检索结果-内蒙古大学图书馆

大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A与其保持系NJCMS1B的生理生化特性比较分析

大豆科学 2017年第3期36卷 391-398页

作者：杨龙树李佳佳贺亭亭丁先龙张浩韩少怀盖钧镒杨守萍南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心/农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室(综合)/作物遗传与种质创新国家重点实验室/江苏省现代作物生产协同创新中心江苏南京210095 安徽农业大学农学院安徽合肥230036

以大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A及其保持系NJCMS1B的花芽为试验材料,利用试剂盒法和紫外分光光度计测定分析了糖分含量(可溶性糖和淀粉)和总ATPase、蔗糖磷酸合成酶(SPS)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、抗坏血酸氧化酶(AO)、过氧... 详细信息

以大豆质核互作雄性不育系NJCMS1A及其保持系NJCMS1B的花芽为试验材料,利用试剂盒法和紫外分光光度计测定分析了糖分含量(可溶性糖和淀粉)和总ATPase、蔗糖磷酸合成酶(SPS)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、抗坏血酸氧化酶(AO)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)以及过氧化物酶(POD)等酶活性的变化情况。结果表明:相较于保持系NJCMS1B,总ATPase、PEPCK、AO和CAT活性在不育系NJCMS1A中显著下降;糖分含量、SPS和SOD活性在不育系NJCMS1A中下降水平不显著;POD活性在不育系NJCMS1A中显著上升。根据结果分析推测,与能量代谢或胁迫响应等相关的物质或酶活性在不育系NJCMS1A中的亏损现象可能是NJCMS1A花粉败育的主要原因。

关键词：大豆质核互作雄性不育生理生化特性

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聚乙烯包装对白菜常温贮藏保鲜的影响

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江苏农业科学 2017年第8期45卷 176-178页

作者：汪敏赵永富侯喜林吴景霞蒋希芝王恒义江苏省农业科学院农业设施与装备研究所江苏南京210014 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095

以聚乙烯(PE)袋(1#包装,厚0.02 mm;2#包装,厚0.04 mm;3#包装,厚0.08 mm)包装新鲜白菜,研究常温贮藏条件下白菜失重率、黄化、新鲜度及袋内CO_2/O_2含量、内侧壁结露程度变化。结果显示,在4 d贮藏期间,包装后的白菜品质优于未包装组(对照... 详细信息

以聚乙烯(PE)袋(1#包装,厚0.02 mm;2#包装,厚0.04 mm;3#包装,厚0.08 mm)包装新鲜白菜,研究常温贮藏条件下白菜失重率、黄化、新鲜度及袋内CO_2/O_2含量、内侧壁结露程度变化。结果显示,在4 d贮藏期间,包装后的白菜品质优于未包装组(对照CK),储藏至第4天,对照组、1#和2#包装的白菜均不能食用,仅3#包装的白菜仍具有食用价值;失重率表现为3#<1#<2#2#>1#和3#;新鲜度表现为3#>1#>2#>CK。从3种包装袋内的CO_2/O_2含量来看,3#包装的气调效果强于1#和2#;3#包装袋内侧壁结露程度较轻,1#和2#包装较重。综合比较,3#包装对白菜常温贮藏保鲜效果最优。

关键词：白菜新型保鲜袋包装常温保鲜品质食用价值失重率黄化程度侧壁结露程度

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定量蛋白质组学分析揭示高温高湿胁迫对春大豆种子活力的影响

定量蛋白质组学分析揭示高温高湿胁迫对春大豆种子活力的影响

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中国作物学会作物种子专业委员会2017年学术年会

作者：魏家萍麻浩南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

南方春大豆种子在生理成熟(R6或R7期)过程中易受高温高湿(HTH)胁迫导致种子收获前恶化,种子活力下降,这已经严重制约了中国南方春大豆生产和应用的发展。本研究以抗种子田间劣变种质湘豆3号和不抗种质宁镇1号为材料,在种子发育到生理成... 详细信息

南方春大豆种子在生理成熟(R6或R7期)过程中易受高温高湿(HTH)胁迫导致种子收获前恶化,种子活力下降,这已经严重制约了中国南方春大豆生产和应用的发展。本研究以抗种子田间劣变种质湘豆3号和不抗种质宁镇1号为材料,在种子发育到生理成熟至完全成熟期期间模拟田间HTH胁迫处理,运用蛋白质组学技术(iTRAQ),分别研究春大豆叶片、子叶和胚在不同HTH胁迫时间(24、96和168h)的蛋白质表达谱的变化。研究表明HTH胁迫处理(24、96和168 h)后,在湘豆3号的子叶、胚和叶片中分别检测到247,179,517个在处理与对照之间表达量上存在显著差异的蛋白。在宁镇1号的子叶、胚和叶片中分别检测到236,366,479个在处理与对照之间表达量上存在显著差异的蛋白。这些蛋白主要参与胁迫防御,能量代谢,光合作用,蛋白合成,信号转导以及贮藏蛋白等代谢途径和细胞过程,且抗性种质湘豆3号的细胞防御,光合作用和蛋白合成途径呈正向调控,不抗种质宁镇1号的光合作用、信号转导和能量代谢途径呈负向调控。高温高湿胁迫下抗性种质湘豆3号较不抗种质宁镇1号具有较强的光合能力,更加稳定的细胞超微结构,较低的能量消耗,较高的蛋白含量,较强的抗氧化和细胞修复及防御能力。这些可能是其具有较强的抗种子田间劣变性的关键原因。本研究在蛋白水平上揭示了高温高湿下南方春大豆种子田间劣变性和劣变抗性的机制,为遗传育种改良和新品种选育奠定种质基础。

关键词：春大豆高温高湿种子劣变蛋白质组学活力

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基于流式细胞学分拣的百萨偃麦草染色体4JL基因组序列分析、特异标记开发及物理作图

基于流式细胞学分拣的百萨偃麦草染色体4JL基因组序列分析、特异...

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第八届全国小麦基因组学及分子育种大会

作者：王青马旭辉杨阳王俊娟杜培浦静庄丽芳亓增军南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

百萨偃麦草4J染色体含有蓝粒基因。蓝粒小麦富含花翠素类糖苷,对人类健康有益,同时,蓝粒基因表现很强的剂量效应和组织特异性,可以作为基因和染色体工程的重要标记基因,但迄今尚没有成功克隆小麦蓝粒基因的报道。我们前期通过配子电离辐... 详细信息

百萨偃麦草4J染色体含有蓝粒基因。蓝粒小麦富含花翠素类糖苷,对人类健康有益,同时,蓝粒基因表现很强的剂量效应和组织特异性,可以作为基因和染色体工程的重要标记基因,但迄今尚没有成功克隆小麦蓝粒基因的报道。我们前期通过配子电离辐射,已创制出稳定的4J变异体20多个,包括端体、等臂染色体、整臂易位、小片段易位、大片段易位和中间插入易位等,并初步构建了包含101个标记的4J物理图谱,其中定位于4JL的标记56个。本研究为精细定位和克隆蓝粒相关基因,首先,综合利用寡核苷酸探针套painting、GISH和分子标记对这些变异体进行了准确鉴定,除明确了易位染色体身份外,还揭示多条小麦染色体同时存在缺失或易位,说明寡核苷酸探针套painting、GISH和分子标记在综合鉴定复杂变异中的应用潜力;其次,与国外科学家合作,分拣并测序获得了端体4JL基因组序列70.7 Gb,通过初步拼接获得588 Mb的contigs,初步注释分析发现4JL包含1897个基因,其重复序列中反转录转座子含量最高,其次为DNA转座子;最后,以这些序列为基础,通过生物信息学分析,开发了百萨偃麦草基因组专化寡核苷酸探针4个和基因组SSR引物1000对,通过对其中357对引物进行分析,新开发4JL特异标记157个,并构建了包含200个标记的4JL物理图谱,将BaThb和17个特异标记共定位于两个蓝粒小片段易位的重叠区段,为蓝粒基因发掘提供了重要信息。

关键词：小麦百萨偃麦草蓝粒基因染色体分拣物理作图

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基于寡核苷酸探针套painting的中国春非整倍体高清核型及应用

基于寡核苷酸探针套painting的中国春非整倍体高清核型及应用

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第八届全国小麦基因组学及分子育种大会

作者：亓增军庄丽芳王丹蕊杜培朱敏秋黄昕怡张思宇王俊娟陈学君吴楠南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

随着小麦参考基因组序列的日趋完善,品种及其突变体重测序将会成为小麦功能基因发掘的重要途径。但是作为异源六倍体,小麦在自然或人工进化中,常发生染色体变异,形成丰富的非整倍体和结构重排,全面揭示小麦染色体多样性及其结构变异,对... 详细信息

随着小麦参考基因组序列的日趋完善,品种及其突变体重测序将会成为小麦功能基因发掘的重要途径。但是作为异源六倍体,小麦在自然或人工进化中,常发生染色体变异,形成丰富的非整倍体和结构重排,全面揭示小麦染色体多样性及其结构变异,对于正确的基因组序列组装、遗传作图和关联分析具有重要意义。基于寡核苷酸探针(套)的FISH技术克服了以往鉴定技术的局限性,具有简单、经济和高效特点,为染色体研究提供了新方法。南京农业大学自2010年开始寡核苷酸探针开发和应用研究,2013年成功将著名的重复序列pSc119.2和pAsl开发成8个56-59nt的单链寡核苷酸探针,分别命名为pSc119.2-1～2和pAs1-1～6,建立了基于重复序列的寡核苷酸探针(套)开发和应用体系。迄今已开发一批寡核苷酸探针(套),成功用于小麦、大麦、玉米和花生染色体多样性和结构变异鉴定、品种演化和染色体生物学研究。利用我们进一步优化的寡核苷酸探针套,通过一次FISH对17个中国春非整倍体进行分析,构建了准确识别3个基因组和全部染色体和染色体臂的高清核型,发现4个非整倍体发生变异;以此核型为参照,该探针套可以清晰识别供试23个小麦地方品种、栽培品种(系)、人工合成品种和亲物种染色体多样性和结构重排,其中,小麦-黑麦易位系T1 RS·1BL、"矮孟牛"中的相互易位T1 RS·7DL和T7DS·1BL、小麦-簇毛麦易位系T6VS·6AL和T6VS·6DL均可以通过一次FISH清晰识别。进一步对江苏省46个小麦品种(系)分析,发现14条染色体表现多态或结构变异,其中,在扬麦3号、扬麦13和宁麦资32包含小片段相互易位T4AS·4AL-1BL和T1BS·1BL-4AL。寡核苷酸探针套可以有效揭示栽培小麦及其亲物种染色体多样性和结构变异,高清晰的中国春非整倍体核型提供了新的参考标准。

关键词：寡核苷酸探针套painting 染色体多样性非整倍体标准核型

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利用zebularine诱致小黑麦染色体变异库的研究

利用zebularine诱致小黑麦染色体变异库的研究

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第八届全国小麦基因组学及分子育种大会

作者：马旭辉王青马洁云吴楠罗腾霄倪爽王俊娟陈学君庄丽芳亓增军南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

筛选稳定可靠的化学诱变剂对于作物染色体工程育种具有很好的应用价值。Zebularine是一种胞苷类似物,除具有抑制胞苷脱氨酶功能外,还是一种有效的DNA甲基转移酶抑制剂。以普通小麦辉县红与荆州黑麦双二倍体荆辉1号为试材,发现zebularin... 详细信息

筛选稳定可靠的化学诱变剂对于作物染色体工程育种具有很好的应用价值。Zebularine是一种胞苷类似物,除具有抑制胞苷脱氨酶功能外,还是一种有效的DNA甲基转移酶抑制剂。以普通小麦辉县红与荆州黑麦双二倍体荆辉1号为试材,发现zebularine可以有效用于诱发染色体数目和结构变异,建立了基于干种子、孕穗期和分蘖期处理诱导染色体变异的新方法。通过对诱变M1-M3代连续追踪分析,发现处理M1代根尖细胞发生多种不同的染色体变异,包括端体、缺失、无着丝粒片段、多着丝粒染色体、环状染色体、大片段易位、小片段易位和中间插入易位等,从根尖细胞包含变异的单株自交M2代中发现52.2%植株中均可以检测到端体、缺失、易位和数目变异,从相应的M3株系中可以成功获得稳定的不同变异类型,综合寡核苷酸探针套paiating和GISH分析,可以清晰区分全部小麦和黑麦染色体及其大部分变异类型,目前从干种子诱变后代中已经准确鉴定了179个M3家系的559个单株,共发现涉及稳定变异的单株253个,其中涉及黑麦染色体缺体单株69株,涉及1RR染色体,由此建立了一套基于小黑麦背景的黑麦缺体系;另外,还鉴定出涉及黑麦端体的单株66株,涉及除3R外的全部黑麦染色体,有望育成一套完整的基于小黑麦背景的黑麦染色体端体系;研究还发现黑麦染色体缺失系40株、易位系19株以及复杂变异59株,涉及全部黑麦染色体,为小黑麦重要基因的发掘与区段定位、染色体互作和多倍体演化等研究提供了新的遗传工具材料。

关键词： Zebularine 寡核苷酸探针套painting 小黑麦染色体变异

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小麦远缘育种原件创制

小麦远缘育种原件创制

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第八届全国小麦基因组学及分子育种大会

作者：陈佩度张守忠张瑞奇应长琴周波王苏玲南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

小麦亲植物蕴含丰富的基因资源,通过远杂交、杂种幼胚培养已获得小麦与众多亲物种的远杂种,并通过创制小麦与亲物种的双倍体、异附加系、异代换系和易位系,将携带有用基因的染色体组、染色体和染色体片段导入栽培小麦。由于在导入亲物... 详细信息

小麦亲植物蕴含丰富的基因资源,通过远杂交、杂种幼胚培养已获得小麦与众多亲物种的远杂种,并通过创制小麦与亲物种的双倍体、异附加系、异代换系和易位系,将携带有用基因的染色体组、染色体和染色体片段导入栽培小麦。由于在导入亲物种有用基因的同时会或多或少地带有该染色体或染色体片段上所伴带的不利基因,因此创制携有目标基因又尽可能少带不利基因的小片段易位尤为重要。南京农业大学细胞遗传研究所利用对异染色体系的雌、雄配子辐射或利用促进部分同源染色体配对的ph1bph1b基因,通过分子、细胞遗传学分析、结实性选择和表型鉴定获得了一批携有抗白粉病、锈病、赤霉病或籽粒特殊品质的小麦与簇毛麦、大赖草、鹅观草、百萨偃麦草等亲植物的易位系。为了能更好地为全国各小麦育种计划利用,我们分别选用我国南方和北方不同小麦生态区域的推广品种、骨干亲本或有苗头的新品系作亲本杂交、回交,进一步改良这些易位系的农艺性状。现已选出一批在扬麦158、扬麦15、绵阳26、郑9023、矮抗58、石麦4185、济麦22等背景上的携有抗白粉病基因Pm21的小片段易位系。这些易位系已经向我国各小麦育种单位发放,利用经改良的小麦远育种原件再与当地优良品种(系)杂交、回交,将大大加快育种进程和提高育种效率。

关键词：小麦远杂种种质创新育种原件

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芜菁花叶病毒诱导的基因沉默系统在不结球白菜各器官的沉默效应

芜菁花叶病毒诱导的基因沉默系统在不结球白菜各器官的沉默效应

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中国园艺学会第十三次全国会员代表大会暨2017年学术年会

作者：张昌伟俞静高立伟刘畅李英肖栋刘同坤侯喜林南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

VIGS技术指的是利用携带目的基因cDNA片段的病毒载体侵染植株,随着病毒的复制和转录而特异性地诱导序列同源基因mRNA降解或被甲基化等修饰,从而引起植物表型或生理指标变化来对鉴定基因的功能。与基因敲除、反义抑制、转基因等研究方法... 详细信息

VIGS技术指的是利用携带目的基因cDNA片段的病毒载体侵染植株,随着病毒的复制和转录而特异性地诱导序列同源基因mRNA降解或被甲基化等修饰,从而引起植物表型或生理指标变化来对鉴定基因的功能。与基因敲除、反义抑制、转基因等研究方法相比,VIGS不依赖于转基因植株的获取及突变体筛选,成本低廉,操作简单,高通量,获得表型快。VIGS可广泛应用于抗病反应,植物与昆虫互作研究,非生物胁迫,代谢途径及生长发育等相关基因的研究,目前已经成为功能基因组学研究领域最具吸引力的技术手段之一,故针对经济作物构建新的VIGS系统成为当下的重要任务,开发新的VIGS载体并建立起稳定的VIGS体系将大大拓宽VIGS的应用范围。本研究中以不结球白菜品种‘四九菜心’为材料,利用芜菁花叶病毒（Turnip yellow mosaic virus,TYMV）质粒pTY-s构建载体pTY-PDS,采用基因枪法将重组质粒转染植株,可观察到不结球白菜多个器官出现光漂白现象,并用实时定量验证了病毒载体pTY-s在白菜上诱导基因沉默的能力。利用携带白菜八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase,PDS）片段的重组质粒PDS-PTY侵染白菜,观察到FYMV诱导的基因沉默系统在不结球白菜根、茎、叶、花、种荚等多个器官产生不同程度的沉默反应,并检测到50%6%的沉默效率,成功建立了白菜病毒诱导基因沉默的体系,为未来园艺作物基因功能鉴定、植物分子育种、植物保护等方面的研究提供了一个强有力的工具。

关键词：不结球白菜基因沉默芜菁花叶病毒

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高温高湿下大豆钙依赖蛋白激酶Gm CDPK SK5互作蛋白基因的分离及功能验证

高温高湿下大豆钙依赖蛋白激酶Gm CDPK SK5互作蛋白基因的分离及...

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中国作物学会作物种子专业委员会2017年学术年会

作者：周亚丽麻浩南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

大豆种子在发育过程中容易受到高温高湿的影响,导致收获前种子田间劣变严重。实验室前期研究发现Gm CDPK SK5与高温高湿胁迫下春大豆种子活力的形成相关。通过构建高温高湿胁迫下抗种子田间劣变春大豆种子膜蛋白酵母双杂交文库,以GmCDPK... 详细信息

大豆种子在发育过程中容易受到高温高湿的影响,导致收获前种子田间劣变严重。实验室前期研究发现Gm CDPK SK5与高温高湿胁迫下春大豆种子活力的形成相关。通过构建高温高湿胁迫下抗种子田间劣变春大豆种子膜蛋白酵母双杂交文库,以GmCDPKSK5为诱饵筛选在细胞膜上与之互作的蛋白,初步获得了6个与之互作的蛋白,分别是:胚胎晚期丰富蛋白(LEA)、翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)、种子成熟蛋白(PM27)、微粒体油酸脱氢酶(FAD)以及功能未知蛋白2个。它们与前人发现的CDPK互作蛋白不同。通过酵母双杂交回转验证实验和双分子荧光互补(BiFC)实验进一步验证了这些蛋白与GmCDPK SK5互作。qRT-PCR结果表明,Gm CDPK SK5、Gm TCTP、Gm LEA、Gm PM27及Gm FAD这五个基因均能响应高温高湿且表达趋势基本一致。研究表明:Gm CDPK SK5与Gm TCTP、Gm LEA、Gm PM27及Gm FAD相互作用,并且可能共同参与种子发育过程中对高温高湿胁迫的调控。

关键词：春大豆高温高湿种子活力蛋白互作钙依赖蛋白激酶

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小麦caspase-like proteases基因TaMCA5的克隆和功能分析

小麦caspase-like proteases基因TaMCA5的克隆和功能分析

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江苏省遗传学会2017年学术研讨会——“技术创新与遗传学发展”

作者：狄昭灿黄振朴高丽刘佳倩胡平肖进王秀娥邢莉萍曹爱忠南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室

由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearium)侵染引起的小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是危害小麦安全生产的重要病害之一。细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)在活体寄生菌和腐体寄生菌与寄主互作方面具有两面性:活体寄生菌... 详细信息

由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearium)侵染引起的小麦赤霉病(Fusarium head blight,FHB)是危害小麦安全生产的重要病害之一。细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)在活体寄生菌和腐体寄生菌与寄主互作方面具有两面性:活体寄生菌与寄主互作,寄主通过信号传导途径启动PCD来达到抗病的目的,而腐生寄生菌则在与寄主互作过程中,协助寄主启动PCD信号传导途径导致寄主细胞死亡,从而达到侵染和繁殖的目的。动物细胞中的caspase (Cysteine aspartate protease)是PCD的关键调控因子,而植物中也存在caspase-like proteases,其中一类为metacaspases基因。已有研究证实TaMAC4是PCD的正向调控因子,而TaMAC1是PCD的负向调控因子。本研究克隆了一个新的负向调控PCD的metacaspases基因TaMAC5,并对其在赤霉菌侵染过程中的功能进行了研究。本研究从感赤霉病小麦Alondra's中克隆了一个新的caspase-likeproteases基因TaMCA5,该基因全长1376bp,包含长1149bp的开放阅读框,编码382个氨基酸,预计蛋白分子量41.7kDa,属于I型metacaspases。TaMCA5基因的表达量在Alondra's穗部的内颖、花药和穗轴较高,在赤霉菌接种后呈明显上调表达趋势,并在接种72小时后其表达水平达到峰值,推测其协助赤霉菌在小麦穗部由活体寄生侵染阶段过渡到腐体寄生阶段。利用农杆菌注射法在烟草叶片中瞬间表达TaMCA5基因,能明显抑制由BAX引起的细胞坏死,说明该基因在体内具有PCD抑制活性。利用BMSV-VIGS系统在感赤霉病材料石麦14、周麦18和郑麦9023的穗部诱导TaMCA5沉默,结果表明Ta MCA5基因沉默后赤霉病感病性均显著增强。上述研究结果显示:感赤霉病品种中受赤霉菌诱导表达的Ta MCA5可能通过抑制赤霉菌早期活体寄生阶段寄主的PCD途径提高寄主对赤霉菌的感病性。本研究进一步构建了Ta MCA5基因的过量表达载体,利用基因枪法转化感病小麦品种Alondra's,目前已经获得转基因T0代植株。后续将通过对转基因高代株系的赤霉病抗性鉴定,研究PCD抑制基因的超量表达是否可提高感病寄主的赤霉病抗性。

关键词： PCD 感病性 caspase-like proteases TaMCA5 功能分析

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