检索结果-内蒙古大学图书馆

南京农业大学学报 2025年

作者：龚丽柏艾梅梁志乐朱桢栀肖栋张昌伟侯喜林李英南京农业大学作物遗传与种质创新利用全国重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心/园艺学院

[目的]本文旨在克隆不结球白菜BcFBN6a基因和探究其在叶绿素积累中的功能。[方法]以不结球白菜‘苏州青’cDNA为模板，同源克隆BcFBN6a的CDS序列，并与其它物种的同源蛋白序列进行保守结构域、系统进化和保守基序分析；构建BcFBN6a-pRI... 详细信息

[目的]本文旨在克隆不结球白菜BcFBN6a基因和探究其在叶绿素积累中的功能。[方法]以不结球白菜‘苏州青’cDNA为模板，同源克隆BcFBN6a的CDS序列，并与其它物种的同源蛋白序列进行保守结构域、系统进化和保守基序分析；构建BcFBN6a-pRI101载体并转化农杆菌，瞬时注射烟草叶片研究BcFBN6a的亚细胞定位；利用RT-qPCR技术，分析BcFBN6a在不同组织的表达模式；利用农杆菌介导的蘸花法和病毒诱导的基因沉默（VIGS）技术分别获取过表达BcFBN6a转基因拟南芥和BcFBN6a沉默不结球白菜植株，研究BcFBN6a在叶绿素积累中的功能；利用GeneMANIA数据库预测BcFBN6a的互作蛋白，并通过酵母双杂交（Y2H）、双分子荧光互补（BiFC）和荧光素酶互补成像（LCI）试验进一步验证。[结果]BcFBN6a的ORF全长714 bp，含有典型的PAP保守结构域，与芜菁的亲缘关系最近，其编码蛋白定位于叶绿体。BcFBN6a在光合组织叶片中高表达。拟南芥中异源过表达BcFBN6a显著增加了叶片中叶绿素的积累，AtHEMA1、AtCHLH、AtGUN4、AtPORB等叶绿素生物合成相关基因表达水平显著上调。VIGS诱导的BcFBN6a沉默植株中的叶绿素含量显著低于pTY空载对照，叶绿素合成相关基因表达下调。Y2H、BiFC和LCI试验联合分析表明，BcFBN6a能与BcGUN4相互作用。[结论]本研究发现BcFBN6a能够正向调控不结球白菜叶片中叶绿素的积累，并筛选鉴定到一个互作蛋白BcGUN4。

关键词：不结球白菜质体脂质相关蛋白 BcFBN6a 叶绿素 BcGUN4

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同源四倍体菜薹新材料的创制与品质分析

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南京农业大学学报 2024年第4期47卷 643-652页

作者：荆禹铭嵇乐乐肖栋胡春梅侯喜林李英胡君刘同坤南京农业大学作物遗传与种质创新利用全国重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心江苏南京210095 无锡市惠山区洛社镇农业农村局江苏无锡214187

[目的]本文旨在创制优质的菜薹四倍体新材料。[方法]用2 g·L^(-1)秋水仙素溶液点滴二倍体菜薹LCX019幼苗的子叶生长点,通过形态学、解剖学、细胞学与流式细胞仪的方式筛选鉴定出同源四倍体植株,并对二、四倍体植株的农艺性状以及... 详细信息

[目的]本文旨在创制优质的菜薹四倍体新材料。[方法]用2 g·L^(-1)秋水仙素溶液点滴二倍体菜薹LCX019幼苗的子叶生长点,通过形态学、解剖学、细胞学与流式细胞仪的方式筛选鉴定出同源四倍体植株,并对二、四倍体植株的农艺性状以及品质特性进行分析比较。[结果]形态学与解剖学结果显示,同源四倍体菜薹在株型、叶片、花、种荚、菜薹等方面表现出“巨大性”的特点;气孔孔径变大,气孔密度下降;花粉粒体积相比二倍体增大,形状呈橄榄球形或不规则形状。细胞学结果显示,四倍体菜薹根尖染色体数目为二倍体的2倍;流式细胞仪的分析结果表明,四倍体的DNA荧光强度约为二倍体的2倍。四倍体菜薹的可溶性糖、有机酸及纤维素含量显著增加76.17%、13.71%和80.34%,叶绿素含量、硝态氮含量显著下降25.01%、45.10%,可溶性蛋白含量无显著变化。通过分析二、四倍体的光响应曲线与光合特性,发现四倍体菜薹LCX019对弱光的利用能力强于二倍体植株。[结论]获得了具有优良品质的菜薹同源四倍体新材料,为菜薹育种提供新的种质资源。

关键词：菜薹同源四倍体秋水仙素光合特性品质鉴定

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不结球白菜BcGR2.1基因的功能验证及响应光氧化胁迫研究

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南京农业大学学报 2023年第5期46卷 841-851页

作者：陶瑜李燕柏艾梅虞章红侯喜林李英南京农业大学作物遗传与种质创新利用全国重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心/园艺学院江苏南京210095

[目的]本文旨在研究不结球白菜BcGR2.1基因在光氧化胁迫下的表达模式,并探索过表达或沉默该基因对植物抗光氧化胁迫的影响,以明确基因的功能。[方法]从不结球白菜中克隆了BcGR2.1基因CDS序列,对其编码的氨基酸序列进行进化树和保守区域... 详细信息

[目的]本文旨在研究不结球白菜BcGR2.1基因在光氧化胁迫下的表达模式,并探索过表达或沉默该基因对植物抗光氧化胁迫的影响,以明确基因的功能。[方法]从不结球白菜中克隆了BcGR2.1基因CDS序列,对其编码的氨基酸序列进行进化树和保守区域分析;采用RT-qPCR技术,对BcGR2.1基因在光氧化胁迫处理下的表达水平进行分析;利用农杆菌介导的蘸花法和病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术分别获得BcGR2.1过表达拟南芥和BcGR2.1沉默不结球白菜植株,并验证过表达或沉默BcGR2.1基因对植物抗光氧化胁迫能力的影响。[结果]不结球白菜BcGR2.1基因ORF全长1626 bp,与芜菁GR2蛋白进化关系最近。在甲基紫精(MV)处理诱导的光氧化胁迫下,该基因一定时间内表达量上调,随后下调。过表达转基因拟南芥中抗坏血酸(AsA)含量上升,而沉默植株中AsA含量下降。光氧化胁迫条件下,过表达转基因拟南芥中的H_(2)O_(2)含量显著低于野生型,而BcGR2.1沉默植株中H_(2)O_(2)含量显著高于PTY空载植株;此外,过表达BcGR2.1拟南芥中相关叶绿素荧光动力学参数F v/F m、Y(Ⅱ)、ETR以及qP均显著高于野生型。[结论]在拟南芥和不结球白菜中BcGR2.1正调控AsA含量,抑制光氧化胁迫处理下植株体内H_(2)O_(2)的爆发,一定程度上维护了植株叶绿素荧光参数的正常状态,提高了植物对光氧化胁迫的耐受性。

关键词：不结球白菜 BcGR2.1 光氧化胁迫抗坏血酸(AsA) 叶绿素荧光参数

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不结球白菜BcAP1的克隆及其启动子分析

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南京农业大学学报 2024年

作者：米闵渠天慧徐新凤李英侯喜林王建军刘同坤南京农业大学作物遗传与种质创新利用全国重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心/园艺学院南京农业大学三亚研究院

[目的] 本文旨在探究BcAP1基因在不结球白菜早、晚开花品种中是否存在结构和表达差异。[方法] 以早开花品种‘菜心’以及晚开花品种‘五月慢’为试验材料，通过同源克隆2个品种中的BcAP1基因和启动子序列，对2个品种的氨基酸序列进行比... 详细信息

[目的] 本文旨在探究BcAP1基因在不结球白菜早、晚开花品种中是否存在结构和表达差异。[方法] 以早开花品种‘菜心’以及晚开花品种‘五月慢’为试验材料，通过同源克隆2个品种中的BcAP1基因和启动子序列，对2个品种的氨基酸序列进行比对和系统进化分析；利用亚细胞定位技术研究BcAP1基因的空间表达；利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）分别对2个品种花蕾期和开花期BcAP1的表达量进行分析；通过双荧光素酶试验对2个品种中BcAP1启动子的活性进行分析；此外对转基因拟南芥进行β-D-葡糖醛酸酶(GUS)染色以及利用PlantCARE 在线软件预测了‘菜心’BcAP1启动子插入片段结构域。[结果] ‘菜心’和‘五月慢’BcAP1 CDS序列仅有1个碱基不同，但两端序列翻译所得氨基酸序列完全一致。系统进化分析表明，BcAP1与拟南芥之间同源性最高。亚细胞定位显示其表达位置在细胞核上。定量结果显示，在花蕾期和开花期，早抽薹品种‘菜心’中的BcAP1基因表达量显著高于同期的晚抽薹品种‘五月慢’。2个品种的BcAP1基因启动子序列上存在较大差异且‘菜心’的启动子序列存在896 bp插入序列。双荧光素酶试验结果表明，‘菜心’BcAP1启动子的活性远高于‘五月慢’BcAP1启动子的活性。GUS染色结果显示，GUS蛋白在pCXBcAP1-BcAP1-GUS转基因拟南芥表达更强。‘菜心’BcAP1启动子插入片段结构域分析发现BcAP1启动子插入片段有参与生物钟调控的顺式作用元件和赤霉素反应因子。[结论] 克隆的BcAP1基因定位于细胞核，与拟南芥的同源性最高，‘菜心’BcAP1启动子比‘五月慢’BcAP1启动子多一段长度为896 bp插入序列，插入片段中有与开花相关的元件，且‘菜心’BcAP1启动子活性比‘五月慢’高。

关键词：不结球白菜 BcAP1基因克隆启动子分析

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优质同源四倍体菜心新材料的创制及特性分析

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核农学报 2024年第2期38卷 209-216页

作者：荆禹铭嵇乐乐李孟杰张彦文侯喜林李英刘照坤刘同坤南京农业大学作物遗传与种质创新全国重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心江苏南京210095 苏州市农业科学院江苏苏州215000

为获得优质的菜心同源四倍体新材料,本研究采用0.2%(W/V)的秋水仙素溶液点滴二倍体菜心LCX017幼苗子叶生长点,通过形态学、解剖学、细胞学以及流式细胞仪等方式鉴定到诱导成功的同源四倍体植株,并对二、四倍体的农艺性状、营养品质、光... 详细信息

为获得优质的菜心同源四倍体新材料,本研究采用0.2%(W/V)的秋水仙素溶液点滴二倍体菜心LCX017幼苗子叶生长点,通过形态学、解剖学、细胞学以及流式细胞仪等方式鉴定到诱导成功的同源四倍体植株,并对二、四倍体的农艺性状、营养品质、光合特性等方面进行分析比较。结果表明,形态学与农艺性状方面,四倍体植株在叶片、花器官、种荚等方面表现出“巨大性”,叶宽、叶厚增大,菜薹直径变粗,重量增大;解剖学方面,四倍体叶片气孔相对二倍体更大,气孔密度降低;花粉粒相比二倍体变大且呈现棒状或橄榄状;细胞学方面,四倍体植株的根尖染色体数目是二倍体的2倍;流式细胞仪鉴定结果显示,四倍体的DNA荧光强度是二倍体的2倍;营养品质方面,相较于二倍体,四倍体植株中可溶性糖、纤维素、有机酸以及叶绿素含量显著上升,硝态氮含量下降22.92%,可溶性蛋白含量无显著变化;此外,结合光响应曲线分析发现,四倍体在强光和弱光条件下的适应能力均强于二倍体。综上,本研究成功诱导出了优质的同源四倍体菜心新材料,丰富了不结球白菜的种质资源。

关键词：菜心秋水仙素同源四倍体品质鉴定光合特性

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不结球白菜GRAS基因家族鉴定及其在低温胁迫下的表达分析

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分子植物育种 2024年

作者：卢宏杰侯喜林南京农业大学作物遗传与种质创新利用全国重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心南京苏曼等离子工程研究院有限公司

通过对不结球白菜(Brassica campestris ssp. chinensis)GRAS基因(BcGRAS)家族成员进行全基因组的研究和鉴定，对其理化属性、保守序列、演化历程、启动子顺式作用元件以及染色体的位置进行了探讨，并利用已发表的RNA-Seq数据分析BcGRA... 详细信息

通过对不结球白菜(Brassica campestris ssp. chinensis)GRAS基因(BcGRAS)家族成员进行全基因组的研究和鉴定，对其理化属性、保守序列、演化历程、启动子顺式作用元件以及染色体的位置进行了探讨，并利用已发表的RNA-Seq数据分析BcGRAS在低温胁迫应答中的表达情况。结果表明：从不结球白菜基因组中鉴定出47个GRAS家族基因成员。系统进化树分析将不结球白菜GRAS家族基因分为8个组(LISCL， SHR， PAT1， HAM， SCR， SCL4/7， SCL3， DELLA)。对其基因结构分析发现，同一组中各成员的基因结构和蛋白功能域高度保守。除此之外，大多数成员只有少量内含子，且在10条染色体上分布不均。共线性分析显示，不结球白菜BcGRAS与拟南芥AtGRAS在进化过程中较为保守，同时两者具有较高的同源性。对启动子顺式作用元件的分析揭示，47个BcGRAS家族基因中有19个成员具有对低温的响应元件(CCGAAA)。转录组数据和qRT-PCR分析结果，BcGRAS3、BcGRAS7、BcGRAS19、BcGRAS22和BcGRAS24在受到低温胁迫后表达量显著上升，说明在不结球白菜响应低温胁迫的过程中这些基因可能起到重要作用。

关键词：不结球白菜 GRAS基因家族低温胁迫

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大白菜LEA家族基因的鉴定及其部分成员在低温胁迫下的表达分析

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园艺学报 2022年第2期49卷 304-318页

作者：王光鹏刘同坤徐新凤李竹帛高瞻远侯喜林南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心南京210095

基于大白菜全基因组数据对LEA家族基因进行全基因组鉴定与生物信息学分析,研究其序列特征、基因结构、启动子顺式作用元件、染色体定位、进化关系以及在不同组织中和低温胁迫下的表达模式。从大白菜基因组中总共鉴定出65个LEA家族基因成... 详细信息

基于大白菜全基因组数据对LEA家族基因进行全基因组鉴定与生物信息学分析,研究其序列特征、基因结构、启动子顺式作用元件、染色体定位、进化关系以及在不同组织中和低温胁迫下的表达模式。从大白菜基因组中总共鉴定出65个LEA家族基因成员,根据系统发育与保守基序分析,其可分为8个组;内含子较少,且不均匀地分布在10条染色体上,另有3个成员位于Scaffold上。启动子顺式作用元件分析显示,有29个(44.6%)成员拥有低温响应元件,除此之外,光响应元件和激素响应元件占比较高。共线性分析显示,大白菜BrLEA与拟南芥AtLEA同源性较高,并在进化中较为保守。大白菜不同组织转录组数据表明,BrLEA基因在大白菜不同组织中的表达存在组织特异性。对筛选出的13个家族成员进行低温胁迫表达分析表明,受低温胁迫表达量都有所升高。

关键词：大白菜 LEA基因家族低温胁迫生物信息学

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不同浓度EMS诱变不结球白菜的效果分析

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中国蔬菜 2024年第7期 42-49页

作者：周玉彩肖栋李英何盈侯喜林南京农业大学作物遗传与种质创新利用全国重点实验室农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心江苏南京210095 南京苏曼等离子工程研究院有限公司江苏南京211162

为创制不结球白菜新种质,发掘新基因,探索不同浓度甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)对不结球白菜的诱变效应。采用浓度为0.4%、0.6%和0.8%的EMS溶液对4个不结球白菜品种[黑塌菜(HTC)、香青菜(XQC)、JP241、XWZ]进行种子诱变处... 详细信息

为创制不结球白菜新种质,发掘新基因,探索不同浓度甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)对不结球白菜的诱变效应。采用浓度为0.4%、0.6%和0.8%的EMS溶液对4个不结球白菜品种[黑塌菜(HTC)、香青菜(XQC)、JP241、XWZ]进行种子诱变处理,调查种子发芽情况与田间植株农艺性状表现。结果表明:4个不结球白菜品种的种子发芽势、发芽率和相对成苗率均随着EMS浓度的升高而逐渐降低,且处理间差异显著。EMS诱变可以引起不结球白菜叶色、叶形、株型、花器官等性状发生变异。不同品种不结球白菜的EMS诱变半致死剂量有所不同,产生的变异种类和变异频率也有所不同,HTC的半致死剂量为0.8%,相对变异频率为23.83%;XQC的半致死剂量为0.8%,相对变异频率为17.61%;JP241的半致死剂量为0.6%,相对变异频率为38.45%;XWZ的半致死剂量为0.6%,相对变异频率16.69%。EMS的浓度越高,诱变的不结球白菜始花开放时间越晚,莲座叶叶片数越少,雄性不育率越高。

关键词：不结球白菜 EMS 变异频率变异类型

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高花青苷同源四倍体紫菜薹新材料的创制及特性分析

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核农学报 2023年第5期37卷 897-906页

作者：李孟杰张晨王美云杨晓雪侯喜林王建军周鸿章刘同坤南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心江苏南京210095 南京苏曼等离子工程研究院江苏南京210095 南京理想农业科技有限公司江苏南京210095

为获得优质高花青苷的同源四倍体不结球白菜紫菜薹Lcx025b新材料,本研究利用浓度为0.2%(w/v)的秋水仙素溶液处理二倍体Lcx025b幼苗的子叶生长点,通过形态学、细胞学、流式细胞仪测定等方法筛选鉴定得到同源四倍体植株,通过农艺性状指标... 详细信息

为获得优质高花青苷的同源四倍体不结球白菜紫菜薹Lcx025b新材料,本研究利用浓度为0.2%(w/v)的秋水仙素溶液处理二倍体Lcx025b幼苗的子叶生长点,通过形态学、细胞学、流式细胞仪测定等方法筛选鉴定得到同源四倍体植株,通过农艺性状指标、营养品质、光合特性、抗病能力等方面对二、四倍体植株进行比较分析。结果表明,相较于二倍体植株,四倍体植株在形态学方面表现出巨大性,具体表现为叶片的长宽比显著减小,叶片趋于扁圆形,花器官、种荚、种子等明显增大,菜薹颜色加深;叶片气孔明显增大,气孔密度减小;花粉粒表现出明显不规则性;四倍体植株根尖细胞染色体的数目以及通过流式细胞仪分析的四倍体植株DNA的荧光强度都表现为二倍体的两倍;营养品质方面,可溶性糖、菜薹花青苷含量显著增加,纤维素、硝态氮含量显著减少,可溶性蛋白、叶绿素含量无显著变化;结合光响应曲线分析,四倍体光合能力更强,适应性更高;此外,在抗病性鉴定过程中,四倍体植株对灰霉菌的抗性明显优于二倍体植株。综上,本研究获得了高花青苷的同源四倍体不结球白菜紫菜薹Lcx025b新材料,为不结球白菜的种质资源创新提供了重要的材料支撑。

关键词：紫菜薹同源四倍体光合特性抗病性特性分析

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不结球白菜耐热相关基因BcNAC036的克隆、亚细胞定位及功能分析

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南京农业大学学报 2022年第4期45卷 647-655页

作者：刘路平刘高峰蒋程侯喜林南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心/南京苏曼等离子工程研究院江苏南京210095

[目的]本文旨在研究不结球白菜基因BcNAC 036的亚细胞定位及高温胁迫下的表达分析,并探索其功能及调控机制。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为试验材料,提取叶片总RNA并且反转录成cDNA,同源克隆BcNAC 036的全长基因序列,运用在线软件工... 详细信息

[目的]本文旨在研究不结球白菜基因BcNAC 036的亚细胞定位及高温胁迫下的表达分析,并探索其功能及调控机制。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为试验材料,提取叶片总RNA并且反转录成cDNA,同源克隆BcNAC 036的全长基因序列,运用在线软件工具对其进行生物信息学分析。采用同源重组的方法构建过表达载体pCAMBIA1302-BcNAC 036-GFP,农杆菌介导法将构建的过表达载体注射入本氏烟草叶片背面,通过激光共聚焦显微镜观察其亚细胞表达部位。采用RT-qPCR技术检测高温处理下不结球白菜耐高温品种‘苏州青’和热敏感品种‘矮脚黄’以及转基因拟南芥体内BcNAC 036基因的表达量。对转基因拟南芥进行高温处理并统计其成活率。[结果]同源克隆的方法获得BcNAC 036基因,其开放阅读框(ORF)为840 bp,编码279个氨基酸,相对分子质量为32154.83,等电点是8.96。氨基酸序列比对以及同源进化树分析结果显示,BcNAC036蛋白与芜菁、甘蓝型油菜NAC036蛋白同源关系较近。亚细胞定位结果显示,BcNAC036的亚细胞定位表达在细胞核。RT-qPCR表明,BcNAC 036在耐高温和热敏感品种中表达差异较大且表达量均呈明显下降趋势。转基因拟南芥与野生型相比,其成活率较低。[结论]BcNAC036蛋白在细胞核表达,BcNAC 036基因与不结球白菜耐高温性呈负相关。

关键词：不结球白菜 BcNAC036基因亚细胞定位耐高温过表达植株

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