检索结果-内蒙古大学图书馆

土壤学报 2009年第6期46卷 1096-1101页

作者：王萍崔中利刘标孙波曹慧南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 国家环境保护部南京环境科学研究所南京210042 中国科学院南京土壤研究所南京210008

提高土壤微生物的可培养性,获得纯培养微生物菌株,是微生物生态学研究的基础。采用三种培养基对土壤细菌进行分时段计数,以细菌通用引物扩增细菌16S rDNA片段,用限制性内切酶HhaI酶切PCR产物,对酶切图谱进行分型,研究不同培养方法对土... 详细信息

提高土壤微生物的可培养性,获得纯培养微生物菌株,是微生物生态学研究的基础。采用三种培养基对土壤细菌进行分时段计数,以细菌通用引物扩增细菌16S rDNA片段,用限制性内切酶HhaI酶切PCR产物,对酶切图谱进行分型,研究不同培养方法对土壤细菌多样性和可培养的影响。结果表明,LB、CSEA、W SA培养基192 h后每g干土获得的细菌数量分别为14.84×107、10.27×107和6.91×107CFU,但微生物多样性指数以W SA为最高,LB多样性指数最低;三种培养基培养的细菌菌群有一定的相似性,LB和CSEA培养基间的Jaccard指数为57.69%,LB和W SA培养基之间为53.13%,而CSEA和W SA培养基的相似性指数达66.67%;16S rDNA测序结果表明,所获得的土壤细菌优势种群在分类方面主要属于γ-和β-变形杆菌以及放线菌亚门,其中某些OTUs中的16S rDNA序列与Burkholderiaceae bacterium、Rhodococcus和Mycobac-terium属具有较高的同源性,推测其细胞能够分泌复苏促进因子,有效地提高土壤细菌的可培养性。

关键词：微生物多样性可培养性 RFLP分析培养基培养时间

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甲基对硫磷降解菌PF32的分离鉴定及其降解特性研究

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农药学学报 2009年第3期11卷 329-334页

作者：许育新冯昭中陆鹏张隽李顺鹏黄星南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室生命科学学院南京210095 浙江省农业科学院环境资源与土壤肥料研究所杭州310021

从某农药厂采集污泥,采用驯化富集的方式分离得到1株能以甲基对硫磷为唯一碳源生长的菌株,命名为PF32。根据表型特征、生理生化特性和16SrRNA基因序列相似性分析,鉴定该菌株为寡养单胞菌Stenotrophomonas sp.。PF32能在24h内降解浓度为1... 详细信息

从某农药厂采集污泥,采用驯化富集的方式分离得到1株能以甲基对硫磷为唯一碳源生长的菌株,命名为PF32。根据表型特征、生理生化特性和16SrRNA基因序列相似性分析,鉴定该菌株为寡养单胞菌Stenotrophomonas sp.。PF32能在24h内降解浓度为100mg/L的甲基对硫磷,降解率99%以上。PF32降解甲基对硫磷的最适pH值为7.0,最适温度为30℃,该菌降解甲基对硫磷的速率和起始接种量呈正相关。降解谱试验结果表明,PF32对辛硫磷、倍硫磷、杀螟硫磷、三唑磷、毒死蜱也有较好的降解效果。

关键词：甲基对硫磷微生物降解寡养单胞菌属 PF32 降解特性

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转座子挽救法克隆鞘氨醇单胞菌CDS-1中呋喃丹水解酶相关基因

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应用与环境生物学报 2009年第5期15卷 677-681页

作者：徐剑宏洪青武俊严秋香李顺鹏江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室江苏省食品质量安全重点实验室南京210014 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

用含Tn5转座子的自杀性质粒pSC123诱变呋喃丹降解菌Sphingomonas agrestis CDS-1,获得失去呋喃丹降解功能的突变株CDS-M1.以pMD18-T为载体在E. coli DH5α中构建了CDS-M1的基因组文库,采用转座子挽救法对Tn5插入位点两侧翼的序列进行克... 详细信息

用含Tn5转座子的自杀性质粒pSC123诱变呋喃丹降解菌Sphingomonas agrestis CDS-1,获得失去呋喃丹降解功能的突变株CDS-M1.以pMD18-T为载体在E. coli DH5α中构建了CDS-M1的基因组文库,采用转座子挽救法对Tn5插入位点两侧翼的序列进行克隆与测序,根据测序结果(共4551个碱基)设计引物,从CDS-1的基因组中扩增到同样大小的片段,把该片断克隆到广宿主载体pPZP201上,得到重组质粒pCDZ1,通过三亲接合的方法把pCDZ1导入CDS-M1中进行功能互补实验,结果显示CDS-M1的呋喃丹水解功能得到了恢复,表明该片断中包含呋喃丹水解酶相关基因.

关键词： Sphingomonas agrestis CDS-1 呋喃丹转座子挽救法基因克隆

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三唑磷降解菌株GS-1的分离鉴定及其降解特性的研究

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微生物学通报 2009年第8期36卷 1143-1149页

作者：郭新强李荣林栋青朱彬李顺鹏蒋建东南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 泰州出入境检验检疫局江苏泰州225300

从有机磷农药污水处理池污泥中分离到一株能高效降解三唑磷的菌株GS-1,通过生理生化实验和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为Diaphorobacter sp.。菌株GS-1能以三唑磷为唯一碳源生长,能在12h内降解100mg/L的三唑磷至检测不出的水平... 详细信息

从有机磷农药污水处理池污泥中分离到一株能高效降解三唑磷的菌株GS-1,通过生理生化实验和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为Diaphorobacter sp.。菌株GS-1能以三唑磷为唯一碳源生长,能在12h内降解100mg/L的三唑磷至检测不出的水平。菌株GS-1降解三唑磷的过程中会产生中间代谢产物苯唑醇(1-苯基-3-羟基-1,2,4-三唑),36h后苯唑醇被完全转化。菌株GS-1降解三唑磷的最适pH值为8.0,最适温度为30°C,且对杀螟硫磷、辛硫磷、毒死蜱和甲基对硫磷等农药具有良好降解效果。菌株GS-1对三唑磷、杀螟硫磷和辛硫磷具有趋化性,显示了降解性和趋化性密切相关。本研究显示了菌株GS-1具有良好的生物修复应用前景。

关键词：三唑磷降解 Diaphorobacter sp. 趋化性苯唑醇

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无色菌产酸对土壤溶液重金属浓度及海州香薷重金属吸收的影响

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土壤 2009年第3期41卷 425-431页

作者：唐明灯吴龙华李振高骆永明胡锋盛下放江春玉中国科学院土壤环境与污染修复重点实验室(中国科学院南京土壤研究所) 南京210008 南京农业大学资源与环境科学学院南京210095 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

利用培养试验和盆栽试验研究了一株无色菌(Achromatium sp.)对复合污染土壤上Cu、Zn的溶出效果及其对海州香薷(Elsholtzia splendens)生长和Cu、Zn吸收性的影响。结果表明,菌株在培养试验(pH=4.65)中的产酸效果较盆栽试验(7.3<pH<... 详细信息

利用培养试验和盆栽试验研究了一株无色菌(Achromatium sp.)对复合污染土壤上Cu、Zn的溶出效果及其对海州香薷(Elsholtzia splendens)生长和Cu、Zn吸收性的影响。结果表明,菌株在培养试验(pH=4.65)中的产酸效果较盆栽试验(7.3生物量和地上部Cu浓度,显著(p<0.05)提高海州香薷对污染土壤中Cu的去除潜力。

关键词：细菌 pH 重金属海州香薷植物修复

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转基因棉花种植对土壤卡那霉素抗性细菌多样性的影响

转基因棉花种植对土壤卡那霉素抗性细菌多样性的影响

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第五次全国土壤生物和生物化学学术研讨会

作者：彭文涛汪峰崔中利曹慧南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

土壤微生物的多样性及其活性是保持农业生态系统稳定的基础,而种植不同的作物对土壤微生物的多样性结构和活性具有显著的影响。本研究通过菌体PCR的方法,用细菌通用引物63F和1387R对江苏省大丰市三龙镇上海农场中卡那霉素抗性菌株的16S ... 详细信息

土壤微生物的多样性及其活性是保持农业生态系统稳定的基础,而种植不同的作物对土壤微生物的多样性结构和活性具有显著的影响。本研究通过菌体PCR的方法,用细菌通用引物63F和1387R对江苏省大丰市三龙镇上海农场中卡那霉素抗性菌株的16S rDNA片段进行扩增,扩增产物用两种限制性内切酶HhaⅠ和Rsa 1分别酶切,获得该土壤250个卡那霉素抗性菌落酶切图谱来研究转基因棉花根际土壤中卡那霉素抗性细菌的多样性及群落构成。结果表明,转基因棉花较常规棉花根系土壤中卡那霉素抗性细菌的多样性和种群结构产生了一定影响。转基因植物的大量种植可能存在一定得生态风险。本研究为进一步研究江苏省大丰市三龙镇上海农场微生物生态功能提供了基础资料。

关键词：转基因棉花卡那霉素抗性土壤微生物 RFLP分析

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阿维菌素降解菌株AW70的分离鉴定及降解特性研究

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土壤 2009年第4期41卷 607-611页

作者：李荣管晓进陈荣宗朱彬 Shinawar Waseem Ali 李顺鹏蒋建东南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江西柳浪农业应用科技有限公司江西抚州344500 泰州出入境检验检疫局江苏泰州225300

从长期受阿维菌素农药污染的土壤中分离到一株能高效降解阿维菌素的菌株AW70。结合生理生化实验和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为伯克霍尔德氏菌属(Burkholderiasp.),GenBank登录号为EU295449。菌株AW70能利用阿维菌素为唯一C源... 详细信息

从长期受阿维菌素农药污染的土壤中分离到一株能高效降解阿维菌素的菌株AW70。结合生理生化实验和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为伯克霍尔德氏菌属(Burkholderiasp.),GenBank登录号为EU295449。菌株AW70能利用阿维菌素为唯一C源生长,在温度25℃～42℃和pH6.5～8.5范围时降解能力较好,其最适降解温度为30℃,最适初始pH值为7。48h对50mg/kg阿维菌素的降解率大于85%。南丰蜜桔上农药降解试验结果表明,喷施菌株AW70菌剂的蜜桔中未检测到阿维菌素的残留,表明该菌株具有良好的应用前景。

关键词：阿维菌素鉴定生物降解 AW70

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复混肥中缩二脲含量对作物生长的影响

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中国土壤与肥料 2009年第6期 41-46页

作者：平泉瑞邹凤珠黄为一南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 农业部农产品质量安全检测中心(南京) 江苏南京210036

采用水培和盆栽法,研究了复混肥中不同含量的缩二脲对作物生长的影响。水培施肥水平为每升水溶液中复混肥(10-8-7)含量分别为0.5 g和1.0 g,即每升水溶液中含氮量达到56.05 mg和112.1 mg;土壤施肥水平为每千克土壤中复混肥(10-8-7)含量... 详细信息

采用水培和盆栽法,研究了复混肥中不同含量的缩二脲对作物生长的影响。水培施肥水平为每升水溶液中复混肥(10-8-7)含量分别为0.5 g和1.0 g,即每升水溶液中含氮量达到56.05 mg和112.1 mg;土壤施肥水平为每千克土壤中复混肥(10-8-7)含量分别为0.5 g和1.0 g,即每千克土壤中含氮量达到56.05 mg和121.1 mg。水培试验结果表明:每升水溶液中,在适宜各供试作物生长的施肥条件下,复混肥中缩二脲对冬小麦、玉米、番茄、油菜、水稻的毒害作用的临界值分别为35、40、20、15、15 mg。盆栽试验结果表明:在适宜各供试作物生长的施肥条件下,缩二脲对冬小麦、玉米、番茄、油菜、水稻的毒害作用的临界值分别为所施复混肥(10-8-7)含量的1.6%、2.0%、2.0%、2.0%、2.0%。当高于这个临界值时,缩二脲对此5种作物会造成毒害作用。考虑到复混肥的实际制造过程中大量使用含氯化肥,氯离子含量波动大,建议国家在制定复混肥产品标准时缩二脲含量应限制在1%以下为宜。

关键词：水培盆栽缩二脲复混肥毒害

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棕点湍蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化、基因克隆及活性分析

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Zoological Research 2009年第2期30卷 165-170页

作者：冯浩李宗杰吕毅王美娟李建许南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 上海应用技术学院上海200235 中国科学院昆明动物研究所动物模型和人类疾病机理重点实验室云南昆明650223

通过分离纯化棕点湍蛙(Amolops loloensis)皮肤分泌液中的生物活性物质,得到有促胰岛素释放活性的分离峰,并鉴定其结构。采用葡聚糖SephadexG-50凝胶层析和反相高效液相(RP-HPLC)等手段对棕点湍蛙皮肤分泌液进行分离纯化,利用胰岛素释... 详细信息

通过分离纯化棕点湍蛙(Amolops loloensis)皮肤分泌液中的生物活性物质,得到有促胰岛素释放活性的分离峰,并鉴定其结构。采用葡聚糖SephadexG-50凝胶层析和反相高效液相(RP-HPLC)等手段对棕点湍蛙皮肤分泌液进行分离纯化,利用胰岛素释放实验进行活性检测,Edman降解法测定活性峰的氨基酸序列,反转录法构建cDNA文库并克隆其基因。得到一个具有显著的促胰岛素释放活性的十六肽,测得其氨基酸序列为:FMPIVGKSMSGLSGKL-NH2,命名为amolopin-1。由cDNA(开放阅读框为192bp)推导的氨基酸一级结构显示,其前体由64个氨基酸残基(aa)组成,包括高度保守的信号肽(22aa),酸性肽以及成熟肽。经过数据库序列比对,从棕点湍蛙皮肤中得到一个新的促胰岛素释放肽,进一步分析其作用机理和药代动力学,极有可能得到一个新的治疗糖尿病的降糖药物。

关键词：棕点湍蛙皮肤分泌液促胰岛素释放肽胰岛素分泌

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真姬菇栽培菌株的ITS和SSR分析

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上海农业学报 2009年第3期25卷 59-64页

作者：董岩陈辉赵明文冯志勇南京农业大学生命科学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室南京210095 农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市农业遗传育种重点实验室上海市食用菌工程技术研究中心上海市农业科学院食用菌研究所上海201106

采用ITS和SSR分子标记技术,对27个真姬菇菌株进行遗传分析。通过内转录间隔区(ITS)区域测定和比较分析,结果显示:供试菌株ITS序列长度为594 bp,与GenBank上登录的真姬菇菌株ITS序列相似度为99%以上,在种的水平上证明供试菌株为真姬菇。... 详细信息

采用ITS和SSR分子标记技术,对27个真姬菇菌株进行遗传分析。通过内转录间隔区(ITS)区域测定和比较分析,结果显示:供试菌株ITS序列长度为594 bp,与GenBank上登录的真姬菇菌株ITS序列相似度为99%以上,在种的水平上证明供试菌株为真姬菇。利用简单重复序列(SSR)标记技术和转移扩增技术,根据香菇、糙皮侧耳、灰盖鬼伞基因组序列设计引物,对真姬菇供试菌株基因组DNA进行扩增。从54对引物中筛选出23对能够扩增出稳定带型且菌株之间带型差异明显的SSR引物。利用23对引物对全部供试菌株进行扩增,共扩增133条条带,其中多态性条带为108条,多态性比率达到81.2%。UPGMA聚类分析结果表明:大部分常规栽培菌株和工厂化栽培菌株聚在不同组,说明两者之间的遗传背景存在明显差异。根据获得菌株的特有SSR标记分析表明:利用7对引物可以将工厂化栽培菌株区分开,其中2个工厂化栽培菌株各自具有1条特异条带,其他工厂化栽培菌株均可通过引物组合法区分开。

关键词：真姬菇简单重复序列(SSR) 遗传多样性内转录间隔区(ITS)

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