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南京农业大学学报 2019年第3期42卷 413-420页

作者：公茂勇王燕徐良王娟娟谢洋范莲雪陈微柳李旺南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺学院江苏南京210095 全国农业技术推广服务中心北京100125

[目的]本文旨在检测萝卜肉质根中硫苷组分与含量,分析硫苷总量与单个硫苷组分含量的相关性,为萝卜种质品质性状评价与优良新品种培育提供理论基础。[方法]通过液质联用(LC-MS)技术和高效液相色谱法(HPLC)对44份萝卜种质肉质根中硫苷组... 详细信息

[目的]本文旨在检测萝卜肉质根中硫苷组分与含量,分析硫苷总量与单个硫苷组分含量的相关性,为萝卜种质品质性状评价与优良新品种培育提供理论基础。[方法]通过液质联用(LC-MS)技术和高效液相色谱法(HPLC)对44份萝卜种质肉质根中硫苷组分与含量进行检测,并通过主成分分析研究了总硫苷与单个硫苷含量之间的相关性。[结果]在萝卜肉质根中共检测到12种硫苷,包括8种脂肪族硫苷和4种吲哚族硫苷,其中4-甲硫基-3-丁烯基硫苷(GRH)作为重要的硫苷组分在所有材料中含量最高。44个萝卜种质干样总硫苷平均含量10.73μmol·g^(-1),变化区间1.61～23.23μmol·g^(-1);硫苷含量占干质量的平均比例为0.4%,变化区间为0.14%～0.97%。筛选到4份4-甲基亚磺酰丁基硫苷(RAA)含量较高的种质,4份GRH含量较低的种质。分析单一硫苷相关系数矩阵显示,总硫苷含量与4-甲基亚磺酰基-3-丁烯基硫苷(GRE)、4-戊烯基硫苷(GBN)、4-甲硫基丁基硫苷(GER)的含量呈极显著正相关,且同族硫苷间相关性较强。[结论]萝卜不同种质肉质根中硫苷组分与含量存在较大差异,其中GRH是影响脂肪族硫苷及总硫苷含量差异的关键硫苷,筛选到的高含量RAA与低含量GRH种质可为萝卜品质性状遗传改良提供重要材料。

关键词：萝卜肉质根硫苷组分含量 LC-MS

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苏南叶菜周年茬口和生产面临的问题及可持续发展建议

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长江蔬菜 2020年第24期 24-28页

作者：侯喜林余汉清张昌伟南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室南京210095 园艺作物种质创新与利用教育部工程研究中心无锡市惠山区农业发展服务中心

江苏省长江以南地区(以下简称苏南)蔬菜生产形势近年来发生了很大变化。随着苏南城市化进程不断加快,蔬菜生产全社会比较效益持续降低,尽管蔬菜总面积呈减少趋势,但是不能大量长途运输、苏南城乡居民喜食的城郊型叶菜生产仍然在不断调... 详细信息

江苏省长江以南地区(以下简称苏南)蔬菜生产形势近年来发生了很大变化。随着苏南城市化进程不断加快,蔬菜生产全社会比较效益持续降低,尽管蔬菜总面积呈减少趋势,但是不能大量长途运输、苏南城乡居民喜食的城郊型叶菜生产仍然在不断调整中得到发展,如江苏小白菜每年播种面积为210万亩(14万hm2)左右,已成为全省第一大蔬菜作物。现就苏南叶菜周年茬口和生产面临的问题进行分析,并提出发展建议。

关键词：长途运输比较效益叶菜长江以南地区蔬菜作物播种面积可持续发展建议城郊型

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水芹咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的克隆与表达特性分析

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南京农业大学学报 2019年第1期42卷 51-58页

作者：朱胜琪徐德宝王永鑫冯凯刘洁霞仇亮熊爱生南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室江苏南京 210095

[目的]本文旨在研究水芹咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因(OjCCoAOMT)的序列及其表达特性,了解该基因在水芹木质素代谢中的作用。[方法]利用RT-PCR技术从水芹中克隆OjCCoAOMT基因,用生物信息学方法对获得的序列进行分析,并利用实时荧光定量... 详细信息

[目的]本文旨在研究水芹咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因(OjCCoAOMT)的序列及其表达特性,了解该基因在水芹木质素代谢中的作用。[方法]利用RT-PCR技术从水芹中克隆OjCCoAOMT基因,用生物信息学方法对获得的序列进行分析,并利用实时荧光定量PCR技术研究该基因在水芹不同组织以及不同贮藏条件下的表达。[结果]序列分析结果表明:OjCCoAOMT基因包含1个长度为726 bp的开放阅读框(ORF),编码241个氨基酸,蛋白相对分子质量为27.111×10~3,理论等电点为5.38。OjCCoAOMT蛋白属于疏水性蛋白,无序化比例为12.45%,空间结构主要由8个α-螺旋和7个β-折叠组成。多重比对与系统树分析结果表明:OjCCoAOMT蛋白与同科植物欧芹的进化关系最近。实时荧光定量PCR显示,在'八卦洲水芹'和'南选八卦洲紫水芹'的叶片及叶柄中OjCCoAOMT基因的表达量差异显著。在室温(25 ℃)、低温(4 ℃)和室温黑暗(25 ℃)3种贮藏条件下OjCCoAOMT基因表达量差异较大,低温(4 ℃)下表达量最高。2个品种的基因表达量也具有显著差异。[结论]OjCCoAOMT蛋白有较高的保守性。OjCCoAOMT基因在水芹中的表达具有明显的组织特异性和材料差异性,同时在低温(4 ℃)条件下表达量最高。

关键词：水芹 OjCCoAOMT基因序列分析多重比对表达分析

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芹菜产品“互联网+”销售模式

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长江蔬菜 2020年第20期 24-27页

作者：杨玥冯顾城李炘烨贾丽丽路晓华庄波陶建平陈龙正刘洁霞沈迪谭国飞苏小俊刘惠吉熊爱生南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室南京210095 南京市溧水区华成蔬菜专业合作社泗阳道秋农业有限公司江苏省农业科学院农业设施与装备研究所江苏省农业科学院蔬菜研究所贵州省农业科学院园艺研究所

芹菜是伞形科一种重要的叶菜类蔬菜作物,在世界各地广泛栽培,不仅可作为蔬菜食用,还具有良好的药用功效。芹菜在我国蔬菜生产中具有重要的地位,在丰富居民“菜篮子”及保证蔬菜周年供应方面发挥着日益重要的作用。随着“互联网+”的快... 详细信息

芹菜是伞形科一种重要的叶菜类蔬菜作物,在世界各地广泛栽培,不仅可作为蔬菜食用,还具有良好的药用功效。芹菜在我国蔬菜生产中具有重要的地位,在丰富居民“菜篮子”及保证蔬菜周年供应方面发挥着日益重要的作用。随着“互联网+”的快速发展,芹菜产品销售模式也迎来新的机遇与挑战,通过“互联网+”方式进行芹菜产品的销售进一步促进了芹菜产业的发展。本文主要从芹菜产品“互联网+”发展背景、现状、存在问题等几个方面进行简要阐述,并提出了一定的建议与思考。

关键词：芹菜产品互联网+ 销售模式思考与建议

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不结球白菜醛酮还原酶BcAKR4C9基因的克隆及表达分析

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南京农业大学学报 2018年第2期41卷 240-247页

作者：张飞雪虞章红刘坤宇文锴王建军侯喜林李英南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室江苏南京210095

[目的]本文旨在探究醛酮还原酶AKR4C亚家族BcAKR4C9基因在不同激素处理及逆境胁迫中的表达模式,从而分析BcAKR4C9基因在不结球白菜作物中的生长代谢和逆境胁迫中可能发挥的作用。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,克隆了BcAKR4C9基... 详细信息

[目的]本文旨在探究醛酮还原酶AKR4C亚家族BcAKR4C9基因在不同激素处理及逆境胁迫中的表达模式,从而分析BcAKR4C9基因在不结球白菜作物中的生长代谢和逆境胁迫中可能发挥的作用。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,克隆了BcAKR4C9基因的全长,应用生物信息学分析了其氨基酸序列,并通过实时荧光定量PCR技术分析BcAKR4C9基因在不同组织,高温、低温、NaCl胁迫、伤害胁迫,以及水杨酸、茉莉酸甲酯和脱落酸等处理下的基因表达变化。[结果]序列分析表明,BcAKR4C9基因包含1个长度为948 bp的开放式阅读框(ORF),编码315个氨基酸。氨基酸序列多重比对和进化树分析表明,BcAKR4C9与其他植物AKR4C9基因同源性较高,具有高度保守性。荧光定量PCR分析表明,BcAKR4C9在叶片中的表达量高于根中,高温和低温处理下表达上调,且具有相似的表达模式。在0~20 g·L^(-1) NaCl质量浓度范围内基因相对表达量随NaCl质量浓度的升高而升高,伤害处理后能够迅速产生应激响应,并能够被水杨酸、茉莉酸甲酯和脱落酸诱导表达。[结论]不结球白菜BcAKR4C9基因能够被不同激素诱导表达,并且参与到多种逆境胁迫响应。

关键词：不结球白菜醛酮还原酶AKR4C亚家族序列分析非生物胁迫

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不结球白菜BrCDF1的功能研究

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南京农业大学学报 2018年第5期41卷 832-838页

作者：李林陈丽吴小婷邵帅旭李英侯喜林刘同坤南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/园艺学院江苏南京210095

[目的]本文旨在研究不结球白菜Br CDF1基因的功能,验证其与CO启动子之间的调控关系,以及其在植物抽薹开花中所起的作用。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,采用酵母单杂交技术,验证Br CDF1转录因子与CO启动子是否能够结合;构建过表... 详细信息

[目的]本文旨在研究不结球白菜Br CDF1基因的功能,验证其与CO启动子之间的调控关系,以及其在植物抽薹开花中所起的作用。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,采用酵母单杂交技术,验证Br CDF1转录因子与CO启动子是否能够结合;构建过表达载体p Early Gate101-Br CDF1,利用农杆菌介导法将过表达载体导入拟南芥中,筛选阳性苗,同时对阳性苗进行Western blot检测,观察转基因植株的表型变化;采用RT-q PCR技术,检测Br CDF1、CO、FT基因在转基因和野生型植株中不同时间点的相对表达量。[结果]酵母单杂交和β-半乳糖苷酶试验分析结果显示,Br CDF1转录因子和CO启动子之间具有较高的结合活性。Western blot检测结果表明:转基因拟南芥植株中的Br CDF1蛋白成功表达。RT-q PCR结果表明,Br CDF1基因在转基因植株中的相对表达量比野生型植株高;CO、FT基因在转基因植株中的相对表达量比野生型低,同时Br CDF1过表达植株较野生型开花晚。[结论]Br CDF1转录因子能与CO启动子结合,从而抑制CO、FT基因的表达,进而影响不结球白菜光周期开花途径。

关键词：不结球白菜 BrCDF1 酵母单杂交功能特性

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同源四倍体紫菜薹的诱导鉴定及其营养品质比较

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西北植物学报 2018年第7期38卷 1262-1269页

作者：邵帅旭陈丽杨阳李艳艳侯喜林刘同坤南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室南京210095 南京理想农业科技有限公司南京210095

该研究以二倍体紫菜薹为材料,采用浓度为0.1%、0.2%和0.3%的秋水仙素溶液,在二倍体紫菜薹生长至子叶期时对植株茎尖生长点进行4次点滴处理,鉴定筛选同源四倍体紫菜薹并进行二倍体和四倍体紫菜薹的营养品质比较。结果表明:(1)使用浓度为0... 详细信息

该研究以二倍体紫菜薹为材料,采用浓度为0.1%、0.2%和0.3%的秋水仙素溶液,在二倍体紫菜薹生长至子叶期时对植株茎尖生长点进行4次点滴处理,鉴定筛选同源四倍体紫菜薹并进行二倍体和四倍体紫菜薹的营养品质比较。结果表明:(1)使用浓度为0.2%秋水仙素溶液点滴4次对紫菜薹的处理效果最好,四倍体紫菜薹的诱导率为6.62%。(2)在形态学上,四倍体植株的叶片、花簇、花器官、角果和种子与二倍体相比都在巨大性上呈现出明显差异;在解剖学上,四倍体植株在气孔密度减小的同时气孔变大,其花粉表现出矩形、梯形以及其他一些不规则的形状;在细胞学上,四倍体和二倍体植株的染色体数目分别为40条和20条;流式细胞仪鉴定结果显示,四倍体植株的DNA分子荧光强度(2 092 385.03)约为二倍体植株(956 725.15)的2倍。(3)植株营养品质方面,四倍体紫菜薹的游离氨基酸、叶绿素总浓度分别比二倍体植株显著增加了228.58%、110.02%,但四倍体紫菜薹的硝态氮、可溶性蛋白、维生素C、可溶性糖、纤维素总含量分别比二倍体植株显著减少了48.99%、43.20%、45.81%、44.50%、59.97%。(4)与二倍体植株相比,四倍体紫菜薹的单株质量、十叶厚、叶宽、叶柄宽都有不同程度的增加,叶片开展度有一定程度的降低。研究发现,秋水仙素诱导产生四倍体紫菜薹的最适浓度为0.2%;四倍体紫菜薹表现出明显的高产性,但多数营养品质极显著低于二倍体紫菜薹。

关键词：紫菜薹秋水仙素诱导鉴定四倍体流式细胞仪

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不结球白菜BcOPR3基因的克隆与功能分析

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南京农业大学学报 2017年第5期40卷 804-811页

作者：文锴王远胡蝶袁敬平侯喜林李英南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室/南京农业大学园艺学院江苏南京210095

[目的]12-氧-植物二烯酸还原酶(12-oxo-phytodienoic acid reductase,OPR)是茉莉酸生物合成途径的关键酶,催化12-氧-植物二烯(OPDA)还原反应生成茉莉酸化合物,广泛参与植物生长过程中的防御系统。本文旨在克隆和研究不结球白菜Bc OPR3基... 详细信息

[目的]12-氧-植物二烯酸还原酶(12-oxo-phytodienoic acid reductase,OPR)是茉莉酸生物合成途径的关键酶,催化12-氧-植物二烯(OPDA)还原反应生成茉莉酸化合物,广泛参与植物生长过程中的防御系统。本文旨在克隆和研究不结球白菜Bc OPR3基因,研究其对信号分子和非生物胁迫应答的影响。[方法]对不结球白菜OPR3基因进行克隆、生物信息分析、亚细胞定位,并对其在霜霉病菌、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)、水杨酸(SA)、机械伤害、低温和热激胁迫下的表达水平进行了分析。[结果]Bc OPR3在2个不结球白菜品种中的序列一致,其Bc OPR3蛋白与同科油菜(Brassica napus)的同源性高达98%,进化关系与之最相近;亚细胞定位结果显示Bc OPR3定位在细胞膜上;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测结果表明,不结球白菜霜霉病菌、ABA、JA、SA、机械伤害、低温和热激胁迫均能诱导Bc OPR3基因表达。霜霉病菌侵染下,Bc OPR3在抗性自交系‘苏州青’和感病自交系‘矮脚黄’中存在差异表达,并且在抗病自交系中表达量较高。[结论]从不结球白菜克隆得到的Bc OPR3,通过表达分析发现,Bc OPR3可能存在对非生物胁迫的共响应,且在不结球白菜中该基因是在细胞膜上起作用。在非生物胁迫下,基因具有不同的应答模式,抗性自交系Bc OPR3基因的高表达是其具有更高抗性的主要原因。

关键词：不结球白菜 BcOPR3 克隆亚细胞定位 RT-qPCR

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全基因组分析鉴定正向选择基因并揭示其在白菜基因组中的分布、表达和甲基化概况

全基因组分析鉴定正向选择基因并揭示其在白菜基因组中的分布、表...

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中国作物学会油料作物专业委员会第八次会员代表大会暨学术年会

作者：郭月刘静彭珍李英候喜林杜建厂江苏省农业科学院种质资源与生物技术研究所江苏省农业生物学重点实验室江苏省农业科学院经济作物研究所农业部长江下游棉花与油菜重点实验室江苏省现代作物生产协同创新中心南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室

普遍认为,正向选择是生物机体表型多样化背后的主要进化力量之一。然而,正向选择基因的特征性质尚缺乏具体详细的研究。本研究中,我们对白菜和甘蓝间的直系同源基因进行了全基因组分析,最终得到468个潜在的正向选择基因。结果表明:(1)... 详细信息

普遍认为,正向选择是生物机体表型多样化背后的主要进化力量之一。然而,正向选择基因的特征性质尚缺乏具体详细的研究。本研究中,我们对白菜和甘蓝间的直系同源基因进行了全基因组分析,最终得到468个潜在的正向选择基因。结果表明:(1)正向选择基因在植物激素信号转导途径以及转录因子家族中富集;(2)正向选择基因的表达水平显著低于随机选取的非正向选择对照组基因;(3)具有组织表达特异性的正向选择基因在愈伤和生殖组织(花和角果)中的表达量显著高于营养组织(根、茎和叶);(4)正向选择基因的比例与三倍化基因保留的拷贝数正相关,但正向选择基因的表达水平却随着三倍化基因拷贝数的增加而降低;(5)正向选择基因在内含子区域的CG和CHG甲基化水平显著高于启动子和外显子区域;(6)转座元件的百分比与正向选择基因的甲基化水平成正比,DNA的甲基化(尤其是CG背景)具有降低正向选择基因表达量的趋势。本研究为进一步了解白菜正向选择基因的特征、演化、功能、表达以及甲基化提供了理论依据。

关键词：正向选择基因分布表达甲基化白菜

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芹菜AgERF4转录因子基因的克隆与表达分析

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园艺学报 2016年第11期43卷 2193-2202页

作者：吴蓓李梦瑶王广龙黄蔚王枫熊爱生南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室南京210095

以‘六合黄心芹’芹菜为材料,克隆出编码乙烯反应元件结合蛋白基因AgERF4。序列分析表明,AgERF4含有1个长度为597 bp的开放阅读框,编码198个氨基酸,预测其蛋白质相对分子质量为21.43 kD,等电点为8.51。进化分析表明,ERF4转录因子在植物... 详细信息

以‘六合黄心芹’芹菜为材料,克隆出编码乙烯反应元件结合蛋白基因AgERF4。序列分析表明,AgERF4含有1个长度为597 bp的开放阅读框,编码198个氨基酸,预测其蛋白质相对分子质量为21.43 kD,等电点为8.51。进化分析表明,ERF4转录因子在植物中高度保守。AgERF4属于亲水性蛋白。酵母单杂交和β–半乳糖苷酶活性测定结果确定AgERF4转录因子和乙烯应答元件GCC Box具有较高的结合活性。RT-qPCR分析表明,AgERF4在芹菜叶片中的表达水平较高,在根和叶柄中表达水平较低;高温和干旱条件下AgERF4的表达呈先上升后下降的趋势,在盐处理的24 h内AgERF4的表达始终高于对照。AgERF4转录因子在芹菜非生物逆境胁迫调控过程中起着重要作用。

关键词：芹菜乙烯反应元件结合蛋白酵母单杂交非生物胁迫基因表达

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