检索结果-内蒙古大学图书馆

应用与环境生物学报 2006年第3期12卷 395-398页

作者：张忠辉洪青武俊汪婷李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从长期受农药杀螟硫磷污染的土壤中分离到一株高效降解菌株,研究了其最适产酶条件:培养温度为30℃,培养液起始pH为7.0,培养时间为30 h.从该降解菌中提取的粗酶液在pH 7.5和30℃时显示最大的降解活性,其米氏常数Km为2.92×10-4mol/L... 详细信息

从长期受农药杀螟硫磷污染的土壤中分离到一株高效降解菌株,研究了其最适产酶条件:培养温度为30℃,培养液起始pH为7.0,培养时间为30 h.从该降解菌中提取的粗酶液在pH 7.5和30℃时显示最大的降解活性,其米氏常数Km为2.92×10-4mol/L,最大降解速率为2 422.79 nmolm in-1mg-1.

关键词：杀螟硫磷酶促降解产酶条件酶的性质

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百脉根根瘤菌群体感应相关基因的克隆与表达

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微生物学报 2006年第6期46卷 1007-1010页

作者：杨梦华钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在实验室的纯培养条件下,检测不到百脉根根瘤菌自体诱导物的产生,但是通过基因序列同源性比对分析发现,百脉根根瘤菌基因组中至少含有4种自体诱导物合成酶基因;将其中一个自体诱导物合成酶基因ml4543克隆到大肠杆菌表达载体pET30a,构建... 详细信息

在实验室的纯培养条件下,检测不到百脉根根瘤菌自体诱导物的产生,但是通过基因序列同源性比对分析发现,百脉根根瘤菌基因组中至少含有4种自体诱导物合成酶基因;将其中一个自体诱导物合成酶基因ml4543克隆到大肠杆菌表达载体pET30a,构建得到能异源表达该基因的大肠杆菌重组菌株;对该大肠杆菌重组菌株进行自体诱导物检测发现,该合成酶基因在大肠杆菌中能合成至少3种自体诱导物因子。

关键词：群体感应自体诱导物合成酶百脉根根瘤菌大肠杆菌重组表达

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重金属镉抗性菌株的筛选及其对镉活化作用的研究

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生态学杂志 2005年第11期24卷 1357-1360页

作者：夏娟娟盛下放江春玉南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过在培养基中加入一定浓度的Cd2+,从土壤中分离筛选出2株具有较强镉抗性及产酸能力的细菌JL-4和JC-9.经初步鉴定,JL-4和JC-9分别属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和黄单胞菌属(Xanthomonas sp.).将菌株JL-4和JC-9接种到添加不溶性镉(100m... 详细信息

通过在培养基中加入一定浓度的Cd2+,从土壤中分离筛选出2株具有较强镉抗性及产酸能力的细菌JL-4和JC-9.经初步鉴定,JL-4和JC-9分别属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和黄单胞菌属(Xanthomonas sp.).将菌株JL-4和JC-9接种到添加不溶性镉(100mg·L-1)的培养液中28℃培养48 h,接菌处理比不接菌对照培养液中有效镉含量分别增加1 392.3%和1 410.8%,培养液pH分别降低了2.87和3.18.将JL-4和JC-9分别接入含不同浓度重金属镉(100、200mg·kg-1)的土壤中28℃培养20 d,接菌处理比不接菌对照土壤中有效镉含量分别增加17.02%～100%(JL 4)和36.17%～61.80%(JC-9).菌株JL-4和JC-9的最适生长温度均为28℃,最适pH值分别为7和8.除对镉具有抗性外,两菌株对重金属铅、铜、镍、锌也具有一定抗性.

关键词：重金属污染镉菌株筛选活化

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孔雀石绿降解菌Arthrobacter sp.M6的分离及降解特性

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应用与环境生物学报 2010年第4期16卷 581-584页

作者：房桂华李联泰李荣朱建春洪青李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从活性污泥中分离得到一株能以孔雀石绿为唯一碳源和能源生长的细菌M6,根据其形态、生理生化特性以及16S rRNA基因序列相似性分析结果,将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.).该菌株在12h内对20mg/L的孔雀石绿降解率高于80%;降解孔... 详细信息

从活性污泥中分离得到一株能以孔雀石绿为唯一碳源和能源生长的细菌M6,根据其形态、生理生化特性以及16S rRNA基因序列相似性分析结果,将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.).该菌株在12h内对20mg/L的孔雀石绿降解率高于80%;降解孔雀石绿的最适pH为7.0,最适温度为30℃,降解速率与初始接种量呈正相关.研究结果对于孔雀石绿的生物降解以及含孔雀石绿废水的处理具有重要意义.

关键词：孔雀石绿生物降解节杆菌属降解特性废水处理

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Rhizobium sp.W33对不同植物吸收铜和根际分泌物的影响

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环境科学学报 2014年第8期34卷 2077-2084页

作者：陈生涛何琳燕李娅袁彤彤盛下放黄智农业部农业环境微生物重点开放实验室南京农业大学生命科学学院南京210095

通过盆栽试验,采用1株植物促生细菌Rhizobium sp.W33接种黑麦草、狼尾草、高羊茅、紫花苜蓿、猪屎豆、油菜和印度芥菜等7种不同植物,考察了Cu胁迫下菌株对植物生物量、Cu含量和根际土壤中分泌物的影响,并筛选根瘤菌-植物联合修复重金属... 详细信息

通过盆栽试验,采用1株植物促生细菌Rhizobium sp.W33接种黑麦草、狼尾草、高羊茅、紫花苜蓿、猪屎豆、油菜和印度芥菜等7种不同植物,考察了Cu胁迫下菌株对植物生物量、Cu含量和根际土壤中分泌物的影响,并筛选根瘤菌-植物联合修复重金属污染土壤的组合体系,以期初步探明细菌-植物联合修复重金属污染土壤的机制.结果表明,接种Rhizobium sp.W33后,有5种植物的干重增加了11%~56%,增加幅度为印度芥菜>黑麦草>高羊茅>狼尾草>油菜,紫花苜蓿和猪屎豆的干重下降.黑麦草、狼尾草、高羊茅和猪屎豆根内Cu含量接近或超过1000mg·kg-1,Cu大量积累在植物根部.Rhizobium sp.W33能够显著促进黑麦草吸收Cu(p<0.05),并提高其对Cu的富集系数和转移系数,增加根部和地上部的Cu总量.苹果酸是供试植物-细菌联合修复Cu污染土壤的主要有机酸种类,接种根瘤菌W33后黑麦草、狼尾草根际的苹果酸和水溶性糖含量降低,过氧化氢酶活性增加,其中,苹果酸、水溶性糖含量与黑麦草中Cu含量呈显著相关性(p<0.05).因此,根瘤菌W33-黑麦草联合体系修复重金属Cu污染土壤的效果最好,具有应用于重金属Cu污染土壤稳定修复的潜力.

关键词：根瘤菌联合修复铜根际分泌物

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一株孔雀石绿降解菌的分离鉴定及降解特性

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应用与环境生物学报 2010年第3期16卷 390-393页

作者：梅嬛洪青李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从某化工厂的废水处理池污泥中分离到一株孔雀石绿降解菌,命名为K4-W.根据生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将其初步鉴定为Raoultella sp.该菌在48h内对20mg/L的孔雀石绿降解率为82.5%,降解孔雀石绿的最适温度为30℃,外加碳源... 详细信息

从某化工厂的废水处理池污泥中分离到一株孔雀石绿降解菌,命名为K4-W.根据生理生化特征和16S rRNA基因序列相似性分析,将其初步鉴定为Raoultella sp.该菌在48h内对20mg/L的孔雀石绿降解率为82.5%,降解孔雀石绿的最适温度为30℃,外加碳源或Pb2+对其降解有明显的促进作用,增大接种量也有利于提高降解效率,较高浓度的孔雀石绿则对降解有抑制作用.该菌在降解过程中没有生成无色孔雀石绿,这不同于已报道的孔雀石绿降解途径,但该菌是否具有新的降解途径还需进一步研究.

关键词：孔雀石绿生物降解降解途径 Raoultella sp. 废水处理

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耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达

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应用与环境生物学报 2008年第4期14卷 534-538页

作者：董晨曹娟张迹沈标南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启... 详细信息

高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子构建了表达载体pP43NMK-amy和pUBC19-amy,并在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis1A752S中进行表达.结果表明,与地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子相比,采用P43启动子的耐高温α-淀粉酶其表达水平提高了8.9倍.而且在枯草芽孢杆菌***1A752S中分泌表达的α-淀粉酶仍具有耐高温的特性,酶反应的最适温度为90℃,表明酶的热稳定性由蛋白质本身的氨基酸序列决定的.

关键词：耐高温α-淀粉酶基因启动子P43 amy启动子高效表达

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呋喃丹降解菌CDS-1的双标记菌株的构建

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微生物学报 2006年第4期46卷 613-617页

作者：徐剑宏武俊洪青张志琳李顺鹏王云端南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

用Sau3AI消化呋喃丹降解菌***-1的基因组DNA,将所得DNA片段与BamHⅠ酶切的启动子探针载体pRobe-GFP酶连后转化***5α感受态细胞,在选择性平板上培养,从大约1×104个菌落中筛选到50个含启动子片段的阳性克隆。挑选其中一个发光强度... 详细信息

用Sau3AI消化呋喃丹降解菌***-1的基因组DNA,将所得DNA片段与BamHⅠ酶切的启动子探针载体pRobe-GFP酶连后转化***5α感受态细胞,在选择性平板上培养,从大约1×104个菌落中筛选到50个含启动子片段的阳性克隆。挑选其中一个发光强度最强的阳性克隆F7,将它的重组质粒pF7用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后得到包含***-1启动子和gfp基因的DNA片段,将该片段克隆到广宿主载体pPZP201上,得到pPZP201-gfp质粒。将pPZP201-gfp通过三亲接合转移至***-1中得到GFP标记菌株CDS-gfp,经荧光显微镜观察,gfp基因在CDS-gfp中表达量很高。对标记菌株进行连续传代10次(48h/次),发现pPZP201-gfp依然存在,而且发光明显。通过NotⅠ酶切位点把linA基因连接到pUT/mini-Tn5上构建新的转座子载体pUT/mini-Tn5-linA。以pRK600为辅助质粒将pUT/mini-Tn5-linA引入到CDS-1中,linA基因通过转座作用,插入到CDS-gfp的染色体中,得到双标记菌株CDS-GFP-LinA。该菌株是一株能同时降解γ-六六六和呋喃丹的基因工程菌,本研究的结果为研究***-1的生态学行为奠定了基础。

关键词： Sphingomonas sp.CDS-1 呋喃丹降解双标记基因工程菌

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中华根瘤菌自体诱导物合成酶基因的筛选及其在大肠杆菌中的表达

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微生物学报 2007年第5期47卷 838-842页

作者：汪洋郑会明杨梦华钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过携带有mariner转座子的质粒pJZ290随机插入诱变中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)建立突变子文库,并从中筛选到自体诱导物(autoinducer,AI)部分缺失突变株YW1。Arbitrary PCR扩增、DNA测序得到YW1基因组DNA中mariner转座子两端侧... 详细信息

通过携带有mariner转座子的质粒pJZ290随机插入诱变中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)建立突变子文库,并从中筛选到自体诱导物(autoinducer,AI)部分缺失突变株YW1。Arbitrary PCR扩增、DNA测序得到YW1基因组DNA中mariner转座子两端侧翼序列,经DNA序列拼接在GenBank上进行同源性分析后获得一个621bp的完整的开放阅读框(ORF),该ORF编码的酶具有206个氨基酸,与草木樨中华根瘤菌(Sinorhizobium medicae)WSM419的LuxI类自体诱导物合成酶(autoinducer synthase)TraI的同源性高达99%。因此,也将该基因命名为traⅠ。将该基因克隆到广宿主范围表达载体pYC12并在大肠杆菌Escherichia coli DH5α中成功表达,C18反相薄层层析(TLC)在阳性重组子培养上清中检测到四种自体诱导物分子,其中的两种正是AI缺失突变株YW1所缺失的AI,这些结果表明该traⅠ基因在苜蓿中华根瘤菌负责合成两种自体诱导物分子,为进一步研究其群体感应系统奠定了理论基础。

关键词： Sinorhizobium meliloti 群体感应自体诱导物合成酶 mariner转座子

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以四氢嘧啶为主要相容性溶质的中度嗜盐菌I15的分离和特性研究

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微生物学报 2005年第6期45卷 900-904页

作者：何健汪婷孙纪全顾立锋李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从草地土壤中分离到一株中度嗜盐菌I15,经过16SrDNA(GenBank登录号为DQ010162)序列分析、形态学和生理生化特征分析,该菌株初步鉴定为Virgibacillusmarismortui。I15能在0%～25%NaCl的培养基中生长,最适生长NaCl浓度为10%,最适生长温度... 详细信息

从草地土壤中分离到一株中度嗜盐菌I15,经过16SrDNA(GenBank登录号为DQ010162)序列分析、形态学和生理生化特征分析,该菌株初步鉴定为Virgibacillusmarismortui。I15能在0%～25%NaCl的培养基中生长,最适生长NaCl浓度为10%,最适生长温度为30℃,最适pH为7.5～8.0。在高盐条件下,I15细胞内主要的相容性溶质为四氢嘧啶,在15%NaCl培养基中其含量达到1.608mmol(g·cdw),占到相容性溶质总摩尔含量的89.6%。渗透冲击试验表明I15细胞内四氢嘧啶在低渗冲击时能够快速分泌到细胞外,在高渗冲击冲剂时能够较快地重新合成。

关键词：中度嗜盐菌相容性溶质四氢嘧啶细菌泌乳工艺

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