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第十九次全国环境微生物学学术研讨会

作者：倪海燕王飞李娜姚利戴琛贺芹何健洪青南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江西农业大学生物技术与工程学院 330045

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一株高效降解废水有机质耐冷菌的筛选、鉴定及特性研究

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环境科学学报 2015年第4期35卷 1006-1011页

作者：高新新何世颖杨林章徐流凤曹慧南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江苏省农业科学院农业资源与环境研究所南京210014

利用生物法进行污水处理已被国内外广泛使用,但由于温度影响微生物的生长和繁殖,使其成为生物污水处理效率的限制因子.本研究从污水处理厂活性污泥中分离出5株在低温4℃条件下生长良好的菌株,其中菌株DW1在4℃条件下,96 h时可将初始COD... 详细信息

利用生物法进行污水处理已被国内外广泛使用,但由于温度影响微生物的生长和繁殖,使其成为生物污水处理效率的限制因子.本研究从污水处理厂活性污泥中分离出5株在低温4℃条件下生长良好的菌株,其中菌株DW1在4℃条件下,96 h时可将初始COD为800 mg·L-1的生活污水有机物去除率高达67.7%.结合菌落形态特征、生理生化特性以及16S r DNA序列分析,将菌株DW1初步鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.).菌株DW1对COD负荷较高的污水处理效果较好;接种量为3%(体积分数)、p H为7.0时,菌株对污水COD去除率和DHA活性较高.在4℃和25℃条件下,菌株DW1均在96 h对污水COD去除率和DHA活性最高,分别为71.2%、11.35μg·m L·h-1(以TF计)和78.8%、15.11μg·m L-1·h-1(以TF计).

关键词：耐冷菌模拟污水菌株鉴定 COD去除率 DHA活性

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N-脱烷基酶基因(caceO)转基因拟南芥对氯乙酰胺类除草剂的降解与生物修复的研究

N-脱烷基酶基因(caceO)转基因拟南芥对氯乙酰胺类除草剂的降解与...

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第十九次全国环境微生物学学术研讨会

作者：褚翠伟刘斌谢香庭陶青邱吉国贺芹蒋建东黄星何健李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 北京大北农生物技术有限公司北京100193

氯乙酰胺类除草剂是美国孟山都公司于上世纪50年代开始研发的一类触杀性除草剂，因此类除草剂分子结构中含有氯乙酰胺基团故得此名。目前大约有53个商品化的品种，常用氯乙酰胺类除草剂品种包括甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺、异丙甲...

氯乙酰胺类除草剂是美国孟山都公司于上世纪50年代开始研发的一类触杀性除草剂，因此类除草剂分子结构中含有氯乙酰胺基团故得此名。目前大约有53个商品化的品种，常用氯乙酰胺类除草剂品种包括甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺、异丙甲草胺和异丙草胺等，主要用于防除一年生禾本科杂草和某些阔叶杂草。

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乳酸作为EBPR进水碳源的可行性研究

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南京农业大学学报 2015年第1期38卷 85-92页

作者：龙建兵顾向阳南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

[目的]探索乳酸作为强化生物除磷(EBPR)进水碳源的可行性。[方法]首先采用厌氧-好氧型序批式生物反应器,以乳酸为唯一进水碳源驯化EBPR污泥(SBR-2),并与以乙酸为唯一进水碳源的EBPR污泥(SBR-1)对比;待SBR-2达到稳态运行后,在1个运行周... 详细信息

[目的]探索乳酸作为强化生物除磷(EBPR)进水碳源的可行性。[方法]首先采用厌氧-好氧型序批式生物反应器,以乳酸为唯一进水碳源驯化EBPR污泥(SBR-2),并与以乙酸为唯一进水碳源的EBPR污泥(SBR-1)对比;待SBR-2达到稳态运行后,在1个运行周期定期取样,测定混合液中化学需氧量(COD)、磷酸根、氨氮和硝氮等参数的周期变化,并与SBR-1比较;通过研究不同进水磷浓度对2个反应器除磷效率的影响,比较2种EBPR污泥的除磷能力。[结果]以乙酸为进水碳源的SBR-1和以乳酸为进水碳源的SBR-2分别经过8和31 d的驯化期实现了稳定的EBPR功能;与乙酸驯化的EBPR污泥类似,乳酸驯化所得的EBPR污泥也表现出典型聚磷菌(PAO)的代谢特征。以乳酸为碳源驯化而成的EBPR污泥其主要特征参数如有机酸吸收速率、磷释放速率和磷吸收速率均明显低于以乙酸为碳源驯化而成的EBPR污泥,但是由于其厌氧释放的磷浓度较低,结果仍可在相同的时间内完成磷的吸收。在进水磷酸根质量浓度小于等于12 mg·L-1时,以乳酸为进水碳源的反应器可以实现稳定高效的除磷效果,出水磷酸根质量浓度稳定在0.3 mg·L-1以下。[结论]采用乳酸作为EBPR的进水碳源是可行的。

关键词：聚磷菌强化生物除磷乳酸碳源

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申氏杆菌HZN7降解转化去甲基烟碱的分子机制研究

申氏杆菌HZN7降解转化去甲基烟碱的分子机制研究

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第十九次全国环境微生物学学术研讨会

作者：邱吉国李娜吕镇梅刘维屏何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 浙江大学生命科学学院杭州310058 浙江大学环境与资源学院杭州310058

去甲基烟碱(Nomicotine,NOR)与烟碱(Nicotine,尼古丁)均为天然的植物碱,主要产生于烟草类植物叶片中.通常情况下,鲜叶中含量最多的植物碱是烟碱(95％),NOR仅占3％.然而在烟叶衰老或老化过程中,大部分烟碱(最多可大95％)细胞中被N-脱甲...

去甲基烟碱(Nomicotine,NOR)与烟碱(Nicotine,尼古丁)均为天然的植物碱,主要产生于烟草类植物叶片中.通常情况下,鲜叶中含量最多的植物碱是烟碱(95％),NOR仅占3％.然而在烟叶衰老或老化过程中,大部分烟碱(最多可大95％)细胞中被N-脱甲基酶降解为NOR.近期的研究报到发现NOR与烟碱具有相同或相似的毒性.更为重要的是,NOR是烟草特异性N-亚硝胺化合物NNN (N-nitrosonomicotine)的直接前体.NNN具有极强的致癌能力,被美国FDA列为一级致癌物.因此,研究NOR的微生物降解对于减少NOR的污染以及降低后续潜在的亚硝化生成强致癌物有着重要的意义.

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银杏内生真菌多样性与产黄酮类物质真菌的分离和鉴定

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土壤 2015年第1期47卷 135-141页

作者：张海龙李善春卢维浩雷燕萍曹福亮曹慧南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 南京林业大学森林资源与环境学院南京210037 南京市园林科学研究所南京210037

采用传统组织培养法从银杏根、叶片和茎中分离内生真菌,以相对频率作为指标分析其多样性,通过显色反应、薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)等方法对内生真菌的发酵产物进行初步分析,筛选能够产黄酮类物质的内生真菌,并通过分光光度法... 详细信息

采用传统组织培养法从银杏根、叶片和茎中分离内生真菌,以相对频率作为指标分析其多样性,通过显色反应、薄层层析(TLC)、高效液相色谱(HPLC)等方法对内生真菌的发酵产物进行初步分析,筛选能够产黄酮类物质的内生真菌,并通过分光光度法测定总黄酮产量;同时根据菌株的形态学特征,结合真菌r DNA的居间序列(internal transcribed spacer,ITS)的系统进化分析进行菌株鉴定。结果表明:共分离得到217株内生真菌,分属于5纲、8目、10科、13属;经初步筛选,2株分离自根组织的内生真菌GF111和GF521具有产黄酮类化合物的能力,发酵液总黄酮产量分别为(14.50±1.30)mg/L和(21.10±1.30)mg/L;初步鉴定2株产黄酮内生真菌GF111和GF521分别为卷枝毛霉Mucor circinelloides和尖镰孢菌Fusarium oxysporum。可见,内生真菌在银杏不同部位在数量、种群及其组成上存在着较大差异,并且菌株GF111和GF521产黄酮能力较高,可作为生物发酵生产黄酮类物质的备选菌株。本研究为更好地开发和保护银杏资源提供了依据。

关键词：银杏黄酮内生真菌 HPLC

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Isolation, transposon mutagenesis, and characterization of the novel picolinic acid-degrading strain Alcaligenes faecalis JQ135

Isolation, transposon mutagenesis, and characterization of t...

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第十九次全国环境微生物学学术研讨会

作者：邱吉国张俊杰杨猷建张艳婷蒋建东洪青闫新何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

Picolinic acid (PA) is a natural by-product from the microbial degradation of 2-aminophenol and *** intermediate 2-aminomuconic 6-semialdehyde was instable and 2-picolinic acid was abiotically formed simultaneously as a dead end *** this study,a bacterial strain JQ 135 capbale of degrading PA efficiently was isolated from Municipal wastewater.

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具有自絮凝特性的乙酸降解菌的筛选及其降解特性

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南京农业大学学报 2015年第5期38卷 830-837页

作者：邹彩连赵国成蒋翊宸林栋青顾向阳南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 建湖县农业技术推广服务中心江苏盐城224700

[目的]探索利用耐盐絮凝细菌降解硫胶废水中的乙酸，解除乙酸对自养型硫细菌的抑制作用，提高硫胶废水中硫代硫酸盐的降解速率的可行性。[方法]从盐碱土中富集分离耐盐或嗜盐的乙酸降解菌，采用摇瓶培养试验筛选出具有絮凝功能的菌株，... 详细信息

[目的]探索利用耐盐絮凝细菌降解硫胶废水中的乙酸，解除乙酸对自养型硫细菌的抑制作用，提高硫胶废水中硫代硫酸盐的降解速率的可行性。[方法]从盐碱土中富集分离耐盐或嗜盐的乙酸降解菌，采用摇瓶培养试验筛选出具有絮凝功能的菌株，通过生理生化特性测定和16SrDNA序列的分析，将所得菌株鉴定至相应的属或种。通过摇瓶试验研究温度、pH、盐度和底物浓度等因素对分离菌株降解性能的影响，获得最佳的降解条件。在硫胶废水中接种絮凝细菌置于最适条件下培养，待乙酸完全降解后将培养液用滤纸过滤除去细菌絮体，然后在滤液中接人适量硫杆菌，并以含有乙酸的硫胶废水原水作对照，比较硫代硫酸盐的降解速率。[结果]从盐碱土中成功分离到1株具有絮凝功能的乙酸降解细菌SSl，以乙酸为碳源生长时絮凝指数达86．41％，根据生理生化特性和16SrDNA序列比对结果，菌株SS1被鉴定为Pseudomonas sp．。菌株SS1是1株中度嗜盐菌，最高可耐受NaCl的质量浓度为75g·L^-1，其降解乙酸的最适条件为30～35℃、pH8．5、NaCl5～30g·L^-1和乙酸1—4g·L^-1。接种SSl絮体质量浓度为1．6g·L^-1时，硫胶废水中的乙酸降解速率可达200mg·L^-1·h^-1，乙酸可在6h内完全降解，硫代硫酸盐完全氧化所需的时间可缩短至48h。[结论]***是1株中度嗜盐且具有良好絮凝功能的乙酸降解细菌，该菌株可解除乙酸对盐生硫杆菌的抑制作用，加快硫代硫酸盐的降解，因而在硫胶废水的生物处理中具有较好的应用潜力。

关键词：硫胶废水硫代硫酸盐盐生硫杆菌絮凝细菌

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Rhodococcus sp.T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶酶学性质及分离纯化

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南京农业大学学报 2015年第1期38卷 78-84页

作者：董维亮侯颖王飞李周坤黄彦崔中利南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045

[目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供... 详细信息

[目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供更多的理论依据。[方法]以酯酶的通用底物乙酸-1-萘酯作为定量测定胞内酯酶活力的底物,分析温度和p H值对酯酶活力和稳定性的影响,同时探讨金属离子对酯酶活力的影响;通过硫酸铵沉淀、疏水层析、DEAE离子交换层析和Superdex-200凝胶层析柱组合技术对精恶唑禾草灵酯酶进行分离纯化,计算了纯化过程中酯酶的比活力、纯化倍数和回收率。[结果]胞内酯酶最适反应p H值为8.0,在p H 4.0-10.0内处理24 h活性稳定;最适反应温度为42℃,在温度50℃以下处理30 min活性稳定;1.0 mmol·L^-1Ag^＋对酯酶活力有强烈的抑制作用。纯化后的酯酶比活力从0.058 U·mg^-1提高到21.5 U·mg^-1,纯化倍数为369.5倍,回收率为3%。纯化后的粗酶经SDS-PAGE电泳后至少有4条明显的蛋白条带,通过酶谱确定精恶唑禾草灵酯酶条带的相对分子质量为42.3×10^3。[结论]精恶唑禾草灵酯酶具有较好的酸碱稳定性和热稳定性,在精恶唑禾草灵污染土壤修复中可能具有较好的应用潜力。

关键词： Rhodococcus sp.T1 精恶唑禾草灵分离纯化酶学性质酯酶酶谱

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碳稳定同位素示踪免耕水稻土固定CO2自养微生物多样性

碳稳定同位素示踪免耕水稻土固定CO2自养微生物多样性

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第八次全国土壤生物与生物化学学术研讨会暨第三次全国土壤健康学术研讨会

作者：钱明媚肖永良彭文涛曹慧南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

自养微生物有极强的环境适应性,在二氧化碳固定方面有很大潜力,但免耕耕作对水稻土CO固定自养微生物数量和种类的影响仍不清楚。采用稳定性同位素核酸探针（DNA-SIP）技术,结合PCR-RFLP方法,研究了南方免耕水稻土中CO固定自养微生物的... 详细信息

自养微生物有极强的环境适应性,在二氧化碳固定方面有很大潜力,但免耕耕作对水稻土CO固定自养微生物数量和种类的影响仍不清楚。采用稳定性同位素核酸探针（DNA-SIP）技术,结合PCR-RFLP方法,研究了南方免耕水稻土中CO固定自养微生物的多样性。结果表明,铁渗潜育水耕人为土FG和普通铁渗水耕人为土TF经CO标记处理80 d后,密度梯度离心分离的15层DNA样品中的cbbLR基因第8层最高,分别为1.36×10～5拷贝·g干土和2.21×10～5拷贝·g干土。以分离的7、8层DNA为模板,构建了包括两种土壤CO标记和CO对照的cbbLR基因文库,8个基因文库中672个克隆经酶切后分为30个OTUs类型,分布在5个目、9个科和12个已知属。土壤FG以Bradyrhizobium和Rubrivivax为主要类群,占全部克隆数的60.40%和13.86%,土壤TF中的微生物种属分布比较均匀,Rhodopseudomonas、Rhodospirillum、Methylibium和Variovorax分别占全部克隆数的20.90%、11.94%、16.42%和10.45%。两种土壤CO标记的cbbLR基因文库OTU类型、多样性指数均高于CO对照文库,其群落结构也有明显的变化。因此,免耕水稻土存在高度多样性的二氧化碳固定自养微生物,在农田土壤碳素循环方面具有重要作用。

关键词：微生物多样性水稻土稳定同位素示踪

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