检索结果-内蒙古大学图书馆

土壤通报 2006年第4期37卷 761-763页

作者：何琳燕曹广祥盛下放钱永禄刘丽农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院江苏南京210095 江苏兴澄集团公司江苏江阴214432 江苏阳光生态农林开发有限公司江苏江阴214426

采用添加高效腐熟菌剂NMF菌群进行奶牛粪便的腐熟试验。结果表明,接种NMF菌剂的奶牛粪便在25 d内可以达到腐熟标准,氮磷钾总养分和腐植酸分别比不接菌处理提高18%和45%。NMF菌剂可以通过改变微生物区系、增加纤维素酶和多酚氧化酶活性... 详细信息

采用添加高效腐熟菌剂NMF菌群进行奶牛粪便的腐熟试验。结果表明,接种NMF菌剂的奶牛粪便在25 d内可以达到腐熟标准,氮磷钾总养分和腐植酸分别比不接菌处理提高18%和45%。NMF菌剂可以通过改变微生物区系、增加纤维素酶和多酚氧化酶活性等途径加快腐熟速度,促进腐熟程度。

关键词：腐熟菌剂牛粪堆肥

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SEFA-PCR法克隆灵芝鲨烯合酶基因启动子及其序列分析

SEFA-PCR法克隆灵芝鲨烯合酶基因启动子及其序列分析

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首届全国食用菌中青年专家学术交流会

作者：李娜王世明陈军李玉祥赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

鲨烯合酶是灵芝三萜生物合成的关键酶,灵芝鲨烯合酶基因的表达和活性的高低决定了灵芝中三萜含量的高低。根据已经获得的灵芝鲨烯合酶全长cDNA序列设计一对专一引物,通过PCR扩增得到了灵芝鲨烯合酶基因的基因组全长, 序列长1984bp,含有... 详细信息

鲨烯合酶是灵芝三萜生物合成的关键酶,灵芝鲨烯合酶基因的表达和活性的高低决定了灵芝中三萜含量的高低。根据已经获得的灵芝鲨烯合酶全长cDNA序列设计一对专一引物,通过PCR扩增得到了灵芝鲨烯合酶基因的基因组全长, 序列长1984bp,含有3个内含子。根据其基因组序列设计引物,采用SEFA-PCR的方法,以总DNA为模板,克隆了灵芝鲨烯合酶基因的启动子序列,长1042bp。序列分析发现灵芝鲨烯合酶基因启动子中没有明显的TATA和CAAT框,但是含有 CCAAT-binding factor、GATA-1、GC-box、TFⅡD等重要的转录因子的结合位点,以及在人和酿酒酵母鲨烯合酶基因启动子中发现的甾醇调节相关的顺式调控元件。

关键词：灵芝三萜生物合成转录调控

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人类病原细菌中的群体感应

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医学分子生物学杂志 2006年第2期3卷 146-148,152页

作者：王卉杨梦华钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京市2100952

群体感应(quorum sensing)是细菌用于调控基因表达从而改变细胞功能的普遍机制,不同的细菌种群具有不同的群体感应机制。对几种典型病原细菌群体感应机制的研究表明,病原细菌的群体感应与其侵染过程,毒素的产生以及最终的致病过程都有... 详细信息

群体感应(quorum sensing)是细菌用于调控基因表达从而改变细胞功能的普遍机制,不同的细菌种群具有不同的群体感应机制。对几种典型病原细菌群体感应机制的研究表明,病原细菌的群体感应与其侵染过程,毒素的产生以及最终的致病过程都有着密切的关系。因此,对细菌群体感应的深入研究有助于真正的了解病原细菌的致病机理,从而为新的治疗方法提供思路和策略。

关键词：群体感应自体诱导物病原细菌信号干扰

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香菇低温胁迫应答基因的克隆及其表达分析

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农业生物技术学报 2006年第3期14卷 381-386页

作者：冯志勇米朔甫赵明文陈明杰李军辉谭琦潘迎捷南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室上海丰科生物科技股份有限公司上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传重点实验室

用RT-PCR和RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术相结合,从香菇(Lentinulaedodes)苏香菌株中得到了1个与低温胁迫相关的全长2432bp的cDNA,该基因含1个1962bp的开放式阅读框,基因组序列分析发现该基因有11个内含子。经数据库同源查找... 详细信息

用RT-PCR和RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术相结合,从香菇(Lentinulaedodes)苏香菌株中得到了1个与低温胁迫相关的全长2432bp的cDNA,该基因含1个1962bp的开放式阅读框,基因组序列分析发现该基因有11个内含子。经数据库同源查找及序列比较,发现该基因编码的氨基酸与青霉菌(Penicilliumnordicum)的聚酮合酶和酿酒酵母(Saccha-romycescerevisiae)的α-氨基己二酸还原酶分别具有30%、22%的同源性和46%、40%的相似性。表达谱分析表明,当低温胁迫的温差为5℃时,该基因即开始表达,但mRNA丰度较低;温差达到10℃时,mRNA达到最大表达量;低温胁迫处理后,该基因在菌丝转色前的表达丰度低于转色后的丰度。将该基因初步命名为ICS(geneinducedundercoldstress,GenBank登录号为DQ211659),并初步推测该基因可能参与了低温胁迫的信号传导,低温胁迫信号在影响氮代谢后进而诱发子实体的形成。

关键词：香菇低温胁迫快速分离cDNA末端(RACE) 基因克隆表达谱

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LuxR类调节蛋白MrtR在植物细菌天山根瘤菌群体感应中的作用

LuxR类调节蛋白MrtR在植物细菌天山根瘤菌群体感应中的作用

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第十届全国土壤微生物学术讨论会暨第三届全国微生物肥料生产技术研讨会

作者：赖欣钟增涛郑会明朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在许多种类的细菌中均发现了LuxR/LuxI类型的群体感应调控系统,其中LuxR是一种调节蛋白,对LuxI合成自体诱导物(AI,autoinducer)起着正调控作用.运用检测菌株JZA1在中慢生型天山根瘤菌(Mesorhizobium tianshanense)培养上清中检测到了高... 详细信息

在许多种类的细菌中均发现了LuxR/LuxI类型的群体感应调控系统,其中LuxR是一种调节蛋白,对LuxI合成自体诱导物(AI,autoinducer)起着正调控作用.运用检测菌株JZA1在中慢生型天山根瘤菌(Mesorhizobium tianshanense)培养上清中检测到了高活性的自体诱导物.通过建库筛选后,测序比对发现存在mrtR/mrtI系统,该系统与LuxR/LuxI有相当的同源性.通过基因重组发现缺失mrtR后菌株不再合成AI,使用lacZ融合表达技术对mrtR进行研究,发现不止是AI合成需要mrtR,同时mrtR的表达也受到AI影响.

关键词：群体感应天山根瘤菌 mrtR

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酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

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首届全国食用菌中青年专家学术交流会

作者：李娜赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室

以酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的全长质粒DNA为模板进行PCR扩增;将PCR产物克隆到巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPIC9K中,并位于α-因子信号肽序列的下游,获得重组质粒pPIC9K-SE。重组质粒线性化后用电转化法导入毕赤酵母菌株GS11... 详细信息

以酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的全长质粒DNA为模板进行PCR扩增;将PCR产物克隆到巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPIC9K中,并位于α-因子信号肽序列的下游,获得重组质粒pPIC9K-SE。重组质粒线性化后用电转化法导入毕赤酵母菌株GS115中,经大量筛选,及PCR验证获得在染色体上整合有目的基因的菌株,取上清液进行SDS-PAGE 电泳可以检测到目的条带。

关键词：鲨烯单加氧酶载体构建分泌表达

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假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析

假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析

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第四届全国发酵工程学术研讨会

作者：邓海华曹慧李晓丹王世明崔中利李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine,Phe)为唯一碳源生长.SEFA-PCR扩增转座子侧翼... 详细信息

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine,Phe)为唯一碳源生长.SEFA-PCR扩增转座子侧翼序列发现其与已报道的尿黑酸1,2-双加氧酶基因hmgA的同源性为92％.将hmgA定向克隆至表达载体pET-29a中,转化至Escherichia coli BL21,经IPTG诱导后可表达分子量约为48kD的蛋白;诱导后转化子粗酶液对尿黑酸有很好的降解效果.将hmgA连入自杀性载体pEX19Gm,通过同源重组整合至M18染色体中,使其恢复了DLL-E4利用Phe的能力,证实了HmgA是尿黑酸苯环裂解酶.

关键词：转座子标签法同源重组基因敲入单胞菌尿黑酸克隆

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环境中污染物降解基因的水平转移(HGT)及其在生物修复中的作用

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遗传 2005年第5期27卷 845-851页

作者：张瑞福蒋建东代先祝顾立锋李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

水平基因转移是不同于垂直基因转移的遗传物质的交流方式。在污染环境这一特异生态环境中,降解基因的水平转移有着独特的功能与作用。研究环境中污染物降解基因在微生物间的水平转移,更深入地了解微生物种群适应污染环境的机理,对于评... 详细信息

水平基因转移是不同于垂直基因转移的遗传物质的交流方式。在污染环境这一特异生态环境中,降解基因的水平转移有着独特的功能与作用。研究环境中污染物降解基因在微生物间的水平转移,更深入地了解微生物种群适应污染环境的机理,对于评价污染物的环境毒理、生物可降解性以及污染环境的可修复潜力具有重要参考价值。在污染物生物修复实践中,可以通过调控降解基因的水平转移,增强污染环境中微生物的降解能力,更有效地发挥生物修复作用。文章将对环境中细菌间基因交流的机制,污染物降解基因的水平转移对微生物适应污染环境的机理、水平基因转移对代谢途径的进化及其对污染物生物修复作用的影响等方面的研究进展做一综述。

关键词：水平基因转移降解基因降解菌生物修复有机污染物

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污染土壤中有机磷农药降解菌的分离及其多样性

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生态学报 2005年第6期25卷 1502-1508页

作者：张瑞福吴旭平樊奔何健蒋建东李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

采用添加有机磷农药的选择性培养基,在长期受有机磷农药污染的土壤中分离到7株有机磷农药降解菌,经生理生化鉴定和系统发育分析,菌株mp-1鉴定为Pseudaminobactersp.,菌株mp-2为Alcaligenessp.,菌株mp-7为Brucellasp.,其他菌株为Ochrobac... 详细信息

采用添加有机磷农药的选择性培养基,在长期受有机磷农药污染的土壤中分离到7株有机磷农药降解菌,经生理生化鉴定和系统发育分析,菌株mp-1鉴定为Pseudaminobactersp.,菌株mp-2为Alcaligenessp.,菌株mp-7为Brucellasp.,其他菌株为Ochrobactrumsp.。16SrDNA序列同源性比较、系统发育分析和染色体ERIC-PCR指纹图谱扩增表明有机磷农药长期污染的土壤中有机磷农药降解菌具有丰富的多样性。

关键词：有机磷农药降解菌系统发育 ERIC-PCR指纹图谱多样性

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甲基对硫磷水解酶参与催化相关结构的研究

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生物工程学报 2005年第6期21卷 998-1002页

作者：吴旭平刘卫东曹慧李顺鹏崔中利南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

甲基对硫磷水解酶(MPH)是一种新的有机磷水解酶。将完整的甲基对硫磷水解酶基因(mpd)构建入pUC19载体,使得mpd基因以自身的启动子在EscherichiacoliDH5α中表达并得到了纯化。金属螯合实验发现MPH的活性不受金属螯合剂1,10菲啉的影响... 详细信息

甲基对硫磷水解酶(MPH)是一种新的有机磷水解酶。将完整的甲基对硫磷水解酶基因(mpd)构建入pUC19载体,使得mpd基因以自身的启动子在EscherichiacoliDH5α中表达并得到了纯化。金属螯合实验发现MPH的活性不受金属螯合剂1,10菲啉的影响;但用电感耦合等离子发射光谱测定其金属含量显示MPH是金属酶,1mol酶中结合了2mol的Zn2+。为确定参与MPH催化活性的必需氨基酸,用化学修饰剂碳化二亚胺、二乙基焦磷酸酯、磷酸吡哆醛和丁二酮处理MPH,然后检测其残余酶活力,结果表明天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸和精氨酸残基与酶的催化活性无关;而二乙基焦磷酸酯对组氨酸侧链的化学修饰引起酶活性的大幅度的下降,其对酶活性的抑制率达到9.6h-1,说明组氨酸是酶活力所必需的基团。这些结果为进一步研究酶的结构及对酶进行分子改造提供了必要的基础数据。

关键词：甲基对硫磷水解酶金属离子含量化学修饰必需氨基酸

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