检索结果-内蒙古大学图书馆

生物学杂志 2009年第3期26卷 63-65,71页

作者：王波于汉寿刘雪慧纪燕玲王志伟南京农业大学农业部农业与环境微生物工程重点开放实验室南京210095 湖南省益阳市农业局茶叶加工指导科益阳413000

为寻找优质黄色素生产资源及研究其在不同条件下的稳定性,以冠突散囊菌(Eurotium cristatum)为材料,利用有机溶剂辅助超声波破碎等方法从固体平板和液体培养的菌丝体中提取黄色素,并分别研究了光、温度等理化因子对该色素的影响。结果表... 详细信息

为寻找优质黄色素生产资源及研究其在不同条件下的稳定性,以冠突散囊菌(Eurotium cristatum)为材料,利用有机溶剂辅助超声波破碎等方法从固体平板和液体培养的菌丝体中提取黄色素,并分别研究了光、温度等理化因子对该色素的影响。结果表明,采用有机溶剂辅助超声波等方法成功提取出黄色素;该色素耐受日光灯光、室内散射光,不耐阳光和紫外光;耐酸,不耐碱;对温度敏感。各种金属离子对该色素有不同程度的影响;磷酸的破坏性显著;H2O2、NaHSO3对该色素有较强的破坏力;柠檬酸有一定的破坏作用;同等条件下,苯甲酸钠的破坏大于山梨酸钾;EDTA-Na2和Vc有一定的护色作用;糖类、NaCl、草酸和乳酸几乎无影响。

关键词： Eurotium cristatum 黄色素提取稳定性

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灵芝羊毛甾醇合酶基因的克隆及其表达特性研究

灵芝羊毛甾醇合酶基因的克隆及其表达特性研究

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中国菌物学会2009学术年会

作者：尚常华赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室

三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,三萜类化合物是通过甲羟戊酸途径,由法呢酯焦磷酸产生鲨烯、再转化成2,3-氧化鲨烯,最后经过一系列的氧化、还原和环化反应形成的。羊毛甾醇合酶(LS)处于甲羟戊酸途径中的第二个分支点,是类异戊二烯生... 详细信息

三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,三萜类化合物是通过甲羟戊酸途径,由法呢酯焦磷酸产生鲨烯、再转化成2,3-氧化鲨烯,最后经过一系列的氧化、还原和环化反应形成的。羊毛甾醇合酶(LS)处于甲羟戊酸途径中的第二个分支点,是类异戊二烯生物合成过程中的一个关键酶,它可以催化2,3-氧化鲨烯环化生成羊毛甾醇.

关键词：灵芝三萜羊毛甾醇合酶基因功能验证上游启动子表达谱

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利用ITS和SRAP分子标记对中国的白灵菇和欧洲的侧耳属菌株进行亲缘关系鉴定

利用ITS和SRAP分子标记对中国的白灵菇和欧洲的侧耳属菌株进行亲...

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中国菌物学会2009学术年会

作者：姜超赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室

为了评价白灵菇的分类地位,本文采用了内转录间隔区(ITS)序列分析和相关序列扩增多态性(SRAP)两种分子标记技术,系统分析包括我国白灵菇商业菌株和欧洲Pleurotusnebrodensis菌株在内的34株侧耳属菌株的DNA多态性。ITS序列分析结果显示,... 详细信息

为了评价白灵菇的分类地位,本文采用了内转录间隔区(ITS)序列分析和相关序列扩增多态性(SRAP)两种分子标记技术,系统分析包括我国白灵菇商业菌株和欧洲Pleurotusnebrodensis菌株在内的34株侧耳属菌株的DNA多态性。ITS序列分析结果显示,对ITS序列进行比对分析,结果显示全部供试菌株的ITS序列长度范围为534～589bp。从序列长度变异来看,ITS1区序列长度变化范围为184～255bp,稍大于ITS2区的180～200bp;5.8S序列相对保守,只有154bp和158bp两种长度。所有侧耳菌株无论是ITS1区还是ITS2区(G+C)%都比较低,ITS1平均为42.5%,ITS2平均为43.9%。基于ITS序列信息,构建了34株供试菌株的系统发育树,结果显示:白灵菇与Pleurotus nebrodensis具有很近的亲缘关系,Pleurotus nebrodensis菌株的多态性更丰富;多数Pleurotus eryngii菌株聚在一组;3株Pleurotus elaeoselini聚在一起;Pleurotus ferulae菌株没有独立聚为一组,供试菌株的ITS序列变异不仅表现在碱基的变异,也表现在区域长度的变异。用筛选出的7对扩增条带清晰、多态性丰富、稳定性好的引物组合对34株供试菌株进行SRAP扩增,共得到420条具有重复性的条带,且均为多态性条带,多态性比率为100%。每对引物的扩增效率不同,扩增条带数目为53～71条不等,平均每对引物扩增出60条条带,其中F1-R4扩增条带数最多,为71条条带。基于SRAP标记信息,构建了供试菌株的系统发育树,聚类分析结果与ITS基本一致,表明SRAP标记可以作为侧耳菌株分类和遗传多样性分析的有效技术手段。ITS序列分析和SRAP分子标记分析结果表明:白灵菇和Pleurotus nebrodensis具有很近的遗传关系,二者很可能为同一菌种;Pleurotus nebrodensis菌株的多态性较白灵菇菌株丰富,中国的白灵菇菌株的遗传背景较单一;供试的Pleurotus ferulae菌株不能聚在一组,各菌株之间遗传差异较大。ITS和SRAP两种标记联合使用可以作为侧耳菌株分类及遗传多样性研究的有效手段。

关键词：白灵菇 Pleurotus nebrodensis 内转录间隔区(ITS) 相关序列扩增多态性(SRAP) 遗传多样性

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不同施肥条件下毛竹根系内生细菌的分离及其多样性分析

不同施肥条件下毛竹根系内生细菌的分离及其多样性分析

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第五次全国土壤生物和生物化学学术研讨会

作者：曲浩丽崔中利桂仁意方伟曹慧南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室浙江林学院林业与生物技术学院

植物内生菌广泛分布于植物体内,其多样性受宿主植物类型和外部环境因素的影响。采用平板培养方法对三种不同施肥状态的毛竹根系内生菌进行分离计数,随机挑取其中150个菌落,依形态特征进行初步归为11类,进而以细菌的通用引物扩增16S rDN... 详细信息

植物内生菌广泛分布于植物体内,其多样性受宿主植物类型和外部环境因素的影响。采用平板培养方法对三种不同施肥状态的毛竹根系内生菌进行分离计数,随机挑取其中150个菌落,依形态特征进行初步归为11类,进而以细菌的通用引物扩增16S rDNA片段,用两种限制性内切酶HhaⅠ和RasⅠ酶切,对限制性酶切多样性进行PCR-RFLP分型后测序。测序结果表明,毛竹根系内生菌归于芽孢杆菌属(Bacillus),肠杆菌属(Enterobacter),假单胞菌属(Pseudomonas),贪铜菌属(Cupriavidus),微球菌属(Micrococcus),金黄杆菌属(Chryseobacterium)六个属。施肥状况不同,内生细菌的种类和数量也不同,占主要优势的群落类型也发生改变。

关键词：毛竹内生细菌 RFLP分析生物多样性

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微量热技术在生命科学及秸秆降解腐熟研究中的应用

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江西农业学报 2009年第5期21卷 137-139页

作者：刘玉涛朱颖峰黄为一南京农业大学工学院江苏南京210031 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 浙江省杭州市萧山区环境保护局浙江杭州311200

综述了微量热技术的特点、工作原理以及其在生命科学中的应用和进展,并重点阐述了其在秸秆降解腐熟中的应用。

关键词：微量热技术生命科学秸秆降解

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抗磺酰脲类除草剂看麦娘乙酰羟酸合酶的大亚基基因的克隆和表达

抗磺酰脲类除草剂看麦娘乙酰羟酸合酶的大亚基基因的克隆和表达

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第九届全国杂草科学大会

作者：俞欣妍李怡李永丰何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏省农业科学院植物保护研究所

乙酰羟酸合酶(AHAS,也称乙酰乳酸合酶acetohydroxyacid synthase,ALS)是植物、真菌和细菌细内支链氨基酸Val、Leu、Ile生物合成过程中关键酶,是乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂如磺酰脲类、咪唑啉酮类、嘧啶水杨酸和磺酰胺类除草剂的作用靶... 详细信息

乙酰羟酸合酶(AHAS,也称乙酰乳酸合酶acetohydroxyacid synthase,ALS)是植物、真菌和细菌细内支链氨基酸Val、Leu、Ile生物合成过程中关键酶,是乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂如磺酰脲类、咪唑啉酮类、嘧啶水杨酸和磺酰胺类除草剂的作用靶标。从看麦娘抗性生物型与敏感生物型中获得抗磺酰脲类除草剂的乙酰羟酸合酶基因,构建其表达载体,并分析基因中的位点突变与乙酰羟酸合酶对磺酰脲类除草剂抗性产生原因。利用染色体步移技术从看麦娘抗性生物型与敏感生物型总DNA中克隆到乙酰羟酸合酶的大亚基基因,对AHAS大亚基氨基酸序列进行比对分析。分别将抗性与敏感AHAS连接到表达载体pET29a(+)多克隆位点,转化大肠杆菌(Escherichia coli)获得转化子BL21(pET-R)和BL21(pET-S),并诱导表达。看麦娘抗性生物型大亚基有3个氨基酸位点发生突变,转化子在IPTG诱导下,乙酰羟酸合酶的大亚基的蛋白成功表达,酶液酶活试验结果表明:看麦娘抗性基因表达的乙酰羟酸合酶大亚基对氯磺隆、甲磺隆与氯嘧磺隆具有很强的抗性。看麦娘抗性生物型的乙酰羟酸合酶大亚基对磺酰脲类除草剂具有很强的交互抗性,看麦娘抗性生物型与敏感生物型的AHAS大亚基有3个氨基酸位点差异,这些位点突变可能是看麦娘对除草剂产生抗性的原因。

关键词：磺酰脲类除草剂看麦娘乙酰乳酸合酶 AHAS大亚基基因

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采用扩增核糖体DNA限制性分析(ARDRA)研究双孢蘑菇培养料后发酵过程中的细菌群落结构(Ⅱ)-细菌群落结构ARDRA分析

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食用菌学报 2009年第1期16卷 1-5页

作者：何丽鸿于荣利陈明杰潘迎捷中华人民共和国农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106 南京农业大学生命科学院微生物系江苏南京210095 上海海洋大学上海200090

采用ARDRA对双孢蘑菇[Agaricus bisporus(Large)Sing.]培养料后发酵过程中的细菌群落结构进行研究。细菌16S rDNA文库ARDRA分析结果表明,细菌群落在后发酵过程中发生了明显变化,4个时期文库的16S rDNA组成分别以各自独有酶切类型为主。A... 详细信息

采用ARDRA对双孢蘑菇[Agaricus bisporus(Large)Sing.]培养料后发酵过程中的细菌群落结构进行研究。细菌16S rDNA文库ARDRA分析结果表明,细菌群落在后发酵过程中发生了明显变化,4个时期文库的16S rDNA组成分别以各自独有酶切类型为主。ARDRA文库优势类群的序列分析结果显示,培养料中的细菌组成远多于传统分离方法所获得的类群:在"空气调节"时期培养料(C6)中发现了一些未曾报道的Bacilli门成员,如Trichococcus属、Planococcus属和Caryophanon属,以及γ-Proteobacteria亚纲;而在"后发酵"开始和结束的培养料(C1和C7)中分别检测到了Ther mus ther mophilus和α-Proteobacteria亚纲的细菌,这些是近年来利用分子生物学方法在高温堆肥中发现的新类群;同时,在整个"后发酵"过程中还发现了大量目前尚未获得培养的细菌类群。

关键词：双孢蘑菇培养料后发酵细菌16S rDNA 细菌群落结构 ARDRA

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日本看麦娘抗AHAS抑制剂类除草剂的分子机理研究

日本看麦娘抗AHAS抑制剂类除草剂的分子机理研究

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第九届全国杂草科学大会

作者：李永丰俞欣妍李怡江苏省农业科学院植物保护研究所南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

近年来,杂草抗除草剂的研究取得了一些进展。本文简述了除草剂的作用机理以及杂草对除草剂容易产生抗药性的种群分布,分别介绍了EPSPS抑制剂,AHAS抑制剂、乙酰CoA转移酶、光合作用抑制剂等6类除草剂的抗性机理研究进展以及目前它们的抗... 详细信息

近年来,杂草抗除草剂的研究取得了一些进展。本文简述了除草剂的作用机理以及杂草对除草剂容易产生抗药性的种群分布,分别介绍了EPSPS抑制剂,AHAS抑制剂、乙酰CoA转移酶、光合作用抑制剂等6类除草剂的抗性机理研究进展以及目前它们的抗性基因在转基因作物上的应用潜力。最后,对生产中除草剂的合理使用,杂草产生抗药性的研究思路创新、杂草抗性基因的利用及杂草抗药性对除草剂品种使用寿命的影响进行了探讨,并对抗性基因的应用前景进行了展望。

关键词：杂草除草剂抗性机理研究进展抗性基因

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采用变性梯度凝胶电泳研究羊肚菌土壤真菌群落结构

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食用菌学报 2009年第2期16卷 6-9页

作者：沈洪汪虹赵永昌冯爱萍陈明杰潘迎捷农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室上海市食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201106 南京农业大学生命科学院微生物系江苏南京210095 云南省农业科学院生物技术资源研究所云南昆明650205 上海海洋大学上海200090

采用变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)技术以土壤微生物群体的基因组DNA为研究对象,通过比较羊肚菌(Morchella sp.)出菇土壤及对照土壤中各种真菌的28S rDNA基因信息来了解土壤微生物的多样性。结果发现,测得... 详细信息

采用变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis)技术以土壤微生物群体的基因组DNA为研究对象,通过比较羊肚菌(Morchella sp.)出菇土壤及对照土壤中各种真菌的28S rDNA基因信息来了解土壤微生物的多样性。结果发现,测得的12种真菌中,盘菌纲的有10种,异担子菌纲1种,还有1种未确定。所取2份土样中仅羊肚菌生长土壤中检测出有羊肚菌;2份样品在优势真菌种群上有一定的区别,盘菌纲真菌群落存在很大的差异,羊肚菌出菇土壤的真菌丰度低于对照,可能与土壤中羊肚菌优势种群对其它种群的抑制作用有关。

关键词：羊肚菌土壤真菌群落 PCR-DGGE

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3种植物花螺原体的分离及其基本特性

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微生物学报 2008年第9期48卷 1141-1146页

作者：于汉寿阮康勤纪燕玲陈永萱王志伟南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

【目的】调查我国植物花上的螺原体的存在,搜集我国的螺原体资源,并研究它们的基本生物学特性。【方法】常规螺原体分离、培养方法,应用暗视野显微镜和透射电子显微镜观察螺原体形态,根据16S rDNA和ITS序列构建系统发育树研究螺原体分... 详细信息

【目的】调查我国植物花上的螺原体的存在,搜集我国的螺原体资源,并研究它们的基本生物学特性。【方法】常规螺原体分离、培养方法,应用暗视野显微镜和透射电子显微镜观察螺原体形态,根据16S rDNA和ITS序列构建系统发育树研究螺原体分离菌株可能的分类地位。【结果】分别从油菜(Brassica napus)、杜鹃(Rhododendron simsii)、红花酢浆草(Oxalis corymbosa)3种植物花表分离到4株螺原体CNR-1和CNR-2、CNA-1、CRW-1,对其形态、部分生理生化特性及分子生物学特性进行了初步研究。这4株螺原体在R-2液体培养基中生长良好,都能通过孔径为0.22μm的微孔滤膜;在R-2固体培养基上呈圆形或颗粒状菌落,菌落直径约50～600μm;在生长的某个阶段可呈典型的螺旋状,菌体直径为37.04～370.40nm,长度约0.89～11.88μm;它们都能利用葡萄糖作为碳源,不能利用尿素;在不含胎牛血清的R-2培养基中,它们都不能生长;菌株CNR-1、CNA-1能强烈代谢精氨酸,而CNR-2和CRW-1不能代谢精氨酸;在氨苄青霉素钠浓度高达2000U/mL的R-2培养基中,分离菌株生长良好。根据16S rDNA序列构建的系统发育树显示,分离菌株CNR-1和CNR-2、CNA-1与蜜蜂螺原体Spiroplasma melliferum聚类较近,而CRW-1与***聚类较近;根据ITS序列构建的系统发育树显示,CRW-1形成一个单独的分枝,其它3个菌株仍与***聚类。【结论】以上结果初步表明,分离菌株CNR-1和CNR-2、CNA-1极有可能是Spiroplasma melliferum,而CRW-1可能是一个新的螺原体种,但还需要血清学试验进一步验证。

关键词：螺原体生物学特性油菜杜鹃红花酢浆草

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