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第七次全国环境微生物学术研讨会

作者：张瑞福吴旭平樊奔何健蒋建东李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室(南京)

采用添加有机磷农药的选择性培养基,在有机磷农药长期污染的土壤中分离到七株有机磷农药降解菌,经生理生化鉴定和系统发育分析,菌株mp-1鉴定为Pseudaminobacter sp,菌株mp-2为Alcaligenes sp.,菌株mp-7为Brucella sp.,其他菌株为Ochroba... 详细信息

采用添加有机磷农药的选择性培养基,在有机磷农药长期污染的土壤中分离到七株有机磷农药降解菌,经生理生化鉴定和系统发育分析,菌株mp-1鉴定为Pseudaminobacter sp,菌株mp-2为Alcaligenes sp.,菌株mp-7为Brucella sp.,其他菌株为Ochrobactrum sp..16S rDNA序列同源性比较、系统发育分析和染色体ERIC-PCR指纹图谱扩增表明有机磷农药长期污染的土壤中有机磷农药降解菌具有丰富的多样性.

关键词：有机磷农药降解菌系统发育 ERIC-PCR指纹图谱多样性

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七株有机磷农药降解菌的降解特性比较

七株有机磷农药降解菌的降解特性比较

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第七次全国环境微生物学术研讨会

作者：张瑞福戴青华何健代先祝李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室(江苏南京)

对分离自同一有机磷农药污染土壤的7株有机磷农药降解菌的降解特性进行了比较,7株降解菌都能利用甲基对硫磷为唯一碳源生长,并生成中间代谢产物对硝基酚.对硝基酚的降解经过一段延滞期,不同菌株降解对硝基酚的能力和延滞期有很大差异.... 详细信息

对分离自同一有机磷农药污染土壤的7株有机磷农药降解菌的降解特性进行了比较,7株降解菌都能利用甲基对硫磷为唯一碳源生长,并生成中间代谢产物对硝基酚.对硝基酚的降解经过一段延滞期,不同菌株降解对硝基酚的能力和延滞期有很大差异.降解菌株对多种有机磷类农药和芳香族化合物具有降解能力,其降解谱表现了一定的差异.用PCR方法从7株降解菌中克隆了有机磷农药水解酶基因.

关键词：有机磷农药降解菌降解特性水解酶基因

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V_E生产废水的短程硝化反硝化研究

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环境工程 2004年第4期22卷 7-9页

作者：陈立伟蔡天明李顺鹏肖娅许敬亮南京农业大学生命科学学院农业部环境微生物工程重点开放实验室江苏210095 泰兴市环境监测站江苏泰兴225400 南京农业大学生命科学学院江苏210095

应用短程硝化反硝化工艺在维生素E废水生物脱氮处理中的实验研究。结果表明 ,当溶解氧浓度为 0 85mg L时的亚硝化率 (NO-2 N NO-x N)为 18 9% ,远远 >溶解氧 2 6 5mg L时的 1 13% ;通过对回流污泥 12h的缺氧选择处理 ,出水中的N... 详细信息

应用短程硝化反硝化工艺在维生素E废水生物脱氮处理中的实验研究。结果表明 ,当溶解氧浓度为 0 85mg L时的亚硝化率 (NO-2 N NO-x N)为 18 9% ,远远 >溶解氧 2 6 5mg L时的 1 13% ;通过对回流污泥 12h的缺氧选择处理 ,出水中的NO-2 由原来的 2 5mg L上升到 2 5 6mg L ,相应的污泥中亚硝化细菌与硝化细菌的数量比值由 0 4 5提高到 2 4 4 ;在进水中投加 5～ 10mg L的ClO-3能够使污泥中硝酸细菌的活性受到明显抑制 ,但污泥中硝酸细菌的数量却增加了。在停止向进水中投加氯酸根离子后硝酸细菌活性可以缓慢恢复 ,15d后系统的亚硝化率稳定在 5 5 %～ 5 8%。

关键词：回流污泥生产废水短程硝化反硝化亚硝化溶解氧浓度脱氮处理 NO2^--N 硝酸投加量比

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微生物浸沥法去除城市污泥中重金属的研究进展

微生物浸沥法去除城市污泥中重金属的研究进展

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2004中国微生物学会学术年会

作者：顾向阳黄焕忠中国微生物学会环境微生物学会专业委员会香港浸会大学生物学系中国微生物学会环境微生物学专业委员会农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院(南京) 中国微生物学会环境微生物学会专业委员会农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院(南京)

重金属污染是城市污泥农用的最大障碍,必须加以适当处理降低重金属含量,以避免通过食物链富集,危害人类健康.同化学酸化法相比,微生物浸沥法具有成本低,条件温和,去除率高等优点,具有更大的应用潜力.已有多种微生物浸沥工艺被研究或成... 详细信息

重金属污染是城市污泥农用的最大障碍,必须加以适当处理降低重金属含量,以避免通过食物链富集,危害人类健康.同化学酸化法相比,微生物浸沥法具有成本低,条件温和,去除率高等优点,具有更大的应用潜力.已有多种微生物浸沥工艺被研究或成功开发,根据能源物质及起作用的微生物种类,可分为"硫法"和"铁法"两类.在污泥生物浸沥工艺过程中,金属元素的浸出涉及直接与间接两种机制,而重金属的去除效率则受环境温度,起始pH,通气状况和营养物质等多种因素的影响.在以Acidithiobacillus ferrooxidans为主要浸沥微生物的铁工艺中,重金属的去除率还受到多种有机质的影响;而以元素硫为底物的硫工艺中,50~60﹪的硫不能被氧化而残留在污泥中,极易造成污泥与土壤酸化等二次污染.此外脱毒污泥的后处理,浸沥液重金属元素的回收或安全处理等相关配套技术尚有待探索,而筛选适应污泥环境的特异性菌株,建立高效稳定的生物浸沥工艺是亟待解决的关键问题.

关键词：重金属污染污泥生物浸沥工艺去除效率铁工艺硫工艺

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甲基对硫磷降解菌DLL-E4降解对-硝基苯酚特性

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中国环境科学 2003年第4期23卷 435-439页

作者：刘智洪青张晓舟徐剑宏李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

甲基对硫磷降解菌DLL-E4(Pseudomonas putida)能以对-硝基苯酚(PNP)为唯一碳源和氮源生长,还可以利用对-硝基苯酚代谢产生的亚硝酸根为唯一氮源.DLL-E4降解对-硝基苯酚的酶系是诱导产生的,甲基对硫磷(MP)和PNP驯化菌株,能有效诱导DLL-E4... 详细信息

甲基对硫磷降解菌DLL-E4(Pseudomonas putida)能以对-硝基苯酚(PNP)为唯一碳源和氮源生长,还可以利用对-硝基苯酚代谢产生的亚硝酸根为唯一氮源.DLL-E4降解对-硝基苯酚的酶系是诱导产生的,甲基对硫磷(MP)和PNP驯化菌株,能有效诱导DLL-E4对PNP的降解,生长延滞期由原来的6h减少到3h,降解完全的时间由9h缩短为7h和6h.对苯二酚(HQ)诱导,降解完全的时间延长为15h.该诱导酶同时能够降解2-硝基酚.DLL-E4菌株中含有大质粒,在丢失对-硝基苯酚降解性状的突变株M+P-中依然存在.

关键词：对-硝基苯酚亚硝酸根诱导酶质粒

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镉抗性菌株的筛选及对番茄吸收镉的影响

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中国环境科学 2003年第5期23卷 467-469页

作者：盛下放白玉夏娟娟江春玉农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

通过在培养基中加入一定浓度的镉(CdSO48H2O, Cd 200mg/L),从土壤中分离到3株具有很强的镉抗性细菌,经初步鉴定,它们分别属于假单胞菌属和芽胞杆菌属(编号分别为NJ3、NJ9、RJ16).将分离到的3株菌分别接种到添加镉(200mg/kg)的土壤并进... 详细信息

通过在培养基中加入一定浓度的镉(CdSO48H2O, Cd 200mg/L),从土壤中分离到3株具有很强的镉抗性细菌,经初步鉴定,它们分别属于假单胞菌属和芽胞杆菌属(编号分别为NJ3、NJ9、RJ16).将分离到的3株菌分别接种到添加镉(200mg/kg)的土壤并进行番茄盆栽试验,结果表明,供试抗性菌株均能显著促进植株生长,活化植株根际镉,接RJ16菌株处理的番茄地上部植株干重、根际有效镉含量及植株吸收的镉含量分别比不接菌对照增加64.2%,46.3%,107.8%,而接NJ3和NJ9菌株处理的番茄植株吸收的镉与对照植株吸收的镉没有显著差异.

关键词：镉番茄抗性菌株土壤重金属污染

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土壤微生物总DNA的提取和纯化

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微生物学报 2003年第2期43卷 276-282页

作者：张瑞福曹慧崔中利李顺鹏樊奔南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

本文建立了从土壤中提取总DNA的方法 ,并通过改进使适合于对革兰氏阳性菌的提取。用 9种性质不同的土壤进行验证 ,均提取到了DNA ,每克干土的DNA提取量从 3 30 μg～1 3 41 μg,通过透析袋回收进行纯化 ,纯化回收率达到 65 34% ,纯化... 详细信息

本文建立了从土壤中提取总DNA的方法 ,并通过改进使适合于对革兰氏阳性菌的提取。用 9种性质不同的土壤进行验证 ,均提取到了DNA ,每克干土的DNA提取量从 3 30 μg～1 3 41 μg,通过透析袋回收进行纯化 ,纯化回收率达到 65 34% ,纯化后的土壤DNA可以直接扩增出 1 6SrDNA。 9种土壤的提取率从 60 5 1 %～ 93 45 % ,可以从每g干土添加

关键词： DNA提取纯化提取量提取率 PCR扩增土壤微生物

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耐盐及苯乙酸、甲基对硫磷降解基因工程菌的构建

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微生物学报 2003年第5期43卷 554-559页

作者：刘智洪青徐剑宏张国顺李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

H1 (Halomonassp.)是一株耐高盐浓度 (1 8%NaCl,W V)和降解苯乙酸的菌株 ,pDT3质粒为pUC1 9插入甲基对硫磷水解酶基因 (mpd基因 )构建而成。采用HindⅢ酶切 ,获得含有完整mpd基因片段 ,克隆到广宿主质粒pKT2 3 0和pBBR1 MCS2上 ,构建... 详细信息

H1 (Halomonassp.)是一株耐高盐浓度 (1 8%NaCl,W V)和降解苯乙酸的菌株 ,pDT3质粒为pUC1 9插入甲基对硫磷水解酶基因 (mpd基因 )构建而成。采用HindⅢ酶切 ,获得含有完整mpd基因片段 ,克隆到广宿主质粒pKT2 3 0和pBBR1 MCS2上 ,构建成质粒pKT MP和pBBR MP。通过三亲杂交 ,在辅助质粒pRK2 0 1 3的帮助下 ,将质粒pKT MP和pBBR MP转移到H1中 ,得到的工程菌H pKT MP和H pBBR MP具有耐盐、降解苯乙酸和水解甲基对硫磷的功能 ,其中H pBBR MP水解酶活性与亲本菌株甲基对硫磷降解菌 (Pseudomonasputida)DLL E4相当 ,而H pKT MP水解酶活性要提高 1倍左右。经过传代试验。

关键词：耐盐苯乙酸甲基对硫磷降解基因工程菌三亲杂交含盐废水

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从污泥中分离到一株降解苯乙酸的中度嗜盐菌(BYS-1)

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南京农业大学学报 2003年第2期26卷 55-58页

作者：洪青何健刘智张国顺李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从处理苯乙酸生产污水的活性污泥中分离到一株能以苯乙酸为惟一碳源生长的细菌BYS 1。该菌在 2 0h内对1g·L-1苯乙酸的降解率在 95 %以上 ,能在 0～ 3 4mol·L-1NaCl的Gibbons培养基中生长。经生理生化分析和 16SrDNA(GenBankAc... 详细信息

从处理苯乙酸生产污水的活性污泥中分离到一株能以苯乙酸为惟一碳源生长的细菌BYS 1。该菌在 2 0h内对1g·L-1苯乙酸的降解率在 95 %以上 ,能在 0～ 3 4mol·L-1NaCl的Gibbons培养基中生长。经生理生化分析和 16SrDNA(GenBankAccessionNo AY0 6 6 2 2 17)序列同源性分析 ,将该菌初步鉴定为盐单胞菌属 (Halomonassp ) ,属于中度嗜盐菌。该菌降解苯乙酸的最适 pH、温度和NaCl浓度分别为 7 5 ,30℃和 1 0mol·L-1。

关键词：苯乙酸中度嗜盐菌污泥分离含盐废水处理生化处理生物学特性

来源：评论

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甲基对硫磷水解酶酶促反应体系建立及特性研究

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南京农业大学学报 2003年第4期26卷 60-63页

作者：刘智马爱芝张晓舟张小华李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从甲基对硫磷降解菌DLL E4 (Pseudomonasputida)中提取水解酶 ,对其酶促反应进行研究 ,建立了反应体系 :4 74 μLNa2 HPO4 柠檬酸缓冲液 ,12 5 μL甲基对硫磷 ,1 5 μg粗蛋白 ,35℃水浴 5min。水解酶保持稳定的 pH值范围为 5 0～ 10 ... 详细信息

从甲基对硫磷降解菌DLL E4 (Pseudomonasputida)中提取水解酶 ,对其酶促反应进行研究 ,建立了反应体系 :4 74 μLNa2 HPO4 柠檬酸缓冲液 ,12 5 μL甲基对硫磷 ,1 5 μg粗蛋白 ,35℃水浴 5min。水解酶保持稳定的 pH值范围为 5 0～ 10 0 ,最适 pH为 7 0。该酶热不稳定 ,4 5℃ 30min处理 ,酶活下降 5 0 % ;10 0℃ 10min处理可完全灭活。测定了 11种金属离子、TWEEN 80、TritonX 10 0及EDTA对水解酶的作用 ,发现 2 0mmol·L-1CoCl2 对酶活有明显的抑制作用 ,而 2 0～ 0 0 2mmol·L-1的LiCl对酶活有促进作用 ,2mmol·L-1的TWEEN 80和TritonX 10 0可降低 80 %的酶活。

关键词：甲基对硫磷水解酶酶促反应反应体系农药污染环境污染降解机理恶臭假单胞菌DLL-E4

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