会导致胸肌增重减少,肠黏膜损伤和生长抑制。

关键词：樱桃谷肉鸭姜黄素生产性能肌肉品质肠道健康

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白羽肉鸡血管紧张素转换酶2(ACE2)全基因克隆及序列信息分析

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畜牧与兽医 2020年第3期52卷 38-44页

作者：纪晓霞李帅许濛杨博张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

血管紧张素转换酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)作为血管紧张素系统(Renin-Angiotensin System,RAS)的重要一员,对鸡ACE2的研究尚没有开展。本研究以白羽肉鸡为研究对象,从白羽肉鸡空肠组织中扩增出ACE2基因编码区的特异性片... 详细信息

血管紧张素转换酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)作为血管紧张素系统(Renin-Angiotensin System,RAS)的重要一员,对鸡ACE2的研究尚没有开展。本研究以白羽肉鸡为研究对象,从白羽肉鸡空肠组织中扩增出ACE2基因编码区的特异性片段,TA克隆到pMD-19T载体并转到大肠杆菌DH5α感受态细胞,对生长出的单菌落进行蓝白斑筛选、菌液PCR、酶切验证后测序,对所得序列进行了生物信息学分析。结果:本研究明确了ACE2在白羽肉鸡体内有存在,分布表达有组织特异性,在消化系统及肾脏有较高表达。并且首次成功克隆了白羽肉鸡ACE2全基因序列,共包括2,444个核苷酸,编码808个氨基酸残基,同源性及遗传进化结果一致。该基因编码ACE2蛋白属不稳定、亲水性蛋白,蛋白信号肽序列位于第1-17aa之间,蛋白跨膜螺旋预测为I型跨膜蛋白。研究所得序列已上传GenBank(基因序列号为MK560199),为ACE2在肉鸡及禽类方面的研究提供了基础资料。

关键词：白羽肉鸡 ACE2 表达定位基因克隆生物信息学

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