检索结果-内蒙古大学图书馆

应用与环境生物学报 2006年第3期12卷 375-378页

作者：洪青徐剑宏王云端武俊张晓舟李顺鹏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

通过固体亚硝基胍诱变获得了Halom ***-1的盐敏感突变株BYS-1M.以pBBR1MCS-2为载体在***5α中构建了BYS-1的基因文库.以文库菌***5α(pBBR-X)为供体菌、***803(pRK2013)为辅助菌、BYS-1M为受体菌进行三亲接合,筛选到了恢复耐盐性能的接... 详细信息

通过固体亚硝基胍诱变获得了Halom ***-1的盐敏感突变株BYS-1M.以pBBR1MCS-2为载体在***5α中构建了BYS-1的基因文库.以文库菌***5α(pBBR-X)为供体菌、***803(pRK2013)为辅助菌、BYS-1M为受体菌进行三亲接合,筛选到了恢复耐盐性能的接合子HR-23,提取接合子HR-23的重组质粒pHR23,酶切确定其插入的耐盐相关DNA片段大小分为5.4 kb.该片段为Halom ***-1耐盐相关基因的克隆奠定了基础.

关键词：中度嗜盐菌耐盐相关DNA片段克隆

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农药污染土壤的微生物修复研究进展

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土壤 2004年第6期36卷 577-583页

作者：李顺鹏蒋建东南京农业大学农业部农业环微生物工程重点开放实验室南京210095

本文介绍了土壤中农药污染的现状与危害,总结了土壤农药污染的微生物修复的历史背景、研究现状,重点介绍了降解农药的微生物与农药污染土壤微生物修复的研究进展,并总结了国内外微生物修复的产业化现状,对土壤农药污染微生物修复进行了... 详细信息

本文介绍了土壤中农药污染的现状与危害,总结了土壤农药污染的微生物修复的历史背景、研究现状,重点介绍了降解农药的微生物与农药污染土壤微生物修复的研究进展,并总结了国内外微生物修复的产业化现状,对土壤农药污染微生物修复进行了预测和展望,指出了需要进一步研究的领域。

关键词：微生物修复农药污染土壤研究进展

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乙酰羟酸合成酶同工酶基因ilvBN、ilvGM和ilvIH的表达及对除草剂抗性的比较

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生物工程学报 2009年第7期25卷 1007-1013页

作者：沈晶晶李永丰黄星俞欣妍何健李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

乙酰羟酸合成酶(AHAS)是磺酰脲类和咪唑啉酮类等AHAS抑制剂类除草剂的作用靶标。获得抗此类除草剂的AHAS突变基因资源具有非常重要的理论和应用价值。本研究从抗甲磺隆菌株Klebsiella ***11和甲磺隆敏感菌株Klebsiella pneumoniae MGH 7... 详细信息

乙酰羟酸合成酶(AHAS)是磺酰脲类和咪唑啉酮类等AHAS抑制剂类除草剂的作用靶标。获得抗此类除草剂的AHAS突变基因资源具有非常重要的理论和应用价值。本研究从抗甲磺隆菌株Klebsiella ***11和甲磺隆敏感菌株Klebsiella pneumoniae MGH 78578中分别克隆到AHAS三种同工酶基因ilvBN、ilvGM和ilvIH。抗性菌株和敏感菌株AHAS三种同工酶基因在氨基酸水平上差异位点主要集中在ilvBN和ilvGM的大亚基上。将2株菌的ilvBN、ilvGM和ilvIH分别构建到表达载体pET29a(+)中,在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达,测得只有含菌株HR11 ilvBN和ilvGM的转化子细胞破碎液AHAS对各类AHAS抑制剂类除草剂具有较强的抗性,而含菌株HR11 ilvIH和菌株MGH78578 ilvBN、ilvGM和ilvIH的转化子细胞破碎液AHAS对各类AHAS抑制剂类除草剂敏感。

关键词： AHAS抑制剂类除草剂乙酰羟酸合酶同工酶 ilvBN ilvGM ilvIH 除草剂抗性

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阿特拉津降解菌SA1的分离鉴定及其降解特性研究

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微生物学报 2007年第3期47卷 544-547页

作者：代先祝蒋建东顾立锋李荣李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

为进行阿特拉津（AT）污染的生物修复,从AT降解混合菌群中,经长期的交替液体摇瓶培养和平板划线分离,筛选到一株能完全降解AT的菌株SA1.经生理生化特征及16S rDNA序列分析,将该菌鉴定为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）.与已报道的AT降解... 详细信息

为进行阿特拉津（AT）污染的生物修复,从AT降解混合菌群中,经长期的交替液体摇瓶培养和平板划线分离,筛选到一株能完全降解AT的菌株SA1.经生理生化特征及16S rDNA序列分析,将该菌鉴定为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）.与已报道的AT降解菌Pseudomonas ***不同,SA1能以AT为唯一碳源、氮源和能源生长,培养基中添加铵盐不抑制SA1的降解功能,而添加葡萄糖时,累积的氰尿酸会被快速降解.SA1生长的最适温度为37℃,最适pH值为***1的静息细胞在10℃～40℃或pH值4～11时均能高效降解AT,比ADP降解具有更广的pH和温度范围,表明SA1降解菌株具有广阔的应用前景.SA1中AT降解基因为保守的atzABCD,并含有IS1071的tnpA基因片段,传代过程中降解基因会以一定频率丢失.

关键词：阿特拉津生物降解分离鉴定降解特性基因转移

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中度嗜盐菌Halomonas sp. BYS-1启动子的克隆和测序

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应用与环境生物学报 2005年第6期11卷 729-732页

作者：洪青张忠辉张晓舟徐剑宏李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

提取了中度嗜盐菌***1的基因组DNA,以甲基对硫磷水解酶基因(mpd)为报告基因,以启动子探针pUCmpd为载体,通过鸟枪法在***5α中构建了BYS1的启动子文库.通过筛选获得了17个阳性克隆,编号为P1～P17.测定了阳性克隆的甲基对硫磷水解酶(MPH)... 详细信息

提取了中度嗜盐菌***1的基因组DNA,以甲基对硫磷水解酶基因(mpd)为报告基因,以启动子探针pUCmpd为载体,通过鸟枪法在***5α中构建了BYS1的启动子文库.通过筛选获得了17个阳性克隆,编号为P1～P17.测定了阳性克隆的甲基对硫磷水解酶(MPH)活性,结果表明,P3中mpd基因的启动子活性最强,它的酶活高达2554.3U/mg,而P17中mpd基因的启动子活性最弱,它的酶活只有68.3U/mg.对P3、P8、P17克隆中的重组质粒的插入片段进行了测序和在线启动子预测.

关键词：中度嗜盐菌启动子克隆测序

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华癸根瘤菌中自体诱导物的初步研究

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微生物学报 2005年第1期45卷 19-22页

作者：高轶静钟增涛郑会明王卉朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验... 详细信息

群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验证明该检测菌株能检测纳摩尔浓度的自体诱导物 ,利用该菌株对 3株不同华癸根瘤菌(Mesorhizobiumhuakuii)进行自体诱导物活性检测 ,发现该 3株华癸根瘤菌均能产生自体诱导物 ,其表达量与菌体密度成正相关 ,但 3株菌在相同培养条件下自体诱导物的表达量存在差异 ,结果表明自体诱导物在种内水平上存在一定的多样性 ;同时发现高pH条件能大大降低自体诱导物的稳定性。

关键词：群体感应自体诱导物华癸根瘤菌

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甲苯降解菌JB-1的分离、鉴定与降解特性

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应用与环境生物学报 2010年第1期16卷 118-121页

作者：冷玲张迹李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从南京石化废水处理池的活性污泥中分离到1株能以甲苯为唯一碳源生长的细菌,命名为JB-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No. EU869278)序列相似性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株在18h内能完全... 详细信息

从南京石化废水处理池的活性污泥中分离到1株能以甲苯为唯一碳源生长的细菌,命名为JB-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No. EU869278)序列相似性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株在18h内能完全降解346.4mg/L的甲苯.降解甲苯的最适温度为30℃,pH为7.0,降解速率与初始接种量呈正相关.甲苯降解途径是通过甲苯双加氧酶形成顺甲苯二氢二醇,再经邻苯二酚2,3双加氧酶开环降解.

关键词：甲苯生物降解假单胞菌属甲苯双加氧酶邻苯二酚2,3双加氧酶代谢途径

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富集液中六六六(γ-BHC)脱氯基因的克隆、表达及降解试验

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微生物学报 2005年第1期45卷 44-47页

作者：张国顺洪青马爱芝张晓舟李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp... 详细信息

从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp的基因片段 ,命名为linN ,测序结果表明linN与报道的脱氯基因linA和linA2的同源性达 99% ,与linA1的同源性达 97%。将linN定向克隆到pET 2 9α表达载体中 ,转化至E .coliBL2 1,经IPTG诱导后可表达分子量约 17kD的蛋白 ,表达产物占菌体总蛋白的 30 %左右 ;诱导后转化子的降解能力明显提高 ,粗酶也有很好的降解效果。

关键词：富集液六六六脱氯基因克隆和表达

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中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128自体诱导物合成酶基因的克隆及对生理功能的影响

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微生物学报 2008年第10期48卷 1314-1318页

作者：曲媛杨梦华郑会明钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

【目的】从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因,从而研究该基因在Sinorhizobium sp.1128群体感应系统中的作用。【方法】利用基因序列同源性比对以及分子克隆的方法,从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆... 详细信息

【目的】从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因,从而研究该基因在Sinorhizobium sp.1128群体感应系统中的作用。【方法】利用基因序列同源性比对以及分子克隆的方法,从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因;利用大肠杆菌异源表达、C18反相薄层层析(TLC)的方法研究该基因的特性;通过中间片段融合的方法缺失该基因,并通过结瘤实验研究该基因对Sinorhizobium sp.1128生理功能的影响。【结果】以草木樨中华根瘤菌Sinorhizobium medicae WSM419自体诱导物合成酶基因Smed_1560序列设计引物,通过PCR扩增在Sinorhizobium sp.1128中寻找到一新的自体诱导物合成基因,命名为traI2。该基因在大肠杆菌Escherichia coli DH5α中表达后能产生两种自体诱导物分子。在Sinorhizobium sp.1128中将该基因缺失,自体诱导物活性下降;回复突变后,自体诱导物活性得到恢复,结瘤实验结果表明该基因能影响根瘤菌的结瘤效率。【结论】中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128群体感应系统是一个复杂的交互系统,它对结瘤的生理功能具有一定的影响。

关键词： Sinorhizobium sp.1128 群体感应自体诱导物合成酶

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硝基苯降解菌的分离鉴定及降解特性

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应用与环境生物学报 2011年第2期17卷 243-246页

作者：卢文翔闫新张迹李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从化工厂污水处理池污泥中分离到一株能高效降解硝基苯的菌株XY-1,通过形态观察、生理生化特征和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株能以硝基苯为唯一碳源、氮源和能源生长,硝基苯初始浓度为200 m... 详细信息

从化工厂污水处理池污泥中分离到一株能高效降解硝基苯的菌株XY-1,通过形态观察、生理生化特征和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株能以硝基苯为唯一碳源、氮源和能源生长,硝基苯初始浓度为200 mg/L时,20 h降解率可达97%.该菌在温度25～35℃、pH 7.0～9.0范围内均能高效降解硝基苯,并且对对氯硝基苯、对氯苯胺也有良好的降解效果.测序分析表明,克隆到了该菌中的硝基苯还原酶基因,推测该菌的降解途径是硝基苯部分还原途径.

关键词：硝基苯生物降解假单胞菌属基因克隆污水处理

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