检索结果-内蒙古大学图书馆

南京农业大学学报 2018年第1期41卷 64-70页

作者：潘俏张舒癑沈迪吴家琪陈春莲陈洁陈劲枫娄群峰南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/园艺学院江苏南京210095

[目的]本文旨在从黄瓜突变体材料中筛选耐盐突变体材料。[方法]对948份‘长春密刺’黄瓜突变体材料进行NaCl溶液催芽试验,通过对比发芽率、发芽势和相对发芽率,结合胚根生长状况进行初步筛选,然后对发芽期筛选出的优质材料进行幼苗期盐... 详细信息

[目的]本文旨在从黄瓜突变体材料中筛选耐盐突变体材料。[方法]对948份‘长春密刺’黄瓜突变体材料进行NaCl溶液催芽试验,通过对比发芽率、发芽势和相对发芽率,结合胚根生长状况进行初步筛选,然后对发芽期筛选出的优质材料进行幼苗期盐胁迫处理(120 mmol·L^(-1)NaCl营养液,处理7 d),测定株高、根长、茎粗、地上部鲜质量、地下部鲜质量、茎节数等形态指标,分析超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性以及叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素和可溶性蛋白含量等生理指标。[结果]根据发芽期突变体材料的发芽指标情况,共筛选出25份耐盐突变体材料,从中挑选出12份优质材料。在盐胁迫处理下12份黄瓜突变体各项形态及生理指标均出现下降,但耐盐性好的材料表现显著优于对照,最终经过综合比较后筛选出7份耐盐新材料:Mu-94-6、Mu-34-2、Mu-144-10、Mu-70-11、Mu-42-5、Mu-61-2、Mu-43-4。[结论]通过对突变体库的筛选,得到7份耐盐新材料。这些材料的获得对黄瓜耐盐性的遗传研究和新品种培育具有重要意义。

关键词：黄瓜突变体耐盐性筛选鉴定

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不结球白菜富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(BcGRP1)的克隆与分析

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分子植物育种 2018年第23期16卷 7598-7605页

作者：汪影张昌伟侯喜林南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室农业部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室

本研究通过分子生物技术从不结球白菜(Brassica campestris ***)中克隆了BcGRP1,引物根据已报导的拟南芥(Arabidopsis thaliana)和大白菜(Brassica campestris ***)中的同源基因序列设计。生物信息学方法分析显示BcGRP1基因编码168个氨... 详细信息

本研究通过分子生物技术从不结球白菜(Brassica campestris ***)中克隆了BcGRP1,引物根据已报导的拟南芥(Arabidopsis thaliana)和大白菜(Brassica campestris ***)中的同源基因序列设计。生物信息学方法分析显示BcGRP1基因编码168个氨基酸,其分子式为C1414H2323N507O612S94,分子量39231.67Da,等电点5.23;无跨膜结构和信号肽。BcGRP1蛋白质的N端第9~82个氨基酸之间包含有一个保守的RNA识别基序(RNArecognition motif,RRM),RRM结构域中包含两段保守的核糖核蛋白结构,被命名为RNP1和RNP2,它们是RRM的活性位点。BcGRP1基因与与拟南芥以及大白菜中同源基因所编码的氨基酸的相似性在90%以上。以不结球白菜‘49菜心’为材料,通过荧光定量PCR分析不结球白菜中BcGRP1在不同处理过程中的表达量变化,本研究结果表明BcGRP1基因的表达量在TuMV以及NaCl处理下的变化不大,该基因对霜霉病以及高温的响应较明显,在这两种处理下,BcGRP1基因都被明显上调,因此,推测BcGRP1基因在这两种胁迫处理下能够起到调控作用。

关键词：不结球白菜富含甘氨酸RNA结合蛋白荧光定量PCR 基因结构分析

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不结球白菜花青苷合成负调控基因BrcLBD39的克隆和表达分析及其对外源6-BA的响应

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南京农业大学学报 2018年第1期41卷 49-56页

作者：董慧杰侯喜林韩克张志硕胡春梅南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095

[目的]本文旨在探究LBD39基因在不结球白菜紫色和绿色材料中的特性及其对外源6-BA的响应,为花青苷调控机制奠定理论基础。[方法]以不结球白菜紫色自交系NJZX1-3及其绿色突变体NJZX1-0为材料,同源克隆LBD39基因的全长,应用生物信息学方... 详细信息

[目的]本文旨在探究LBD39基因在不结球白菜紫色和绿色材料中的特性及其对外源6-BA的响应,为花青苷调控机制奠定理论基础。[方法]以不结球白菜紫色自交系NJZX1-3及其绿色突变体NJZX1-0为材料,同源克隆LBD39基因的全长,应用生物信息学方法分析其核酸和蛋白序列及其进化关系,并在线预测蛋白质二级和三级结构。采用外源6-BA处理后测定叶片中花青苷含量,并通过实时荧光定量PCR技术测定了LBD39基因在外源6-BA处理后的表达水平。[结果]在2个不同材料中克隆获得的LBD39基因完全相同,序列长为876 bp,包含编码区(长为699 bp)及非编码区(长为177 bp)。其编码区序列含有1个长为696 bp的开放阅读框(ORF),编码232个氨基酸,将该基因命名为Brc LBD39。亚细胞定位预测该蛋白分布在细胞核中,蛋白相对分子质量为25.30×103,等电点为8.85。进化树分析表明,Brc LBD39蛋白序列与大白菜Bra LBD39相似性为100%,其次与油菜和甘蓝关系最近,相似性分别为99%和93%。外源6-BA处理24 h以后紫色材料NJZX1-3叶片中花青苷含量均高于对照,而绿色突变体叶片基本不含花青苷;Brc LBD39基因在2个材料中具有相似的表达模式,即先下降后上升而后又下降,其中在处理后48 h时Brc LBD39基因表达量急剧增加,在紫色和绿色材料中增量分别为74.84%和49.87%。此外,Brc LBD39表达量在绿色材料中明显高于紫色材料。[结论]不结球白菜中花青苷负调控基因Brc LBD39既响应外源6-BA,又与叶片中花青苷的积累密切相关,在花青苷的生物合成过程中起着重要的调控作用。

关键词：不结球白菜 LBD39 同源克隆序列分析基因表达

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6种不结球白菜材料叶片抗氧化活性的比较及花青苷合成相关基因的表达分析

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南京农业大学学报 2018年第3期41卷 422-428页

作者：董慧杰韩克侯喜林张志硕胡春梅南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095

[目的]本文旨在比较不结球白菜不同材料间叶片总花青苷含量及其抗氧化活性,探究花青苷合成相关基因的表达特性。[方法]以6种不结球白菜材料为试材,采用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法和铁离子还原能力(FRAP)法检测了叶片提取液抗氧化... 详细信息

[目的]本文旨在比较不结球白菜不同材料间叶片总花青苷含量及其抗氧化活性,探究花青苷合成相关基因的表达特性。[方法]以6种不结球白菜材料为试材,采用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法和铁离子还原能力(FRAP)法检测了叶片提取液抗氧化活性,并测定了花青苷合成相关结构基因(BrcF3H、BrcDFR、BrcANS、BrcCHI、BrcCHS、BrcUFGT)和调节基因(BrcTT8、BrcTTG1、BrcMYB75、BrcMYB90、BrcGL3、BrcEGL3.1、BrcEGL3.2)的表达水平。[结果]在6种不结球白菜材料中,深紫色材料NJZX1-4的总花青苷含量最高,为(801.5±57.4)μg·g^(-1)。6种材料叶片提取液的DPPH自由基清除率为(49.31±3.91)%^(84.94±6.20)%,铁离子还原能力为(256.8±136.3)^(1 279.5±202.0)μg·g^(-1),其中紫色材料NJZX1^(-1)叶片的DPPH自由基清除率和铁离子还原能力最强,且总花青苷含量与DPPH自由基清除率和铁离子还原能力均存在极显著正相关。结构基因BrcF3H、BrcDFR、BrcANS和调节基因BrcTT8在6种材料中的表达量与总花青苷的含量呈正相关。调节基因BrcMYB75和BrcTTG1在紫色材料NJZX1-4叶片中具有较高的表达量,而BrcEGL3.2和BrcMYB90基因在所有材料中均无表达。[结论]不结球白菜不同材料间花青苷含量和抗氧化活性存在显著差异,且紫色材料富含的花青苷在高抗氧化性方面发挥了重要作用。此外,3个结构基因和3个调节基因的表达水平与总花青苷含量密切相关,在调控不结球白菜叶片着色过程中起重要作用。

关键词：不结球白菜花青苷抗氧化活性结构基因调节基因

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不同抗性甜瓜接种蔓枯病菌后内源激素含量变化及其相关基因的表达分析

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南京农业大学学报 2018年第2期41卷 248-255页

作者：鲁秀梅张宁夏美玲钱春桃陈劲枫南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095

[目的]本文旨在研究甜瓜抗感材料中内源激素含量及其相关基因表达量的分析,了解甜瓜抗蔓枯病的抗性机制。[方法]以抗蔓枯病甜瓜抗源PI420145和感蔓枯病甜瓜‘白皮脆’(对照)为材料,在接种蔓枯病菌后的不同时间(0、1、2、3、5、7 d)进行... 详细信息

[目的]本文旨在研究甜瓜抗感材料中内源激素含量及其相关基因表达量的分析,了解甜瓜抗蔓枯病的抗性机制。[方法]以抗蔓枯病甜瓜抗源PI420145和感蔓枯病甜瓜‘白皮脆’(对照)为材料,在接种蔓枯病菌后的不同时间(0、1、2、3、5、7 d)进行取样,测定内源激素乙烯、茉莉酸及水杨酸的含量,并利用荧光定量PCR技术分析叶片中乙烯、茉莉酸、水杨酸等防御信号途径中相关基因的表达特征。[结果]抗蔓枯病甜瓜材料PI420145叶片中的乙烯含量整体低于感蔓枯病材料‘白皮脆’,但在接种0和7 d时茉莉酸含量均高于‘白皮脆’,并且水杨酸含量也基本高于‘白皮脆’。在接种前期(0~3 d),PI420145叶片中乙烯途径相关基因ACS、EIN2的表达量显著高于‘白皮脆’,接种后期(5~7 d)ACS在PI420145中下调表达并且表达量显著低于‘白皮脆’。PI420145叶片中茉莉酸途径相关基因COI1、PDF1.2的表达量分别在接种后期和接种前期基本显著高于‘白皮脆’,而AOS表达量在接种后期则极显著低于‘白皮脆’。在PI420145叶片中除接种后1 d外,水杨酸途径相关基因EDS5的表达量均显著高于‘白皮脆’,而ICS、NPR1的表达量分别在接种后期和接种前期基本显著高于‘白皮脆’。[结论]PI420145叶片中低浓度的乙烯以及高浓度的茉莉酸和水杨酸提高了其对蔓枯病的抗病能力,PI420145叶片中EIN2、PDF1.2、EDS5和NPR1在接种早期的高表达促使其比‘白皮脆’更早一步对蔓枯病菌的侵染作出反应。

关键词：甜瓜蔓枯病内源激素基因表达

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有机硒肥对薄皮甜瓜香气成分和营养品质的影响

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中国瓜菜 2018年第7期31卷 7-12页

作者：夏美玲鲁秀梅任琴琴柯思佳钱春桃陈劲枫作物遗传与种质创新国家重点实验室.南京农业大学园艺学院南京210095

以薄皮甜瓜新品种(系)‘G6×4’为试材,研究叶面喷施不同浓度有机硒肥对薄皮甜瓜香气成分和营养品质的影响。以喷施清水为CK(对照),叶片喷施有机硒浓度分别为6、12、18、24和30 mg·L^(-1)。结果表明,有机硒肥处理对甜瓜果实的... 详细信息

以薄皮甜瓜新品种(系)‘G6×4’为试材,研究叶面喷施不同浓度有机硒肥对薄皮甜瓜香气成分和营养品质的影响。以喷施清水为CK(对照),叶片喷施有机硒浓度分别为6、12、18、24和30 mg·L^(-1)。结果表明,有机硒肥处理对甜瓜果实的香气种类和含量具有显著的影响。乙酸己酯、2,3-丁二醇-二乙酸酯、3-(甲硫基)乙酸丙酯、辛醇、3-羟基丁酮等特征香气成分的含量随着有机硒肥处理先升高后下降,在有机硒质量浓度12~18 mg·L^(-1)处理下,甜瓜果实的特征香气成分含量相对较高。有机硒质量浓度18~24 mg·L^(-1)时,有助于甜瓜果实可溶性固形物等营养物质含量的提高。综上所述,叶面喷施18 mg·L^(-1)有机硒是提高薄皮甜瓜香气成分和营养品质的适宜施硒处理。

关键词：薄皮甜瓜有机硒肥香气成分营养品质

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基因工程技术在甜瓜属作物分子育种中的应用与发展

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中国瓜菜 2018年第8期31卷 1-8页

作者：段莉莉朱拼玉李季陈劲枫作物遗传与种质创新国家重点实验室.南京农业大学园艺学院南京210095

黄瓜和甜瓜均属于葫芦科甜瓜属作物,作为重要的园艺作物在全世界广泛种植。我国黄瓜和甜瓜的种植面积与产量均居世界第一。不断培育优质高抗的新品种是促进产业持续发展的重要推动力,但常规育种存在转育效率低、育种周期长等问题。多年... 详细信息

黄瓜和甜瓜均属于葫芦科甜瓜属作物,作为重要的园艺作物在全世界广泛种植。我国黄瓜和甜瓜的种植面积与产量均居世界第一。不断培育优质高抗的新品种是促进产业持续发展的重要推动力,但常规育种存在转育效率低、育种周期长等问题。多年来瓜类育种家们一直致力于甜瓜属作物基因工程育种方法的探索和研究,随着黄瓜和甜瓜在基因组研究领域取得了重大突破,大量重要功能基因的发掘与克隆为基因工程育种带来了机遇,也促使甜瓜属作物基因工程技术研究进入了快速发展的阶段。就基因工程技术在甜瓜属作物分子遗传育种研究中的应用和发展现状、存在问题以及未来发展趋势等进行了探讨。

关键词：黄瓜甜瓜基因工程分子遗传

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调控植物生长—代谢平衡实现可持续发展农业

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生命的化学 2019年第5期39卷 943-949页

作者：李姗傅向东南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室中国科学院遗传与发育生物学研究所植物细胞与染色体工程国家重点实验室中国科学院大学

二十世纪五六十年代,半矮秆水稻和小麦新品种的育成和大面积推广,有效地解决了"高产与倒伏"之间的制约矛盾,这一历程即为众所周知的"绿色革命"。水稻半矮秆基因sd1(semi-dwarf1)既增加了水稻收获指数,又有效地解决... 详细信息

二十世纪五六十年代,半矮秆水稻和小麦新品种的育成和大面积推广,有效地解决了"高产与倒伏"之间的制约矛盾,这一历程即为众所周知的"绿色革命"。水稻半矮秆基因sd1(semi-dwarf1)既增加了水稻收获指数,又有效地解决了因密植和大量施肥导致的植株倒伏和减产问题,实现了水稻单产的大幅度提升。然而,半矮秆水稻和小麦品种也表现出其植物生长对氮肥响应的减弱,根系对氮肥的吸收速率下降,导致氮肥利用效率(nitrogen use efficiency, NUE)下降。因此,协同改良半矮化作物的高产与氮肥高效利用性状,对保障国家粮食安全和农业可持续发展具有重要意义。傅向东课题组的研究显示,水稻生长调节因子GRF4和生长抑制因子DELLA相互之间的反向平衡调节赋予了植物生长与碳-氮代谢之间的稳态共调节。DELLA蛋白高水平积累导致了作物半矮化,实现了植株耐高肥和抗倒伏的高产目标,但其伴随着氮肥利用效率的降低。相反,GRF4蛋白高水平积累能协同提高作物光合作用和氮肥利用效率,但并不改变"绿色革命"品种的半矮化优良性状,从而实现了在现有高产品种中协同提升产量和氮肥利用效率。DELLA-GRF4分子调控模块的解析为"少投入、多产出、保护环境"的绿色高产高效农作物新品种培育提供了理论基础和具有育种利用价值的新基因资源。

关键词：水稻 GRF4 DELLA 氮肥利用效率

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白菜BcMAF2基因克隆及功能验证

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西北植物学报 2018年第9期38卷 1571-1577页

作者：吴小婷邵帅旭任海波李林侯喜林刘同坤南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室南京210095

为了揭示白菜(Brassica campestris *** Makino)开花调控转录因子(MADS AFFECTING FLOWERING 2)MAF2在开花过程中的作用,该研究通过同源克隆的方法获得BcMAF2基因的全长序列。结果表明:(1)BcMAF2基因含有1个长度为588bp开放阅读框,编码... 详细信息

为了揭示白菜(Brassica campestris *** Makino)开花调控转录因子(MADS AFFECTING FLOWERING 2)MAF2在开花过程中的作用,该研究通过同源克隆的方法获得BcMAF2基因的全长序列。结果表明:(1)BcMAF2基因含有1个长度为588bp开放阅读框,编码196个氨基酸;将BcMAF2蛋白氨基酸序列与其他物种MAF2氨基酸比较表明,BcMAF2基因与其他物种中该基因具有高度保守的结构域。(2)将BcMAF2与YFP和HA标签融合,构建亚细胞定位载体pEarleyGate101-BcMAF2-YFP-HA,采用农杆菌介导法将其瞬时表达于本氏烟草(Nicotiana tabacum)叶片中,激光共聚焦显微镜观察发现BcMAF2蛋白定位于细胞核中,表明BcMAF2符合作为转录因子的功能。(3)将BcMAF2基因遗传转化拟南芥中进行功能验证,通过蛋白印迹试验获得5个过表达株系,且在选取的蛋白表达量较高的第8、10株拟南芥中均表现出明显延迟其抽薹开花表型。研究推测BcMAF2基因可能参与植物开花的春化途径。

关键词：白菜 BcMAF2 开花亚细胞定位转基因

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白菜类作物开花时间相关基因CCA1的克隆及功能标记开发

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江苏农业科学 2019年第20期47卷 84-91页

作者：刘东让侯喜林肖栋南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/江苏现代园艺工程技术中心/农业部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室

以1年生的油用型品种Yellow sarson(YS-143)与2年生的芜菁品种Vegetable turnip(VT-044)的cDNA为模板,克隆出CCA1基因cDNA全长序列,分析其核苷酸多态性。在这2份材料构建的200株F2分离群体中,选取极早和极晚开花的单株各24株,对在亲本... 详细信息

以1年生的油用型品种Yellow sarson(YS-143)与2年生的芜菁品种Vegetable turnip(VT-044)的cDNA为模板,克隆出CCA1基因cDNA全长序列,分析其核苷酸多态性。在这2份材料构建的200株F2分离群体中,选取极早和极晚开花的单株各24株,对在亲本上鉴定到的4个多态性位点进行PCR扩增,采用Pearson相关性分析研究基因型与开花时间表现型的关系。构建pEZS-NL-CCA1载体,利用亚细胞定位技术,分析CCA1基因在真核细胞中的表达情况。序列分析表明,YS-143与VT-044分别有1 665、1 647个核苷酸,分别编码了554、548个氨基酸。亲本之间核苷酸序列分析鉴定到12个差异位点,氨基酸同源进化树分析表明,十字花科的不结球白菜、大白菜、萝卜、油菜、拟南芥、亚麻芥聚集在同一分支中,而禾本科的大麦、玉米、水稻聚集在另一分支中。在F2分离群体上,Pearson相关性鉴定到位于亲本第727至第732个碱基处的1个多态性位点(ACCCTT/ACCCTT),有该位点的群体单株平均开花时间为39 d,极显著早于缺失该位点的群体单株平均开花时间104 d(P<0.01),表明白菜类作物CCA1基因的第727至第732个碱基的缺失(A05:472204-472209)与开花时间呈极显著相关,影响开花时间,可为光周期敏感的白菜类作物晚抽薹育种研究提供一定的理论依据。开发的该Insert/Delete(InDel)标记,可以作为功能分子标记进行辅助育种工作,以加快育种进程。亚细胞定位结果表明,CCA1基因主要在细胞核上表达。

关键词：白菜类作物开花时间 CCA1 InDel标记亚细胞定位

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