检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：杜丽丽钟凯杨国宇鲁维飞韩立强朱河水王江农业部动物生化与营养重点实验室河南农业大学牧医工程学院

在胰脏和小肠生长与修复过程中,上皮细胞表达的Epithelial progenitor(EP1)蛋白是一种细胞表面蛋白,其与细胞的管状形变关系密切。为进一步研究EP1基因所编码蛋白质的生物学功能,本实验设计一对引物,利用RT-PCR方法成功克隆了猪EP1基因,... 详细信息

在胰脏和小肠生长与修复过程中,上皮细胞表达的Epithelial progenitor(EP1)蛋白是一种细胞表面蛋白,其与细胞的管状形变关系密切。为进一步研究EP1基因所编码蛋白质的生物学功能,本实验设计一对引物,利用RT-PCR方法成功克隆了猪EP1基因,猪EP1基因长度为829 bp,开放阅读框为651 bp,编码217个氨基酸。将编码的EP1基因的cDNA片段与原核表达载体pEX4连

关键词：原核表达 EP1

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猪染色质开放元件UCOE基因筛选及功能验证

猪染色质开放元件UCOE基因筛选及功能验证

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全国动物生理生化第七届全国代表大会暨第十三次学术交流会

作者：高会贞杨国宇郭豫杰鲁维飞韩立强张超李宏基农业部动物生化与营养重点实验室河南农业大学牧医工程学院

源于人HNRNPA2B 1/CBX3基因座位的UCOE片段(ubiquitous chromatin opening element)包含一个双向启动子,且嵌有丰富的无甲基化的CpG岛,具有染色质重塑功能。当它作为调控元件连接在启动子的上游时能够防止转录沉默,增强转基因的表达水... 详细信息

源于人HNRNPA2B 1/CBX3基因座位的UCOE片段(ubiquitous chromatin opening element)包含一个双向启动子,且嵌有丰富的无甲基化的CpG岛,具有染色质重塑功能。当它作为调控元件连接在启动子的上游时能够防止转录沉默,增强转基因的表达水平。为了研究猪UCOE基因在临床应用中所发挥的功能,本试验利用人UCOE序列进行同源比对得到猪UCOE序列。通过酶切以及RT-

关键词：基因筛选功能验证染色质

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文蛤坎氏弧菌的分离鉴定

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山东畜牧兽医 2014年第6期35卷 22-23页

作者：王雪鹏柴雪良闫茂仓山东农业大学动物科技学院泰安271018 浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室

本文从江苏文蛤养殖区发病文蛤中分离到1株优势菌,人工感染显示菌株能引起供试文蛤发病,死亡率为68.75%,且发病症状与原发病症状相同,提示该菌是引起文蛤大面积死亡的主要致病菌。对其形态、生理生化特征致病性进行了初步研究。结果显... 详细信息

本文从江苏文蛤养殖区发病文蛤中分离到1株优势菌,人工感染显示菌株能引起供试文蛤发病,死亡率为68.75%,且发病症状与原发病症状相同,提示该菌是引起文蛤大面积死亡的主要致病菌。对其形态、生理生化特征致病性进行了初步研究。结果显示分离菌株为革兰氏阴性菌,直杆状,主要生理生化指标赖氨酸脱羧酶、硝酸盐还原、甘露糖、氧化酶为阳性,精氨酸脱羧酶、鸟氨酸酸脱羧酶、V.P为阴性。结合革兰氏染色、形态、生理生化特点,最后鉴定该分离菌株为坎氏弧菌。

关键词：文蛤坎氏弧菌 16SrRNA

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动-静脉血管插管技术研究热应激对山羊不同部位血糖浓度变化的影响

动-静脉血管插管技术研究热应激对山羊不同部位血糖浓度变化的影响

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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第七届中国饲料营养学术研讨会

作者：施忠秋廖睿王超赵传超周颖齐智利华中农业大学动物科技学院

本试验旨在为动物在炎热环境中能够维持正常生理机能以及探索行之有效的缓解动物热应激的方法提供理论基础和科学依据。试验选择体重相近、健康状况良好的肉山羊8只,随机分为气候适宜的对照组(空调控制环境温度为25℃,温湿指数控制在72... 详细信息

本试验旨在为动物在炎热环境中能够维持正常生理机能以及探索行之有效的缓解动物热应激的方法提供理论基础和科学依据。试验选择体重相近、健康状况良好的肉山羊8只,随机分为气候适宜的对照组(空调控制环境温度为25℃,温湿指数控制在72以下)和热应激组(空调控制温度,环境温湿指数达72以上),每组4只羊。试验期22天,前10天为预试期,后12天为正试期。首先利用全收粪法进行消化代谢试验,测定两组试验羊的氮沉积及氮沉积率。之后安装山羊肠系膜静脉-颈动脉-门静脉-肝静脉插管,一周后于肝静脉、门静脉、颈动脉及肠系膜近端插管抽取血液样品,使用安稳血糖试纸测定血糖浓度。于两组试验羊颈静脉处抽取血样,使用生化分析仪测定碱性磷酸酶、肌酸激酶、总胆固醇、甘油三酯等指标。结果表明,热应激组肉山羊的氮沉积高于对照组,氮沉积率低于对照组,但二者差异不显著(P>0.05)。整体来看,热应激组试验羊与对照组相比较各部位的血糖浓度较低,热应激组肝静脉、门静脉及肠系膜近端的血糖浓度较低,而颈动脉部位血糖浓度基本稳定。9:00、13:00时热应激组的肝静脉血糖浓度显著低于对照组(P<0.05)。对照组肉山羊于10:00、11:00、12:00、13:00的血糖浓度特征均为肝静脉>肠系膜近端>门静脉>颈动脉。热应激组山羊的血糖检测结果整体上与对照组相同,但在11:00、12:00出现了肠系膜近端的血糖浓度低于门静脉的情况。热应激组肉山羊血液中的的碱性磷酸酶、甘油三酯水平均低于对照组,但并不显著(P>0.05),而肌酸激酶、总胆固醇水平显著的低于对照组(P<0.05)。综上所述,热应激对肉山羊的氮沉积无明显影响,对机体不同部分血糖浓度产生一定影响,对钙、磷代谢及脂类代谢也有不同程度的影响。

关键词：热应激肉山羊氮沉积血糖浓度动-静脉血管插管技术

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蓝舌病病毒核酸通用检测方法的建立

蓝舌病病毒核酸通用检测方法的建立

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：冯瑜菲徐青元杨涛孙恩成李俊平吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室哈尔滨150001 东北农业大学哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室哈尔滨150001

目的：建立具有群特异性的BTV通用核酸检测方法，为有效的防控蓝舌病奠定了基础。方法：利用DNAMAN生物学软件，比对了GenBank中26个不同血清型BTV的共104条S10基因的核酸序列，选取最保守的序列区域设计特异性引物，并利用PubMed中的BL... 详细信息

目的：建立具有群特异性的BTV通用核酸检测方法，为有效的防控蓝舌病奠定了基础。方法：利用DNAMAN生物学软件，比对了GenBank中26个不同血清型BTV的共104条S10基因的核酸序列，选取最保守的序列区域设计特异性引物，并利用PubMed中的BLAST软件将设计的引物与GenBank中病毒的核酸序列进行比对，以分析其特异性。利用设计的特异性引物对BTV1-24共24个血清型毒株的RNA用Quant One Step RT-PCR Kit进行one stepRT-PCR检测，以验证该引物的通用性。同时，以IBAV,CV和AKAV的RNA为模板，进行one step RT-PCR检测，以验证该引物的特异性。并通过已知浓度的BTV-16的RNA样品，按照确定的检测体系进行one step RT-PCR检测，以测定该方法的灵敏度。对人工感染BTV-16的46份羊的抗凝血样品用QIAampRNA Blood Mini Kit进行RNA提取，并进行one step RT-PCR检测。每组实验进行三次重复。结果:通过试验成功设计了BTV核酸特异性通用检测引物，并成功建立了BTV群特异性one step RT-PCR检测方法。该方法可有效检测出不同血清型BTV核酸，而对IBAV,CV和AKAV无交叉反应，特异性好;同时，该方法可成功检测到102 TCID50/mL的BTV核酸;该方法也可有效检测出羊的抗凝血样品中的BTV核酸。结论:通过比对104条26个不同血清型BTV S10基因的核酸序列，其同源性可高达90. 55％，并在不同血清型BTV中存在两段高度保守的核酸区域，这为设计BTV特异性通用检测引物提供了有利的基础。本实验筛选得到的一对特异性引物对BTV1-24型都发生特异性反应，具有良好的群特异性，为建立快速、敏感、特异性的BTV通用核酸诊断方法奠定了基础。

关键词：动物医学蓝舌病病毒群特异性核酸检测

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蓝舌病病毒8型VP2蛋白的真核表达与抗原性检测

蓝舌病病毒8型VP2蛋白的真核表达与抗原性检测

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：席娜王文世冯瑜菲李俊平吴东来孙恩成孙亮魏天杨涛徐青元刘二战孙晶魏鹏中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

目的:利用真核表达系统对BTV8型VP2蛋白进行表达并对其抗原性进行检测。方法:从BTV8感染的BHK-21细胞提取病毒RNA,依据Genback中已登录的BTV8的L2基因序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增BTV8 VP2全长基因,将VP2基因和pFastBacHTA供体... 详细信息

目的:利用真核表达系统对BTV8型VP2蛋白进行表达并对其抗原性进行检测。方法:从BTV8感染的BHK-21细胞提取病毒RNA,依据Genback中已登录的BTV8的L2基因序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增BTV8 VP2全长基因,将VP2基因和pFastBacHTA供体质粒分别经BamHI和HindⅢ酶切后连接转化将其克隆到pFast-BacHTA供体质粒中构建重组pFast-VP2质粒,双酶切和测序鉴定后将pFast-VP2转化DH10Bac感受态细胞制备提取重组杆粒BAC-VP2,经PCR鉴定后在脂质体Cellfectin Reagent作用下将重组杆粒BAC-VP2转染Sf21细胞,转染后的Sf21细胞经蛋白质印迹检测VP2蛋白及其生物活性。结果:经双酶切以及测序鉴定成功构建了真核表达载体pFast-VP2,利用杆状病毒表达系统成功表达出BTV8重组蛋白VP2.通过包涵体纯化方法对其进行了纯化,Western blot结果显示该蛋白可以与抗BTV8绵羊阳性血清产生反应,显示出良好的抗原性。结论:昆虫杆状病毒表达载体具有高效性和灵活性,能高效地表达大片段基因也能同时表达多个基因,而且表达的重组蛋白经糖基化、磷酸化、二硫键的形成等翻译加工后在结构和功能上更接近天然蛋白,使得重组蛋白具有较好的生物活性。本研究构建的BTV8 VP2蛋白的真核表达载体,为后期建立稳定表达VP2蛋白的细胞模型和VP2蛋白功能研究奠定了基础。

关键词：动物医学蓝舌病病毒重组蛋白真核表达抗原性检测

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蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定

蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：魏天徐青元耿宏伟冯瑜菲杨涛孙恩成席娜钱爱东吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130000

VP7蛋白作为蓝舌病病毒群特异性抗原，在BTV各个血清型中高度保守，而针对VP7蛋白的血清学检测方法也是当前检测BT的主要方法之一。本研究通过鉴定BTV VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位，初步阐明了BTV VP7蛋白竞争抑制特异性的分... 详细信息

VP7蛋白作为蓝舌病病毒群特异性抗原，在BTV各个血清型中高度保守，而针对VP7蛋白的血清学检测方法也是当前检测BT的主要方法之一。本研究通过鉴定BTV VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位，初步阐明了BTV VP7蛋白竞争抑制特异性的分子基础，这一结果对BT血清学检测方法的建立和改进具有重要的参考价值。

关键词：动物医学蓝舌病病毒蛋白表达群特异性抗原表位

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日本血吸虫章鱼胺受体基因克隆表达及分析

日本血吸虫章鱼胺受体基因克隆表达及分析

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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：孟培培傅志强魏梅梅熊雅念黄莉妮艾德宙洪炀伍妙梨程相朝林矫矫河南科技大学洛阳471003 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海 200241 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海 200241 河南科技大学洛阳471003

目的：克隆日本血吸虫章鱼胺受体编码基因,了解其表达和分布情况.方法:利用PCR技术扩增日本血吸虫章鱼胺受体基因,利用大肠杆菌表达该受体蛋白,纯化重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.通过RT-PCR、Western-blot以及免疫组化技术分析了章... 详细信息

目的：克隆日本血吸虫章鱼胺受体编码基因,了解其表达和分布情况.方法:利用PCR技术扩增日本血吸虫章鱼胺受体基因,利用大肠杆菌表达该受体蛋白,纯化重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.通过RT-PCR、Western-blot以及免疫组化技术分析了章鱼胺受体在日本血吸虫的转录、表达分布特性.结果:克隆到日本血吸虫章鱼胺受体基因,和终末宿主对应的肾上腺素受体同源性较低.western-blot分析结果表明含受体保守区段的重组蛋白抗原性较好.章鱼胺受体基因在各期虫体中转录差异不大,免疫组化分析显示该受体蛋白在日本血吸虫体被下方的肌层和生殖系统中分布较多.结论:日本血吸虫章鱼胺受体可能有作为抗血吸虫药物研究靶标的潜力,研究结果为进一步研究提供了条件.

关键词：动物医学血吸虫章鱼胺受体基因克隆蛋白表达

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豆粕替代鱼粉对青鱼幼鱼生长及生理生化指标的影响

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淡水渔业 2013年第5期43卷 50-56,67页

作者：毛盼胡毅李金龙黄云肖调义艾庆辉湖南农业大学动物科学技术学院长沙410128 益阳益华水产品有限公司湖南益阳413000 中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室青岛266003

以初始体重(5.90±0.01)g的青鱼(Mylopharyngodon piceus)为研究对象,用豆粕替代不同水平鱼粉,配制5种等氮等能的实验饲料,分别为30%鱼粉(对照组)、25%鱼粉、20%鱼粉、15%鱼粉和15%鱼粉+晶体氨基酸,试验持续8周。结果显示:当鱼粉含... 详细信息

以初始体重(5.90±0.01)g的青鱼(Mylopharyngodon piceus)为研究对象,用豆粕替代不同水平鱼粉,配制5种等氮等能的实验饲料,分别为30%鱼粉(对照组)、25%鱼粉、20%鱼粉、15%鱼粉和15%鱼粉+晶体氨基酸,试验持续8周。结果显示:当鱼粉含量为15%时,其增重率、特定生长率、肌肉鲜味氨基酸含量和总氨基酸含量显著低于对照组,而饲料系数则显著高于对照组,添加晶体氨基酸对青鱼生长无显著改善;各处理组间甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)含量及谷丙转氨酶(ALT)活性无显著差异,但15%鱼粉组和15%鱼粉+晶体氨基酸组的青鱼的血糖含量和谷丙转氨酶活性显著高于对照组。结果表明,青鱼幼鱼实用饲料中鱼粉含量以不低于20%为宜,添加晶体氨基酸对青鱼幼鱼的生长无改善作用。

关键词：青鱼(Mylopharyngodon piceus) 豆粕鱼粉生长晶体氨基酸

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主动免疫β_2肾上腺素能受体(β_2-AR)肽苗对绵羊生长及血清生化指标的影响

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中国草食动物科学 2013年第2期33卷 29-32页

作者：杨斌陈勇韩冰新疆农业大学动物科学学院新疆肉乳用草食动物营养重点实验室乌鲁木齐830052

选取12只体重31 kg左右的6月龄雄性阿勒泰大尾羊,随机分为对照组和肽苗免疫组。正试期第1天免疫,15 d后加强免疫。每15天空腹称重后颈静脉采血,间隔15 min采血1次,共采血4次,用于测定血液生理生化指标。第90天所有动物屠宰称量胴体重。... 详细信息

选取12只体重31 kg左右的6月龄雄性阿勒泰大尾羊,随机分为对照组和肽苗免疫组。正试期第1天免疫,15 d后加强免疫。每15天空腹称重后颈静脉采血,间隔15 min采血1次,共采血4次,用于测定血液生理生化指标。第90天所有动物屠宰称量胴体重。结果表明:免疫肽苗15 d后,绵羊可产生高水平的抗体,加强免疫1次后,抗体水平维持至第90天;绵羊免疫β2-AR肽苗对采食量和体增重均无显著影响,但免疫组屠宰率比对照组显著增加(P<0.05)。血液指标分析表明:在免疫15 d后饲喂前免疫组血糖水平比对照组升高21.74%(P<0.05),60 d时饲喂前免疫组低密度脂蛋白胆固醇比对照组降低15.19%(P<0.05);免疫组血液中甘油三酯水平始终低于对照组。结果显示:阿勒泰大尾羊主动免疫重组绵羊β2-AR第二外环肽可以产生抗体,具有降低血液甘油三酯水平的趋势,提高了阿勒泰大尾羊的屠宰率,但不影响绵羊的生长和采食量。

关键词： β2-AR 肽苗免疫调控绵羊

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