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土壤 2005年第1期37卷 100-104页

作者：邱珊莲崔中利王英王兴祥李顺鹏南京农业大学农业部环境微生物工程重点开放实验室中国科学院南京土壤研究所南京210008 中国科学院南京土壤研究所

将 GFP 基因标记的甲基对硫磷降解菌 DLLBR 接入 100 ml LB 培养基,过夜培养达到 1010cfu/ml,浇灌到盆钵试验的 800 g 土壤中,20 天后用激光共聚焦显微镜检测其在小青菜植株根部和植株内的定殖及分布。结果表明标记菌株能够在植株根圈... 详细信息

将 GFP 基因标记的甲基对硫磷降解菌 DLLBR 接入 100 ml LB 培养基,过夜培养达到 1010cfu/ml,浇灌到盆钵试验的 800 g 土壤中,20 天后用激光共聚焦显微镜检测其在小青菜植株根部和植株内的定殖及分布。结果表明标记菌株能够在植株根圈较好地定殖,也能在植株内定殖。30 天后将植株各段研磨破碎,涂布 LB 平板计数发光菌落数,在根内的定殖数为 104cfu/g 根,在茎内的定殖数为 102cfu/g 茎。结果还发现与不接菌的对照相比,处理促进了植株内细菌群落结构的变化,尤其是芽孢杆菌的种类和数量明显增加。接菌 45 天后通过土壤计数检测发现,标记菌株在土壤中的存活力很高,能达到 106cfu/g 土,同时也发现与对照相比,接菌的土壤细菌群落结构明显发生了变化,细菌种类变化不大,但芽孢杆菌的数量明显增加。

关键词： GFP基因标记激光共聚焦显微镜研磨:植株内细菌群落结构土壤细菌群落结构

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抗Cd细菌J5的筛选和抗Cd^(2+)特性

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农业环境科学学报 2005年第z1期24卷 223-227页

作者：刘爱民黄为一南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 安徽师范大学生命科学学院

从某冶炼厂污染土壤中分离出一株能高度抗镉和吸附镉的菌株J5,经初步鉴定为假单胞菌属(Pseudo-m onassp.)。研究结果表明该菌株在液体细菌培养基中耐硫酸镉高达40 mmol.L-1,琼脂平板上耐硫酸镉高达75mmol.L-1;J5产碱,有一定絮凝性;Cu2+... 详细信息

从某冶炼厂污染土壤中分离出一株能高度抗镉和吸附镉的菌株J5,经初步鉴定为假单胞菌属(Pseudo-m onassp.)。研究结果表明该菌株在液体细菌培养基中耐硫酸镉高达40 mmol.L-1,琼脂平板上耐硫酸镉高达75mmol.L-1;J5产碱,有一定絮凝性;Cu2+和Cd2+的共同存在增加了对菌株J5的毒害,Cd2+浓度影响J5绿色色素的表达;活菌体的菌浓度对J5耐Cd2+能力影响很大,菌浓度愈大,耐性愈强,在0~1.5 mmol.L-1Cd2+浓度范围内,J5菌体的全细胞SDS-PAGE电泳图谱差异不明显;活菌体对100μ***-1Cd2+积累率为99.1%,吸附率达100%。

关键词：抗Cd细菌色素抗性变化 SDS-PAGE电泳

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3-苯氧基苯甲酸降解菌的分离及降解特性研究

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微生物学通报 2005年第5期32卷 62-66页

作者：许育新李晓慧秦华李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部环境微生物工程重点开放实验室中国科学院南京土壤研究所生物与生化研究室南京210008

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7&#... 详细信息

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7·0,30℃,160r/min,装瓶量为100mL/250mL的条件下,PBM11经过24h可完全降解200mg/L的3-PBA;添加低浓度的外源营养物质能够在一定程度上促进降解;Cu2+和Co2+等对其降解性能有抑制作用,而Fe3+有明显的促进作用;通过分析底物利用情况,初步推断3-PBA降解的中间产物可能为原儿茶酸和苯酚。经过7d的处理,PBM11对土壤中100mg/L3-PBA的降解率为66·25%。从PBM11中检测到一个质粒。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸降解菌降解特性中间产物

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中国土壤生物学研究的现状与展望

中国土壤生物学研究的现状与展望

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2020年的中国土壤科学学术研讨会

作者：曹慧李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

本文在系统查阅近10年来国内土壤生物学文献的基础上，分析了中国土壤生物学研究的现状特点，从土壤生物化学、土壤微生物学、土壤--植物系统、土壤动物学几个方面概括了土壤生物学研究的主要进展，结合国际土壤科学发展的前沿和热点问... 详细信息

本文在系统查阅近10年来国内土壤生物学文献的基础上，分析了中国土壤生物学研究的现状特点，从土壤生物化学、土壤微生物学、土壤--植物系统、土壤动物学几个方面概括了土壤生物学研究的主要进展，结合国际土壤科学发展的前沿和热点问题，对中国土壤生物学研究进行了展望。

关键词：土壤生物学养分循环根际微生物

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灭多威降解菌(MDW-1)的分离、鉴定及降解特性研究

灭多威降解菌(MDW-1)的分离、鉴定及降解特性研究

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第八次全国环境微生物学术研讨会

作者：许敬亮武俊王志春何健李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从生产灭多威的厂区土壤中分离到一株高效灭多威降解菌MDW-1.该菌能够以灭多威为惟一碳源和氮源进行生长,最适生长和降解的pH值和温度分别为8.0和30℃.依据其形态、生理生化特征以及16SrDNA序列同源性比对分析等,最终确定MDW-1为副球菌... 详细信息

从生产灭多威的厂区土壤中分离到一株高效灭多威降解菌MDW-1.该菌能够以灭多威为惟一碳源和氮源进行生长,最适生长和降解的pH值和温度分别为8.0和30℃.依据其形态、生理生化特征以及16SrDNA序列同源性比对分析等,最终确定MDW-1为副球菌属(Paracoccussp.).GC-MS分析表明MDW-1能在10h之内把100ppm的灭多威完全转化为灭多威肟.

关键词：灭多威降解菌灭多威肟降解特性分离鉴定副球菌属

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沼气发酵残余物的综合利用及其在现代农业发展中的意义

沼气发酵残余物的综合利用及其在现代农业发展中的意义

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中国沼气学会第七次全国代表大会暨沼气产业化发展研讨会

作者：虞方伯何健管晓进管莉菠李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

我国的沼气技术开发始于上世纪50年代，70-80年代得到大规模发展。目前全国有户用沼气池1540多万口，年产沼气约55亿m3。已建成大中型沼气工程2600多处，年产沼气约17.6亿m3。掌握了禽畜粪便、工业有机废水等工农业有机废弃物的厌氧消... 详细信息

我国的沼气技术开发始于上世纪50年代，70-80年代得到大规模发展。目前全国有户用沼气池1540多万口，年产沼气约55亿m3。已建成大中型沼气工程2600多处，年产沼气约17.6亿m3。掌握了禽畜粪便、工业有机废水等工农业有机废弃物的厌氧消化技术，形成了可以服务农村的小型沼气和服务于工业化开发的大型沼气工程建设队伍。本文评析了当前我国农业面源污染的形势，指出了沼气发酵及其发酵产物的综合利用必将在生态农业发展中发挥重大作用。

关键词：农村能源沼气工程生态农业循环经济

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联苯菊酯降解菌株Pseudomonas sp. LFJS3-9的分离与酶学特性

联苯菊酯降解菌株Pseudomonas sp. LFJS3-9的分离与酶学特性

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中国科协2005年学术年会

作者：王兆守陈一楠刘君寒洪元范郑晓宁杨成香李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从多个农药厂污泥中分离出一株降解效果良好的联苯菊酯降解菌***3-9,3d内对20mg/L联苯菊酯降解率为95.02％.***3-9降解酶主要为胞内酶,属组成酶,耐储藏,4℃中保存25d仍保持最高酶活的90％,在40℃以下和pH7.0～8.0时酶活较稳定,并以37℃... 详细信息

从多个农药厂污泥中分离出一株降解效果良好的联苯菊酯降解菌***3-9,3d内对20mg/L联苯菊酯降解率为95.02％.***3-9降解酶主要为胞内酶,属组成酶,耐储藏,4℃中保存25d仍保持最高酶活的90％,在40℃以下和pH7.0～8.0时酶活较稳定,并以37℃和pH7.0时酶活最高,对联苯菊酯降解率达87.28％.酶具有较好的热稳定性,70℃时保温1h,1.2h内对联苯菊酯仍具有40％的降解率.对联苯菊酯的Km为602.92nmol/mL,最大反应速率为28.09nmol/min,降解速率为72.96nmol/(min·mg蛋白).最适酶学反应体系为含联苯菊酯20mg/L的pH7.5缓冲液2.7mL,粗酶液0.3mL,温度37℃,反应时间1.2h.

关键词：联苯菊酯降解酶联苯菊酯降解菌菌种分离酶学

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黄伞菌株中三磷酸甘油醛脱氢酶基因片段的分离鉴定与保守性验证

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中国食用菌 2005年第5期24卷 53-55页

作者：季哲李玉祥赵明文潘迎捷南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 上海水产大学上海200090

本研究以黄伞菌丝cDNA为模板,设计简并引物,经PCR扩增出两条片段SL1和SL2,经过回收、重扩增、克隆与鉴定后进行测序分析,结果发现SL1的序列在Genebank中与三磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogease,GPD)基因的同源... 详细信息

本研究以黄伞菌丝cDNA为模板,设计简并引物,经PCR扩增出两条片段SL1和SL2,经过回收、重扩增、克隆与鉴定后进行测序分析,结果发现SL1的序列在Genebank中与三磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogease,GPD)基因的同源性达到85%,根据SL1序列设计引物,以黄伞菌丝体、原基、菇蕾、子实体菌柄、子实体菌盖的cDNA为模板进行PCR反应以验证其保守性,结果显示此片段在不同分化发育阶段表达量相同。

关键词：黄伞三磷酸甘油醛脱氢酶基因克隆

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几种水稻田土壤微生物总DNA提取方法的比较

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江苏大学学报（医学版） 2005年第4期15卷 300-305页

作者：顾华杰李玉祥赵明文潘根兴南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 南京农业大学农业资源与生态环境研究所江苏南京210095

目的:使人们在提取土壤总DNA时,可以根据不同的要求选用不同的方法。方法:选用了5种现在较常用的土壤微生物总DNA提取方法从水稻田土壤中提取总DNA,并对5种方法提取的DNA的质量和数量进行比较评价。结果:5种方法都可以从土壤中提取到长... 详细信息

目的:使人们在提取土壤总DNA时,可以根据不同的要求选用不同的方法。方法:选用了5种现在较常用的土壤微生物总DNA提取方法从水稻田土壤中提取总DNA,并对5种方法提取的DNA的质量和数量进行比较评价。结果:5种方法都可以从土壤中提取到长度大于48 kb的DNA片段,但不同方法提取的DNA的产量存在明显差异。土壤总DNA都不需要纯化就可以用于PCR扩增,使用细菌16S rDNA基因的引物可以扩增得到相应的片段。结论:Bourrain法和M artin-Laurent法可以较快地提取出DNA,M artin-Laurent法提取的DNA的量最多,Tied je法和Jans-sen法提取的DNA片段最大,Janssen法提取的DNA纯度最高,Reddy法提取的DNA的完整性和PCR扩增效果最好。

关键词：水稻田土壤微生物方法比较 DNA提

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甲磺隆降解细菌S113的分离鉴定及其降解特性研究

甲磺隆降解细菌S113的分离鉴定及其降解特性研究

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农作物药害预防及控制技术研讨会

作者：黄星何健李顺鹏南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

从生产甲磺隆的农药厂内采取土样,经驯化富集后筛选到一株能高效降解甲磺隆的细茵S113,根据表型特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性分析,将S113初步鉴定为嗜甲基菌(Methylopila sp)。该菌能在含甲磺隆(30 mg/L)的无机盐液体培养基... 详细信息

从生产甲磺隆的农药厂内采取土样,经驯化富集后筛选到一株能高效降解甲磺隆的细茵S113,根据表型特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性分析,将S113初步鉴定为嗜甲基菌(Methylopila sp)。该菌能在含甲磺隆(30 mg/L)的无机盐液体培养基中降解甲磺隆,5 d降解率达72.6%,该茵降解甲磺隆的最适pH为7.0,最适温度为30℃,该茵降解甲磺隆的速率和起始接种量呈正相关。酶的定域实验表明,该菌中甲磺隆水解酶为胞内酶。土壤降解实验结果表明,土壤投加入S113后,可有效的提高甲磺隆的降解速率。

关键词：甲磺隆假单孢菌生物降解

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